ω-芋螺毒素结构与功能研究进展

芋螺毒素是从海洋软体动物芋螺中分离纯化的一类具特异生物活性的小肽神经毒素.一般含10～30个氨基酸,大多富含二硫键,可分为α,ω,μ,δ等家族.现对ω-芋螺毒素的结构,构效关系及功能作一综述.     

芋螺睡眠肽结构和功能研究进展

芋螺睡眠肽是一类与众不同的芋螺毒素,一级结构有高度同源性,它含有丰富的γ-羧基谷氨酸,和其他类芋螺毒素不同的是一般不含二硫键(除了芋螺睡眠肽-R),在结合金属离子后,构像中α-螺旋结构的成分会有不同程度地增加。芋螺睡眠肽是一类非竞争性的N-甲基-D-天门冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受体的选择性抑制剂,并且具有受体亚型特异性,颅内注射芋螺睡眠肽后,实验鼠会呈现一种睡眠样症状。序列及结构分析显示,正是芋螺睡眠肽序列中高度保守的氨基酸残基决定了它们的结构及功能,文中对其结构和功能的关系作了综合分析。     

芋螺毒素conantokin的药理作用及构效关系研究进展

目的 综述芋螺毒素conantokin的构效关系、药理作用与作用机制及临床应用研究现状.方法 对近年的国内外文献进行分析、整理和归纳.结果与结论 Conantokin作用于N-甲基-D-天冬氨酸受体,对癫痫、慢性疼痛、脑缺血损伤、精神药物成瘾及帕金森病等具有潜在的临床应用价值.Conantokin不同结构类似物的活性存在较大差别.目前已有芋螺毒素类药物进入临床,显示出较好的开发和应用前景.     

烟碱型乙酰胆碱受体及其相关疾病

烟碱型乙酰胆碱受体（nicotinic acetylcholine receptors,nAChRs）属于配体门控离子通道,广泛分布于中枢神经系统、周围神经系统和肌肉组织非神经系统中,不同的亚基组成形式决定了其对激动剂或拮抗剂不同的亲和力。近期的研究表明,nAChRs 与神经痛、帕金森病、阿尔茨海默病（老年痴呆症）以及小细胞肺癌、乳腺癌、宫颈癌等多种疾病的病理进程息息相关。该文就几种疾病与nAChRs 结构、功能及其二者相关性进行综述,并重点阐述 nAChRs 介导的 α- 芋螺毒素抗肿瘤研究进展,以期为芋螺毒素的抗肿瘤药物的研发提供理论依据。     

α-芋螺毒素TxID异构体对人类乙酰胆碱受体的活性研究

研究α-芋螺毒素Tx ID 3个二硫键异构体对人类α3β4与α6/α3β4乙酰胆碱受体的阻断活性。采用Fmoc固相合成法,分别合成α-芋螺毒素Tx ID的3个二硫键异构体的线性肽,利用2步氧化法进行氧化折叠,获得具有定点连接二硫键的异构体多肽。利用非洲爪蟾卵母细胞表达人类α3β4与α6/α3β4乙酰胆碱受体亚型,测定3个异构体对该乙酰胆碱受体的电流与洗脱速率的影响情况。α-芋螺毒素Tx ID的3个二硫键异构体对人类α3β4与α6/α3β4乙酰胆碱受体亚型的阻断活性差异很大,阻断是可逆的,洗脱速率较快。其中具有天然构象的球状异构体活性最强,其半数阻断剂量(IC50)仅约为9.3 nmol/L;其次是带状异构体具有很微弱的抑制活性,其IC50大于5μmol/L;而珠子状异构体几乎没有阻断活性,其IC50大于10μmol/L。成功合成了α-芋螺毒素Tx ID的3个二硫键异构体,并获知了3个二硫键异构体分别对人类α3β4与α6/α3β4乙酰胆碱受体亚型的阻断活性,为α-芋螺毒素Tx ID后续海洋新药研发提供理论基础。     

