优选和冻融对精子顶体反应及顶体反应释放的顶体酶活性影响

目的:研究优选和冻融对人精子顶体反应(acrosome reaction,AR)和AR释放的顶体酶活性影响。方法:10例健康生育男子精液,用Percoll密度梯度分离法和上游法优选精子;用3种冷冻保护剂进行冷冻;用孕酮诱导AR;采用FITC-PSA荧光染色法分析AR;采用分光光度比色法测定顶体酶活性。结果:Percoll法和上游法优选后,顶体反应率和AR释放的顶体酶活性均较优选前显著升高(P<0·05),但Percoll法和上游法优选组间比较差异不显著(P>0·05)。精子冻融后甘油组和GYC组顶体反应率和AR释放的顶体酶活性均下降,与冷冻前比较差异均有显著性(P<0·01),GYCG组与冻融前组比较,差异不显著(P>0·05)。结论:优选后顶体反应率及AR释放的顶体酶活性增加,GYCG对精子顶体反应和AR释放的顶体酶活性有保护作用。     

禁欲时间对人精子顶体酶活性精子密度和精子数的影响

目的:了解禁欲时间对人精子顶体酶活性、精子密度和精子数的影响。方法:分光光度比色法测定精子顶体酶活性。结果:禁欲1～5d时,顶体酶活性是稳定的,而禁欲10d时顶体酶活性明显下降,与禁欲1d时顶体酶活性比较差异有显著性(P<0.05)。精子密度和精子数随禁欲时间增加而增加,禁欲10d精子密度约为禁欲1d精子密度2倍,禁欲10d精子总数约为禁欲1d的4倍。结论:禁欲时间影响顶体酶活性、精子密度和精子数。     

甲氧滴滴涕对大鼠精子顶体酶活性的影响

目的观察甲氧滴滴涕(methoxychlor,MXC)对雄性大鼠精子顶体酶活性的影响,以探讨其生殖毒性的可能机理。方法在精子悬液中加入不同浓度的MXC,以改良的Kennedy法分别测定不同浓度MXC作用下的精子顶体酶活性。结果与对照组比较,MXC作用后的各组精子顶体酶活性明显降低,且降低幅度与MXC的作用浓度有关。结论MXC对大鼠精子顶体酶活性具有明显的抑制作用。     

形态正常精子百分率与顶体酶活性的关系

目的:探讨精子形态与精子顶体酶活性的关系。方法:对737例男性不育患者采用分光光度比色法测定顶体酶活性,采用精子形态检测系统下人工修正方法分析精子形态。结果:精子形态正常组的顶体酶活性明显高于精子形态异常组,两组间比较差异显著(P<0.05);顶体酶活性正常组形态正常精子百分率明显高于顶体酶活性异常组形态正常精子百分率,两组间比较差异亦具有显著性(P<0.001);顶体酶活性与形态正常精子百分率间呈显著正相关关系(r=0.172,P<0.001)。结论:精子形态可影响精子顶体酶活性。     

影响人精子顶体酶活力测定因素探讨

精子顶体酶活力是一种新的生育力指标。本文对人精子顶体酶测定中有关问题作了观察,提示精子顶体酶在２％（ｖ／ｖ）的醋酸水溶液中放置时间和加入顶体酶抽提液后比色时间都会影响检测结果的准确性。     

精索静脉高位结扎术对抗精子抗体、精子顶体酶活性及精子数量、活动力的影响

目的探讨精索静脉曲张患者在精索静脉高位结扎术前、后精液中抗精子抗体、精子顶体酶活性及精子数量、活动力的变化。方法选取精索静脉曲张患者35例。用混合抗球蛋白凝集法(MAR)、改良的Kennedy法测定术前和术后3～6个月精液中抗精子抗体、精子顶体酶活性及精子计数、活动力(a及b级活动力精子的百分率)测定。结果精索静脉高位结扎术后患者精液中抗精子抗体有下降、精子顶体酶活性较术前明显增高、精子数量增加、活动力升高。结论精索静脉高位结扎术对精索静脉曲张患者精液中抗精子抗体的下降、精子顶体酶活性的提高、精液质量的提高有帮助。     

