麻痹性贝类毒素ELISA快速检测方法的建立

[目的]建立应用酶联免疫技术检测麻痹型贝类毒素的快速方法。[方法]在福建沿海厦门、莆田、宁德三市的零售市场采集织纹螺68份，应用R-Biopharm试剂盒检测麻痹性贝类毒素。[结果]应用酶联免疫试剂盒检测麻痹性贝类毒素，全部实验过程在1h之内完成。检测限50μg／kg，灵敏度2．5μg／kg。[结论]应用酶联免疫技术检测麻痹性贝类毒素简单、快捷，不需要昂贵的设备，对于监控海产食品的麻痹性贝类毒素具有重要的现实意义。     

贝类麻痹性毒素的检测

海洋软体动物贝类麻痹性毒素（paralytic shellfish poison，PSP）的检测方法，通用的方法为生物测定法，即根据小鼠注射贝类提取液后的死亡时间，查出相应的鼠单位并进行体重校正后，计算确定每100g贝肉中PSP毒素的含量。这种方法的局限性是以小鼠活体实验为基础，判定贝类产品的毒性大小。由于小鼠个体差异，使得检测结果具有高变异性和低敏感性。因此，欧盟对贝类产品PSP含量，特别规定了允许80μg／100g的限量。目前，我国检测PSP含量的方法SN0352—95《出口贝类麻痹性贝类毒素（PSP）检验方法》和SC／T3023—2004无公害食品《麻痹性贝类毒素的测定》仍采用小鼠生物测定法。为了准确检测贝类等水产品中PSP毒素的含量，本次用ELISA法进行实验，取得了满意的结果，方法如下：     

柱前衍生HPLC-FLD法测定水产品中3种麻痹性贝类毒素

目的建立水产品中3种麻痹性贝类毒素成分(GTX2,3、dcSTX和STX)的柱前荧光衍生高效液相色谱(HPLC-FLD)检测方法。方法样品用1%乙酸提取,C18固相萃取柱净化,2%H2O2荧光衍生,以Symmetry?C18柱(4.6mm×150mm,5μm)为色谱柱分离,以乙腈和0.1mol/L甲酸铵(595)作为流动相,流速1.0mL/min,荧光检测器激发波长340nm,发射波长395nm。结果该法在10~500μg/L范围内线性关系良好,平均加标回收率为72.5%~88.6%,RSD为2.8%~4.7%。方法的检出限分别为dcSTX 3μg/kg、STX 10μg/kg和GTX2,34μg/kg。结论本方法灵敏度高、结果可靠,为检测水产品贝类麻痹性毒素的含量提供了一种高效便捷的方法。     

福建口岸出口贝类产品毒化状况的监测分析

目的：为了解我省出口贝类产品是否存在DSP和PSP这两种贝毒的污染，也为建立水产贝类毒素监测体系提供必要的监测数据。方法：2003～2005年对福建出入境检验检疫局辖区内采样并送检的出口贝类产品的贝类毒素污染状况进行监测；腹泻性贝类毒素检验方法采用SN0294—93，麻痹性贝类毒素检验方法采用SN0352—95。结果：3年间共检出口样品268批次。麻痹性贝类毒素均未检出。而腹泻性贝类毒素的合格样品数为266份，仅2份贻贝样品DSP大于0．05MU／g。结论：3年间福建出口的贝类产品大部分状况良好，只有两批次贻贝受到腹泻性贝类毒素的污染。     

