同病异治复方对戊四氮慢性点燃大鼠痫性发作的影响

目的:研究癫痫"从肝论治"、"从痰论治"的复方柴胡疏肝汤及定痫丸对戊四氮(PTZ)慢性点燃大鼠痫性发作的影响。方法:建立大鼠PTZ慢性点燃的癫痫模型,选取完全点燃大鼠随机分为4组,即生理盐水组(A组)、丙戊酸钠组(B组)、定痫丸组(C组)、柴胡疏肝汤组(D组),连续灌胃给药28天,于给药第7、14、21及28天观察大鼠阵发性痉挛发作潜伏期、痫性发作级别以及强直性惊厥发生率。结果:C组与D组在各用药时间点均能不同程度延长PTZ慢性点燃大鼠的阵发性痉挛发作潜伏期,与A组相比有显著性差异(P0.05或P0.01),与B组作用相当(P0.05),而C组与D组无显著性差异(P0.05)。结论:癫痫"从肝论治"的复方柴胡疏肝汤、"从痰论治"的复方定痫丸均能明显抑制PTZ致痫大鼠的痫性发作,有明显的抗癫痫作用,但两复方在时效关系中可能存在差异。     

康痫丸对致痫大鼠氨基酸递质的影响

目的 从脑内氨基酸类递质角度探讨康痫丸治疗原发性癫痫的作用机制.方法 将40只SD大鼠随机分为正常对照组、癫痫模型组、丙戊酸钠组、康痈丸组,每组10只.用戊四氮(PTZ)亚惊厥剂量造模.通过免疫组化观察药物处理后致痫大鼠海马CA1、CA3、齿状回和顶叶大脑皮层的γ-氨基丁酸((GABA)、谷氨酸(Glu)表达强度.结果 PTZ致痫后,大鼠海马及皮层GABA阳性细胞数及光密度减少,而Glu阳性细胞数及光密度增加,提示PTZ同时影响脑内GABA和Glu的代谢,证实了GABA及Glu与癫痫的相互关系.采用康痫丸抗癫痫,动物海马、皮层GABA阳性细胞数及光密度增加.而Glu阳性细胞数及光密度减少.结论 康痫丸降低脑内Glu,升高GABA水平可能是其发挥抗癫痫作用的机制之一.     

定痫丸对戊四唑点燃癫痫大鼠脑内神经递质含量及海马c-fos表达的影响

目的:通过观察定痫丸对癫痫大鼠神经递质谷氨酸(Glu)、γ-氨基丁酸(GABA)和海马c-fos表达的影响来探讨该方治疗癫痫的机理。方法:采用腹腔注射戊四唑3.2mg/100g,连续给予4周造成大鼠癫痫模型,造模同时给予定痫丸、丙戊酸钠和定痫丸加丙戊酸钠治疗,连续4周。结果:采用戊四唑造模后,模型组大鼠脑组织中谷氨酸含量升高而γ-氨基丁酸含量明显降低,c-fos阳性细胞数明显增多,与正常组比较有显著性差异(P<0.05)。定痫丸组、丙戊酸钠组和中西药合用组均可明显降低谷氨酸含量,升高γ-氨基丁酸含量,减少c-fos阳性细胞数,与模型组比较具有显著性差异(P<0.05)。结论:定痫丸可对抗戊四唑致大鼠癫痫的作用,作用机理与降低脑内神经递质谷氨酸含量、升高γ-氨基丁酸含量以及阻断脑内c-fos蛋白的表达有关。     

柴胡疏肝汤对戊四氮慢性点燃大鼠不同脑区兴奋性的影响

目的:研究中药复方柴胡疏肝汤对戊四痰(PTZ)慢性点燃大鼠皮层、海马(不同脑区)兴奋性的影响。方法:以PTZ腹腔注射建立大鼠慢性点燃癫痫模型,选取完全点燃大鼠随机分为模型组和治疗组,分别给予生理盐水、丙戊酸钠和柴胡疏肝汤高、中、低剂量连续灌胃治疗4周。分别应用荧光成像技术及HPLC检测大鼠不同脑区6-[N-(7-硝基苯基-2-氧杂-1,3-重氮盐-4-基)氨基]-2-脱氧葡萄糖(2-NBDG)的含量及谷氨酸(G lu)、天门冬氨酸(Asp)的浓度。结果:柴胡疏肝汤高、中、低剂量组均等显著降低癫痫大鼠不同脑区内的2-NBDG含量及G lu,Asp浓度(P0.01)。结论:柴胡疏肝汤能降低PTZ慢性点燃大鼠不同脑区内葡萄糖的代谢,通过降低不同脑区内兴奋性神经递质的含量,可能是其降低大鼠不同脑区兴奋性的机制之一。     

