子宫颈鳞状细胞癌中DLC-1和Cyclin D1的表达及其相关性分析

目的 观察肝癌缺失基因-1(deleted in liver cancer-1,DLC-1)和Cyclin D1在正常子宫颈组织、子宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)及子宫颈鳞状细胞癌(cervical squamous cell carcinoma,CSCC)中的表达,并探讨二者与CSCC临床病理参数间的关系.方法 应用免疫组化SP法及逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)检测DLC-1和Cyclin D1在正常子宫颈组织、CIN及CSCC中的表达,采用统计学软件SPSS 19.0对数据进行分析.结果 (1)DLC-1在正常子宫颈组织、CIN及CSCC中的阳性率依次降低,其表达与CSCC的肿瘤分级、FIGO分期及淋巴结转移有关,结合RT-PCR结果,差异具有统计学意义(P＜0.05);(2) Cyclin D1在正常子宫颈组织、CIN和CSCC中的阳性率依次升高,其表达与CSCC的肿瘤分级、FIGO分期及淋巴结转移有关,结合RT-PCR结果,差异具有统计学意义(P ＜0.05);(3) DLC-1和Cyclin D1在CSCC中的表达呈负相关(r=-0.526,P＜0.001).结论 DLC-1低表达和Cyclin D1高表达与CSCC的发生、发展和侵袭、转移相关,二者联合检测可作为CSCC诊断、治疗的重要判断指标.     

NQO1生物活性药物β-Lapachone抑制皮肤鳞状细胞癌A431增殖、诱导周期阻滞及ROS生成

目的 探讨NQO1蛋白在皮肤鳞状细胞癌（cutaneous squamous cell carcinoma, CSCC）组织中的表达及β-Lapachone在CSCC中的抗肿瘤作用。方法 采用免疫组化法检测76例CSCC组织和13例正常皮肤组织中NQO1的表达;分析NQO1表达与CSCC临床病理特征的关系;体外常规培养A431细胞,通过克隆形成、流式细胞术及免疫荧光染色法检测β-Lapachone对细胞增殖、周期进程以及活性氧（reactive oxygen species, ROS）生成的作用,并通过Western blot检测相关分子和信号通路。结果 免疫组化：NQO1蛋白在CSCC中的阳性率（85.5%,65/76）高于正常皮肤组织（46.2%,6/13,P<0.05）。χ²检验：NQO1蛋白表达与肿瘤大小有关（P<0.05）,与患者年龄、性别、分化和临床分期均无相关性。MTT和克隆形成实验：β-Lapachone可抑制A431细胞的增殖能力。流式细胞术检测：β-Lapachone诱导A431细胞发生周期阻滞。β-Lapachone可促进细胞生成...     

子宫颈鳞状细胞癌中DIAPH3表达对细胞迁移和侵袭的作用及分子机制

目的 探讨Diaphanous相关成蛋白3(diaphanous-related formin 3, DIAPH3)对子宫颈鳞状细胞癌(cervical squamous cell carcinoma, CSCC)细胞迁移和侵袭的作用及其分子机制。方法 收集30例CSCC石蜡包埋组织及配对癌旁组织,应用生物信息学与免疫组化分析CSCC组织中DIAPH3的表达,并进行临床病理相关性分析。采用分子生物学与肿瘤迁移相关实验分析DIAPH3对CSCC细胞迁移和侵袭的作用及机制。结果 仙桃学术数据库分析显示：DIAPH3 mRNA在CSCC组织(2.37)中表达比癌旁组织(0.25)明显升高(P<0.05);DIAPH3高表达患者的无复发生存率明显降低(P=0.031)。免疫表型：CSCC组织中DIAPH3的阳性率为70.00%(21/30),高于癌旁组织(30%,9/30);DIAPH3的阳性率在不同肿瘤分化程度(P=0.032)和有无淋巴结转移(P=0.018)组间差异有统计学意义。siRNA干扰DIAPH3组：CSCC细胞的迁移率(28.33%,P=0.002)、穿过小室的细胞数(2...     

