高表达HER2的自发转移性乳腺癌小鼠模型的建立与应用

目的建立高表达HER2的自发转移性乳腺癌小鼠移植瘤模型,用于抗HER2抗体等靶向药物的药效学活性和作用机制研究。方法将重组HER2全长基因转染含有荧光素酶基因的小鼠乳腺癌细胞系4T1-Luc,用G418加压筛选,采用流式细胞术和免疫印迹方法鉴定4T1-Luc稳转细胞株中HER2表达。将细胞注射BALB/c小鼠或裸鼠皮下乳房垫,待肿瘤生长稳定后随机分为4组给药,即PBS对照、chA21、Trastuzumab和抗体联合组。每周2次测量肿瘤体积,并计算抑瘤率。实验结束时用活体动物成像仪监测体内肿瘤转移情况。结果经过G418筛选获得了多个4T1-Luc/HER2稳转细胞株克隆,流式细胞术和免疫印迹均证实HER2高表达。这些克隆均具有良好的成瘤性,细胞注射1周后可见肿瘤稳定生长,2³周后可观察到肿瘤转移到肺、面部、腹股沟等部位。在BALB/c小鼠中,抗体联合组抑瘤率达43.3%,与PBS对照组之间的差异有显著性(P<0.05),并且明显优于抗体单用组抑瘤率(chA21组为11.1%,Trastuzumab组为23%)。而且,抗体联合组在小鼠肺部的肿瘤转移灶的数目和荧光强度与对照组相比明显降低。结论成功构建高表达HER2的4T1-Luc乳腺癌细胞系并建立自发转移性乳腺癌小鼠模型。初步研究结果表明抗HER2抗体chA21与Trastuzumab联合使用具有良好的抗肿瘤生长和转移的作用。     

银杏叶提取物EGb-761对乳腺癌肺转移型小鼠体内实体瘤的影响

目的:探讨银杏叶提取物EGb-761对乳腺癌肺转移型小鼠体内实体瘤的影响.方法:选取雌性BALB/c小鼠,使用小鼠乳腺癌4T1细胞系建立高转移性的肿瘤小鼠模型,随机分为五组,即正常组、模型组、EGb-761组[高剂量组(200?mg/kg)、中剂量组(100?mg/kg)、低剂量组(50?mg/kg)].观察并测量各组...     

小鼠乳腺癌TM40D细胞株移植模型建立及其C-erbB-2的测定

目的　建立乳腺癌TM 4 0D细胞BALB/c小鼠移植模型 ,并检查其癌基因C erbB 2状况。方法　采用来源于BALB/c小鼠的乳腺癌TM4 0D细胞接种于BALB/c小鼠胸壁第 5～ 6肋间皮下 ,细胞数为 1× 10 6/只 ,观察成瘤情况。切除肿块作病理、C erbB 2免疫组织化学检查。结果　接种后 14d在接种部位可见肿块 ,直径 3～ 5mm ,肿瘤移植成功率为 93 33% (2 8/30 )。病理检查为乳腺癌 ,免疫组织化学C erbB 2阳性。结论　该方法建立的小鼠乳腺癌移植模型成瘤率高 ,为乳腺癌研究、尤其是以C erbB 2为靶的乳腺癌研究建立了一个很有价值的模型     

用乙型肝炎病毒单克隆抗体治疗裸鼠的移植人肝癌

本文报道了用单克隆抗-HBs IgM 和IgG_(2a)预防或抑制注射 PLC/PRF/5瘤细胞的无胸腺裸鼠的肿瘤形成。PLC/PRF/5细胞是含有 HBV DNA 的人肝癌细胞系,能合成和释放 HBsAg,能使BALB/c 裸鼠100%产生肿瘤。     

一株减毒沙门氏菌在体内外诱发的细胞毒性:与带菌状态和抗肿瘤生长的关系

作者用减毒肠炎沙门氏菌11RX 株免疫小鼠后,测定了体内外抗肿瘤参数。(BALB/c J×C57BL/6J)F_1杂交小鼠腹腔或静脉注射10~511RX 株活菌,用10~6Eh-rlich 腹水瘤(EAT)细胞腹腔攻击。取小鼠的     

抗HBsAg的单克隆抗体用于HBsAg的自动化检测

作者用经亲和层析法纯化的HBsAg免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与NS-1骨髓瘤细胞融合。选得3株分泌抗-HBs的杂交瘤细胞。此3株细胞分泌的抗体具有HBsAg a决定簇特异性,均属小鼠IgGl亚类。其中一株杂交瘤细胞(K1/3/2)用被动血凝试验测得其细胞培养液中抗-HBs的血凝滴度为2×10~4,小鼠腹水中抗-HBs的血凝滴度为10~7。腹水抗体经(NH_4)_2SO_4沉淀,DEAE-Seph-     

