存在受精失败风险中应用分半IVF/ICSI治疗的精液参数分析

目的 通过回顾性分析采用分半治疗的患者,探讨体外受精低下及受精失败的精子参数.方法 收集2011年1月至11月采用分半治疗的患者47例,按照受精正常和受精失败分为两组,分析精液参数变化.结果 两组比较,在不受精组,正常精子形态百分比及精子顶体酶活性低于正常受精组(P＜0.05),分别为(8.33％±3.72％)和(12.01％±7.39％)；顶体酶活性低于正常组,分别为42.66±24.84和64.66±35.59.不育年龄、不育年限及精子密度、精子活力无明显差异.结论 正常精子形态结合顶体酶活性可估计体外受精的成功率.     

常规体外受精后完全不受精患者的病因及精子参数分析

目的通过回顾性分析常规体外受精(IVF)后出现完全不受精的病因及精子参数,探讨体外不受精的相关原因。方法自2005年4月至2007年8月期间选择原发性不孕3年以上、在我中心接受2次宫腔内人工授精未孕、具有体外受精-胚胎移植(IVF-ET)适应证者,首次接受助孕的35个周期。为避免常规IVF失败导致无胚胎移植,对取出的卵子同时行常规IVF和卵浆内单精子显微注射(ICSI),结果发现有18个周期常规IVF后完全不受精(称不受精组),17个周期常规IVF和ICSI后均有受精(称受精组)。结果两组相比,在不受精组,精子畸形率显著高于受精组,分别为(72.59±19.76)%,(54.06±20.92)%;男方不育因素显著多于受精组(分别为44.44%,17.65%)。进一步分析两组男方不育病因发现,不受精组畸形精子症伴少或弱精子症因素显著高于其它男方因素(分别为81.25%,16.67%)。结论在原发性不育症中,畸形精子症是完全不受精的主要原因。因此建议原发性不育3年以上、男方两次以上精液常规分析及形态学检查均为畸形精子症同时伴少或弱精子症时,应直接采用ICSI助孕。     

畸形精子症与常规体外受精失败

目的:回顾性分析常规体外受精-胚胎移植(IVF-ET)中受精完全失败的可能原因。方法:选择在2007年1月至2008年8月期间完成的第1次常规体外受精病例,共552对夫妇。男方的精子要求为:妻子取卵当日精液处理后a+b级精子总数>1×106,在术前1年内,按照Kruger/Tygerberg标准,精子畸形率<96%者。结果:552对夫妇中,515对常规体外受精成功,占93.3%,其受精率为:78.67%,此组为受精组;37对受精完全失败,发生率为6.7%,为受精失败组。将两组进行比较,受精失败组中原发不孕和畸形精子症的比例显著高于受精组(P<0.05),而两组促排卵天数、获卵数、促性腺激素用量、男女方年龄、长短方案的应用及少弱精子症的比例均没有显著性差异。结论:按照Kruger严格评分法对于男方畸形精子症者,应考虑行部分卵子ICSI,以避免受精失败。     

体外受精失败MII期人卵母细胞的免疫荧光研究

目的探讨体外受精中MII期人卵母细胞受精失败的原因。方法收集体外受精后24～48h仍未受精的MII期卵母细胞,进行免疫荧光染色和碘化丙啶(PI)复染,在荧光显微镜下对其失败原因进行分类。结果卵母细胞内未见精子的在常规体外受精(IVF)周期有55.8%,显著多于卵胞浆内单精子注射(ICSI)周期中的9.7%(P<0.01);卵母细胞活化失败两者分别为14.9%和58.1%,有显著性差异(P<0.01);原核形成和(或)迁移缺陷的在两者分别为25.3%和32.3%(P>0.05);其他异常两者分别为3.9%和0.0%。结论IVF中MII期卵母细胞的受精失败主要是缺乏精子的穿透,ICSI周期中的主要原因是卵母细胞活化不完全。     

早期补救卵胞浆内单精子注射在常规体外受精不受精或低受精周期中的应用

常规体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET)周期中,卵母细胞受精低下或不受精的发生率约为10％～20％[1].补救性卵胞浆内单精子注射(rescue intracytoplasmic sperm injection,rescue ICSI)作为受精失败的一种补救措施已在许多生殖中心实施,早期多行晚期补救,一般在受精后16～20 h观察原核形成情况,如未见原核形成则通过ICSI再次受精.     

