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相似文献
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1.
目的:探讨微小RNA(miR)-17-5p调控同源盒蛋白(HOXB13)的分子机制。方法:从SD大鼠胸主动脉分离和培养血管平滑肌细胞(VSMCs);利用细胞计数试剂盒检测细胞增殖;反转录定量聚合酶链反应检测miRNA和miR-17-5p的表达;细胞转染miR-17-5p mimics、anti-miR-17-5p和小干...  相似文献   

2.
目的 观察微小RNA-92b(miRNA-92b)在大鼠急性胰腺炎中的表达及其对急性胰腺炎腺泡细胞凋亡的影响.方法 以50μg/L肿瘤坏死因子(TNF)-α诱导大鼠胰腺腺泡细胞(AR42J)建立体外急性水肿型胰腺炎模型,未处理的AR42J作为对照,检测干预12 h后培养基中淀粉酶含量,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测miRNA-92b在1、3、6h时表达量变化.慢病毒携带miRNA-92b的模拟物(miRNA mimic)及反义寡核苷酸链(miRNA AMO)转染AR42J,转染空病毒组作为对照.建立体外急性胰腺炎模型后,使用FQ-PCR检测miRNA-92b表达量;流式细胞术检测AR42J细胞凋亡率,Western blot法检测活性半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶3(Caspase-3)表达量变化.结果 TNF-α诱导AR42J建立的体外急性胰腺炎模型,miRNA-92b 3 h表达水平较对照组升高(1.81 ±0.09)倍(P<0.05);转染miRNA-92b mimic组miRNA-92b表达量较空病毒组升高(3.71±0.33)倍(P<0.05),AR42J凋亡率[(41.20±2.42)%]较空病毒组[(23.50±1.85)%]明显升高(p<0.05),活性Caspase-3表达量明显升高;转染miRNA-92b AMO组较空病毒组miRNA-92b表达量降低(0.58±0.15)倍(P<0.05),AR42J凋亡率[(13.80±0.40)%]较空病毒组[(23.50±1.85)%]明显降低(P<0.05),活性Caspase-3表达量明显降低.转染空病毒组较未转染组miRNA-92b表达量、细胞凋亡率、活性Caspase-3表达量差异均无统计学意义(P>0.05).结论 急性水肿性胰腺炎发生时miRNA-92b表达量明显升高;上调miRNA-92b的表达,胰腺腺泡细胞的凋亡率增高,下调其表达胰腺腺泡细胞的凋亡率降低.  相似文献   

3.
目的筛选强效抑制生存素Survivin基因表达的小干扰核糖核酸(siRNA),探讨Sur- vivin基因抑制对小鼠结肠癌细胞凋亡的影响。方法根据siRNA的设计规则和Survivin序列,设计3段侯选siRNA,聚合酶链反应(PCR)法制备表达框;将siRNA表达框与Survivin-绿色荧光蛋白(EGFP)融合基因表达质粒(pSurvivin-EGFP)共转染293T细胞,24~48 h后根据荧光强度筛选强效siRNA;再制备其表达质粒转染小鼠结肠癌CT26细胞,应用实时荧光定量(FQ)-聚合酶链反应和蛋白印迹(Western blot)法分析Survivin基因的表达;DNA末端标记(TUNEL)法和流式细胞仪(FCM)Annexin V/丙化碘锭(PI)双染色法检测细胞凋亡。结果筛选出1段高效抑制Survivin表达的siRNA,可使CT26细胞内Survivin mRNA拷贝数明显减少,抑制率为86.9%;蛋白表达水平亦显著降低;TUNEL检测显示转染48 h后RNA干扰组和对照组凋亡细胞数分别为(60.13±5.71)个和(5.47±0.63)个,两组差异有统计学意义(P<0.01);FCM检测转染后1、2、3、4 d凋亡细胞比率分别为2.1%、4.9%、11.7%和32.6%,对照组4个时间点凋亡率均低于1.5%,两组差异有统计学意义(P<0.01)。结论siRNA能有效抑制小鼠结肠癌CT26细胞内Survivin基因表达并诱导结肠癌细胞凋亡。  相似文献   