精子DNA碎片率及顶体酶活性对男性不育的诊断价值

目的：分析精子DNA碎片率、顶体酶活性诊断男性不育的效用。方法：选择2016年6月至2021年12月入院诊断的1727例男性筛查者,其中男性不育患者481例。根据DNA碎片指数(DFI)分组,一组的DFI值≤10%;二组为10%6为27例,>48.2μU/10⁶为416例,对比各项参数差异。结果：不同DFI组间的年龄、精子密度、顶体酶活性、前向运动率、正常精子率以及非前向运动率对比存在差异P<0.05。根据顶体酶活性分组,对比组间的精子密度、前向运动率、DFI、正常精子率与非前向运动率有差异P<0.05。相关系分析可见,DFI与精子密度、前向运动率、正常精子率、顶体酶活性具有负相关性,顶体酶活性与精子密度、前向运动率、正常精子率具有正相关性,与DFI具有负相关性。结论：DFI与顶体酶活性能够反映精子质量,可以通过以上指标诊断男性不育,具有较高的诊断价值。     

解脲脲原体对人精子形态结构及顶体酶活性的影响

[目的]探讨解脲脲原体(Uu)对人精子形态、超微结构及顶体酶活性的影响。[方法]Uu临床标本和标准菌株分别与精子按照25︰1比例混合,通过改良巴氏染色、透射电镜、比色法观察精子形态、超微结构及顶体酶活性的改变。[结果]精子出现头部、颈中段和尾部的缺陷;透射电镜观察可见Uu吸附于精子表面,精子顶体、膜结构、线粒体、中心粒、外周致密纤维等超微结构改变;临床株组和标准株组顶体酶活性均低于对照组;顶体酶活性与形态正常精子百分率呈明显正相关关系。[结论]Uu感染可改变精子形态、超微结构,降低精子顶体酶活性。     

精子顶体酶活性与精液常规检查参数关系分析

目的通过比较精子顶体酶正常组和异常组精液常规检测参数差异,明确顶体酶活性在评估男性生育能力中的重要意义。方法从316例男性不育症患者的精液中选取36例顶体酶活性正常标本和36例顶体酶活性异常标本,分别作为顶体酶活性正常组和顶体酶活性异常组。所有精液标本均进行精子活率、A＋B级精子活力、精子密度、精子畸形率、精予头部畸形率测定,运用相关统计学方法分析。结果顶体酶正常组精子活率、A＋B级精子活力、精子密度均显著高于异常组,精子畸形率和精子头部畸形率均显著低于异常组,且精子顶体酶活性与精子活率、A＋B级精子活力、精子密度呈显著正相关与精子畸形率和精子头部畸形率呈显著负相关。结论精子顶体酶活性可以代表精子质量,精液常规检测参数可能是精子顶体酶活性的影响因素,可作为临床评估男性生育能力的重要指标。     

用顶体反应释放的顶体酶活性评价顶体反应功能的研究

目的:研究用顶体反应释放的顶体酶活性评价人类精子顶体反应功能。方法:10例健康生育男子精液,采用Percoll密度梯度分离法优选精子,用FITC-PSA荧光染色法分析顶体反应(acrosome reaction,AR),顶体酶活性采用分光光度比色法测定。结果:A23187和孕酮诱导的精子AR释放的顶体酶活性和顶体反应率均明显增加(P<0.05)。随A23187浓度增加,AR释放的顶体酶活性和顶体反应率均明显增加(P<0.01)。A23187诱导AR释放的顶体酶活性与相应顶体反应率呈明显正相关关系(r=0.950,P<0.001)。随孕酮浓度增加,AR释放的顶体酶活性和顶体反应率均明显增加(P<0.05)。孕酮诱导的AR释放的顶体酶活性与相应顶体反应率亦呈明显正相关关系(r=0.921,P<0.001)。结论:孕酮可诱导人精子顶体反应,用顶体反应释放的顶体酶活性可评价人精子顶体反应功能。     