子宫颈鳞状细胞癌中Wnt-1和β-catenin的表达及其与转移的关系

目的：探讨Wnt-1、β-catenin蛋白在子宫颈鳞状细胞癌( cervical squamous cell carcinoma, CSCC)中的表达及其与侵袭转移的关系。方法采用免疫组化EliVision法检测78例CSCC组织和30例正常子宫颈组织中Wnt-1、β-catenin蛋白表达。结果在正常子宫颈组织中,Wnt-1、β-catenin蛋白的阳性率分别为20.0%和10.0%;CSCC组织中,Wnt-1、β-catenin蛋白的阳性率分别为56.4%和74.4%,二组差异有统计学意义(P<0.001)。33例CSCC淋巴结转移中Wnt-1、β-catenin蛋白的阳性率分别为72.7%和90.9%;45例CSCC无淋巴结转移中Wnt-1、β-catenin蛋白的阳性率分别为44.4%和62.2%。 Wnt-1、β-catenin蛋白表达与CSCC的分化程度( P <0.05)、浸润深度及 FIGO 分期均有关( P <0.05),与患者年龄、肿瘤大小等均无关。Spearman相关性分析显示：Wnt-1与β-catenin蛋白表达呈正相关关系(rs =0.490,P<0.001)。结论 Wnt-1、β-catenin蛋白的表达异常可能参与CSCC的发生、发展及转移,Wnt-1、β-catenin蛋白均可作为预测CSCC侵袭、转移的潜能及临床预后的指标。     

子宫颈鳞状细胞癌中Lgr5的表达及其临床意义

目的探讨富含酪氨酸重复序列G蛋白偶联受体(leucine-rich repeat-containing G protein-coupled receptor 5,Lgr5)在子宫颈鳞状细胞癌(cervical squamous cell carcinoma,CSCC)中的表达及意义。方法采用免疫组化EnVision两步法检测83例CSCC组织、56例癌旁正常组织及32例子宫颈上皮内病变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)组织中Lgr5蛋白表达,并应用RT-PCR检测13例CSCC及癌旁组织中Lgr5 mRNA的表达,分析Lgr5表达与CSCC临床病理特征的关系。结果 Lgr5在CSCC中的表达明显高于癌旁正常组织(P0.01)及CIN(P0.05)。Lgr5表达与肿瘤分化程度(P0.01)和浸润深度(P0.05)有关,与患者年龄、肿瘤大小、临床分期及淋巴结转移无关(P0.05)。Kaplan-Meier生存分析显示,Lgr5高表达者5年生存率显著低于Lgr5低表达者(P0.01)。多因素Cox比例风险回归模型分析显示,Lgr5的表达(P=0.027)可以作为判断CSCC患者预后的独立危险因素。结论 Lgr5的表达与肿瘤分化程度和浸润深度密切相关,可能参与CSCC的发生、发展,可作为CSCC患者预后判断的辅助指标。     

整合素α5β1蛋白及mRNA在子宫颈鳞状细胞癌中的表达及意义

目的 探讨子宫颈鳞状细胞癌(cervix squamous cell carcinoma,CSCC)中整合素α5β1蛋白和mRNA的表达,并分析其与临床病理特征的关系.方法 采用免疫组化SP法、RT-PCR技术检测60例CSCC及40例子宫颈正常组织中整合素α5β1蛋白及mRNA的表达.结果 CSCC中整合素α5β1蛋白及mRNA表达均高于子宫颈正常组织,差异有统计学意义(P＜0.05);整合素α5β1蛋白及mRNA的表达均与CSCC分化程度、pTNM分期、淋巴结转移、浸润深度有相关性(P＜0.05),与患者年龄无相关性(P＞0.05).结论 CSCC中整合素α5β1蛋白及mRNA的表达与其生长、侵袭与转移密切相关.采用免疫组化SP法与RT-PCR技术联合检测CSCC中整合素α5β1蛋白及mRNA,有望成为评估CSCC恶性程度、侵袭、转移和临床预后的指标.     