分泌抗α_2-巨球蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞系建立

用亲和层析法从人血清中纯化α_2-M抗原,免疫BaLB/c小鼠后取其脾细胞制成悬液,与无分泌型SP_2/o-Ag14细胞系融合、培养,定期用微量间接血凝法测定抗α_2-M抗体,其滴度≥1:8为阳性,再行杂交瘤细胞克隆化。将其中A91-3-5、A91-3-6等6个亚系继续传代半年,并不断检测α_2-M抗体滴度,建立分泌抗α_2-M单克隆抗体的杂交瘤细胞系。     

T细胞介导的1型糖尿病小鼠模型的建立及机制研究

目的:建立T细胞介导的1型糖尿病(IDDM)小鼠模型。方法:BALB／c小鼠小剂量连续多次ip链脲佐菌素(STZ)制备1型糖尿病模型,4周后处死取脾制备脾细胞悬液建立T淋巴细胞系,并将不同数量T淋巴细胞过继转移到经不同方式预处理的BALB／c小鼠体内。符合高血糖诊断标准后处死动物,观察胰腺病理变化,检测脾淋巴细胞增殖反应。结果:2次ip小剂量STZ联合3×106T细胞过继转移,或采用2次ip环磷酰胺联合2次ip STZ和1．5×106T细胞过继转移,均可建立1型糖尿病动物模型。血糖分别于T细胞过继转移后第20和第13天显著升高(P<0．05),脾淋巴细胞增殖能力明显增强(P< 0．05),胰腺见大量淋巴细胞浸润和严重胰岛β细胞破坏。结论:BALB／c小鼠一次性过继转移IDDM发病T淋巴细胞可成功复制1型糖尿病模型。     

大规模生产单克隆抗体的途径

随着单克隆抗体(McAb)的广泛应用,如何大量生产McAb已成为细胞工程和商业公司所共同关心的问题.目前采用大规模培养杂交瘤细胞生产McAb的方法有体内法、体外法和体内、体外结合法三类,现分别简述如下.体内法一、诱生腹腔肿瘤法将小鼠杂交瘤细胞接种到BALB/c小鼠腹腔内,经增殖后从小鼠腹水提取McAb.每只小鼠可收获1～20ml,约含10～100mg抗     

用小鼠杂交瘤技术生产麻疹病毒抗体

BALB/c小鼠骨髓瘤P_3×63Ag8细胞与同系小鼠经Vero细胞传代的麻疹病毒LEC株免疫的脾细胞在PEG作用下杂交。杂交细胞分种微量培养盘的孔内,进行孵育,用HAT培养液筛选单克隆细胞,用RIA检测,单克隆细胞孔中60％麻疹抗体阳性。 28个杂交瘤细胞系接种BALB/c小鼠腹腔内,经3～5周,从每只小鼠腹腔抽取2～10ml腹水,测定其麻疹抗体活性,其抗体滴度较原培养液高20～200倍。28个杂交瘤的     

用单克隆抗体检测EB病毒株和群特异抗原决定簇

作者用细胞融合技术制备4种抗EB病毒多肽的单克隆抗体来鉴别不同的EB病毒株。产生病毒的细胞为QIMR-WIL、B95-8和P3HR-1细胞,用于免疫BALB/c小鼠的抗原是从QIMR-WIL细胞纯化的EB病毒颗     

小鼠对C群脑膜炎球菌荚膜多糖-胸腺依赖性类毒素结合菌苗的免疫应答

作者选用4周龄雌性BALB/c、A/He、B6、DBA/2小鼠于10～12周龄时首次腹腔注射10μg C群脑膜炎球菌荚膜多糖（MCPS）或MCPS-破伤风类毒素（TT）,初免后2和4周分别眼眶穿刺采血,于末次采血后4周进行第2次免疫,1周及3周后收集血样。将12～16周龄的BALB/c小鼠脾细胞用抗T细胞抗体及家兔补体处理除去T细     

胃泌素释放肽DNA疫苗抑制EMT6乳腺癌生长的实验研究

目的：观察胃泌素释放肽（GRP）DNA疫苗对EMT6小鼠乳腺癌生长的抑制作用。方法：将构建的GRP DNA疫苗pCR3.1-VS-HSP65-TP-GRP6-M2肌肉注射免疫BALB/c雌性小鼠,2周1次,共5次。采用ELISA法对小鼠的血清中抗GRP-IgG类抗体进行检测。最后一次免疫后第2周,接种EMT6小鼠乳腺癌细胞。于肿瘤细胞接种后d14,处死全部动物,称量肿瘤的质量和测量肿瘤的体积。并对瘤组织进行常规HE染色。结果：pCR3.1-VS-HSP65-TP-GRP6-M2免疫BALB/c小鼠,可诱导抗GRP-IgG类抗体的产生。并对随后的EMT6肿瘤细胞攻击有显著的抑制作用（P〈0.01）,抑瘤率为46.53%。病理学检查结果显示,GRP DNA疫苗成功地激发了宿主的抗肿瘤免疫反应;与pCR3.1-VS-HSP65-TP对照组相比,GRP DNA疫苗免疫组小鼠EMT6肿瘤组织浸润性下降。结论：GRP DNA疫苗显著抑制EMT6乳腺癌生长,为此类疫苗应用研究奠定了基础。     

