补肾活血方对多囊卵巢大鼠卵巢MMP-2，9的表达干预

目的观察补肾活血方对多囊卵巢（PCO）大鼠基质金属蛋白酶-2，9（MMP-2，9）表达的影响，探讨补肾活血方治疗PCO排卵障碍的机理。方法选用未成年24日龄SD雌性大鼠60只，随机分为模型对照组、西药对照组、补肾活血方高剂量组、补肾活血方低剂量组、正常对照组共5组，每组12只。建立大鼠PCO病理模型，采用原位杂交法检测各组卵巢组织中MMP-2，9基因的表达水平。结果经图象分析和统计处理，各组大鼠卵巢中卵泡的颗粒细胞和发育良好的卵泡膜细胞中均可检测到MMP-2和MMP-9的杂交信号。模型组MMP-2与MMP-9表达强度明显超过正常组、补肾活血方高剂量组、补肾活血方低剂量组及西药对照组（P〈0．05）；补肾活血方高剂量组MMP-2与MMP-9的表达接近正常组（P〉0．05）；补肾活血方低剂量组、，西药对照组与正常组相比，MMP-2与MMP-9的表达均较正常组高（P〈0．05）；补肾活血方低剂量组与西药对照组MMP-2与MMP-9的表达强度相似，但均超过补肾活血方高剂量组的表达强度（P〈0．01）。结论MMPs的过度表达可能是卵巢排卵障碍的关键因素，提示MMPs参与了卵巢排卵过程；大鼠PCO动物模型卵巢局部MMP-2，9异常高表达与PCO大鼠卵巢排卵障碍有关，补肾活血方通过抑制MMP-2，9的异常高表达，从而发挥治疗多囊卵巢排卵障碍的作用，这可能是其促进卵巢排卵的机制之-。     

补肾活血方对PCO大鼠卵巢COX-1mRNA表达的影响

目的探讨环氧化酶（COX—1）的表达在多囊卵巢卵泡破裂中的作用及补肾活血方治疗多囊卵巢排卵障碍的作用机制。方法选用未成年24d龄SD雌性大鼠60只。随机分为模型组、克罗米酚对照组、补肾活血方高剂量组、补肾活血方低剂量组、正常对照组5组,每组12只。用Bogovieh法建立大鼠多囊卵巢病理模型。以克罗米酚为对照,采用原位杂交法检测各组卵巢组织中环氧化酶COX-1基因的表达水平。结果模型组与正常组比较,卵泡内膜细胞COX—1 mRNA表达明显增加,两者比较差异有统计学意义（P〈0．01）;补肾活血方高剂量组与正常组相比。差异无统计学意义（P〉0.05）。结论COX—1 mRNA在卵巢卵泡内膜细胞水平升高可能是PCOS发病的重要因素或环节。补肾活血方可能通过影响COX—1mRNA水平。从而发挥治疗多囊卵巢排卵障碍的作用．这可能是其促进卵巢排卵的作用机制之一。     

鼻息肉中MMP-2、MMP-9的表达及意义

目的 探讨基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)在观察组织、正常组织中表达程度的差异性.方法 选取45例为观察组、15例为对照鼻甲组,采用实时荧光定量RT-PCR方法检测标本中MMP-2、MMP-9的表达情况并行相关分析.结果 与对照组比较,观察组MMP-2、MMP-9的表达量明显增加(P＜0.05).结论 MMP-2、MMP-9在观察组织中表达增高,可能与鼻息肉发生、发展相关.     

大鼠脑缺血再灌注后MMP-9、MMP-2表达与脑水肿的关系

目的:观察大鼠脑缺血再灌注后基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)的动态变化规律及其与脑水肿的关系。方法:将80只SD大鼠分为假手术组(n=10)和实验组(再灌注6 h、12 h、24 h、48 h、72 h、7 d和10 d组,n=10)。线栓法复制大鼠左侧大脑中动脉缺血再灌注模型,缺血2 h,再灌注6 h、12 h、24 h、48 h、72 h、7 d和10 d测定大鼠神经功能缺损评分;断头取脑,按Elliot公式计算脑组织含水量,免疫组织化学法测定相应时间点MMP-2、MMP-9免疫阳性细胞数。结果:实验组再灌注后6 h出现神经功能障碍,48 h最严重,10 d仍未完全恢复,与假手术组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组再灌注6 h出现脑水肿,48 h最严重,7 d时脑水肿仍存在,与假手术组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组再灌注6 h有少量的MMP-9免疫阳性细胞,12 h开始增多,48 h达到高峰,与假手术组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组再灌注24 h见少量MMP-2免疫阳性细胞,48 h逐渐增多,72 h最多,7 d和10 d仍有较多表达,与假手术组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:脑缺血再灌注后MMP-2和MMP-9均升高,两者表达方式的不同,提示MMP-9主要参与脑缺血再灌注后脑水肿形成,MMP-2可能与组织修复和神经再生有关。     

