矽肺患者白介素17、T淋巴细胞亚群水平及吸烟对其的影响

目的　研究矽肺患者血清中白介素17（IL-17）、T淋巴细胞亚群的表达水平，并探讨吸烟对患者上述指标的影响。方法　选取60例矽肺患者作为矽肺组，60名无粉尘接触者作为对照组。分析矽肺组不同诊断期别、血氧分压、肺通气功能、小气道功能是否正常及有无吸烟患者间IL-17、T淋巴细胞亚群水平差异。结果 与对照组比较，矽肺组IL-17表达水平升高，CD3+ T细胞、CD3+CD4+ T细胞水平降低；矽肺叁期患者CD3+ T细胞低于矽肺壹期（P＜0.05）。矽肺患者肺通气功能、血氧分压与其IL-17、T淋巴细胞亚群水平无明显相关（P＞0.05）。吸烟的矽肺患者CD3+ T细胞水平低于已戒烟者，CD3+CD8+ T细胞水平低于不吸烟者及已戒烟者，CD3+CD4+/CD3+CD8+ T细胞比值高于不吸烟者及已戒烟者（P＜0.05）。矽肺壹期吸烟患者CD3+ T、CD3+CD8+ T细胞水平低于已戒烟者；贰期吸烟患者IL-17表达水平高于不吸烟者及已戒烟者；叁期吸烟者CD3+ T细胞水平低于不吸烟者，且CD3+CD4+/CD3+CD8+ T细胞比值升高（P＜0.05）。结论　IL-17是参与矽肺肺间质炎症的细胞因子，吸烟会增加矽肺患者IL-17的表达，影响T淋巴细胞水平，存在诱发患者肺间质炎症及抑制细胞免疫功能的可能。     

60例矽肺患者肺功能10年跟踪研究

目的探讨矽肺患者肺功能动态变化特点.方法选择某钢铁厂已确诊的60例矽肺患者,对其肺功能进行了10年动态研究,用常规方法测定肺功能.结果Ⅰ期与Ⅱ、Ⅲ期组VC、FVC、FEV1均为进行性下降、FEV1/FVC均增加,且除Ⅱ、Ⅲ期组FEV1（P＞0.05）外差异皆有显著性（P＜0.01或0.05）.Ⅱ、Ⅲ期组患者VC、FVC、FEV1实测值的年平均下降值皆高于Ⅰ期组,但差异无显著性（P＞0.05）.1994年与1984年相比,60例矽肺患者通气功能障碍类型的构成比差异有显著性（P＜0.01）.总的趋势是通气功能正常的比例减少,限制性与混合性通气功能障碍皆增加,即由通气功能正常、阻塞性通气功能障碍向限制性与混合性通气功能障碍转变.呼吸困难越严重,其VC、FVC、FEVl值下降越大.结论矽肺患者肺功能的损伤逐年加重,通气功能障碍类型也发生变化.     

矽肺患者肿瘤坏死因子、超氧化物歧化酶、T淋巴细胞亚群检测与石棉肺对比研究

近年来,细胞因子及自由基损害所致矽肺纤维化的实验研究较多。我们检测了临床矽肺患者的肿瘤坏死因子（ＴＮＦα）、红细胞超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、Ｔ淋巴细胞亚群ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ４／ＣＤ８的改变,并与石棉肺患者进行对照研究。一、对象与方法１．对象：矽肺患者４６例、石棉肺患者１６例及不接触有毒有害物的健康人１６例,分为以下几组：（１）高矽组：接触石英（游离ＳｉＯ２＞９５％）的矽肺患者１８（男２、女１６）例,其中Ⅰ期１０例、Ⅱ期５例、Ⅲ期３例;工龄（４．３±６．１）年,年龄（６４．１±５．４）岁。（２…     

矽肺合并肺部感染全身细胞因子水平分析

目的:探讨细胞因子谱在老年矽肺合并下呼吸道感染患者体内水平变化及其临床意义。方法:于2019年10月,采取回顾性研究,选取徐州矿务集团总医院收治的老年矽肺患者167例为调查对象,分为矽肺伴下呼吸道感染患者115例作为感染组,其中Ⅰ期矽肺41例,Ⅱ期矽肺38例,Ⅲ期矽肺36例;矽肺不伴下呼吸道感染患者52例作为不感染组;...     

