淫羊藿苷抗肿瘤作用的研究进展

淫羊藿苷是淫羊藿的主要单体成分,具有调节内分泌、改善心血管功能、增加免疫活性及抗肿瘤等多种作用.以往有大量相关文献研究其在上述方面的作用,并证实了强大的药理作用.淫羊藿苷抗肿瘤作用主要集中于抑制肿瘤细胞增殖、诱导分化、促进凋亡及增加机体免疫力两个方面.     

淫羊藿甙诱导肿瘤细胞凋亡及其机制的研究

目的:采用淫羊藿苷icarrin(ICA,从朝鲜淫羊藿中提取的中药单体),作用于人急性早幼粒白血病细胞HL-60,较系统地对ICA诱导肿瘤细胞凋亡进行了观察,为ICA的开发应用提供实验依据.方法:采用电镜、流式细胞术、DNA片段化检测、RT-PCR等技术进行研究.结果:ICA在体外诱导HL-60细胞凋亡,呈典型的细胞凋亡形态学和生化特征,并具有时间剂量依赖性.ICA诱导肿瘤细胞凋亡的同时,下调相关基因bcl-2和c-myc基因mRNA和蛋白表达水平.结论:ICA体外诱导HL-60细胞凋亡,其机理可能与下调bcl-2和c-myc基因mRNA和蛋白表达水平密切相关.     

淫羊藿苷促进脐血来源树突状细胞的分化与成熟

目的：研究淫羊藿苷（icariin,ICA）体外对脐血单个核细胞来源树突状细胞的分化、成熟及免疫活性的影响。方法：无菌条件下采集脐血,密度梯度离心法分离脐血单个核细胞,用GMCSF、IL4诱导树突状细胞（dendritic cells, DCs）,第5天后将DCs分为3组（ICA组、TNFα组和阴性对照组）并作相应处理。倒置显微镜和透射电镜下观察DCs形态,流式细胞术检测DCs表面分子CD1a、CD80、CD83和CD86的表达情况,ELISA法检测DCs培养上清中IL12和IFNγ的水平,MTT法检测DCs刺激T细胞增殖的能力。结果：ICA刺激后,脐血单个核细胞来源DCs呈现典型的成熟DCs形态学特征。ICA组DCs表面CD1a、CD80、CD83和CD86表达水平较对照组均明显上调（P<0.05）,且CD86的表达水平显著高于TNFα组（P<0.05）。ICA组DCs上清中IL12、IFNγ的水平及诱导T细胞增殖的能力较对照组DCs明显增高（P<0.05）,但与TNFα组DCs无显著差异。结论：ICA可刺激脐血单个核细胞来源DCs的分化和成熟,增强DCs的免疫学活性。     

淫羊藿苷促进白血病K562细胞凋亡的研究

目的：探讨淫羊藿苷对人慢性粒细胞白血病K562细胞的作用及其机制。方法将对数生长期K562细胞分成对照组和淫羊藿苷处理组。对照组细胞常规培养,淫羊藿苷处理组加入8μmol／L淫羊藿苷培养。应用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测K562细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,反转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测细胞p85、Akt mRNA的表达,Western blot检测p85、Akt、p-p85、p-Akt、cleavage-caspase-3、caspase-3蛋白表达的变化。结果与对照组比较,淫羊藿苷处理组K562细胞增殖率明显下降（P＜0.05）,K562细胞凋亡率和p85、Akt、cleavage-caspase-3蛋白表达均明显升高（均P＜0.05）, p85 mRNA、Akt mRNA、caspase-3蛋白表达水平差异均无统计学意义（均P＞0.05）。结论淫羊藿苷能抑制K562细胞增殖,促进其凋亡,其作用机制可能是通过激活PI3K-Akt信号转导通路实现的。     