补肾活血法对肾小球系膜细胞MMP-2、TIMP-2表达的影响

摘要: 目的 观察补肾活血法组方中药对基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、膜型基质金属蛋白酶-1（MT1-MMP）、基质金属蛋白酶组织抑制剂-2（TIMP-2）在高糖培养的肾小球系膜细胞（GMC）中表达的影响。方法 将体外培养的GMC分为高糖组（30mmol/L）、正常糖组（5.4 mmol/L）和高糖+补肾活血组方中药组。采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定GMC上清液中Ⅳ型胶原的分泌;免疫细胞化学法及流式细胞仪（FCM）检测MMP-2、MT1-MMP、TIMP-2的蛋白表达。结果 与正常糖组比较,随着培养时间的延长,高糖组细胞培养上清液中Ⅳ型胶原分泌明显增加,MMP-2、MT1-MMP表达减少,TIMP-2表达升高（p<0.01）。补肾活血法组方中药可以上调MMP-2的表达,下调TIMP-2的表达。结论 补肾活血法组方中药可以加速细胞外基质降解,减少细胞外基质积聚,从而防治肾小球硬化。     

MMP-2、MMP-9在口腔黏膜白斑中表达的研究

目的:检测基质金属蛋白酶2、9(matrix metalloproteinase 2、9,MMP-2、9)在口腔正常黏膜、白斑上皮单纯性增生及异常增生中的表达,探讨其与白斑不同增生程度间发生发展的关系。方法:选取正常口腔黏膜15例,白斑单纯性增生31例,白斑异常增生35例,应用MMP-2、MMP-9抗体行免疫组化染色并进行统计学分析。结果:MMP-2、MMP-9均表达在细胞浆,在上皮内两者的阳性率在上述三组中分别为20.0%、22.6%、34.3%和6.7%、9.7%、34.3%,在上皮下成纤维细胞中两者的阳性率在上述三组中分别为0、12.9%、14.3%和6.7%、25.8%、80.0%。MMP-2在上皮内、成纤维细胞的阳性表达在三组间差异无统计学意义(P0.05)。MMP-9在上皮内及上皮下成纤维细胞的阳性表达在白斑异常增生组中明显高于正常组织和白斑单纯增生组(P0.05)。结论:MMP-9可能参与了白斑发生发展的过程。     

穿心莲有效成分对巨噬细胞MMP-2、MMP-9表达和活性的影响

目的 探讨穿心莲有效成分(API0134)是否具有抑制小鼠腹腔巨噬细胞基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶-9(MMP-2,MMP-9)活性及其mRNA表达的作用.方法 用腹腔冲洗的方法收集小鼠腹腔巨噬细胞,使用氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)刺激巨噬细胞,同时分别以不同浓度的API0134对巨噬细胞进行干预.采用免疫荧光方法、明胶酶谱法和RT-PCR的方法检测ox-LDL和API0134对巨噬细胞MMP-2、MMP-9活性和表达的影响.结果 与对照组相比,ox-LDL组MMP-2及MMP-9活性和mRNA表达显著升高(均P＜0.01).与ox-LDL组相比,加入50 μg/mL API0134组MMP-2及MMP-9的活性和mRNA表达变化不明显(均P＞0.05),而加入100、200 μg/mL API0134组的MMP-2及MMP-9的活性和mRNA表达均有不同程度的下降(均P＜0.05).结论 穿心莲有效成分能够抑制ox-LDL对巨噬细胞MMP-2及MMP-9活性和mRNA表达的上调作用,因此可能具有维护粥样斑块稳定,减少斑块破裂危险的作用.     