矽肺患者肺功能分析

目的探讨矽肺患者肺功能受损情况。方法对57例矽肺患者最大肺活量（VCmax）,用力肺活量（FVC）,1秒时间用力呼出量（FEV1）,1秒时间用力呼出量与用力肺活量之比（FEV1／FVC）,最大呼气中期流速（MMEF）,25％、50％、75％肺量时的最大呼气流量（V25、V50、V75）,肺总量（TLC）,残气量（RV）,残总比（RV／TLC）,肺弥散量（DLCO）等肺功能指标进行测定分析。结果I期与Ⅱ期矽肺患者肺功能损伤以混合型为主,且I期矽肺患者FEV1％、FEV1／FVC、V25、V50、MMEF测定值与Ⅱ期矽肺患者比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论矽肺患者肺功能损伤明显,且随矽肺期别增加而加重,损伤类型以混合为主。Ⅱ期矽肺患者大、小气道的阻塞较I期矽肺病人加重。     

62例矽肺患者肺通气功能分析

[目的]探讨矽肺患者肺通气功能的损害情况。[方法]对62例矽肺和70例X射线胸片正常的接尘工人做肺通气测量并进行比较。[结果]各期矽肺的用力肺活量（FVC）、第1秒用力呼气容积（FEV1．0）,FEV1.0／FVC百分比,呼气中期流量（FEF25％～75％）、最大通气量（MVV）均低于对照组。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期矽肺的肺通气功能异常率分别为71．4％、84．6％和100％,高于对照组;矽肺伴有并发症者各项肺功能指标均下降。[结论]Ⅰ期矽肺者肺通气功能损害以阻塞型为主,Ⅱ、Ⅲ期患者肺通气损害以混合型为主。各期矽肺患者肺通气功能损害明显,肺通气功能随矽肺期别的升高而降低。     

瓜芪合剂治疗矽肺的临床研究

矽肺是我国最主要的职业病,至今尚无特效治疗方法。我们采用自制的天然中药瓜芪合剂治疗矽肺36例,经临床严密观察,有较好的疗效,无明显不良反应,现报告如下。一、对象与方法1.对象:病例为自1997年1月～1998年6月来我院就诊的经青岛市职业病诊断组诊断的72例无肺结核、无肺心病、年龄在71岁以下的矽肺患者,随机分成治疗组与对照组。治疗组36例,矽肺期别:Ⅰ期22例、Ⅱ期13例、Ⅲ期1例,其中快进型11例、缓进型15例、稳定型10例。年龄27～71岁,平均52岁,男性14例、女性22例,平均接尘工龄18年。对照组36例,矽肺期别:Ⅰ期19例、Ⅱ期15例、Ⅲ期2例,…     

江苏省非煤矿山行业矽肺发病情况分析

目的 收集2006 - 2017年江苏省非煤矿山行业相关信息及其职工患病情况,归纳总结矽肺发病特征,为今后我省非煤矿山职业安全管理体系的建设提供参考。方法 通过江苏省职业病危害申报和职业病网报系统收集相关行业信息及矽肺患者资料,采用SPSS 19.0软件进行数据的统计分析,计量资料经正态性检验符合正态分布者以（ x±s）描述,计量资料的组间比较采用单因素方差分析,方差分析后若差异有统计学意义,则进一步采用SNK - q检验进行两两比较。结果 我省非煤矿山行业111家企业以微型（89.19%）、私有经济（82.88%）、非金属矿采选业（91.89%）为主,其职业病危害风险分类多为严重（82.88%）;2017年非煤矿山企业开展职业健康检查率约27.93%;患者尘肺期别多为壹期（64.15%）,尤以非金属矿采选业患者最多（81.22%）;确诊的矽肺患者212例中,不同期别矽肺患者的平均确诊年龄和平均发病潜伏期间均有统计学意义（P＜0.05）;叁期患者确诊年龄（54.92±6.50）岁小于壹期（59.59±10.27）岁、叁期发病潜伏期（23.13±12.48）年低于壹期（33.47±12.74）年和贰期（29.76±15.62）年（P＜0.05）。结论 需重视非金属矿采选业的职业危害及叁期矽肺患者的健康状况,企业对接尘职工职业健康监护的重视度仍需进一步提高。     