芋螺毒素MⅦA与GST的融合表达及其镇痛活性的测定

目的构建芋螺毒素MⅦA基因的融合表达质粒pGEX～2T／CTX MⅦA在大肠杆菌中表达，并对融合蛋白的镇痛活性进行测定。方法根据芋螺毒素MⅦA的氨基酸序列，按大肠杆菌偏爱密码子化学合成CTX MⅦA基因。把合成的CTX MⅦA基因克隆到谷胱甘肽S-转移酶（GST）融合蛋白表达载体pGEX-2T中，构建质粒pGEX-2T／CTX MⅦA。将此质粒转化大肠杆菌BL21，经IPTG诱导后获得融合蛋白GST-CTX MⅦA，用谷胱甘肽偶联的Sepharose4B柱对融合蛋白进行纯化。热板法测定其对小鼠的镇痛活性。结果获得的融合蛋白GST-CTX MⅦA使小鼠疼痛阈值有显著提高。结论基因工程产生的GST-CTX MⅦA融合蛋白具有明显的镇痛活性，且镇痛活性具有浓度依赖性，可以为进一步的科研及临床应用开辟新的途径。     

H-89和wortmannin对霍乱毒素促进受损视网膜节细胞再生作用的影响

【目的】研究蛋白激酶A(PKA)抑制剂H-89和磷酸肌醇3-激酶(PI3-K)特异抑制剂wortmannin对霍乱毒素(CTx)促进受损视网膜节细胞(RGCs)再生的影响,探讨CTx促进受损视网膜节细胞(RGCs)再生的作用机制。【方法】成年金黄地鼠近侧切断视神经(ON),移植一段自体坐骨神经(SN)与ON近侧残端缝接,玻璃体内注射给药。20只动物分4组,每组5只。注射CTx为CTx组,注射CTx和H-89为CTx+H组、注射CTx和wortmannin为CTx+W组、不给药组为对照组。用粒蓝(GB)逆行标记再生的RGCs,取视网膜于荧光镜下记数。【结果】动物存活4周后,对照组、CTx组和CTx+H组再生节细胞平均数(个/视网膜)分别为:(1431±352),(2567±883)和(1606±293)个/视网膜(n=5)。CTx+H组与对照组比较差异无显著性(P<0.05),而与CTx组比较有显著性差异(P<0.05),表明H-89可抑制CTx的促再生作用;CTx+W组再生节细胞数为:(1872±262)个/视网膜(n =5),与对照组和CTx组比较差异均有显著性(P <0.05),提示wortmannin对CTx有部分的抑制作用。【结论】CTx可能是通过PKA-CREB通路实现对受损RGCs的促再生作用,PI3-K-Akt通路可能是PKA-CREB通路的下游分支。     

H-89和Wortmannin对霍乱毒素促进受损视网膜节细胞存活作用的影响

[目的]探讨霍乱毒素(CTx)促进受损视网膜节细胞(RGCs)存活的作用机制。[方法]采用荧光逆行示踪标记术,研究蛋白激酶A(PKA)抑制剂H-89和PI3-K特异抑制剂wortmannin玻璃体内注射对CTx促进成年地鼠受损RGCs存活的影响。[结果]动物存活2周后,对照组存活节细胞数为:(220±45)/mm2,CTx组存活节细胞数为:(413±90)/mm2,CTx+H组存活节细胞数为:(256±61)/mm2,CTx+W组存活节细胞数为:(296±39)/mm2;H-89和wortmannin均可部分抑制CTx对受损RGCs的促存活作用。[结论]CTx可能是通过PKA-CREB和PI3-K-Akt通路实现对受损RGCs的促存活作用。     

大肠杆菌异源表达富含二硫键毒素多肽研究进展

<正>富含二硫键毒素多肽广布于蝎、胡蜂、蜘蛛、海葵、蜈蚣、芋螺与蛇等有毒动物毒液中,具有抗菌、抗肿瘤、镇痛、抗血栓、抑制或激活离子通道等多种生物学活性[1-3]。基于二级结构差异,这类多肽可分为四类:(1)α螺旋/β折叠,如BmKTX[4];(2)α螺旋,如[κ-hefutoxin[5];(3)β折叠,如TRTX-Hhn2b6];(4)     

新镇痛药物N-型钙通道阻滞剂——来考诺肽（leconotide）

来考诺肽是w-芋螺毒素的一种，系可选择性地阻滞N型钙通道的新型非阿片类镇痛药物。与齐考诺肽（ziconotide）相比，由于较少的副作用和可静脉注射，可能会使其得到更好的应用。     