清肺化痰通络方对肺纤维化大鼠基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-9表达的影响

目的探讨清肺化痰通络方对博莱霉素A5（BLMA5）所致肺纤维化大鼠的干预作用及可能机制。方法将Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、干预组。模型组和干预组通过气管插管灌注BLMA5复制大鼠肺纤维化模型,对照组给予等量生理盐水气管灌注;对照组和模型组给予生理盐水灌胃,干预组给予清肺化痰通络方药物灌胃。灌胃后3、7、14、28d分别处死大鼠,采用HE和Masson染色观察肺组织病理变化,免疫组化染色检测基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、MMP-9在肺组织的表达水平。结果清肺化痰通络方能显著改善大鼠的一般身体状况．减轻肺泡炎及肺纤维化的程度。干预组和模型组肺内MMP-2表达在第14天达到高峰,MMP-9的表达在第7天达到高峰,且两组同时期MMP-2、MMP-9的表达均高于对照组（P〈0．05）;干预组MMP-2、MMP-9表达低于同时期模型组（P〈0．01）。结论清肺化痰通络方可能通过抑制MMP-2、MMP-9在肺内的表达,对BLMA5致肺组织纤维化起到一定的防治作用。     

MMP-2、MMP-9与脑动脉畸形的相关性研究

目的 探讨基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）与脑血管畸形的关系。方法 选取经头颅CT、MRI和造影检查证实为脑动脉畸形患者30例为观察组,收集其血清和手术切除的标本;选取脑外伤非血管性疾病患者18例为对照组,收集其血清和脑动脉标本。血清标本采用ELISA法检测MMP-2和MMP-9含量;采用RT-PCR方法检测MMP-2、MMP-9 mRNA在脑动脉标本中的表达;采用Western blot方法和免疫组化技术检测MMP-2和MMP-9蛋白在脑动脉标本中的表达。结果 观察组患者血清MMP-2和MMP-9水平均高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;与对照组比较,观察组患者MMP-2和MMP-9在mRNA及蛋白表达高,在动脉组织中MMP-2和MMP-9蛋白的表达高,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 MMP-2和MMP-9在脑动脉畸形患者中异常表达,并且在脑动脉畸形的形成和发展中起重要作用。     

调气活血补肾汤对慢性肾功能不全大鼠的影响

目的:观察调气活血补肾汤对慢性肾功能不全(CRF)大鼠肾组织匀浆NO及脂质过氧化的影响。方法:Wistar大鼠在乙醚麻醉下,切除5/6肾脏制备慢性肾功能不全模型。5周后,按小剂量(生药13.9 g/kg)、大剂量(生药27.8 g/kg)给模型大鼠灌胃给药,连续10周,于给药4周、10周后分两批处死大鼠,制备肾组织匀浆,测定NO、一氧化氮合酶(NOS)及超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量。结果:成功复制大鼠CRF模型。CRF大鼠肾匀浆NO和NOS活性呈明显的早期升高、晚期下降趋势;使用调气活血补肾汤治疗4周时显著抑制NO和NOS活性过分明显升高,10周时显著抑制NO和NOS活性过分持续降低。随病程延长CRF大鼠肾组织SOD活性呈逐渐下降,MDA呈逐渐升高的趋势;调气活血补肾汤治疗后肾组织SOD活性明显增强,10周时显著下降,MDA则呈下降趋势;以上作用大剂量药物组均优于小剂量组。结论:调气活血补肾汤能改善和调节肾组织NO合成与释放、降低自由基损伤。     

补肾活血方对PCOS大鼠模型卵巢中PAI-1mRNA表达的影响

目的探讨补肾活血方对大鼠PCOS模型卵巢局部纤溶酶原激活物抑制因子-1（PAI—1mRNA）表达的影响。方法选用未成年24d龄SD雌性大鼠60只,随机分为模型组、克罗米酚组、补肾活血方高剂量组、补肾活血方低剂量组、正常对照组5组。用Bogovich法建立大鼠多囊卵巢病理模型。以克罗米酚为对照。用原位杂交法观察补肾活血方对多囊卵巢大鼠局部PAI—1mRNA的影响。结果模型组卵巢局部PAI—1mRNA存在卵泡膜间质细胞显著增高,用补肾活血方高、低剂量与克罗米酚药后,卵巢局部PAI-1mRNA的表达明显降低．差异具有统计学意义（P〈0．05、P〈0．01）。补肾活血方高剂量组与克罗米酚组比较,差异具有显著统计学意义（P〈0．01）;低荆量组与克罗米酚组比较差异无统计学意义（P〉0．05）,补肾活血方高、低剂量组比较,低剂量组卵泡膜间质细胞上PAI-1的基因表达增高更明显,但二者差异无统计学意义（P〉0．05）。结论PAI-1mRNA可能与多囊卵巢综合征的发病机制有关。以补肾活血立法的补肾活血方能降低多囊卵巢大鼠局部PAI—1mRNA的显著增高表达．降低PAI—1mRNA卵巢局部的作用。提示补肾活血方可能通过PAI—1mRNA途径促进卵巢排卵的机制。     