淫羊藿苷对小鼠放射性损伤后造血调控的影响

目的：探讨淫羊藿苷(ICA)对辐照小鼠造血调控的影响。方法：小鼠接受^60Co照射后给予ICA，检测外周血白细胞总数及分类、骨髓和脾脏粒细胞／巨噬细胞克隆形成单位(CFU-GM)计数变化。结果：应用ICA可促进小鼠外周血白细胞总数增加，明显促进骨髓和脾脏CFU-GM集落形成。结论：ICA具有明显的促进造血功能恢复的作用。     

淫羊藿苷与HMBA衍生物单独及联合作用对K562细胞生长的影响及机制研究

目的 探讨淫羊藿苷与HMBA衍生物单独及联合作用对K562细胞生长的影响及机制。方法 采用光镜、电镜观察K562细胞形态的改变,免疫荧光检测细胞凋亡的情况。结果 淫羊藿苷与HMBA衍生物单独作用,均可明显抑制K562细胞的生长,且具有协同作用。淫羊藿苷诱导48h后,细胞开始出现显著的形态学改变并表现出某些凋亡的特征,72h后更为明显。HMBA衍生物亦可改变细胞的形态,但主要表现在形状更加不规则、线粒体肿胀,而没有明显的分化或凋亡迹象。结论 淫羊藿苷与HMBA衍生物单独及联合作用均可抑制K562细胞的生长,但联合应用时作用更强,其作用与浓度相关。淫羊藿苷有部分地诱导细胞凋亡的作用。     

淫羊藿苷对急性早幼粒白血病细胞体内外效应的研究

目的：探讨淫羊藿苷（ICA）对急性早幼粒白血病细胞的诱导分化作用。方法：采用ICA与全反式维甲酸（ATRA）对比试验,观察ICA在体外及小鼠体内对白血病细胞增殖分化的影响。结果：ICA在体内外对白血病细胞均有较明显的诱导分化和抑制增殖作用。且与ATRA合用可产生明显的协同效应。结论：ICA具有明显的抗白血病细胞作用。     

淫羊藿甙对HL-60细胞诱导分化作用的研究

淫羊藿又名仙灵脾，为历代常用的补益中药。为小蘖科多年生草本植物。采用的淫羊藿甙是从朝鲜淫羊藿中提取的单体成份，为寻找新的肿瘤细胞诱导分化剂，研究了淫羊藿甙对人急性早幼粒白血病细胞(HL-60)的诱导分化作用。结果如下：     

淫羊藿苷对小鼠放射性损伤后造血调控的影响

目的探讨淫羊藿苷(ICA)对辐照小鼠造血调控的影响.方法小鼠接受 60 Co照射后给予ICA,检测外周血白细胞总数及分类、骨髓和脾脏粒细胞/巨噬细胞克隆形成单位(CFU-GM)计数变化.结果应用ICA可促进小鼠外周血白细胞总数增加,明显促进骨髓和脾脏CFU-GM集落形成.结论ICA具有明显的促进造血功能恢复的作用.     

淫羊藿苷逆转耐甲氨蝶呤肺癌A549细胞转移表型

目的:研究中药淫羊藿苷(icariin,ICA)作用甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)耐药肺癌A549细胞后对细胞转移表型的影响,初步探讨ICA逆转A549/MTX耐药细胞转移表型的作用机制及对肺癌的治疗价值.方法:采用MTT法检测ICA对A549/MTX耐药细胞的半数抑制浓度(half inhibition concentration,IC_(50)).采用双层软琼脂克隆形成实验检测A549/MTX 组和A549/MTX+ICA组细胞的克隆形成率,并观察其集落形态.细胞划痕实验检测A549/MTX组和A549/MTX+ICA组细胞的迁移能力.Transwell小室实验检测细胞侵袭能力的变化.结果:MTT结果显示,无毒剂量的ICA与MTX联合应用后A549/MTX细胞的IC_(50)值为35.50±1.85 μmol/L,比单独应用MTX(同等剂量)后A549/MTX细胞的IC50值(52.17±2.25 μmol/L)有了一定程度的下降.软琼脂实验发现,A549/MTX+ICA组细胞克隆形成率为0.94±0.09,小于A549/MTX组细胞的1.56±1.07(P<0.05).划痕实验显示,72 h后A549/MTX组细胞的迁移能力大于A549/MTX+ICA组细胞(P<0.05).Transwell实验显示,A549/MTX组细胞的穿膜细胞数明显多于A549/MTX+ICA组细胞(P<0.05),说明A549/MTX+ICA组细胞的侵袭浸润能力小于A549/MTX组细胞.结论:中药ICA具有逆转A549/MTX耐药细胞转移表型的作用.     

