DNA探针鉴定伴放线放线杆菌及其与牙周炎临床参数的关系

目的 评估ＤＮＡ探针鉴定伴放线放线杆菌（Ａａ）的价值，探讨Ａａ与牙周炎临床表现间的相关性。方法 ３２例成人牙周炎患者５９个部位龈下菌斑经Ａａ选择性培养后，菌落分别用ＤＮＡ探针法及生化法鉴定，并根据探针法的检出率探讨Ａａ感染与牙周炎临床参数间的关系。结果 ＤＮＡ探针法与培养法有一致性（Ｐ〈０．０１，ｒ＝０．７８但探针法的检出率（２６／５９）明显高于培养法（１９／５９）（Ｐ〈０．０５）；Ａａ的检出率与     

核酸探针杂交技术用于检测伴放线放线杆菌

伴放线放线杆菌(A.a)是青少年牙周炎的主要致病菌,A.a的传统检测方法费时费力。本文从核酸分子杂交的原理出发,就核酸探针的种类及其杂交、探针的标记、临床应用、评价及使用核酸探针杂交技术检测A.a的前景做了介绍。     

放线共生放线杆菌的分型和基因鉴定方法

放线共生放线杆菌（Ａｃｔｉｎｏｂａｃｉｌｕｓａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｍｃｏｍｉｔａｎｓ,Ａａ）是革兰氏阴性、兼性厌氧的球杆菌,它在牙周炎患者的牙周袋中检出率较高,有报告９０％‘以上青少年牙周炎的牙周损害部位有此菌定居［１］,因此,被认为是与牙周炎,...     

伴放线放线杆菌全染色体DNA探针的制备和鉴定

本研究的目的是制备伴放线放线杆菌全染色DNA探针,并评价其特异性和敏感性。抽提标准菌株Aa Y4 DNA,经~(32)P标记后制成探针,然后用斑点杂交法鉴定探针性质。结果Aa全染色体DNA探针的灵敏性为8×10~2纯菌或1ng同源DNA,探针与口腔常见菌的杂交显示仅与嗜沫嗜血杆菌有较弱的交叉反应。提示~(32)P标记Aa全染色体DNA探针的敏感性、特异性均较高,且方便实用,有临床推广应用价值。     

伴放线放线杆菌诱导人外周血淋巴细胞活化及凋亡的体外研究

目的研究伴放线放线杆菌诱导人外周血淋巴细胞活化及凋亡的作用。方法选取10名全身及牙周组织健康受试者,分离外周血淋巴细胞,在有／无伴放线放线杆菌情况下培养0—96h,用荧光探针（AnnexinV—FITC、PI、CD69-TC7）进行标记,并进行流式细胞仪检测。结果全淋巴细胞加伴放线放线杆菌组AnnexinV＋／PI-细胞百分数在48h、72h、96h分别为13．42±2．88、22．74±2．18、46．92±4．28,全淋巴细胞组AnnexinV＋／PI-细胞百分数在48h、72h、96h分别为8．46±2．53、6．36±2．36、9．36±2．67,2组间存在明显差异（P〈0．01）。CD69加淋巴细胞加伴放线放线杆菌组和CD69＋淋巴细胞组AnnexinV＋／PI-细胞百分数除48h外的4个时间点上都无明显差异（P〉0．05）。CD69＋淋巴细胞加伴放线放线杆菌组AnnexinV＋／PI-细胞百分数在各个时间点上都明显高于全淋巴细胞加伴放线放线杆菌组（P〈0．01）。结论伴放线放线杆菌能够诱导人外周血淋巴细胞活化,并且能够通过活化促进其凋亡。     

放线共生放线杆菌与牙周疾病

放线共生放线杆菌（Actinobacillus actinomycetemcomitans,Aa)是牙周主要致病菌之一，近年对其研究较多，并取得不少进展，本着文重描述了放线共生放线杆菌的一些重要特性，包括其传播特征，分类，毒性特征，检测方法，与牙周炎的关系及对临床治疗的指导作用。     

伴放线放线杆菌血清型分析

目的 PCR法检测伴放线放线杆菌（Actinobacillus actinomy＇etemcomitans，Aa）临床分离菌株血清型，分析其与flp-1基因型的关系。方法用血清型特异性引物，通过普通PCR和多重PCR的方法对60株Aa临床分离菌株的血清型进行鉴定，并分析其与flp-1基因型的关系。结果 60株Aa临床分离菌株中血清型c型63，33％，e型23．33％，b型6.67％，a，f型各占3．33％，未检测到d型菌株；在24名被检测者中，15名检测到c型An菌株，3名检测到b型菌株，各有2名分别检测到a、e、f型菌株。fip-1基因型Ⅰ型菌株的血清型均为a型，40株Ⅱ型菌株中38株为c型，Ⅳ型菌株均为b型，11株Ⅴ型菌株中9株为e型，Ⅵ型菌株均为e型。结论 Aa血清型分布以c型为主，fip-1基因型与菌株血清型存在一定对应关系。     