痫愈痊颗粒对戊四氮致痫大鼠海马Glu,GABA含量的影响

目的:观察痫愈痊颗粒对戊四氮致痫大鼠海马谷氨酸(Glu),γ-氨基丁酸(GABA)含量的影响,探讨痫愈痊颗粒治疗癫痫的机制。方法:将70只健康雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、丙戊酸钠组(200 mg·kg-1)、痫愈痊颗粒低、高剂量组(586,1 172 mg·kg-1),采用亚惊厥剂量戊四氮(PTZ)ip建立癫痫大鼠模型,在造模同时即开始给药,共28 d。行为学观察后取海马组织,采用高效液相色谱-四级杆离子阱串联质谱仪检测海马中Glu,GABA的含量。结果:59只大鼠进入结果分析,与模型组比较,痫愈痊颗粒与丙戊酸钠干预后发作潜伏期延长、惊厥持续时间缩短(P0.01);惊厥持续时间高剂量组优于低剂量组(P0.05)。模型组与正常组相比,海马Glu含量明显上升,GABA含量明显下降(P0.01);与模型组比较,痫愈痊颗粒高、低剂量组和丙戊酸钠组可明显降低海马Glu含量,升高GABA含量(P0.05,P0.01)。结论:采用亚惊厥剂量PTZ能够建立癫痫大鼠模型;痫愈痊颗粒抗癫痫机制可能与其降低海马Glu含量,增加GABA含量有关。     

石甘散对戊四氮致痫大鼠血清Glu含量的影响

目的:通过观察中药石甘散对戊四氮(PTZ)致痫模型大鼠血清Glu含量的影响,探讨石甘散治疗癫痫的相关机制。方法:60只Wistar大鼠,随机分为正常组、模型组、石甘散组、石菖蒲组、甘松组、西药对照组。随机选取10只作为正常组,其余50只大鼠给予PTZ 35mg/Kg腹腔注射(ip)诱导慢性点燃癫痫模型。各组给药30天后,观察大鼠行为及ELISA法检测各组大鼠血清中Glu含量的变化。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清Glu明显升高,各药物组均可降低血清Glu含量,以石甘散组作用最为显著。结论:中药石甘散能调整PTZ致痫大鼠血清中Glu含量,从而抑制癫痫发作。     

地龙有效成分对戊四氮慢性点燃大鼠海马区Glu、GABA含量的影响

目的：通过观察地龙有效成分对戊四氮（FFZ）慢性点燃大鼠海马区谷氨酸（Glu）及γ-氨基丁酸（GABA）含量的影响,探讨其可能存在的抗癫痫作用机制。方法：48只Wistar大鼠随机分成空白组,模型组,阳性对照组,地龙有效成分高、中、低剂量组,除空白组注射生理盐水外,其余5组均连续腹腔注射亚致痉量戊四氮3周进行模型制备,造模同时观察大鼠行为学变化。造模成功后记录大鼠癫痫发作潜伏时间、持续时间,采用高效液相色谱法检测海马区Glu、GABA含量。结果：癫痫发作潜伏时间和持续时间同模型组比较,地龙各剂量组、阳性对照组均明显延长潜伏时间和缩短发作持续时间;海马区Glu和GABA含量同模型组比较,阳性对照组Glu含量降低,GABA含量明显增加,地龙有效成分高剂量组Glu含量明显减少,GABA含量明显增加,中、低剂量组仅GABA含量明显增加。结论：地龙有效成分对PTZ慢性点燃大鼠存在抗癫痫作用,其机制可能与降低海马区Glu含量、增加GABA含量有关,且高剂量组疗效显著。     