The antitumor activity of the fungicide ciclopirox

Ciclopirox olamine (CPX) is a synthetic antifungal agent clinically used to treat mycoses of the skin and nails. Here, we show that CPX inhibited tumor growth in human breast cancer MDA‐MB‐231 xenografts. To unveil the underlying mechanism, we further studied the antitumor activity of CPX in cell culture. The results indicate that CPX inhibited cell proliferation and induced apoptosis in human rhabdomyosarcoma (Rh30), breast carcinoma (MDA‐MB231) and colon adenocarcinoma (HT‐29) cells in a concentration‐dependent manner. By cell cycle analysis, CPX induced accumulation of cells in G₁/G₀ phase of the cell cycle. Concurrently, CPX downregulated cellular protein expression of cyclins (A, B1, D1 and E) and cyclin‐dependent kinases (CDK2 and CDK4) and upregulated expression of the CDK inhibitor p21^Cip1, leading to hypophosphorylation of retinoblastoma protein. CPX also downregulated protein expression of Bcl‐xL and survivin and enhanced cleavages of Bcl‐2. Z‐VAD‐FMK, a pan‐caspase inhibitor, partially prevented CPX‐induced cell death, suggesting that CPX‐induced apoptosis of cancer cells is mediated at least in part through caspase‐dependent mechanism. The results indicate that CPX is a potential antitumor agent.     

阿法替尼对人乳腺癌细胞增殖与凋亡的影响及机制研究

  目的  探讨酪氨酸激酶抑制剂（tyrosine kinase inhibitor,TKI）阿法替尼（afatinib）对乳腺癌细胞增殖、周期及凋亡的影响,并就阿法替尼与吉非替尼（gefitinib）对乳腺癌细胞的作用进行比较。  方法  应用MTT法检测人乳腺癌细胞系MCF-7、T47D、MDAMB-231细胞活性,流式细胞术的PI染色法检测细胞周期变化以及Annexin-V/PI双染法检测细胞凋亡,通过Western blot法检测蛋白表达情况。  结果  阿法替尼对MCF-7、T47D、MDA-MB-231细胞均有明显的抑制作用,IC₅₀分别为0.101、0.141、0.887 μmol/L。阿法替尼对T47D、MDA-MB-231细胞作用24 h后G₀/G₁期细胞比例明显升高,细胞凋亡率增加,晚期的凋亡率分别为88.9%、58.1%,并可促进细胞凋亡通路蛋白PARP、caspase-3发生剪切。阿法替尼、吉非替尼使MDA-MB-231细胞的EGFR磷酸化水平受到明显抑制,相同浓度下,阿法替尼作用较吉非替尼更强、持续时间更长。  结论  阿法替尼可显著抑制乳腺癌细胞增殖、促进其凋亡,且具有明显的量效关系,较吉非替尼具有更有效的作用。      