急性香螺中毒16例分析

目的 探讨急性香螺中毒临床特点及治疗。方法 对16例急性香螺中毒进行回顾性分析。结果 16例中轻度中毒12例占75％，中度中毒3例占18．7％，重度中毒致心跳呼吸停止1例占6．25％。结论 揭示应加强宣传教育，禁止食用，主要为神经毒素，及时诊断治疗是抢救成功的关键。     

霍乱毒素对视神经扎断后视网膜节细胞轴突再生的作用

[目的]探讨霍乱毒素(CTx)对成年金黄地鼠视神经扎断(microcrush,MC)后视网膜节细胞(RGCs)轴突再生的促进作用。[方法]扎断成年金黄地鼠视神经近端,玻璃体内注射CTx,或插入小段坐骨神经分支(SN)。动物随机分为实验组和对照组:对照组分为单纯扎断视神经组(MC)和MC+溶剂组;实验组包括MC+CTx组、MC+CTx+SN组、量效关系组。量效关系组动物存活4周,其余各组动物存活3～5周。用荧光金逆行标记再生的RGCs,在荧光镜下观察视网膜平铺片再生 RGCs的数量变化。[结果]CTx不同剂量组125、250、500和1000 ng视网膜再生RGCs平均数分别为(130±46)、(189±91)、(358±84)、(94±34)个/视网膜,比MC组或MC+溶剂组显著增加,具有统计学意义(P<0.01),以500 ng/眼的剂量最佳。在3、4和5 W时MC+CTx组的视网膜再生RGCs平均数分别为(503±123)、(345±98)、(57±25)个/视网膜;MC+CTx+SN组为(771±199)、(432±105)、(160±76)个/视网膜,均比MC组或MC+溶剂组明显增加(P<0.01)。[结论]提示霍乱毒素或联合玻璃体内植入坐骨神经具有显著促进视神经扎断后视网膜节细胞轴突再生的作用。     

霍乱毒素对垂体腺瘤的诱导分化潜能及机制的研究进展

霍乱毒素(Cholera toxin,CTx)是一种经典的神经毒素,低剂量的CT不仅能够提高机体的免疫力而且对神经的再生、肿瘤表型的逆转等方面都有着积极的作用。垂体腺瘤是一种常见的颅内良性肿瘤,其发病机制复杂,尽管临床运用手术和药物进行多方面综合治疗,其仍具有较高的复发率,诱导分化治疗作为一种新型的治疗手段今年来国内外研究较多。本文就霍乱毒素对垂体瘤的诱导分化研究的国内外进展作一综述。     

植物灭螺剂及其灭螺机理的研究进展

植物灭螺剂(plant molluscicide)是具有杀螺作用的植物的根、茎、叶等提取物或水浸液.灭螺剂可用来杀灭血吸虫的中间宿主螺类,从而控制血吸虫病的传播.目前所使用的几种化学灭螺剂都不同程度地具有高毒性、高使用费用和对环境的高危害性等缺点,人们一直在寻找安全、高效、稳定、价廉、原料广泛并且对其他生物无毒的植物灭螺剂,以用于血吸虫病的防治工作.     

海洋生命活性物质和海洋药物的研究与开发

海洋是生物资源的巨大宝库,地球上约80%的物种栖息在海洋中.由于特殊的生存环境,海洋生物可合成与陆地生物结构不同的、活性不一的代谢产物,为新药的研究与开发提供了大量的先导化合物.在过去的几十年间,全球范围内已从海洋动、植物及微生物中分离得到15 000多个化合物,其中头孢霉素、芋螺毒素、阿糖胞苷和阿糖腺苷等4个药物均是以海洋来源先导化合物为基础开发成功的.     

霍乱毒素对金黄地鼠视网膜神经肽Y免疫 反应节细胞再生的影响

【目的】研究NPY免疫反应(IR)视网膜节细胞(RGCs)能否再生及玻璃体内注射霍乱毒素(CTx)或/和玻璃体植入外周神经对其再生的影响。【方法】16只成年金黄地鼠随机分4组,每组4只动物。切断视神经(ON)并缝接坐骨神经(attachedgraft,AG)为再生对照组即AG组;ON切断并缝接坐骨神经后再于玻璃体内注射CTx或/和植入小段坐骨神经(SN)为实验组。荧光金逆行标记再生的RGCs结合NPY免疫荧光组化双标法,观察视网膜平铺片并记数。【结果】术后4周,AG组每个视网膜NPY-IR阳性再生RGCs平均数为58±22个,占再生RGCs总数的3.36%;AG+CTx、AG+SN和AG+CTx+SN各实验组该类再生节细胞平均数依次为(143±47)、(125±37)和(437±37)个,它们分别占再生RGCs总数的(5.15±0.89)%,(5.34±0.37)%和(8.11±0.85)%,与对照组的差异具统计学意义。【结论】成年哺乳动物NPY-IR阳性RGCs能再生,玻璃体内注射CTx或/和植入SN,可能促进该类RGCs再生。     