短时体外受精周期中受精失败的影响因素分析

目的 探讨短时体外受精中受精失败的影响因素.方法 回顾性分析武汉大学人民医院生殖医学中心2016年1月至2019年12月共8107个短时IVF周期的数据,根据受精结果分为短时IVF组(n=7214)和早期补救卵胞浆内单精子注射(R-ICSI)组(n=893),比较两组患者的周期特点和妊娠结局.结果 短时IVF组和R-I...     

常规IVF完全/部分受精失败后行早期补救ICSI的应用价值

目的探讨短时受精联合早期补救卵胞浆内单精子注射(R-ICSI)在常规体外受精(IVF)受精失败和低受精周期的临床应用效果。方法回顾性分析653个体外受精-胚胎移植(IVF-ET)周期,根据受精情况将患者分为3组:因IVF全卵不受精行早期R-ICSI者131个周期(A组);因IVF低受精行早期R-ICSI者100个周期(B组);因男方因素直接行ICSI者422个周期(C组)。比较3组患者的一般情况和临床结局。结果 (1)C组原发不孕的比例(68.48%)显著高于A组(56.49%)和B组(51.00%)(P0.05);(2)C组的3PN率(0.77%)显著低于A组(2.25%)和B组(2.91%)(P0.05),B组的优胚率(34.71%vs.41.53%vs.41.84%)和胚胎利用率(56.28%vs.65.87%vs.63.46%)显著低于A组和C组(P0.05);(3)3组的MII卵率、2PN率、囊胚形成率、临床妊娠率、胚胎种植率和流产率比较均无统计学差异(P0.05)。结论短时受精联合早期R-ICSI可有效克服常规IVF受精障碍,显著提高受精率,获得良好的妊娠结局。     

ICSI受精失败的原因与对策

卵细胞胞质内单精子注射(ICSI)是一种新型的体外受精技术,有很高的单精受精率,但ICSI技术不能解决所有的受精失败,可能的原因包括卵母细胞质量、受精激活障碍、精子异常以及ICSI技术等问题.IVF超促排卵可能引起卵母细胞内凋亡增加,从而导致受精失败.卵母细胞激活障碍有多种人工辅助的激活方法.ICSI时精子引起的受精失...     

短时受精与卵胞浆内单精子注射的临床应用研究

目的　比较采用简化的短时受精与卵胞浆内单精子注射 (ICSI)的临床应用效果 ,以了解体外受精 (IVF)时短时受精的临床应用价值。　方法　全部病例接受常规促超排卵治疗获得卵母细胞 ,根据患者接受体外受精的不同方式分为两组。短时受精组 10 5例 ,采用精卵四孔皿混合培养 ,加精后 2h将卵母细胞转移至新鲜培养基 ,12 1周期 ;对照组 112例 ,采用ICSI,133周期。分别比较两组受精卵的个数、形成胚胎数及临床妊娠率 ,并进行统计分析。　结果　短时受精组共获卵母细胞16 33个 ,正常受精 (双原核 ) 116 4个 (71.3% ) ,形成胚胎数 10 84个 (93.1% ) ,临床妊娠 4 5例 (4 2 .9% ) ;对照组共获卵母细胞 175 2个 ,形成胚胎数 10 97个 ,临床妊娠 4 8例 (4 2 .9% )。两组女方年龄差异无显著性意义 ;受精率、形成胚胎数、移植胚胎数、冷冻胚胎数及妊娠率差异均无显著性意义 (P均 >0 .0 5 )。　结论　短时受精既简便 ,有效 ,又能获得与ICSI受精相同的临床效果。     

新建辅助生殖实验室的鼠胚培养质控及鼠卵显微注射分析

目的利用小鼠体外受精法和体内受精法胚胎培养检测新建辅助生殖实验室的质控情况,分析比较常规人卵显微注射模式与鼠断尾精子显微注射模式的结局。方法利用昆明小鼠进行胚胎培养质控分析,按照受精方式不同分为体内受精组和体外受精组;又根据显微注射方式的不同,分为常规人卵显微注射模式(C-ICSI组)和鼠断尾精子显微注射模式(D-ICSI组),分析比较不同方式的鼠卵ICSI结局。结果体内受精组的受精率显著高于体外受精组(91.90%vs. 81.59%,P<0.05),两组的卵裂率(94.24%vs. 93.39%)、囊胚形成率(85.97%vs. 81.67%)比较无显著性差异(P>0.05)。人卵显微注射系统应用于鼠ICSI时卵子存活率有降低的趋势,但C-ICSI组与D-ICSI组的卵子存活率比较无显著性差异(29.49%vs. 30.52%)(P>0.05);D-ICSI组的受精率(56.72%vs. 42.53%)、卵裂率(71.05%vs. 43.24%)及囊胚形成率(61.11%vs. 31.25%)显著高于C-ICSI组(P<0.05)。结论昆明小鼠配子体外受精法和体内受精法胚胎培养的囊胚形成率均达到辅助生殖实验室的质控标准。人卵显微注射系统应用于鼠卵ICSI时,仅适用于卵子的显微注射操作练习。     