内皮抑素的作用机制以及在肿瘤治疗中的研究现状

内皮抑素是胶原ⅩⅧ的20kD水解片断，它是血管生成最有效的天然抑制剂之一，特异性抑制内皮细胞的增殖，通过抑制细胞周期素D1而诱导凋亡。在内皮细胞表面，内皮抑素与整合素α5β1结合从而激活Src激酶，此外也下调RhoAGTP酶的活性，抑制Ras和Raf激酶家族介导的信号传导。所有的事件均导致激动蛋白细胞骨架的解体，细胞-基质相互作用的紊乱，内皮细胞迁移活性的下降等，抑制血管生成。本文概述内皮抑素的生物学活性及作用机制。     

亚硒酸盐抗肿瘤的作用及其机制研究进展

硒是人体所需的重要微量元素,与人体健康和疾病密切相关。近年来,硒及其硒化合物对肿瘤细胞具有高效的选择性细胞毒性得到广泛关注。亚硒酸盐作为自然界中最常见及研究最多的无机硒化物,通常被认为通过充当促氧化剂来杀伤肿瘤细胞。亚硒酸盐能与细胞内的硫醇反应介导活性氧簇产生,氧化参与代谢、转录、信号转导等相关蛋白中的巯基,改变其生物活性进而抑制肿瘤细胞增殖,但其发挥抗癌作用的机制远不止这些。研究发现亚硒酸盐可通过抑制相关酶活性及调控代谢基因干扰肿瘤营养代谢,激活内源及外源性凋亡通路,调控抑癌或促癌基因表观遗传修饰,转化为内源性硒纳米颗粒介导细胞毒性,刺激免疫细胞分裂活化并协助识别肿瘤抗原等机制发挥肿瘤抑制作用。进一步加强对亚硒酸盐抗肿瘤作用的研究和认识,既能为临床新药开发提供一定的证据,又能为临床医师提供新的治疗思路,对提高肿瘤治疗效果具有重要意义。这篇综述旨在总结亚硒酸盐在抗肿瘤方面的作用及其机制的研究进展。     

香加皮提取物抗肿瘤活性的研究

背景与目的： 研究中药香加皮提取物的抗肿瘤活性,探讨其抗肿瘤机制。 材料与方法： 采用噻唑蓝(3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5 diphenyltetrazolium bromide, MTT)法观察香加皮醇提物和水提物对MCF-7、TE-13、QG56、SMMC7721、T24、Hela、K562等肿瘤细胞增殖的抑制作用,应用流式细胞术检测肿瘤细胞的周期变化和对凋亡的影响。 结果： 香加皮醇提物和水提物均能明显抑制多种肿瘤细胞的增殖,呈浓度依赖性;醇提物的抑瘤作用(IC50<10 μg/ml)强于水提物(IC50<40 μg/ml),并且差异具有统计学意义(P<0.05)。香加皮醇提物可将MCF-7细胞阻滞于G0/G1期,并呈时间依赖性地诱导MCF-7细胞发生凋亡。10 μg/ml香加皮醇提物作用MCF-7细胞24 h,与对照组相比,G0/G1期细胞显著增多,作用48 h,凋亡率从对照组的0.70％±0.13％升高到13.54％±2.12％,两者之间的差异有统计学意义(P<0.05)。 结论： 香加皮提取物对体外肿瘤细胞的增殖具有显著的抑制作用,醇提物强于水提物,其抗瘤机制可能与阻滞肿瘤细胞周期和诱导凋亡有关。     