子宫颈鳞状细胞癌中PD-L2的表达及临床意义

目的 探讨子宫颈鳞状细胞癌(cervical squamous cell carcinoma, CSCC)组织中程序性死亡配体-2(programmed death-ligand 2, PD-L2)的表达及临床意义。方法 采用免疫组化EnVision法检测CSCC及子宫颈腺癌(cervical adenocarcinoma, CAC)组织中PD-L2的表达；分析PD-L2表达与CSCC临床病理特征、无瘤生存期(disease free survival, DFS)和总生存期(overall survival, OS)的关系。结果 肿瘤细胞PD-L2的总阳性率为16.8%(24/143),肿瘤浸润性免疫细胞(tumor-infiltrating immune cell, TIIC)PD-L2的总阳性率为66.4%(95/143)。肿瘤细胞PD-L2在CSCC中的阳性率为16.3%(21/129),TIIC PD-L2在CSCC中的阳性率为65.1%(84/129);肿瘤细胞PD-L2在CAC中的阳性率为21.4%(3/14),TIIC PD-L2在CAC中的阳性率为78.6%(11/14...     

Lgr5在子宫颈鳞状细胞癌中的表达及其与预后的相关性

目的探讨富含酪氨酸重复序列G蛋白偶联受体5(leucine-rich repeat-containing G protein-coupled receptor 5,Lgr5)在子宫颈鳞状细胞癌(cervical squamous cell carcinoma,CSCC)中的表达及其与预后的相关性。方法采用免疫组化SP法检测25例正常子宫颈上皮、42例子宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)及79例CSCC组织中Lgr5蛋白的表达,分析Lgr5表达与CSCC临床病理特征的关系及其与预后的相关性。结果 Lgr5在CSCC中的表达明显高于正常子宫颈上皮(P0.01)和CIN(P0.05)。Lgr5表达与CSCC肿瘤分化程度(P0.05)和FIGO分期(P0.05)有关,而与患者年龄、肿瘤大小、有无宫旁浸润及淋巴结转移无关(P0.05)。Kaplan-Meier生存分析显示,CSCC中Lgr5高表达者5年生存率显著低于Lgr5低表达者(P0.05)。结论 Lgr5在CSCC中高表达,且与肿瘤分化程度和临床分期密切相关,提示Lgr5可能参与CSCC的发生、发展,可作为判断CSCC生物学行为的辅助指标。     

子宫颈鳞状细胞癌中PHLPP表达与肿瘤转移的关系

目的探讨PHLPP表达与子宫颈鳞状细胞癌(cervix squamous cell carcinoma,CSCC)临床病理特征的关系及与肿瘤转移的生物学意义。方法应用免疫组化SP法检测78例CSCC组织(其中淋巴结转移38例、无淋巴结转移40例),低、高级别上皮内病变各40例,20例正常子宫颈组织中PHLPP和p-AKT表达,分析PHLPP表达与不同子宫颈病变组织、淋巴结转移的相关性。结果 PHLPP在正常子宫颈、低、高级别上皮内病变、CSCC中的阳性率逐渐减少,各组间差异有统计学意义(P0.05);但低级别上皮内病变与高级别上皮内病变组间差异无统计学意义(P0.05);组织学分级各组间差异无统计学意义(P0.05)。淋巴结转移组与无淋巴结转移组相比,差异有统计学意义(P0.05)。pAKT在正常子宫颈、低、高级别上皮内病变、CSCC中的阳性率逐渐增加,各组间差异均有统计学意义(P0.05);但低、高级别上皮内病变与CSCC组间差异无统计学意义(P0.05)。组织学分级各组间差异均有统计学意义(P0.05)。淋巴结转移组与无淋巴结转移组间差异有统计学意义(P0.05)。PHLPP表达与p-AKT表达呈负相关(r=-0.964,P0.05)。结论 PHLPP在CSCC中低表达可能与肿瘤的发生、发展及转移密切相关,可作为判断子宫颈癌患者预后的参考指标。     