4.
目的 探讨Stat3反义寡核苷酸 (Stat3AS ON)联合 5 氟尿嘧啶 (5 FU )治疗结肠癌的作用机制。方法 应用Stat3AS ON与 5 FU处理结肠癌细胞HCT116,Westernblot检测Stat3、p Stat3、CyclinD1与bcl xL表达 ,MTT法检测细胞增殖状态 ,流式细胞技术检测细胞周期与凋亡。结果 Stat3AS ON与 5 FU作用于HCT116细胞 72h后 ,G1期细胞比率由 63 .7%上升至 82 .2 % ,S期细胞比率分别由 17.6% ,下降至 9.9% ,凋亡细胞百分比由 6.1%增加至 3 2 .0 %。Stat3AS ON与 5 FU可以抑制结肠癌细胞增殖 ,促进结肠癌细胞凋亡 ,联合应用Stat3AS ON与 5 FU可以起协同作用 ,明显抑制结肠癌细胞Stat3信号转导通路活化。结论 选择性阻断细胞内信号转导通路可能为治疗结肠癌提供新途径  相似文献   

5.
目的 观察新辅助化疗(NACT)对结肠癌细胞凋亡及相关调控蛋白表达的影响.方法 收集结肠癌患者114例,采用原位末端标记法和免疫组织化学方法分别观察经NACT的FOLFOX4方案治疗前后结肠癌细胞凋亡和癌组织中B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、环氧合酶-2(COX-2)、p53蛋白的表达,并判定NACT的近期疗效.结果 NACT化疗后结肠癌细胞发生典型凋亡形态学变化,细胞凋亡系数(3.87%比1.17%)和凋亡阻性率(59.65%比23.68%)显著高于化疗前.经NACT治疗后患者结肠癌细胞bcl-2(54.39%比70.15%)、COX-2(28.07%比50.00%)和p53(45.61%比70.05%)的阳性表达率与化疗前比较均有不同程度降低,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),而bax阳性表达率(22.81%比50.88%)显著增强,差异有统计学意义(P<0.01).同时bcl-2/bax比值(3.08比1.07)也显著降低.NACT治疗组的总有效率(39.47%)显著高于对照组(1.75%),治疗后患者无严重药物不良反应.结论 结肠癌患者经NACT化疗后癌组织中bcl-2、COX-2和p53蛋白表达明显降低,而bax蛋白的表达显著增加,促进癌细胞凋亡,且NACT的近期疗效显著.  相似文献   

6.
目的探讨肿瘤增殖型腺病毒(Ad-delE1b55KD-shRNA/Survivin-EGFP)介导的以人Survivin为靶标的RNA干扰对结肠癌细胞株HT-29中Survivin mRNA和蛋白表达及对HT-29增殖凋亡的影响。方法用Ad-delE1b55KD-shRNA/Survivin-EGFP转染结肠癌细胞株HT-29(以携带相同shRNA的增殖缺陷型腺病毒和脂质体载体为对照),用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot分别检测转染后的HT-29细胞中Survivin mRNA和蛋白表达的变化,用噻唑蓝(MTT)法、吖啶橙/溴乙锭荧光染色法、Annexin V-PE/7-AAD联合染色法检测细胞死亡率及凋亡率。结果与复制缺陷型腺病毒载体和脂质体载体比较,转染Ad-delE1b55KD-shRNA/Survivin-EGFP后,HT-29细胞中Survivin mRNA拷贝数及蛋白表达显著降低,其细胞死亡率和凋亡率显著提高(P〈0.05)。结论Ad-deIE1b55KD-shRNA/Survivin-EGFP介导的RNA干扰较之增殖缺陷型腺病毒载体和脂质体载体具有更高的干扰效率,且能高效地诱导结肠癌细胞凋亡并抑制其增殖。  相似文献   

7.
目的:探讨微小RNA(miR)-138-5p在前列腺癌(PCa)中的表达及对前列腺癌侵袭、迁移、凋亡等能力的影响。方法:miR-138-5p模拟物转染正常前列腺上皮细胞(RWPE)-1、DU145细胞,实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)用于检测转染前后细胞miR-138-5p的表达。细胞计数试剂盒(CCK-8...  相似文献   

8.
目的:探讨微小RNA(miR)-454-3p在结直肠癌细胞增殖和侵袭中的作用及其可能分子学机制。方法:选取2019年6月1日至2019年8月31日于郑州大学第一附属医院原发性结直肠癌的患者19例肿瘤组织及其对应的癌旁组织标本。应用应用荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)技术检测样本中miR-454-3p的表达水平。通...  相似文献   

9.
目的:探讨胃癌细胞微小RNA-448(miR-448)对沉默维甲酸诱导蛋白14(RAI14)的靶向调控作用及对细胞增殖侵袭迁移的影响。方法:用miR-448转染人胃癌细胞株和胃正常上皮细胞GES-1,利用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白质印迹法(Western blot)和双荧光素酶报告实验确认miR-448...  相似文献   