放线共生放线杆菌与牙周疾病

放线共生放线杆菌(Actinobacillus actinomycetemcomitans,Aa)是牙周主要致病菌之一,近年对其研究较多,并取得不少进展,本文着重描述了放线共生放线杆菌的一些重要特性,包括其传播特征、分类、毒性特征、检测方法、与牙周炎的关系及对临床治疗的指导作用。     

用荧光试剂快速鉴别放线共生放线杆菌与嗜沫嗜血杆菌

本实验应用荧光试剂检测放线共生放线杆菌与嗜沫嗜血杆菌，简便、快速、明确。可用于两种细菌的初步鉴别。     

伴放线放线杆菌菌毛研究进展

伴放线放线杆菌是侵袭性牙周炎的可疑致病菌，菌毛是其重要的致病因子。本文对伴放线放线杆菌菌毛的形态、相关基因和蛋白、基因表达的相关调控、致病作用以及免疫原性进行了综述。     

伴放线放线杆菌形态变化对菌体表面疏水性影响的研究

目的研究伴放线放线杆菌形态变化对菌体表面疏水性的影响。方法采用碳氢化合物法检测伴放线放线杆菌粗糙型和光滑型的菌体表面疏水性,观察同一菌株不同表型疏水性的变化。结果伴放线放线杆菌粗糙型和光滑型菌体表面具有疏水性。14株粗糙型伴放线放线杆菌菌体表面疏水率高于4株光滑型,差异有统计学意义（P〈0．05）。4株同源的粗糙型与其光滑型转变株比较得出除1株外,其余3株菌两种表型的菌体表面疏水率差异无统计学意义（P〉0．05）。结论伴放线放线杆菌形态变化可引起菌体表面疏水性的改变,粗糙型转变为光滑型后菌体表面疏水性减弱。     

放线共生放线杆菌表面相关物质的提取和纯化

目的：提取并纯化放线共生放线杆菌表面相关物质。方法：厌氧环境下液体培养放线共生放线杆菌（Ｙ４）７２ｈ，低温超速离心分离细菌，上清液经超滤浓缩后，以６０％硫酸铵粗提，ＨＰＬＣ纯化，检测各峰细胞毒性以及蛋白质含量、总糖含量、内毒素含量，透射电镜观察。结果：透射电镜显示：液体培养７２ｈ多数细菌表面电子阻射区剥离；粗提物经ＨＰＬＣ显示一个蛋白主峰中含３个小蛋白峰，峰Ⅱ有细胞毒性，此峰为糖蛋白，内毒素含量极微。结论：提取、纯化毒素的主要毒力成份是细菌表面相关物质     

寡核苷酸探针检测龋下菌斑中伴放线菌放线杆菌的分布

目的研究伴放线菌放线杆菌在牙周炎患者和健康人龈下菌斑中的分布。方法利用合成的寡核苷酸探针对60例慢性牙周炎患者60患病位点、10例健康人的10个对照位点龈下菌斑中伴放线菌放线杆菌进行检测。结果60个患病位点中有19位点检出伴放线菌放线杆菌，检出率为31.67%,在健康部位未检测出伴放线菌放线杆菌，二者差异有统计学意义(P<0.05)；检出伴放线菌放线杆菌的患者的年龄是(28.68±7.33)岁,未检出伴放线菌放线杆菌的患者的年龄是(44.48±12.48)岁,二者差异有统计学意义(P<0.01)。结论伴放线菌放线杆菌与年轻患者慢性牙周炎的发生、发展密切相关。     

分泌抗放线共生放线杆菌Y_4特异性抗体的杂交瘤细胞系的建立

本实验建立了三株分泌抗放线共生放线杆菌Ｙ４特异性抗体的杂交瘤细胞系Ｙ４１Ｈ１、Ｙ４２Ｇ１和Ｙ４２Ｅ４。反复传代三个月仍能稳定分泌抗体。抗体与放线共生放线杆菌其它血清型及口腔其它常见菌未发现有交叉反应。Ｙ４１Ｈ１和Ｙ４２Ｇｉ抗体亚类均为ＩｇＧ３。腹水抗体ＥＬＩＳＡ效价：Ｙ４１Ｈ１２×１０５，Ｙ４２Ｇ１及Ｙ４２Ｅ４为５×１０５。     