HPV DNA、E6/E7 mRNA在各子宫颈病变及子宫颈鳞状细胞癌中的表达

目的 探讨HPV DNA和E6/E7 mRNA在各子宫颈病变及子宫颈鳞状细胞癌(cervical squamous cell carcinoma,CSCC)中的表达,并分析其与CSCC发生、发展的相关性。方法 应用PCR-反向杂交法和支链DNA技术对210例低级别鳞状上皮内病变(low-grade squamous intraepithelial lesion,LSIL)、200例高级别鳞状上皮内病变(high-grade squamous intraepithelial lesion,HSIL)及240例CSCC进行HPV DNA及E6/E7 mRNA的检测。结果 HSIL、CSCC中,HPV DNA百分率分别为100.00%、89.58%,呈递减趋势(P0.001);E6/E7 mRNA百分率分别为52.50%、95.83%,呈递增趋势(P0.001);HPV DNA+/mRNA+的百分率分别为52.50%、87.50%,呈递增趋势(P0.001);HPV DNA-/mRNA-的百分率分别为0、6.25%,呈递增趋势(P0.001)。LSIL、HSIL中,HPV DNA百分率均大于E6/E7 mRNA百分率,差异有统计学意义(P0.001);而CSCC中HPV DNA百分率均小于E6/E7 mRNA百分率,差异有统计学意义(P=0.008)。结论 HPV DNA在LSIL、HSIL中的表达较E6/E7 mRNA高;CSCC中HPV DNA表达较E6/E7 mRNA低,因此HPV DNA标志物可能与CSCC的发生过程关系较为紧密;E6/E7 mRNA标志物可能与CSCC的发展相关性更高。     

LncRNA DSCAM-AS1通过靶向miR-627-3p调控皮肤鳞状细胞癌增殖、侵袭和迁移

目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)唐氏综合征细胞粘附分子反义1(DSCAM-AS1)靶向miR-627-3p对人皮肤鳞状细胞癌增殖和侵袭能力的影响和分子机制.方法 采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测DSCAM-AS1和miR-627-3p在人永生化表皮细胞HaCaT和3种皮肤鳞状细胞癌细胞(SCC13...     

miR-409-3p靶向CXCL9调控滋养层细胞的增殖、迁移和侵袭

目的探讨微小RNA-409-3p(miR-409-3p)对滋养层细胞增殖、迁移和侵袭影响及作用机制。方法实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测正常妊娠胎盘组织和子痫前期胎盘组织中miR-409-3p和干扰素伽玛诱导的单核细胞因子(CXCL9)mRNA表达水平,蛋白印迹(Western blot)法检测CXCL9蛋白表达水平。转染miR-409-3p模拟物或CXCL9小干扰RNA至滋养层细胞HTR8/SVneo,构建miR-409-3p过表达或CXCL9表达抑制的HTR8/SVneo细胞,四甲基噻唑蓝染色法(MTT)检测细胞增殖,Transwell检测细胞迁移和侵袭,Western blot检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、p21、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9蛋白表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证miR-409-3p与CXCL9调控关系。结果与正常妊娠胎盘组织比较,子痫前期胎盘组织中miR-409-3p水平升高(P<0.05),CXCL9 mRNA和蛋白水平降低(P<0.05)。miR-409-3p过表达或干扰CXCL9表达后,HTR8/SVneo细胞培养48 h和72 h后OD值、迁移和侵袭数、CyclinD1、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平降低(P<0.05),p21蛋白表达水平升高(P<0.05)。miR-409-3p在HTR8/SVneo细胞中靶向负调控CXCL9表达。CXCL9过表达逆转了miR-409-3p过表达对HTR8/SVneo细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结论 miR-409-3p抑制HTR8/SVneo细胞的增殖、迁移和侵袭与下调CXCL9表达有关。     

LncRNA OGFRP1 promotes angiogenesis and epithelial-mesenchymal transition in colorectal cancer cells through miR-423-5p/CTCF axis