补脑止痫散对戊四氮慢性点燃癫痫大鼠模型GABA及其受体GABAα表达的影响

目的:揭示补脑止痫散对戊四氮(PTZ)慢性点燃癫痫大鼠模型γ-氨基丁酸(GABA)及其受体亚单位α(GABAα)表达的影响。方法:1选取60只健康SD大鼠,分成6组(空白对照组、癫痫模型组、丙戊酸钠组、补脑止痫散小剂量组、补脑止痫散中剂量组、补脑止痫散高剂量组)。2采用连续小剂量腹腔注射戊四氮(PTZ)的方法,建立癫痫大鼠模型(慢性点燃)。凡是获得III级以上发作后,均停止给药。后采用免疫组织化学法,检测各组大鼠海马区GABA及其GABAα的表达。结果:除空白对照组无癫痫样发作外,其余各组都出现Racine分级中的III-IV痫样发作表现。通过免疫组织化学法,检测各组大鼠海马区GABA及其GABAα的表达。丙戊酸钠组、补脑止痫散高剂量组GABA及GABAα表达明显上调,与模型组比较,差异显著,具有统计学意义(P0.05)。结论:补脑止痫散对戊四氮慢性点燃癫痫大鼠模型海马区内抑制性递质及受体有明显的上调作用,从而起到保护脑组织、缓解癫痫症状,进而减轻由癫痫导致的脑损伤的作用。     

川芎嗪对癫痫的作用及其与神经递质关系的研究

目的研究川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)对癫痫的作用及其与神经递质谷氨酸(glutamate,Glu)、γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric,GABA)的关系。方法采用腹腔注射戊四氮(pentylenetetrazol,PTZ)诱发大鼠癫痫模型。将SD大鼠随机分为3组,即:生理盐水对照组;戊四氮致痫组;川芎嗪 戊四氮致痫组。采用免疫组织化学方法检测各组大鼠大脑皮层、海马谷氨酸、γ-氨基丁酸阳性神经元的表达变化。结果戊四氮致痫组与对照组比,大脑皮层、海马Glu阳性神经元明显增多,大脑皮层、海马GABA阳性神经元明显减少,差异均有显著性意义(P<0.05)。川芎嗪干预后,大脑皮层、海马Glu阳性神经元明显减少,大脑皮层、海马GABA阳性神经元明显增多,差异均有显著性意义(P<0.05)。结论川芎嗪能上调GABA阳性神经元数目,下调Glu阳性神经元数目。川芎嗪可能通过抑制脑内Glu的产生,促进脑内GABA的产生,从而使神经元的兴奋性降低,抑制了癫痫的发生。     

补脑止痫散对戊四氮致痫大鼠血清Glu和GABA含量的影响

目的:通过检测中药补脑止痫散对戊四氮(PTZ)致痫模型大鼠血清Glu和GABA含量的影响,从而探讨补脑止痫散治疗癫痫的相关机制。方法:60只Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型组、丙戊酸钠组和补脑止痫散高、中、低剂量组,每组各10只,除空白对照外,其它5组用PTZ制作癫痫点燃模型,给药30天后比较各组大鼠血清中Glu和GABA含量的变化。结果:补脑止痫散高、中剂量组血清Glu和GABA含量与模型组相比,分别出现明显降低和升高(P0.05),而补脑止痫散低剂量组血清Glu和GABA含量改变不明显(P0.05),并且补脑止痫散高剂量组和中剂量组比较,以及此二组与丙戊酸钠组相比,血清Glu和GABA含量改变均无明显差异(P0.05)。结论:中药补脑止痫散高、中剂量能调整PTZ致痫大鼠血清中Glu和GABA含量的平衡,从而抑制癫痫发作。     

柴胡疏肝汤对匹罗卡品致难治性癫痫大鼠痫性发作的影响

目的 探讨"从肝论治"复方柴胡疏肝汤对匹罗卡品致难治性癫痫模型大鼠痫性发作的影响.方法 将制备成功的50只SD难治性癫痫大鼠模型随机分为5组,模型组(A)、VPA组(B),柴胡疏肝汤低(C)、中(D)、高(E)组,每组各10只,各组灌胃给药,分别观察给药4周、8周后痫性发作次数、平均发作时间及发作级别的变化.结果 A组大鼠痫性发作明显;和A组比较,B、C、D、E组大鼠痫性发作均有不同程度的减轻(P<0.05或P<0.01),而E组减轻大鼠痫性发作最明显(P<0.01).结论 "从肝论治"复方柴胡疏肝汤能减轻难治性痫痈大鼠痫性发作,有明显的抗痫痈作用.     