抗霍乱弧菌0:1 群-和型-特异性脂多糖抗原的单克隆抗体

本文报道产生抗霍乱弧菌O:1群脂多糖(LPS)O抗原决定簇单克隆抗体的杂交细胞系的建立及其所产生抗体的某些免疫学活性。采用稻叶型霍乱弧菌35、569B株和小川型34株,培养后分别经酚-水法提取LPS,高速离心纯化后,免疫6～10周龄BALB/c雌性小鼠4～9周,各取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/O-Ag14株融合并克隆化,在体内、     

1株与人乳腺癌反应的单克隆抗体AB/3

抗人乳腺癌单克隆抗体(以下简称单抗)的建立将有助于乳腺癌类型的鉴定及免疫学分型,并可用于乳腺癌的临床诊断、定位和治疗。目前虽已有一些单抗问世,但多与正常组织有交叉反应。本文作者用人乳腺癌细胞系CG-5免疫小鼠,成功获得1株选择性较强的抗人乳腺癌单抗AB/3。作者用2×10~6CG-5(自建的MCF-7人乳腺癌细胞系的亚系)     

肌肉注射编码Ag85A的结核病DNA疫苗具有免疫原性和保护作用

到目前为止 DNA疫苗接种的两条主要途径为 DNA溶液的肌肉注射 ( im)和 DNA包被金颗粒的表皮基因枪轰击 ( gg)。作者在BALB/ c和 C5 7BL 两个品系小鼠中对 im和gg接种编码结核杆菌 Ag85 A的 DNA疫苗的免疫原性和保护效力进行了比较。　　 6～ 8周龄雌性 BALB/ c或 C5 7BL 小鼠间隔 3周 im或 gg接种结核病 DNA疫苗 3次 ,并于最后一次接种后 3周采血。用ELISA测定抗 Ag85 A抗体 ,并取脾细胞进行细胞毒性 T淋巴细胞 ( CTL )应答测定。结果显示 ,在 BALB/ c小鼠中 ,gg免疫诱生抗体和 CTL应答所需的 DNA质粒量比 im免疫低 5 …     

在裸小鼠连续移植人体恶性肿瘤的实验性化疗

作者研究异种移植于裸小鼠的人体肿瘤的实验化疗。采用体重为20～22g 的BALB/c 裸小鼠。连续传代的15株人体肿瘤是:六株胃癌、三株结肠癌、三株乳腺癌、一株肝癌、一株胆管癌和一株血管肉瘤。用套管针将一或两块约3×3×3mm 大小的瘤组织块接种到裸小鼠背部皮下。每周三次由同一人用游标卡尺测     

霍乱毒素单克隆抗体的生产与鉴定

本文报告能产生霍乱毒素决定簇特异性单克隆抗体(MCA)的15株杂交瘤细胞系的建立。将大约10~8SP2/0骨髓瘤细胞与用霍乱毒素免疫的 BALB/c J 小鼠脾细胞融合,以Littlefield 次黄嘌呤-氨基蝶呤胸苷培养基选择稳定的杂交细胞系,移种于培养板孔中,     

预先注射抗个体基因型抗体增强HBsAg的免疫应答

本文介绍了运用抗个体基因型试剂,调节BALB/c小鼠对HBsAg的免疫应答。作者应用亲和层析纯化的兔抗共同个体基因型IgG,这种个体基因型与抗体结合部位有关,并用免疫前的兔IgG作对照。免疫原采用未变性的HBsAg的多肽。用Jerne溶血空斑试验,测定其空斑形成单位(PFU),从细胞水平上定量测定小鼠抗-HBs的免疫应答。IgM     

清热解毒口服液在小鼠体内抗甲型流感病毒的实验研究

目的观察清热解毒口服液在BALB/c小鼠体内抗甲型流感病毒的作用。方法将BALB/c小鼠随机均分为正常对照组、流感病毒感染模型组、利巴韦林片组、连花清瘟胶囊组及清热解毒口服液高、中、低剂量组。小鼠感染流感病毒后ig给药,以生存情况、死亡保护率及延长生命率作为指标,观察清热解毒口服液抗流感病毒的作用。结果清热解毒口服液各剂量组均能减轻感染小鼠的发病症状;死亡保护率为50%～60%;延长生命率为61.56%～73.84%。与阳性药物利巴韦林片及连花清瘟胶囊比较,差异无统计学意义。结论清热解毒口服液在BALB/c小鼠体内有抗甲型H1N1流感病毒的作用,其机制有待深入研究。