补肾活血方对大鼠卵巢局部VEGFmRNA表达的影响

目的探讨补肾活血方对大鼠多束卵巢形成中血管内皮生长因子的基因表达(VEGFmRNA)的影响。方法选用未成年24 d龄SD雌性大鼠60只,随机分为模型对照组、西药对照组、补肾活血方高剂量组、补肾活血方低剂量组、正常对照组5组。用Bogovich法建立大鼠多囊卵巢病理模型。以克罗米酚为对照,用原位杂交法观察补肾活血方对多囊卵巢大鼠局部VEGFmRNA的影响。结果模型组卵巢局部VEGFmRNA存在颗粒细胞、卵泡膜细胞、间质细胞及血管内皮细胞表达的显著增高。用补肾活血方高、低剂量和西药对照治疗后,卵巢局部VEGFmRNA的表达明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01),说明补肾活血方高、低剂量组与西药组对VEGFmRNA的表达具有抑制作用。补肾活血方高、低剂量组与西药组比较,高剂量组抑制作用优于西药组,差异具有显著统计学意义(P<0.01);低剂量组与西药组比较差异无统计学意义(P>0.05),补肾活血方高、低剂量组比较,高剂量组抑制作用优于低剂量组,差异具有显著统计学意义(P<0.05)。结论VEGFmRNA可能参与多囊卵巢综合征的发病机制有关。以补肾活血立法的补肾活血方能降低多囊卵巢大鼠局部VEGFmRNA的显著增高表达,降低VEGFmRNA在卵巢局部的作用。提示补肾活血方可能通过VEGFmRNA途径切入卵泡发育、促卵泡优势化、卵泡成熟、基质降解、诱发局部类炎症反应,使排卵成功。     

补肾活血方对肝肾阴虚型红斑狼疮肾炎患者疗效及免疫功能影响

[目的] 探讨补肾活血方对肝肾阴虚型狼疮肾炎(LN)患者治疗效果及免疫功能影响。[方法] 36例肝肾阴虚型LN患者按随机数字表法分为基础治疗组及联合治疗组,两组均应用甲基泼尼松与环磷酰胺(CTX)冲击治疗,联合治疗组同时应用补肾活血方治疗,4个月后观察两组患者系统性红斑狼疮(SLE)疾病活动指数(SLEDAI)、补体C3、C4、24 h尿蛋白定量、内生肌酐清除率(Ccr)、 血尿素氮(BUN)、CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺ 水平。[结果] 联合治疗组患者的SLEDAI、24 h尿蛋白定量、尿素氮、日糖皮质激素用量均明显下降,CD8⁺ 水平下调,与基础治疗组比较有统计学差异(P<0.05).[结论] 补肾活血方能够显着改善肝肾阴虚型狼疮肾炎(LN)患者临床症状,减少糖皮质激素维持应用量,并可在一定程度上纠正免疫功能紊乱。     

补肾化瘀方对多囊卵巢大鼠血脂水平的影响

目的观察补肾化瘀方对多囊卵巢(PCO)大鼠血脂代谢的影响。方法采用来曲唑灌胃制作PCO大鼠模型,造模成功后,分别给予不同剂量补肾化瘀方和炔雌醇环丙孕酮片灌胃,观察大鼠胆固醇(TC)、甘油三酯(TG),低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL)的变化。结果 PCO大鼠TC、HDL、LDL含量明显高于正常组,与正常组相比,差异有统计学意义(P<0.05);补肾化瘀方中、低剂量组和炔雌醇环丙孕酮片能不同程度地改善PCO大鼠血脂成分的病理改变。结论补肾化瘀方能改善PCO大鼠血脂代谢异常。     