少弱精症患者精子顶体酶活性分析

目的:研究少弱精症不育男性精子顶体酶活性变化与其生育力的关系。方法:以159例少弱精症和25例正常生育男性为研究对象,应用改良Kennedy法检测精子顶体酶活性,分析不同精子密度、活力、形态与顶体酶活性的关系。结果:正常组的顶体酶活性高于不同精子密度不育各组(>50×106ml、20～50×106ml、<20×106ml)(F=7.504,P<0.001);不同精子密度不育各组之间顶体酶活性比较,>50×106ml组顶体酶活性高于<20×106ml组(P<0.05),其它各亚组两两比较顶体酶活性无统计学差异;少弱精症不育者的精子畸形率与顶体酶活性呈负相关(r=-0.171),a+b级精子活力(r=+0.142)和顶体完整率(r=+0.154)与顶体酶活性呈正相关。结论:顶体酶活性对少弱精症男性生育力评价有重要价值,顶体酶活性可以作为精子形态分析之外重要的预测精子受精能力的指标。     

果糖及葡萄糖对精子运动能力存活率及顶体酶活性的影响

目的探讨果糖及葡萄糖对人类精子运动能力、存活率及顶体酶活性的影响。方法选取2008年7月~2009年1月在浙江省舟山市妇幼保健院生殖中心接受精液质量检查的男性患者312人,经精液常规分析符合《人类精液及精子-宫颈黏液相互作用实验室检验手册》规定的正常标准者;以无糖的人类输卵管液(HTF)为对照组(n=312),添加果糖成分的研究组1(n=312),添加葡萄糖成分的研究组2(n=312),观察不同配方精子培养液培养前、培养24,48,72 h后对精子运动能力、存活率及顶体酶活性的影响。统计学处理采用SPSS 10.0统计学软件,数据均衡性检验后用t检验或单因素方差分析方法 ,P0.05为差异有统计学意义。结果与对照组相比,培养前各项指标差异无统计学意义;培养24,48 h及72 h后,研究组精子的各项指标明显较好(P0.05)。两研究组之间相比,培养前及培养24h的各项指标差异无统计学意义;但培养48 h及72 h后,研究组1的各项指标都优于研究组2,但差异无统计学意义。结论精子培养液内添加糖分是必须的,在精子培养24 h之前,添加果糖和添加葡萄糖对精子的运动能力、存活率及顶体酶活性没有明显差别,但培养超过24 h后,以果糖作为精子能量供应物质优于葡萄糖。     

Addition of Tempol in semen cryopreservation medium improves the post-thaw sperm function

Abstract

Despite extensive research carried out for optimization and commercialization of sperm cryopreservation media, percentage of motility and viability remain low following cryopreservation. These adverse effects have been partially ascribed to reactive oxygen species (ROS) production during cryopreservation. Therefore, we proposed that addition of a cell permeable antioxidant like Tempol, with superoxide dismutase (SOD) mimetic action, may overcome these effects in an optimized commercially available cryo-protective medium. Therefore, semen samples were cryopreserved in the presence or absence of Tempol. A concentration of 5?μM Tempol was defined as optimal since it significantly improved motility and viability post thawing and reduced DNA fragmented sperm. In addition, percentage of ROS positive sperm was reduced. These effects of Tempol can be attributed to cell permeability characteristic and ability to reduce superoxide production both at intra- and extra-cellular levels. Tempol may hold the potential for clinical applications.     