常规IVF完全/部分受精失败后行早期补救ICSI的应用

目的探讨常规短时受精联合早期补救卵胞浆内单精子注射(R-ICSI)在常规体外受精(IVF)失败和低受精率周期中的临床应用效果。方法回顾性分析2012年1月至2017年12月在河北省生殖医学中心接受IVF/ICSI-ET助孕治疗的2811个周期的临床资料,根据受精方式不同分为3组:R-ICSI组(210个周期):实施早期R-ICSI;IVF组(2062个周期):行常规IVF助孕;ICSI组(539个周期):直接行ICSI助孕。比较3组患者的一般情况、实验室指标和妊娠结局。结果R-ICSI组的原发不育比例显著高于IVF组(P<0.05),但与ICSI组比较无显著性差异(P>0.05)。3组患者的平均获卵数、移植胚胎数及MⅡ率比较均无显著性差异(P>0.05);R-ICSI组患者的受精率显著高于IVF组和ICSI组(P<0.05);R-ICSI组患者的2PN率显著低于ICSI组(P<0.05),但与IVF组比较无显著性差异(P>0.05);R-ICSI组的多PN率显著高于ICSI组,但显著低于IVF组(P<0.05);R-ICSI组患者的优胚率、可利用胚胎率及临床妊娠率均显著低于IVF组和ICSI组(P<0.05);R-ICSI组患者的着床率显著低于IVF组(P<0.05),但与ICSI组比较无显著性差异(P>0.05)。结论常规IVF受精失败及低受精的患者行早期R-ICSI可有效克服受精障碍,提高受精率,获得较好的妊娠结局。     

Correlation between sperm morphology, acrosin, and fertilization in an IVF program

Acrosin, a neutral proteinase, is located within the acrosome. The aim of this study was to evaluate acrosin concentrations in patients with severe damage of the sperm head and to determine whether acrosin concentration could predict the chances of fertilization in an IVF program. Sixty patients were accepted into this study, prospectively. The patients were divided into two groups, those with a normal morphology of less than 14% (group I, n = 33) and those with normal morphology less than 14% (group II, n = 27). All patients had a sperm concentration of less than 20 million sperm/ml and less than 30% progressively motile sperm. The acrosin assays were performed on the semen sample obtained on the day of IVF. Routine IVF insemination procedures were used, and only mature oocytes were considered. The only factor that showed a significant correlation of fertilization was normal morphology (p less that 0.01). The mean acrosin level was 73.4 /+- 38.6 mED/10 million sperm in group I and 70.9 /+- 42.7 mIU/10 million sperm in group II (no significant difference). The fertilization rate in group I was 45.4% and in group II, 77.7% p less than 0.002). Acrosin levels were not significantly different in patients with and without fertilization (72.0 /+- 42.1 and 73.6 /+- mIU/10 million sperm, respectively).     

精子功能检测与男性不育诊治的新进展

传统的精液常规分析是用于判断男性生育力的最基本临床指标,但是,只依靠精液分析的结果来预测男性生育状况仍是很不准确的。精子功能正常与否,对临床选择IVF还是ICSI治疗不育症极为重要。因为IVF需要功能完全正常的精子才能受精,而ICSI的受精只需要精子的正常核DNA,不需要其它的精子功能。在发明ICSI以前,患者IVF受精失败或低下(<30%)发生率很高(20%~35%)。研究证明,这些IVF受精失败的患者主要与精子功能障碍有关。常见的是少精子症,弱精子症和畸形精子症。但是有很多患者,精液分析结果仍正常。为了提高临床对精子功能测定的准确性,文献里有很多新的精子功能试验的研究报导,比如丫啶橙(AO)测定精子DNA、精子与透明带结合和穿透、顶体诱发精子顶体反应和精子与透明质酸结合试验。精子形态测定是常规精液分析中最重要的临床指标之一。但精子形态又是最难测定准确和稳定。IVF/ICSI受精失败的人卵可以用来测定精子功能。人卵透明带选择性地与正常形态和顶体完整的精子结合,透明带诱发的顶体反应与精子穿透明带的能力有很强的相关性。在不明原因的男性不育患者中,由于透明带诱发顶体反应障碍所导致的不育症占25%左右。少精子症(精子计数<2×106/ml)和严重精子形态畸形症(严格正常形态<5%)的男性不育患者,精子-透明带结合反应缺陷的发生率很高(>70%)。这类患者用IVF治疗受精率会很低,因此只能用ICSI治疗。精子与透明质酸结合试验与精子活力和形态有很强的相关性,但它不是很有用的精子功能试验。AO测定精子DNA对预测ART的受精和妊娠率的临床意义目前还没有肯定的结论,需要进一步研究。总之,在常规精液分析时,增加一些新的精子功能试验,在临床ART中对男性不育患者的诊治会有很大的帮助。     