定痫丸对急性期癫痫小鼠海马组织Wnt/β-Catenin信号通路相关蛋白及神经元凋亡的影响

目的研究定痫丸对急性期癫痫小鼠海马组织Wnt/β-Catenin信号通路相关蛋白及神经元凋亡的影响,探讨其可能的疗效机制。方法取100只8~10周龄SPF级雄性小鼠,其中20只用于模型失败备用小鼠,将80只小鼠随机分为4组,分别为模型组(A)、生理盐水组(B)、卡马西平组(C)、定痫丸组(D),每组20只,采用腹腔注射氯化锂-匹罗卡品的方法制作急性期癫痫小鼠模型,A组不予干预,B组实验全程均给予生理盐水,C组予卡马西平混悬液灌胃,D组予定痫丸混悬液灌胃,应用免疫组化和Western Blot分别检测海马组织内β-Catenin(β-连环蛋白),Cyclin D1(细胞周期蛋白D1)和Wnt3a的蛋白表达水平,运用Tunel法检测神经元的凋亡情况。结果与生理盐水组比较,模型组海马组织中的β-Catenin、Wnt3a的蛋白表达明显上调(P<0.05),在海马CA1区和CA3区的凋亡阳性细胞增多(P<0.05);与模型组比较,定痫丸组中的β-Catenin、Wnt3a的蛋白表达下调(P<0.05),在海马CA1区和CA3区的凋亡阳性细胞减少(P<0.05);在4组海马组织中均未检测到Cyclin D1蛋白的表达。结论定痫丸可能是通过下调Wnt/β-Catenin信号通路上的β-Catenin、Wnt3a的蛋白的表达,抑制了海马神经元的凋亡,达到治疗癫痫的作用。     

同病异治复方对三种不同急性癫痫模型的药效学观察

目的:观察及比较中医从痰论治复方和从肝论治复方的抗癫痫疗效.方法:60只Wistar大鼠被随机分为6组,即模型组(A组),丙戊酸钠组(B组),柴胡疏肝汤低、中、高剂量组(C组、D组、E组),定痫丸组(F组),试验大鼠戊四氮(PTZ)急性癫痫模型.120只昆明小鼠被随机分为6组,分组同上,分别试验小鼠最大电休克(MES)和小鼠士的宁急性惊厥模型.结果:C组、D组、E组、F组和B组可显著延长PTZ急性癫痫大鼠发作性阵挛的潜伏期(P＜0.05);MES模型中,D组、E组、F组和B组的小鼠惊厥率较A组低;在士的宁惊厥小鼠模型中,柴胡疏肝汤D组、E组、F组和B组的小鼠惊厥率和死亡率都较A组低.结论:癫痫从肝论治复方和从痰论治复方均具有抗惊厥、抗癫痫的作用.     

中药补脑止痫散对癫痫大鼠海马谷氨酸和γ-氨基丁酸含量的影响

目的研究中药补脑止痫散对戊四氮致痫大鼠海马谷氨酸(Glu)和γ-氨基丁酸(GABA)含量的影响,探讨补脑止痫散的抗痫机制。方法 80只大鼠随机分为空白组、模型组、补脑止痫散低、中、高剂量10 d组和低、中、高剂量21 d组。除空白组外,其余各组腹腔注射戊四氮制作癫痫大鼠模型,分别用低、中、高剂量的补脑止痫散灌胃。在预定时间点处死大鼠,取海马切片,用免疫组化法检测海马Glu和GABA的含量变化情况。结果与模型组相比,补脑止痫散中、高剂量组和低剂量21 d组海马神经元Glu含量均显著或极显著地降低,GABA含量均极显著地升高;治疗时间相同而灌胃剂量不同的各组间比较:高剂量组和中剂量组Glu含量均显著低于低剂量组,高剂量组和中剂量组GABA含量均显著高于低剂量组,而中、高剂量组之间比较则均无显著差异;灌胃剂量相同而治疗时间不同的各组间比较:低剂量10 d和21 d组之间有显著差异,中剂量10 d和21 d组、高剂量10 d和21 d组之间无显著差异。结论补脑止痫散能明显降低癫痫大鼠海马Glu含量,提高GABA含量,调节二者之间的平衡;中、高剂量组效果更明显。     