10.
目的 探讨微小RNA(miRNA,miR)-146a在骨肉瘤中表达的意义和miRNA-146a对骨肉瘤的作用机制.方法 实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测骨肉瘤标本和癌旁组织中miRNA-146a表达量,并采用Cox回归模型分析其与患者生存期的相关性.质粒转染miRNA-146a进入骨肉瘤细胞TE85中,检测转染后细胞活性、细胞凋亡和细胞中YY1、Fas蛋白的表达.结果 癌旁组织和骨肉瘤组织中miRNA-146a的表达量分别为1.213±0.525和0.734±0.263,差异有统计学意义(P<0.05).miRNA-146a的表达量与患者的生存时间呈正相关(P<0.05).转染miRNA-146a24 h后,50、100 nmol/L组人骨肉瘤细胞活性明显降低至(65.161±5.528)%和(40.385±8.442)%(P<0.05),细胞凋亡率分别明显升高至(38.671±12.415)%和(59.513±9.058)% (P<0.05),细胞中YY1蛋白表达量明显降低(分别为0.472±0.014和0.272±0.005,P<0.05),而Fas蛋白表达量明显升高(0.292±0.010、0.584±0.006,P<0.05).转染miRNA-146a 48 h后,与对照组比较,50、100 nmol/L组人骨肉瘤细胞活性、凋亡率、YY1表达量和Fas蛋白表达量变化与转染24 h的变化相似.结论 miRNA-146a对骨肉瘤的作用是通过下调YY1的表达,而上调Fas蛋白的表达,抑制骨肉瘤细胞的增殖同时促进骨肉瘤细胞的凋亡.  相似文献   

11.
目的 观察重组人内皮抑素对结肠癌细胞SW620增殖和凋亡的影响.方法 在培养液中加入梯度浓度的重组人内皮抑素(0.1、0.5、1.0,5.0、10.0、20.0mg/L)分别作用24、48、72 h,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞生长,流式细胞术检测细胞周期和凋亡,扫描及透射电镜观察细胞超微结构的变化.结果 内皮抑素对SW620细胞的增殖有抑制作用.其中,作用48 h的抑制率分别为13.46%、15.38%、20.82%、24.71%、30.12%和37.44%,呈剂量依赖关系.给药后24 h和48 h,内皮抑素组细胞G0/G1期比例增高,而s期细胞比例降低(P<0.05).72h两组差异无统计学意义(P>0.05).24 h和48 h的凋亡率分别为(1.430±0.145)%和(1.760±0.054)%,均高于对照组(0.670±0.181)%和(1.260±0.138)%(P<0.05).透射电子显微镜下,内皮抑素组细胞微绒毛减少,染色质厚薄不均,位于核膜下.结论 重组内皮抑素可以在体外直接抑制结肠癌细胞的增殖,诱导凋亡,影响细胞骨架等结构.
Abstract:
Objective To investigate the effect of endostatin on the proliferation of colon cancer SW620 cells. Methods The SW620 cells were treated by recombinant human endostatin(0. l ,0. 5,1.0,5.0,10.0,20.0 mg/L). The effect of endostatin on the proliferation, cell cycle, apoptosis and ultrastructure of SW620 cells were examined after 24,48 and 72 h. Results The proliferation of SW620 cells were inhibited by endostatin compared with the control group. The inhibiting rates were 13. 46% ,15. 38% ,20. 82% ,24. 71% ,30. 12% and 37.44% .respectively (P <0.05). Endostatin arrested SW620 cells at G0/G1 phase (P < 0. 05); The apoptotic rates were (1.430 ± 0. 145) % and (1. 760 ± 0. 054) % in endostatin group after 24 and 48 h, respectively. This was a significant increase when compared with the control group after 24 and 48 h (0. 670 ±0. 181)% and (1.260 ±0. 138)% (P<0. 05). Under TEM,both the number of protrusions and microfilaments of SW620 cells in the endostatin group decreased. Conclusion Recombination human endostatin inhibits the proliferation of SW620 cells,induce the apoptosis,and changes the skeleton of SW620 cells directly.  相似文献   

12.
目的:探讨臭椿酮对结直肠癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:根据检测结果实施分组,采用低(0.2 μmol/L)、中(0.4 μmol/L)、高剂量(0.6 μmol/L)的臭椿酮干预结直肠癌SW1116细胞24 h,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞活力,集落形成实验检测克隆形成数,流式细胞术检测细胞凋亡,实时荧光定量聚...  相似文献   