精子形态率、顶体酶活性对IVF受精失败的影响

目的 探讨精液中精子形态率及顶体酶活性与IVF受精失败的关系.方法 回顾性分析2014年在本中心行IVF新鲜周期的982个周期患者,根据精子形态分析结果,将正常精子形态百分率(x)分为5组,包括:1组:x≥4％,2组:x＜1％,3组:1％≤x＜2％,4组:2％≤x＜3％,5组:3％≤x＜4％.根据顶体酶活性分为正常组及异常组.结果 IVF受精失败组(受精率＜30％)与正常组比较,正常精子形态率及顶体酶活性差异有统计学意义(P＜0.01).精子形态率比较,2、3、4组与1组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).5组与1组比较,差异无明显统计学意义(P＞0.05).顶体酶活性正常组与异常组比较,受精失败率差异有统计学意义(P＜0.01).结论 精子形态率及顶体酶活性异常可导致IVF受精失败率升高.     

优选前后精子顶体酶活性与IVF受精率相关性的研究

目的探讨优选处理前和处理后精子顶体酶活性的变化,及与体外受精(IVF)受精率的相关性。方法采用分光光度比色法,对接受IVF治疗的53例不育夫妇男方精液,分别测定优选处理前和处理后精子顶体酶活性,分析其与IVF受精率的相关性。结果优选处理后精子顶体酶活性与优选前比较有显著性差异(P<0.05);达到常规IVF标准并选择常规IVF治疗者,优选后的精子顶体酶活性与IVF受精率有相关性,精子顶体酶活性降低与IVF受精率降低有关。结论精子顶体酶活性与IVF受精率有相关性,并且通过精子顶体酶活性可以预测IVF受精率。     

异常形态精子对植入前胚胎发育和妊娠结局的影响

目的探讨异常形态精子(畸形率≥98%)对植入前胚胎发育及妊娠结局的影响。方法采用回顾性队列研究,分析2017年1~12月在唐都医院妇产科生殖医学中心行ART助孕的2419例患者临床资料,根据异常形态精子分为3组,即IVF对照组(畸形率≤96%,n=2129)、IVF实验组(畸形率≥98%,n=90)和ICSI实验组(畸形率≥98%,n=200)。比较3组间植入前受精失败率(受精率<30%)、正常受精率、可用胚胎率等胚胎发育参数和着床率、临床妊娠率、流产率及活产率等妊娠结局的差异。结果(1)胚胎发育结果:组间比较,IVF实验组受精失败率显著高于IVF对照组(P<0.05),ICSI实验组的受精失败率为0;ICSI实验组正常受精率显著高于IVF对照组和IVF实验组(P<0.05);IVF实验组可用胚胎率显著低于IVF对照组和ICSI实验组(P<0.05)。(2)妊娠结局:单因素分析结果显示,与IVF对照组、ICSI实验组相比,IVF实验组的着床率、临床妊娠率、流产发生率和活产率差异均有统计学意义(P<0.05);IVF对照组和ICSI实验组组间妊娠结局指标比较均无显著性差异(P>0.05)。(3)Logistic多因素分析显示:IVF实验组的受精失败风险显著高于IVF对照组(P=0.002),可用胚胎率、活产率显著低于IVF对照组(P=0.002);ICSI实验组的正常受精率显著高于IVF对照组(P=0.05)。结论对于活力正常、但异常形态精子率≥98%的患者,采用ICSI授精方式,能降低受精失败风险,提高正常受精率和可用胚胎率,同时提高妊娠率和活产率并降低流产发生率。     