一种细菌毒素的提取方法研究

用真菌生长直径方法研究357细菌毒素的提取方法.得到如下结论:用超声波处理357细菌以使细胞破裂,不能提高毒素得率.为提高毒素产量,宜对细菌作固体培养.加活菌于固体培养物,可提高毒素产量.固体培养基晒干除水分可减小萃取毒素时的有机溶剂用量,并可减小工作量.357毒素具有相当的稳定性.     

螺内酯对老年冠心病心力衰竭患者某些体液因子的影响

目的:探讨螺内酯对老年冠心病心力衰竭患者血浆儿茶酚胺、PRA、血管紧张素Ⅱ及醛固酮的影响.方法:入选32例老年冠心病心力衰竭患者,随机分入螺内酯组与对照组,各16例,用螺内酯治疗前与治疗一个月时,用高效液相色谱方法测定血浆去甲肾上腺素、肾上腺素,同时采用均相竞争放射免疫方法检测血浆PRA、血管紧张素-Ⅱ与醛固酮.结果:治疗1月螺内酯组血浆去甲肾上腺素、肾上腺素明显低于治疗前,也低于对照组.结论:螺内酯可明显抑制老年冠心病心力衰竭患者的儿茶酚胺水平.     

短裸甲藻毒素的研究进展

短裸甲藻毒素是一种具有独特结构及药理活性的海生毒素,与赤潮有关。该毒素为脂溶性神经毒素,在动物体内浓度低至nM或pM范围便呈现活性,在体外对离体神经肌肉标本及巨轴突通过增强内向Na~+流而导致去极化,此作用可被钠通道阻滞剂TTX所拮抗。已证实,此种毒素在理化性质药理活性上与西加毒素相似,二者均与VSSC部位5相结合。本文综述了近年来对短裸甲藻毒素的化学、毒性及药理方面的研究进展,并阐述了开发研究此种毒素在分子药理学及应用科学上的意义。     

霍乱毒素及视神经植块对视网膜节细胞存活的影响

目的　探讨霍乱毒素及视神经植块对视神经切断后视网膜节细胞存活的影响。方法　研究采用荧光逆行示踪标记法和定量解剖学技术。结果　 ( 1 )切断视神经 5、7及 1 4天后 ,视网膜节细胞平均密度分别为 1 1 93.8± 94.2 mm2 、846.9± 5 5 .6 mm2 及 2 1 7.5± 40 .3 mm2 。 ( 2 )给予霍乱毒素组在 5d、7d及 1 4d ,视网膜节细胞的密度分别为 1 386.3± 88.0 mm2 ,1 1 96.9± 75 .2 mm2 及 396.3± 72 .4 mm2 ,与切断视经组相比在各时间段差异均有显著性 (P <0 .0 5 )。 ( 3)玻璃体植入视神经组在 5天、7天及 1 4天视网膜节细胞的密度分别为 1 367.4± 90 .8 mm2 ,1 1 40 .6± 83.5 mm2 及 2 38.8± 37.3 mm2 ,与对照组相比 ,在 5天及 7天组差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,而 1 4天组差异无显著性 (P >0 .0 5 )。 ( 4 )联合给予霍乱毒素及视神经植块 ,在 5、7、1 4天视网膜节细胞的平均密度分别为 1 660 .6± 93.1 mm2 ,1 385 .6± 94.1 mm2及 5 5 6.4± 93.1 mm2 ,与神经切断组及单纯给予霍乱毒素或视神经组相比 ,差异均有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　 ( 1 )CTx和视神经植块都分别能促进受损视网膜细胞存活。 ( 2 )联合应用CTx和视神经植块 ,可显著提高受损视网膜节细胞存活