ObjectiveTo investigate the mechanism of lncRNA OGFRP1 affecting angiogenesis and epithelial-mesenchymal transition (EMT) in colorectal cancer (CRC) and provide a new target for the treatment of CRC.MethodsThe expressions of OGFRP1, miR-423-5p, and CTCF were measured in CRC cell lines (HT29, LoVo, HCT116, SW620, and SW480) and normal colonic epithelial cells NCM460. Gain and loss of function experiments were performed on HCT116 and SW620 cells, after which the proliferation, apoptosis, EMT, invasion, and migration of the cells were measured using CCK-8 and colony formation assays, flow cytometry, Western blotting, Transwell, and scratch assay. The transfected cells were incubated with human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) to assess angiogenesis using tube formation assay. ELISA was performed to detect VEGF in the conditioned medium of HCT116 and SW620 cells. The interactions among OGFRP1, CTCF and miR-423-5p were validated by dual-luciferase reporter assay.ResultsCRC cell lines had increased expression levels of OGFRP1 and CTCF and a suppressed expression level of miR-423-5p when compared with NCM460 cells. Suppression on OGFRP1 or CTCF and overexpression of miR-423-5p led to inhibited proliferation, EMT, invasion and migration and increased apoptosis of HCT116 and SW620 cells. HUVECs incubated with cells transfected with si-OGFRP1, si-CTCF or miR-423-5p mimic had suppressed angiogenesis ability. The effect of OGFRP1 suppression in CRC cells could be counteracted by miR-423-5p inhibition. Both CTCF and OGFRP1 could bind to miR-423-5p.ConclusionOGFRP1 promotes proliferation, EMT, and angiogenesis in CRC through miR-423-5p/CTCF axis.     

miR-196a通过靶向NR6A1降低宫颈癌Hela细胞生存和运动能力

目的探究微小型RNA-196a(miR-196a)对宫颈癌Hela细胞生存和运动能力的影响和作用机制。方法RT-PCR检测正常宫颈上皮HcerEpic细胞和宫颈癌Hela细胞、CaSki细胞中miR-196a和核受体NR6A1的mRNA水平;阴性对照miR-NC和miR-196a inhibitor转染Hela细胞,分别记为NC组和miR-196a inhibitor组,免疫印迹检测NR6A1蛋白的表达,生物信息学和荧光素酶报告实验分析和验证miR-196a和NR6A1的靶向调控关系;阴性对照质粒pcDNA和过表达质粒pcDNA-NR6A1转染Hela细胞,分别记为pcDNA组和pcDNA-NR6A1组,免疫印迹检测NR6A1蛋白表达;将miR-196a inhibitor和pcDNA-NR6A1单独或联合转染Hela细胞,分别记为miR-196a inhibitor组、pcDNA-NR6A1组和inhibitor+NR6A1组,CCK8检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Transwell检测细胞侵袭能力,划痕实验检测细胞迁移能力,免疫印迹检测Ki-67、Caspase-3、VEGF和MMP-9的表达。结果与HcerEpic细胞比较,Hela细胞和CaSki细胞中miR-196a和NR6A1 mRNA表达水平均较高(P<0.01),Hela细胞中miR-196a和NR6A1 mRNA表达变化最为显著(P<0.05);miR-196a inhibitor组Hela细胞中NR6A1蛋白表达显著降低(P<0.01),pcDNA-NR6A1组NR6A1的蛋白表达显著升高(P<0.01);miR-196a inhibitor能显著降低Hela细胞增殖倍数和Ki-67表达水平(P<0.05),同时还能提高Hela细胞凋亡率和Caspase-3表达(P<0.01);此外,miR-196a inhibitor还能减少侵袭细胞数,降低Hela细胞划痕闭合率并抑制VEGF和MMP-9的表达(P<0.01);NR6A1能显著减弱miR-196a inhibitor对Hela细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移及对Ki-67、Casapse-3、VEGF和MMP-9表达的调控作用(P<0.01)。结论miR-196a inhibitor能通过靶向抑制NR6A1表达降低宫颈癌Hela细胞的生存和运动能力。     