木鳖子提取物体外抗肿瘤活性的初步研究

目的：观察木鳖子（cochinchina momordica seed,CMS）水提物（water extract of CMS,CMSWE）和醇提物（ethanol extractof CMS,CMSEE）对肿瘤细胞生长的影响,探讨CMSEE的抗肿瘤机制。方法：制备CMSWE和CMSEE。MTT法检测CMSWE和CMSEE对人黑色素瘤B16、肺癌细胞A549、乳腺癌细胞MDA-MB-231、食管癌细胞TE-13,以及正常人外周血淋巴细胞（PBMC）生长的影响,计算细胞生长抑制率;光镜下观察细胞形态变化;瑞氏-吉姆萨染色观察B16细胞凋亡形态学变化。流式细胞技术（FCM）检测B16细胞凋亡率和细胞周期分布。结果：CMSEE（25—300mg／L）对B16、A549、MDA-MB231和TE-13细胞增殖均有明显的抑制作用（P〈0．01）,对PBMC的增殖没有明显影响。CMSWE（25～300mg／L）对A549、TE-13、MDA-MB231、PBMC的生长没有明显影响,仅对B16细胞的增殖有较弱的抑制作用,且各浓度组抑制率均小于相同浓度的CMSEE（P〈0．01）。经CMSEE处理后,B16细胞显示典型的凋亡形态变化,凋亡率明显增高（P〈0．01）,G0／G1期细胞明显增加,S期、G／M期细胞减少（P〈0．01）。结论：CMSEE体外对人肿瘤细胞增殖有明显的抑制作用,其抗肿瘤机制可能与阻滞肿瘤细胞周期和诱导凋亡有关。     

毛蚶蛋白抗肿瘤活性研究

目的： 分离得到毛蚶蛋白活性组分并研究其体外抗肿瘤机制及对免疫细胞的作用。方法：低温水提及硫酸铵沉淀法获取毛蚶蛋白活性组分;MTT法检测50、100、200和400 μg/mL的毛蚶蛋白活性组分分别作用24、48和72 h后对人结直肠癌细胞HT-29、HCT116,人肝癌细胞HepG-2,人肺癌细胞A549的细胞毒活性;倒置相差显微镜下观察细胞活性及Giemsa染色观察毛蚶蛋白活性组分对肿瘤细胞及核形态变化的影响,流式细胞术检测毛蚶蛋白活性组分对人结直肠癌HT-29细胞周期及凋亡的影响;MTT法检测毛蚶蛋白活性组分对小鼠巨噬细胞RAW264.7生长的影响,中性红法测定其对小鼠巨噬细胞RAW264.7吞噬能力的影响,Griess法检测其对小鼠巨噬细胞RAW264.7分泌NO的影响。结果：毛蚶蛋白活性组分对多种人肿瘤细胞系有抑制作用,且呈作用时间与剂量依赖性;流式细胞术结合Giemsa染色发现,其主要引起HT-29细胞G2~M期阻滞,多核细胞增加,并具一定的诱导细胞凋亡作用;在50～100 μg/mL下能刺激小鼠巨噬细胞RAW264.7生长,增强其吞噬能力及NO分泌活性。结论：毛蚶蛋白活性组分具有一定抗肿瘤活性,主要机制为引起肿瘤细胞G2~M期阻滞及诱导其凋亡,且具一定免疫激活作用。     

Exploring the anticancer activities of novel bioactive compounds derived from endophytic fungi: mechanisms of action,current challenges and future perspectives

Cancer is the second leading cause of death all around the world. The natural compounds derived from the endophytic flora of fungi are possible solutions to cancer treatment because they are safe for health, cost-effective, biocompatible and have fewer toxicity issues. The active ingredients in endophytic fungi that are responsible for anti-cancer activities are alkaloids, terpenoids, glycosides, saponin, peptides, steroids, phenols, quinones, and flavonoids. This review highlights the anti-cancer activities of entophytic fungus against human papillary thyroid carcinoma (IHH4), human pancreatic (PANC-1), ovarian (OVCAR-3), hepatic (HepG2), lung (A-549), human lymphoma (U937), human skin carcinoma (A431), breast (MCF-7), and Kaposi’s sarcoma. The emerging evidence suggested that bioactive compounds isolated from endophytic fungi showed their anti-cancer activities by revealing the disturbance of the microtubule network caused by increased levels of Bax and Bcl-2 proteins that triggers cell cycle arrest at the G2-M phase, by inhibiting the DNA replication via binding with topoisomerase II, by regulating the activity of extracellular signal-regulated kinase and NF-kB, by evaluating the levels of p21, p27, and cyclins B/D1/E that led to cell death by apoptosis and cell cycle arrest. This review will assist readers in better comprehending bioactive chemicals and the beneficial interaction between the fungal endophytes and medicinal plants.     