柴胡疏肝汤对难治性癫痫大鼠脑电图及多药耐药蛋白 P-糖蛋白表达的影响

目的:探讨柴胡疏肝汤对锂-匹罗卡品致难治性癫痫模型大鼠脑电图变化以及多药耐药蛋白P-糖蛋白(P-gp)表达的影响。方法:将制备成功的50只SD难治性癫痫大鼠模型随机分为5组,模型组(B)、丙戊酸钠(VPA)组(C)、柴胡疏肝汤低(D)、中(E)、高(F)剂量组,每组各10只,另有空白对照组(A)10只。柴胡疏肝汤是以柴胡桂枝汤和四物汤为基础方加味煎煮浓缩而成,含生药1 g.mL-1。VPA组用量为0.2 g.kg-1,柴胡疏肝汤低、中、高浓度依次为4.5,9,18 g.kg-1,空白组和模型组给予等量生理盐水。各组均ig给药8周,给药结束后检测各组大鼠脑电图以及海马、颞叶皮层P-gp蛋白的表达。结果:脑电图:A组无痫性波出现,B组出现大量的痫性波,C,D,E,F组能不同程度的减少脑电图的痫性波,以F组最明显。在大鼠海马区、颞叶皮层,Western blotting检测各组P-gp表达,差异有统计学意义(P﹤0.01)。与A组相比,其余各组P-gp表达水平明显增强(P﹤0.01);与B组相比,C组表达水平增加(P﹤0.01),D,E,F组表达水平降低,以F组最明显(P﹤0.01)。结论:VPA明显增强难治性癫痫模型大鼠脑内海马、颞叶皮质P-gp蛋白的表达,柴胡疏肝汤低、中、高剂量均可以降低海马、颞叶皮层P-gp蛋白的表达以及脑电图的痫性放电,以高剂量组明显。     

中药抗痫复方对PTZ致痫大鼠海马c-jun基因及其蛋白表达的影响

目的:观察中药抗痫复方对PTZ致痫大鼠海马c-jun基因及其蛋白表达的影响。方法:观察大鼠痫性发作的行为;采用免疫组化方法检测大鼠脑组织中海马c-jun基因及其蛋白的表达;采用Realtime PCR(实时荧光定量)方法检测大鼠海马组织c-junmRNA的相对表达。结果:经观察发现经中药抗痫复方治疗6周后,大鼠痫性发作行为明显减少。并可降低癫痫大鼠大脑内c-jun水平和海马中c-junmRNA表达。结论:中药抗痫复方能够减少大鼠癫痫发作的次数,降低海马区基因c-junmRNA及其蛋白表。     

定痫方对戊四氮致痫大鼠模型海马神经元凋亡的影响

目的:观察戊四氮(PTZ)致痫大鼠海马神经元凋亡以及定痫方(AAP)的脑保护作用。方法:144只健康成年雄性Wistar大鼠随机分为对照组(CK组)、模型组(PTZ组)、定痫方大剂量组(AAPl组)、定痫方中剂量组(AAPm组)、定痫方小剂量组(AAPs组)和丙戊酸钠组(VPA组);每组24只。CK组和PTZ组分别给予生理盐水(4 ml/kg体质量.d)灌胃;定痛方各组分别给予定痫方大、中、小剂量(10.26 g/kg体质量、5.13 g/kg体质量、2.56 g/kg体质量)灌胃,VPA组给予丙戊酸钠(20 mg/kg.d)灌胃,每日1次;连续7 d。造模第1天,除CK组外,其余各组大鼠均腹腔注射戊四氮(PTZ)75 mg/kg体质量,观察记录大鼠行为学变化;于致痫后12 h、2 d、5 d、7 d相应时间点取材,制备脑标本,TUNEL检测海马神经元凋亡。结果:致痫后,除CK组外,其余各组海马区凋亡细胞增加;7 d,与PTZ组相比,AAPl组凋亡神经元阳性表达减少(P<0.05)。结论:凋亡参与致痫大鼠海马神经元死亡过程;定痫方能减少神经元凋亡,有神经保护作用。     