miR-495-3p / WIF1 / Wnt 信号通路轴调节视网膜母细胞瘤细胞 增殖、 迁移和侵袭

目的 分析 miR-495-3p / Wnt 抑制因子 (Wnt inhibitor factor 1, WIF1) / Wnt 信号通路轴调节视网 膜母细胞瘤 (retinoblastoma, RB) 细胞增殖、 迁移和侵袭。 方法 生物信息学分析 WIF1 的差异表达及与 临床不良表型之间的关系, 并预测 miRNA 靶标; 双荧光酶素报告实验验证。 构建稳定过表达 WIF1 的 RB 细胞 (Vector 组、 WIF1 组)。 构建稳定过表达 miR-495-3p 的 RB 细胞 (miR-NC 组、 miR-495-3p 组和 miR495-3p + WIF1 组)。 Western 印迹检测 WIF1 蛋白及 Wnt 通路相关蛋白表达, 并进行体外功能试验。 裸鼠移 植瘤实验分析移植瘤体积重量。 免疫组化分析 WIF1 在 RB 组织中水平。 结果 WIF1 低表达, 与迁移、 侵袭 有关, 为 miR-495-3p 靶标, 双荧光酶素报告实验证实 WIF1 是 miR-495-3p 作用靶点。 WIF1 过表达抑制细胞增 殖、 迁移和侵袭, 影响细胞周期, 诱导凋亡。 体内实验显示 WIF1 在 RB 组织中过表达, 其过表达抑制瘤体生 长。 过表达 WIF1 下调 β-catenin、 c-Myc 蛋白水平 (P< 0. 05)。 过表达 miR-495-3p 下调 WIF1 蛋白水平, 上调 β-catenin 和 c-Myc 蛋白水平, 促进细胞增殖迁移、 迁移和侵袭, 抑制细胞凋亡 (P< 0. 05), 增加 WIF1 表达 可逆转 miR-495-3p 的作用 (P< 0. 05)。 结论 miR-495-3p 靶向 WIF1 通过 Wnt 信号通路抑制 RB 细胞增殖、 迁移和侵袭, 并诱导凋亡。     

miR-454-3p靶向BPTF表达调控肺癌细胞A549增殖、迁移和侵袭

目的探讨miR-454-3p对肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及分子机制。方法采用RT-PCR技术检测miR-454-3p在肺癌组织以及肺癌细胞株中的表达,以表达量最低的肺癌细胞A549为后续分析对象,将miR-454-3p mimic转入A549细胞,RT-PCR验证miR-454-3p的过表达效率;采用CCK-8、迁移、侵袭等实验,观察转染组与对照组肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭情况;生物信息学预测BPTF是miR-454-3p的靶标,构建BPTF 3′UTR荧光素酶载体,通过双荧光素酶报告基因验证miR-454-3p和BPTF的靶向关系;应用Western blot法检测BPTF的表达及迁移、侵袭相关蛋白的变化。结果RT-PCR实验表明miR-454-3p在肺癌组织和细胞中表达下调,且在A549细胞中表达最低(P<0.05)。与对照组相比,过表达miR-454-3p的肺癌细胞A549增殖能力明显降低,迁移和侵袭能力均受到抑制(P<0.05)。生物信息学软件分析BPTF为miR-454-3p的潜在靶基因,过表达miR-454-3p后BPTF的表达水平明显受到抑制。同时,迁移相关蛋白MMP-2和MMP-9表达明显下调,E-cadhern表达明显上调,而E-cadherin的负性调控N-cadherin表达下降。结论miR-454-3p可能通过靶向下调BPTF的表达,抑制肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,为肺癌的靶向治疗提供潜在靶标。     