伴放线放线杆菌磷酸胆碱的电泳分析

目的 比较3个磷酸胆碱阳性的伴放线放线杆菌菌株在蛋白酶K作用后电泳结果的变化,分析磷酸胆碱抗原在细菌中的附着结构.方法 将培养收集的伴放线放线杆菌破碎处理后,加入蛋白酶K水解,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE),考玛斯亮蓝染色显示蛋白条带的分布情况,免疫印迹法检测磷酸胆碱的分布情况.结果 伴放线放线杆菌的3个菌株SA716、SA1398、SA2791通过SDS-PAGE电泳,可见未经蛋白酶K处理的细菌悬液显示连续分布的蛋白条带,而蛋白酶K处理后,只显示1条蛋白条带,该条带在只有等量蛋白酶K的对照组也出现,而在未经蛋白酶K处理的细菌悬液中无该条带,可以确定这一条带是蛋白酶K,细菌蛋白都已经被分解.未经蛋白酶K处理的菌株通过SDS-PAGE电泳和磷酸胆碱免疫印迹检测,磷酸胆碱显示阳性结果,磷酸胆碱附着结构分子量大小约为9 kDa,而蛋白酶K处理后,显示阴性结果,磷酸胆碱信号消失.结论 伴放线放线杆菌磷酸胆碱信号在蛋白酶K处理后消失,提示该抗原的附着结构为蛋白成分.     

伴放线放线杆菌形态变化对白细胞毒素分泌影响的研究

目的观察伴放线放线杆菌形态变化对白细胞毒素分泌的影响。方法选择粗糙型和光滑型伴放线放线杆菌各8株,应用聚丙烯酰胺凝胶电泳,检测液体培养12、24、48、60、72h的菌体及培养上清液中116kDa大小白细胞毒素蛋白条带的情况,应用超滤法分离纯化培养上清液蛋白,应用台盼蓝染色排除法检测上清液蛋白白细胞毒素活性。结果粗糙型伴放线放线杆菌菌株液体培养12、24、48、60、72h菌体蛋白电泳均可见116kDa大小的蛋白条带,培养上清液蛋白电泳结果显示116kDa大小的蛋白条带均出现于培养24和48h;光滑型伴放线放线杆菌菌株液体培养12、24、48、60、72h菌体蛋白电泳结果均缺少116kDa大小的蛋白条带,培养上清液蛋白电泳结果显示116kDa大小的蛋白条带出现于培养12和24h;实验菌株培养上清液提取蛋白均具有白细胞毒素活性。结论伴放线放线杆菌粗糙型和光滑型菌株均可分泌具有直接杀灭人多形核白细胞活性的白细胞毒素,但粗糙型菌株分泌白细胞毒素的时间晚于光滑型。     

伴放线放线杆菌菌毛研究进展

伴放线放线杆菌是侵袭性牙周炎的可疑致病菌,菌毛是其重要的致病因子。本文对伴放线放线杆菌菌毛的形态、相关基因和蛋白、基因表达的相关调控、致病作用以及免疫原性进行了综述。     

伴放线放线杆菌外膜蛋白的研究进展

伴放线放线杆菌与牙周炎,特别是与局限性侵袭性牙周炎有着密切的关系.伴放线放线杆菌外膜蛋白作为其重要毒力因子,在牙周病的发病中起着重要的作用.本文就近年来有关伴放线放线杆菌外膜蛋白的结构特征、外膜蛋白的表现型、外膜蛋白与血清型、外膜蛋白的致病性等研究进展作一综述.     

伴放线放线杆菌粘附特性研究

目的分析伴放线放线杆菌的粘附特性及菌毛结构基因tip-1的遗传多样性对菌株粘附活动的影响。方法检测不同孵育条件下5种tip-1基因型临床分离菌株和光滑型菌株的粘附活动。结果临床分离菌株的粘附量随菌液浓度,孵育时间的增加而增加。tip-1基因型Ⅱ型菌株的粘附量高于其它4型菌株,光滑型菌株的粘附量低于临床分离菌株。生理温度下菌株粘附数高,低温下明显降低。厌氧条件和有氧条件下的粘附量无显著性差异。结论伴放线放线杆菌临床分离菌株的粘附存在时间和菌量依赖性,并要求一定新陈代谢活性,粘附效率在氧浓度改变时没有明显变化。伴放线放线杆菌表型影响菌株的粘附作用。不同tip-1基因型菌株粘附能力存在差异,Ⅱ型菌株粘附能力最强。     

放线共生放线杆菌的血清型分布

为了解放线共生放线杆菌（Ａｃｔｉｎｏｂａｃｉｌｕｓａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｍｃｏｍｉｔａｎｓ，Ａａ）不同血清型的分布，作者应用Ａａ菌种及ｂ、ｃ血清型抗体对来自２８人３２个龈下菌斑标本的１３１株Ａａ进行了血清分型。结果：每人只检出一种血清型，未发现复合血清型；２８人中的１９人为血清型ｃ，占６８％；９名青少年牙周炎患者７名为血清型ｃ，２名牙周健康者均为血清型ｂ。研究表明Ａａ不同血清型分布以ｃ型为优势血清型；血清型的分布可能存在地域或种族差异。