13.
目的:探讨微小RNA(miR)-618及羧基末端结合蛋白2(CtBP2)对胰腺癌增殖、侵袭和迁移的影响及其作用机制。方法:采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测胰腺癌细胞中miR-618的表达;分别转染miR-618 inhibitor和mimics后,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、克隆集落形成及Tr...  相似文献   

14.
目的:研究miR-299-3p对乳腺癌细胞增殖、凋亡的影响和潜在的分子机制.方法:以乳腺上皮细胞MCF-10A为对照,qRT-PCR检测乳腺癌MDA-MB-231和MDA-MB-468细胞中miR-299-3p和PAX3 mRNA的表达,Western blot检测MDA-MB-231和MDA-MB-468细胞中PAX...  相似文献   

15.
目的 探讨瑞芬太尼对人结肠癌COLO205细胞增殖及凋亡的影响.方法 体外培养人结肠癌细胞COLO205,按完全随机法分为两组:正常对照组和瑞芬太尼干预组.四甲基偶氮唑盐(monotetrazolium,MTT)法检测瑞芬太尼在相同浓度的条件下不同时间点对结肠癌COLO205细胞增殖的影响,测得抑制率并计算半数抑制浓度值,应用凋亡试剂盒结合流式细胞仪检测瑞芬太尼对人结肠癌COLO205细胞凋亡的影响.结果 MTT结果显示,相同浓度的瑞芬太尼干预结肠癌COLO205细胞,分别在24、48、72 h测算半数抑制浓度结果为(50.6±4.0)、(43.6±3.7)、(36.0±1.1)nmol/L;瑞芬太尼干预组凋亡率为(59±9)%,对照组凋亡率为(71±15)%.结论 瑞芬太尼能抑制结肠癌COLO205细胞增殖,促进其凋亡.  相似文献   

16.
Leflunomide对结肠癌细胞增殖及凋亡的影响   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:检测Leflunomide对结肠癌细胞增殖和诱导凋亡作用。方法:实验采用结肠癌细胞株SW260,与不同浓度的Leflunomide药物(0、5、10、20、40、80μg/ml)共同培养,以MTT方法和流式细胞仪技术检测细胞的增殖状态,用TUNEL染色和流式细胞仪技术检测细胞的凋亡。结果:Leflunomide在对结肠癌细胞增殖具有双重影响,即在低浓度下(5μg/ml和10μg/ml)有轻度的促进结肠癌细胞SW620增殖的作用,而提高浓度后(>40μg/ml)则表现为明显的抑制细胞的增殖作用,并随着剂量增加和作用时间延长,抑制作用更为明显,即存在着时相性和量-效依赖性。结论:Leflunomide可抑制结肠癌细胞增殖和诱导凋亡。可能对结肠癌病人有潜在的治疗作用。  相似文献   

17.
目的:探讨化学预防药物Sulfone是否通过转录调节XAF1的表达诱导结肠癌细胞凋亡。方法:采用Hoechst 33258染色法检测人结肠癌细胞株HCT116(p53野生型)和SW480(p53突变型)经Sulfone处理后的细胞凋亡率。运用Western印迹法检测上述细胞经Sulfone处理前后XAF1、磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)和ERK1/2总蛋白质的表达量变化。通过双重荧光素酶报告基因检测Sulfone对XAF1启动子转录活性的调节作用。结果:Sulfone能诱导HCT116和SW480细胞凋亡,其效应随剂量的增加和时程的延长而更明显。Sulfone能有效抑制上述两种细胞中ERK1/2蛋白的磷酸化(抑制率分别为74%和57%,P<0.05),但上调XAF1蛋白的表达(2.2倍和3.1倍,P<0.05)。经Sulfone处理后,XAF1启动子的转录活性在HCT116和SW480细胞分别提高了3.3倍(P<0.01)和2.6倍(P<0.05)。结论:Sulfone通过抑制ERK途径,在转录水平显著上调XAF1的表达进而诱导细胞凋亡,且这种作用的强弱与肿瘤细胞的p53分型有关。  相似文献   

18.
目的:探讨miR-143-3p靶向调控Kirsten鼠肉瘤病毒癌基因(KRAS)介导丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路对胃癌细胞增殖和侵袭的作用机制。方法:双荧光素酶报告基因实验验证miR-143-3p与KRAS基因的靶向关系。将购自上海中国科学院的胃癌细胞株转染分组,将筛选人胃癌细胞...  相似文献   

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