海水和贝类中软骨藻酸的酶联免疫吸附分析方法研究

目的建立间接竞争酶联免疫吸附分析(ELISA)方法测定海水样品和海洋贝类中赤潮毒素记忆缺失性贝毒主要成分软骨藻酸(DA)。方法采用碳二亚胺法,将半抗原DA分别与载体蛋白卵清蛋白(OVA)和牛血清白蛋白(BSA)偶联,得到包被抗原和免疫抗原。以DA-BSA做为免疫抗原,免疫BALB/c小鼠,制备多克隆抗体,建立间接竞争ELISA方法分析检测海水样品和海洋贝类中的软骨藻酸。结果最低检出限为10.0ng/ml(对于贝相当于4μg/g);海水样品回收率为83.2%～124.7%,批内变异系数在4.7%～5.9%之间;贝类样品回收率为85.9%～99.9%,批内变异系数2.4%～7.1%之间。结论建立的ELISA方法检测海洋贝类中DA可以满足国际规定的安全限值。     

固相萃取-高效液相色谱-串联质谱法测定贝类产品中麻痹性贝类毒素

目的建立了贝类产品中石房蛤毒素(STX)、新石房蛤毒素(neo STX)、膝沟澡毒素(GTX14)、脱氨甲酰基类毒素(包括dc STX、dcneo STX和dc GTX23)8种麻痹性贝类毒素的固相萃取-高效液相色谱-串联质谱测定方法。方法匀浆贝组织以0.1 mol/L乙酸提取,HLB固相萃取小柱净化,10 000 MW超滤离心管离心纯化。采用TSK gel Amide-80柱分离,以乙腈-2 mmol/L乙酸铵溶液(均含0.1%甲酸)为流动相进行梯度洗脱,以正离子多反应监测模式检测,基质标准校正外标法定量。结果 8种麻痹性贝类毒素的定量限为10μg/kg~50μg/kg;在各自相应浓度范围内线性关系良好,相关系数0.990;2种添加水平的平均加标回收率为75.5%~103.0%;相对标准偏差为4.3%~13.2%。应用建立的方法对多份贝类样品进行分析,均未检出目标组分。结论方法选择性高、灵敏、准确,适用于贝类产品中麻痹性贝类毒素的确证及定量分析。     

UPLC-MS/MS测定水产品中4种麻痹性贝类毒素

目的建立超高效液相色谱—串联质谱法检测水产品中4种麻痹性贝类毒素的方法。方法贝类样品用0.1 mol/L乙酸超声提取,经亲水亲脂固相萃取小柱净化后,目标物以乙腈(含0.1%甲酸)和乙酸铵(含0.1%甲酸)溶液为流动相,经色谱柱HILIC 150 mm×2.1 mm,3μm梯度洗脱分离,采用电喷雾离子源,多反应监测(MRM)正离子模式进行定性与定量分析,外标法定量。结果各种麻痹性贝类毒素与杂质能良好分离,在各自的线性范围内线性关系良好,相关系数(r)0.999,方法检测限为10.0μg/kg~31.0μg/kg,在不同浓度水平加标平均回收率(n=6)为81.0%~104%,相对标准偏差(RSD)为0.47%~6.9%。结论本方法前处理方法简单,有较好的灵敏度和重现性,满足水产品中麻痹性贝类毒素的确证和定量分析要求。     

麻痹性贝类毒素的高效液相色谱-串联质谱测定方法研究

目的建立利用高效液相色谱-串联质谱法同时分析11种麻痹性贝类毒素的确证方法，用于实际样品的测定。方法采用0．1mol／LHAc提取海洋贝类或鱼类中的麻痹性贝类毒素，经OASISHLB固相萃取小柱净化后，以甲醇-乙酸铵溶液作为流动相，在Atlantis色谱柱（150mm×2．1mm×5μm）上，采用梯度改变乙腈在流动相中的比例和流速，一次进样同时定性及定量测定试样中的上述全部毒素组分。结果11种PSP线性相关系数均大于0．995，变异系数在1．2％～9．3％之间，高、中、低不同水平的加标回收率在80．9％～119．8％之间。定量检出限5μg／kg，回收率大于90％，相对标准偏差（RSD）小于10％。结论本方法对PSP毒素具有良好的分析测定效果。     