Apoptosis and cell growth inhibition as antitumor effector functions of interferons

Since their introduction to the clinic some 30 yr ago, interferons (IFNs) have become standard therapy for a range of disorders, including malignant and benign tumors as well as various viral diseases. Although IFNs will induce remissions in some patients with cancer, they are of no benefit or, at best, lead only to minor improvements in the great majority of patients with malignant disease. One of the great challenges of IFN research is to understand the multiple ways by which IFNs influence the behavior of tumor cells and to identify the factors that underlie the resistance of some tumors to IFNs. This reviews is written with a focus on two anticellular effects of IFN, inhibition of proliferation and induction of apoptosis, possible mechanisms underlying the antitumor action of IFN. In addition, possible reasons for IFN tumor cell resistance are also discussed.     

氧化苦参碱对小鼠肉瘤和肝癌的体内外抗肿瘤作用

目的： 研究氧化苦参碱对小鼠肉瘤和肝癌的体内、外抗肿瘤作用,为氧化苦参碱在抗肿瘤方面的应用提供实验依据。方法： 取对数生长期S₁₈₀和H₂₂细胞悬液预培养24 h,分别设立小鼠S₁₈₀和H₂₂细胞的空白对照组（RPMI-1640培养基）、阴性对照组（不加药的S₁₈₀和H₂₂细胞悬液）、5-氟尿嘧啶（5-FU,5×10^-5 g/L）阳性对照组及5个不同浓度（1×10^-4、1×10^-5、1×10^-6、1×10^-7、1×10^-8 g/L）的氧化苦参碱培养组,连续培养48 h后,采用四甲基噻唑蓝（MTT）法检测氧化苦参碱对S₁₈₀和H₂₂细胞的增殖抑制率。分别将S₁₈₀和H₂₂瘤细胞悬液接种于昆明种小鼠,建立S₁₈₀和H₂₂荷瘤小鼠模型,分别设立正常对照组、模型组、阳性对照组、氧化苦参碱高、中、低剂量组,每组10只。正常对照组和模型组灌胃给予等体积蒸馏水,高、中、低剂量小鼠分别灌胃浓度为100、50、25 mg/kg的氧化苦参碱,阳性对照组灌胃给予30 mg/kg的环磷酰胺。各组连续给药8 d后,检测氧化苦参碱对S₁₈₀和H₂₂荷瘤小鼠的抑瘤率、胸腺系数和脾系数以及对S₁₈₀和H₂₂腹水瘤小鼠生存期的影响。结果： 体外研究结果表明,与阴性对照组比较,氧化苦参碱对小鼠S₁₈₀和H₂₂细胞的增殖均有抑制作用（P<0.05）。动物实验表明,与模型组比较,氧化苦参碱100、50和25 mg/kg剂量组均能够显著抑制小鼠S₁₈₀肉瘤的生长,抑瘤率分别为48.48%、41.67%和32.58%,差异具有统计学意义（P<0.05）;氧化苦参碱100和50 mg/kg剂量组均能够显著抑制小鼠肝癌H₂₂的生长,抑瘤率分别为33.95%和31.63%,差异具有统计学意义（P<0.05）;氧化苦参碱50 mg/kg剂量组可显著延长S₁₈₀腹水型小鼠的生存期,其生命延长率为31.18%,差异具有统计学意义（P<0.05）。与正常对照组比较,氧化苦参碱各剂量组对S₁₈₀荷瘤小鼠和H₂₂荷瘤小鼠的胸腺系数和脾系数无明显影响（P>0.05）。结论： 氧化苦参碱对小鼠肉瘤和肝癌体外和体内均具有一定的抗肿瘤作用。