混苯对接触男工精子顶体酶活力和副性腺功能的影响

探讨混苯对接触男工精子顶体酶活力和副性腺功能的影响，对２３名从事混苯作业的男工进行生物材料混苯分析及精子顶体酶活力、精浆γ－ＧＴ活性和果糖含量的测定。结果接触组顶体酶活力、精浆γ－ＧＴ活性和果糖含量分别为１８．０２±７．２４Ｕ／Ｌ、１７１４．４３±８７３．８８Ｕ／Ｌ、３．０９±２．０５ｇ／Ｌ，而对照组则分别为３０．７４±１０．０５Ｕ／Ｌ、２４１８．９７±４１１．９２Ｕ／Ｌ、２．０３±０．７４ｇ／Ｌ。表明混苯可引起男工精子顶体酶活力下降（Ｐ＜０．００１），精浆γ－ＧＴ活性显著低于对照组（Ｐ＜０．０５），而精浆果糖含量两组间未见差别。精子顶体酶活力与接触工龄、精浆γ－ＧＴ与精浆中苯及血液中甲苯等呈负相关。混苯在一定程度上可影响男工生育力和副性腺功能。     

供精精液冻存时间对人工受精结局及子代出生缺陷的影响

目的:探讨精液冻存时间对供精人工受精(AID)结局及子代出生缺陷的影响。方法:回顾性分析2007年4月~2013年4月在本生殖中心实施AID助孕治疗的6038例妇女共14 290个AID周期的临床资料,分析供精精液冻存0.5~1年、1~3年、3~5年、5~7年、7~10年对AID妊娠率、流产率、子代出生缺陷率的影响。结果:供精精液不同冻存时间的妊娠率、流产率未见统计学差异(P0.05);子代出生缺陷发生率为1.33%,不同冻存时间子代出生缺陷率未见统计学差异(P0.05)。结论:供精精液冻存0.5~10年,并不影响AID的临床妊娠率、流产率和子代出生缺陷率,用于人工受精安全有效,能获得类似自然妊娠的效果。     

不同温度冻存对杂交瘤细胞及其单克隆抗体活力的影响

目的：观察冻存对分泌抗大肠癌SW1116细胞单克隆抗体（McAb）的杂交瘤细胞存活率的影响，以及对抗大肠癌SW1116细胞的McAb效价的影响。方法：杂交瘤细胞在12．5％DMSO下，于4℃、-30℃、-60℃及-196℃下分别冻存1、3、6、12及24个月，复苏，用台盼蓝拒染法测其存活率。McAb在等量甘油下，于4℃、-10℃、-20℃及-60℃下分别冻存1、3及12个月后，测其效价。结果：杂交瘤细胞置-196℃保存2年仍有78％的存活率；-60℃保存3、6及12个月的存活率分别为73％、40％及0％；不宜于-30℃及4℃保存。McAb在-20℃以下保存1年，效价未见下降；-10℃保存1年下降1个稀释度；4℃保存1年下降1—2个稀释度。结论：杂交瘤细胞短期保存可用-60℃冻存，长期需液氮保存。McAb长期保存最好于-20℃以下冻存。     

程序冷冻法、液氮蒸汽法冷冻人类精子的效果比较

目的:比较程序冷冻法和液氮蒸汽法冷冻保存人类精子的效果.方法:用同一批次GYC型冷冻保护剂,分别应用程序冷冻法和液氮蒸汽法对68份精液标本进行冷冻保存,并比较其冷冻复苏率.结果:应用程序冷冻法冷冻的精液标本,其复苏后前向运动精子(a b级)的冷冻复苏率为66.7%±8.1%,应用液氮蒸汽法冷冻的精液标本,其复苏后前向运动精子(a b级)的冷冻复苏率为63.9%±7.9%,两组相比无显著差异(p>0.05).结论:采用程序冷冻法和液氮蒸汽法冷冻人类精子,二者冷冻复苏率无显著差异,两种方法均可以用于人类精子库冷冻保存精液标本.