抗痫煎剂对实验性癫痫大鼠脑内氨基酸含量的影响

目的观察抗痫煎剂对戊四氮(PTZ)点燃大鼠脑内氨基酸含量的影响。方法选用健康的Wistar大鼠40只,随机分为5组:即空白对照组(A组)、模型组(B组)、中药低、高剂量组(C组D组)、西药阳性对照组(E组)。除A组不做任何处理,其余四组均采用戊四氮(PTZ)亚惊厥剂量35mg/(kg.d),腹腔注射;造模同时,C组、D组、E组分别予以胃饲抗痫煎剂低、高剂量及苯巴比妥等不同处理因素,连续4周,停药1周后,再用相同剂量的PTZ测试,凡显示连续5次2级或2级以上惊厥的大鼠被认为达到点燃标准。以氨基酸分析检测仪检测大鼠海马Glu及GABA的含量,并比较各组的变化。结果海马区Glu含量变化:Glu含量升高以B组最显著,与A、C、D、E组比较有显著性差异(P<0.05);D组Glu含量降低与C组、E组比较有统计学意义(P<0.05);C组Glu含量降低与E组比较差异无统计学意义(P>0.05)。海马区GABA含量变化:GAAB含量升高以D组最显著,与B、C、E组比较有显著性差异(P<0.05);C组与E组比较无统计学意义(P>0.05)。结论通过降低大鼠海马Glu含量、升高GABA含量可能是抗痫煎剂发挥抗痫作用的机制之一。     

柴胡总皂甙对戊四氮致痫大鼠海马神经细胞凋亡和P53蛋白表达影响的实验研究

目的：观察柴胡总皂甙对实验性痫性发作大鼠海马神经细胞凋亡和P^53蛋白表达的影响。方法：采用戊四氮（PTZ）致痫大鼠模型。将40只SD大鼠，随机分为6组，其中A组（8只）为PTZ模型组，B、C、D组（各8只）分别为柴胡总皂甙低、中、高剂量组，E组（4只）为正常对照组，F组（4只）为安定给药组。以原位末端标记（TUNEL）法检测凋亡细胞，免疫组化法检测P^53蛋白，观察大鼠痫性发作后48小时其海马齿状回（DG）区神经细胞凋亡和P^53蛋白表达情况。结果：各组大鼠海马DG区均可观察到不同程度的阳性细胞，其中A组阳性细胞数最多，其余各组阳性细胞数明显减少，各组与A组比较，C、D、E、F组与B组比较，差异均有显著性意义（P〈0．05）。各组大鼠海马DG区均有不同程度的P^53蛋白表达，其中A组免疫表达阳性细胞数最多，其余各组阳性细胞数明显减少，各组与A组比较，差异均有显著性意义（P〈0.05）。结论：柴胡总皂甙对PTZ致痫大鼠所致的海马神经细胞凋亡和P^53蛋白表达有明显抑制作用，可能对痫性发作引起的神经细胞凋亡有一定的保护作用。     

电针对癫痫大鼠行为及海马神经元钙调素表达的影响

目的 探讨电针抗痈作用及其对眦致痈大鼠海马神经元内钙调素(CaM)表达的影响.方法 成年SD大鼠24只随机分为正常组、戊四唑(FTZ)组、电针组、尼莫地平组,观察各组大鼠癫痫发作潜伏期及发作次数,同时采用免疫组织化学SABC法测定PTZ点燃型癫痫发作后大鼠海马神经元内CaM表达及电针和尼莫地平的干预效应.结果 电针组癫痫发作潜伏期明显延长、发作次数明显减少;PTZ模型组大鼠海马神经元CaM表达明显增强;电针组及尼莫地平组CaM表达均减弱,两组与PTZ组比较均有差异,电针组优于尼莫地平组.结论 电针具有显著抗痫作用,对癫痫大鼠海马神经元CaM表达具有明显的调节作用.