环丙沙星间接竞争ELISA（ic-ELISA）检测方法的建立

目的：建立环丙沙星残留的间接竞争ELISA检测方法。方法：用卵清白蛋白与环丙沙星偶联物做包被抗原,标准环丙沙星做竞争抗原,建立间接竞争ELISA方法,并用数学方法对结果进行了分析。结果：所建立的ELISA检测方法,最低检测限为2.77 ng/ml,检测范围为2.77～500 ng/ml。曲线回归方程为Y=-36.458X＋110.98,相关系数r2=0.9946。结论：该ELISA方法可以用于环丙沙星残留的快速检测。     

采用噬菌体展示技术筛选黄曲霉毒素B_1模拟抗原表位

目的从随机肽库中筛选黄曲霉毒素B1模拟抗原表位,以建立无需黄曲霉毒素B1偶联抗原的免疫学检测方法。方法利用噬菌体展示技术,以抗黄曲霉毒素B1单克隆抗体为靶分子,从随机七肽库中进行生物亲和淘选,ELISA鉴定阳性克隆,通过DNA测序对每个阳性克隆进行定性分析。结果通过4轮结合/扩增循环,获得了能与抗黄曲霉毒素B1单克隆抗体结合的肽,采用间接竞争ELISA,筛选到了4株能抑制黄曲霉毒素B1的阳性克隆子,经DNA测序得到HXXDPXH共有序列,其中X为任意氨基酸。以其中P10噬菌体阳性克隆建立竞争ELISA方法,线性范围为500~2000pg/ml,检测下限为50pg/ml。结论利用噬菌体展示技术筛选到了黄曲霉毒素B1模拟抗原表位,并以其代替黄曲霉毒素B1偶联抗原建立了免疫学检测方法。     

对医院护理管理队伍建设的几点思考

文章分析了当前医院护理管理队伍存在的主要问题：知识结构不合理；专业思想不纯正；接受继续教育不足：工作效能低下。提出了建设高素质护理管理人才队伍的思路：严格标准，搞好选才；加强思想教育和引导；加大培养力度；建立科学考评和激励机制；完善人才合理流动措施；合理编制，突出效率。     

医学科技成果信息资源网络开放利用的原则探析

医学科技成果信息资源网络开放利用，为资源的开放共享创造了良好条件，它使医学科技信息得到了高效传播和最大利用。网络开放利用医学科技成果信息资源，利用的主体和核心是其信息内容。信息内容是网络用户从中提取知识和所需资料的主要来源，同时也是信息破坏者发动攻击的主要目标之一，因而，信息内容的安全是信息安全的基本问题，主要包括信息内容的规范性、完整性与真实性、知识产权保护与利用的合理性等。要做好这些工作，应该遵循相应的原则和要求。     

政府公共财政支出分配公平性研究进展

政府公共财政支出是社会再分配的一种形式，其目的是促进社会公平。因此，政府的公共财政支出应该具有较强的目标针对性，应该向社会贫困人群倾斜，使其从中受益。本文通过查阅国内外政府公共财政支出分配公平性的相关文献资料。阐述了相关研究的进展情况，井着重探讨了政府公共财政支出分配公平性的内涵、研究范围、测算方法和研究意义。以及实际研究中存在的问题，最后提出我国政府公共财政支出分配公平性的研究方向和需要进一步完善的地方。     

长春新碱过量引起严重毒副反应1例的护理体会

报道1例霍奇金淋巴瘤患者因误用长春新碱（VCR）10mg一次性静脉推注后治疗护理情况。其出现间断性神志恍惚、眼睑闭合不全、言语不清、口腔黏膜糜烂、全身疼痛、麻痹性肠梗阻、尿潴留、手足麻木等症状,经积极解救,禁食,持续胃肠减压、胃管内注入麻油、开塞露、生理盐水灌肠,合理应用肠外营养,注重疼痛、心理护理,做好口腔、肛周护理,预防感染加重,患者病情得到控制好转出院。