低氧对大鼠精子体外顶体反应和顶体酶、透明质酸酶活性的影响

目的研究低氧对大鼠精子顶体酶、透明质酸酶活性的影响以及对精子体外顶体反应发生的影响。方法成年Wistar大鼠随机分为4个组:常氧对照组、低氧5d组、低氧15d组和低氧30d组。低氧组置低压舱内模拟高原5000m,分别低氧5、15和30d。采用明胶薄膜法、透明质酸底物转化法、溶血磷脂胆碱(LPC)诱导金霉素荧光染色法,测定低氧对附睾尾精子顶体酶、透明质酸酶活性和体外顶体反应发生率的影响。结果低氧5、15和30d组大鼠精子顶体反应发生率,与常氧对照组相比均显著降低,分别由常氧对照组的(30.5±3.5)%,下降至(11.7±0.9)%(P<0.01)、(10.8±1.0)%(P<0.01)和(10.0±1.4)%(P<0.01);低氧5、15和30d组大鼠精子顶体酶阳性率降低,分别由常氧对照组的(81.67±7.16)%,下降至(54.17±3.82)%(P<0.01)、(30.00±3.92)%(P<0.01)和(43.00±3.63)%(P<0.01);低氧各组透明质酸酶活性无显著改变(P>0.05)。结论低氧抑制了精子顶体酶活性和顶体反应发生。     

The human acrosome reaction

We developed tests of sperm-oocyte interaction: sperm-zona binding, zona-induced acrosome reaction, spermzona penetration and sperm-oolemma binding, using oocytes which failed to fertilise in clinical in vitro fertilization (IVF). Although oocyte defects contribute to failure of sperm oocyte interaction, rarely are all oocytes from one woman affected. Low or zero fertilization in standard IVFwas usually caused by sperm abnormalities. Poor sperm-zona pellucida binding was frequently associated with failure of standard IVF and obvious defects of sperm motility or morphology. The size and shape of the acrosome is particularly important for sperm binding to the oocyte. The proportion of acrosome intact sperm in the insemination medium was related to the IVF rate. Inducing the acrosome reaction with a calcium ionophore reduced sperm-zona binding. Blocking acrosome dispersal with an acrosin inhibitor prevented spermzona penetration. Sperm-zona penetration was even more highly related to IVF rates than was sperm-zona binding. Some patients had low or zero fertilization rates with standard IVF but normal sperm by conventional tests and normal sperm-zona binding. Few of their sperm underwent the acrosome reaction on the surface of the zona and none penetrated the zona. In contrast, fertilization and pregnancy rates were high with intracytoplasmic sperm injection. We call thiscondition defective zona pellucida induced acrosome reaction. Discovery of the nature of the abnormalities in the signal transduction and effector pathways of the human zona pellucida induced acrosome reaction should result in simpler tests and treatments for the patients and also provide new leads for contraceptive development.     

Relation of human sperm acrosin activity and fertilization in vitro

The aim of the study described here was to determine the possible contribution of the acrosin activity test to routine semen analysis in enhancing the precision of the prognosis of IVF success in a group of patients in which the contribution of the egg factor to infertility was ruled out (20 cases) compared to a control IVF group (39 cases). Semen analysis, acrosin activity and acrosome ultrastructure were determined for all semen samples. The group with high fertilization rates was comprised of normozoospermic patients while the group with low fertilization rates was comprised of astheno-teratozoospermic patients. The mean acrosin level of the positive IVF group was significantly higher than that of the negative group (51.7 ± 33.2 and 28.6 ±13.7, respectively). Two parameters: per cent motile spermatozoa and acrosin level, were found to have a significant positive correlation with subsequent successful IVF ( r = 0.36, P < 0.006; r = 0.37, P < 0.004, respectively); and agenesis of the acrosome was found to have a significant negative correlation ( r = -0.33, P < 0.01). The ability of these parameters to correctly predict fertilization success was 59%, with 5% false positive, among which 15.4% was predicted solely by the acrosin level (above 54 μIU 10⁶ cells⁻¹) and 23% solely by per cent motile spermatozoa (above 50%). Abnormalities of the acrosome ultrastructure did not contribute further to the correct classification. The apparent clinical benefit of the acrosin level test is discussed.     

IVF—ET中未受精卵母细胞行早期（5hrs）补救ICSI授精后胚胎发育潜能

在常规应用卵胞浆内单精子注射（ICSI）之前,常规体外受精（IVF）受精率低下很常见,大约有20％～35％的IVF患者会发生受精率很低（〈35％的卵子受精）甚至受精完全失败（所有卵子都不受精）。卫生部辅助生殖技术管理条例规定,在应用辅助生殖技术助孕的治疗中,对以女方输卵管堵塞、排卵障碍、子宫内膜异位症或不明原因等不孕因素为主的患者,