MicroRNA-940在乳腺癌中的表达变化及作用机制

目的 探讨microRNA-940(miR-940)在乳腺癌组织和细胞中的表达以及对乳腺癌细胞增殖、侵袭、迁移能力的影响及其相关分子机制。 方法 实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）检测2016年1月~2017年1月我院手术切除的78例患者的乳腺癌组织、癌旁组织和人乳腺癌细胞系MCF-7、SK-BR-3、MDA-MB-231、BT-549及人正常乳腺细胞系MCF-10 A中miR-940的表达情况。在乳腺癌细胞系MDA-MB-231中利用脂质体LipofectaminsTM 2000转染miR-940模拟物上调miR-940的表达,CCK-8实验检测细胞增殖活性的改变,小室侵袭及迁移实验（transwell）检测细胞侵袭、迁移能力的改变。生物学信息法预测miR-940的可能作用靶基因,双荧光素酶报告实验检测miR-940与CXC趋化因子受体2 (CXCR2)的3’UTR区结合情况,Western blotting检测miR-940对CXCR2 蛋白表达的影响。 结果 miR-940在乳腺癌组织和细胞中表达明显降低（P<0.01）,并且miR-940的表达与TNM分期和淋巴结转移密切相关（P<0.01）。上调MDA-MB-231细胞miR-940表达后,细胞的增殖活性明显下降（P<0.01）,侵袭及迁移能力明显下降（P<0.01）。双荧光素酶报告显示,miR-940可与CXCR2 的3’UTR区特定序列结合显著抑制荧光素酶活性(P<0.01),上调miR-940后细胞中CXCR2 蛋白的表达均明显下降(P<0.01)。 结论 miR-940在乳腺癌中的表达降低,miR-940可以通过靶向CXCR2抑制乳腺癌细胞的增殖、侵袭及迁移能力。     

microRNA-423-3p promotes tumor progression via modulation of AdipoR2 in laryngeal carcinoma

Despite of the variety of combined modality treatments for laryngeal carcinoma have been introduced, the distance recurrence rate and 5-year overall survival rate over the past decades are still the major issues, underlining the importance to better understand the biological bases that contribute to disease progression. Here, we reported that miR-423-3p overexpressed in primary laryngeal carcinoma cell line where it plays a critical role in tumor progression. Suppression of miR-423-3p expression resulted in decreasing cell proliferation, clonogenicity, cell migration and invasion. By using in silico prediction algorithms for target identification, AdipoR2 (adiponectin receptor 2) and DUSP4 (MAP kinase phosphatase 2) were identified to be potential targets of miR-423-3p. Overexpression of miR-423-3p was associated with epigenetic silencing of AdipoR2 in human laryngeal carcinoma samples, which have been previously implicated in suppression of tumor proliferation and angiogenesis. Luciferase reporter assays and western blot further confirmed the direct interaction of miR-423-3p with AdipoR2. Our findings have demonstrated that miR-423-3p plays an important oncogenic role in laryngeal carcinoma progression, and further suggest that suppression of miR-423-3p expression might be useful for its clinical management.     

MiR-382促进大鼠正常肝细胞BRL-3A增殖

目的 探讨miR-382对大鼠正常肝细胞BRL-3A增殖和凋亡的影响。方法 BRL-3A细胞瞬时转染miR-382的模拟物和抑制物48 h, MTT法测定细胞活性;流式细胞术检测细胞周期;Real-time PCR检测细胞增殖和凋亡相关基因的表达情况。结果在 大鼠BRL-3A细胞中,转染模拟物可以显著增加miR-382的表达,转染抑制物可以显著降低miR-382的表达(P＜0.01)。MTT检测表明,miR-382过表达后,BRL-3A细胞活性明显提高;流式细胞术检测表明,miR-382过表达组S期的细胞数明显增加,而miR-382干涉组S期的细胞数明显减少;用Real-time PCR检测细胞增殖/凋亡相关基因mRNA表达水平表明,miR-382过表达后,BRL-3A细胞增殖相关基因增殖细胞核抗原（PCNA)、Bcl-2和Ccnd1的mRNA表达水平上调,细胞凋亡相关基因Caspase-3和Bax的mRNA表达水平下调,而miR-382干涉组与上述结果相反。结论 miR-382通过促进细胞增殖相关基因表达,抑制细胞凋亡相关基因表达而促进大鼠正常肝细胞BRL-3A增殖。