英夫利昔单抗联合健脾补肾活血中药汤剂治疗类风湿关节炎疗效及安全性观察

[目的]探讨英夫利昔单抗联合健脾补肾活血中药汤剂治疗类风湿关节炎的疗效及安全性。[方法]60例类风湿关节炎患者随机分为两组,对照组使用英夫利昔单抗联合甲氨蝶呤治疗,试验组使用英夫利昔单抗联合甲氨蝶呤联合中药治疗。治疗前后分别记录关节疼痛数,关节肿胀数,晨僵时间,疼痛视觉模似评分法(VAS)评分,健康评估问卷(HAQ)评分,实验室检查血沉(ESR)、C-反应蛋白(CRP);安全指标血尿便常规及肝功能。并记录患者症状体征及中医证候评分。[结果]两组治疗后均较治疗前有明显改善,差异有统计学意义(P0.05);两组疗效相当,组间差异无统计学意义(P0.05),不良反应试验组少于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。[结论]联合中药治疗在不影响治疗效果的前提下能明显降低药物不良反应,提高患者依从性。     

补肾活血汤配合鲑鱼降钙素治疗老年骨质疏松性腰椎骨折临床观察

目的分析补肾活血汤配合鲑鱼降钙素治疗老年骨质疏松性腰椎骨折的临床效果。方法选择2015年5月~2017年6月来我院就诊的老年骨质疏松性腰椎骨折患者109例为研究对象,采用随机数字表法分为对照组和观察组,109例患者在接受PKP治疗的基础上,对照组采用皮下注射鲑鱼降钙素,观察组在对照组基础上联合补肾活血汤,比较两组临床效果。结果对照组治疗前ODI(46.83±3.91)与观察组治疗前ODI(45.98±4.03)比较差异不显著(P0.05),经治疗后对照组ODI(38.91±4.09)与观察组ODI(26.28±5.21)差异显著(P0.05)。重复测量方差分析发现,两组在组间和时间具有统计学差异(P0.05),但组别与时间的交互作用差异无统计学意义(P0.05),两组术前BMD(0.69±0.06)、术后1个月(0.72±0.09)与观察组术前BMD(0.69±0.06)、术后1个月(0.72±0.09),差异不显著(P0.05)。治疗后对照组BMD术后3个月(0.72±0.09)、术后6个月(0.72±0.08)与对照组BMD术后3个月(0.73±0.09)、术后6个月(0.73±0.09),差异显著(P0.05)。对照组总有效率45例(83.33%)与观察组总有效率53例(96.36%),差异显著(P0.05)。结论补肾活血汤配合鲑鱼降钙素治疗老年骨质疏松性腰椎骨折临床效果显著,值得推广。     

大鼠脑出血后MMP-2和MMP-9的动态表达及七叶皂苷钠对其表达的影响

目的观察大鼠脑出血（ICH）后基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、MMP-9蛋白动态表达及其与血肿周围脑组织含水量的关系,以及观察七叶皂苷钠对MMP-2、MMP-9表达的影响。方法Wistar大鼠250只随机分为4组：正常对照组10只、假手术组80只、ICH组80只和七叶皂苷钠治疗组80只,于制模后6、12、24、48、72、120h、7d和15d 8个时间点,测定各组血肿周围脑组织含水量、MMP-2和MMP-9的蛋白表达。结果治疗组神经功能缺失较ICH组明显改善（P〈0.05）;6-120h治疗组血肿周围脑组织含水量较ICH组明显减少（P〈0.05）;ICH后MMP-2蛋白表达在6h达到高峰,12h时下降,与正常对照组相比,MMP-2蛋白表达具有统计学意义（P〈0.01）;治疗组MMP-2蛋白表达在各时间点较ICH组明显减少（P〈0.01）;ICH后MMP-9蛋白表达在6h开始上升,24-48达高峰,72h时下降,与正常对照相比,具有统计学意义（P〈0.01）,其表达水平与血肿周围脑组织含水量呈正相关（r=0.949,P〈0.05）;治疗组MMP-9蛋白表达在各时间点ICH组明显减少（P〈0.01）。结论大鼠ICH后MMP-2、MMP-9蛋白的表达是ICH后早、中期脑水肿形成主要因素,七叶皂苷钠能降低MMP-2、MMP-9蛋白表达和脑组织含水量,对ICH具有保护作用。