矽肺细胞免疫系统损伤与肺功能相关性分析

目的探讨矽肺发病机理中的细胞免疫损伤及其对矽肺患者肺功能的影响。方法应用免疫组化法观察30例矽肺患者及29例健康正常人CD3、CD4、CD8的分布状况,并研究CD3、CD4、CD8细胞亚群与肺功能的相关性。结果各期矽肺患者CD3、CD4、CD8细胞较正常组均有明显改变,CD4减低（P〈0.05）,CD4/CD8减低,两组之间差异具有统计学意义（P〈0.01）;CD3的改变与肺弥散功能成正相关（r=0.68）。结论各亚型淋巴细胞参与了矽肺患者免疫损伤,其细胞免疫损伤直接导致肺弥散功能的改变,符合矽肺的病理生理改变。     

龙岩市养路工人矽肺发病30年跟踪调查分析

目的探讨养路工人矽肺发生、发展规律,为制定相应的防治措施提供科学依据。方法对1980～2009年龙岩市公路局养路工人矽肺发病普查资料进行分析。结果 1980～2009年的10次普查合计体检6 617人次,累计检出新发Ⅰ期矽肺患者90例,平均检出率为1.36%;肺结核患者平均检出率为1.86%。检出的90例矽肺患者,发病年龄为（50.25±9.57）岁,发病工龄为（23.07±8.19）年;I期晋级为Ⅱ期13例,晋级期年限为（9.12±4.09）年;合并肺结核的7例,占7.78%。30年中,养路工矽肺发病率为13.29%（90/677）,其中18.89%死亡。结论尘肺病严重危害着养路工人的健康和生命。     

不同期别矽肺患者肺灌洗液中过氧化物还原酶6表达差异

  目的  分析不同期别矽肺患者肺灌洗液中的过氧化物还原酶6（PRDX6）表达量的差异。
  方法  以尘肺病患者的肺灌洗液为研究对象,以具有可比性的非矽肺男性患者正常肺段的支气管的肺灌洗液为对照。采用Western blot方法检测不同组别PRDX6蛋白表达水平的差异。
  结果  PRDX6蛋白在对照组和矽肺不同期别患者肺灌洗液中均有表达。随着肺纤维化程度增加,PRDX6蛋白在矽肺患者肺灌洗液中表达量逐渐升高,对照组、壹期矽肺、贰期矽肺、叁期矽肺各组灰度值分别为0.536 7±0.066 6、0.567 8±0.072 8、0.713 3±0.080 8、0.785 6±0.097 6,且差异有统计学意义（P < 0.05）,其中贰期矽肺和叁期矽肺患者的PRDX6表达量高于对照组和壹期矽肺患者（P < 0.05）。
  结论  PRDX6蛋白可能在矽肺发生发展过程中发挥重要的作用,对于防治矽肺具有重要意义。
     

矽肺患者肺泡巨噬细胞培养上清对人胚肺成纤维细胞c-myc基因表达的影响

目的 探讨矽肺患者肺泡巨噬细胞(AM)培养上清对人胚肺成纤维细胞(HEFB)c-myc基因表达的影响.方法 AM分为加尘组(SiO2,30μg/ml)和对照组,培养1、2、6、12、24和36 h,收集培养上清.Ⅲ代HEFB用质量分数为0.5%的血清培养液培养48 h使大部分细胞处于静止期后,加人SiO2刺激6 h的AM培养上清(S6组),用反转录一聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot方法观察c-mycmRNA和蛋白的时程变化.然后将各组AM上清与静止状态的HEFB孵育2和7 h,观察c-myc mRNA和蛋白表达的变化.结果 HEFB在静止状态时c-myc mRNA和蛋白的表达为0,在对照组中,培养不同时间的AM上清刺激了c-myc mRNA及蛋白的表达,以AM培养12 h的卜清作用最明显,比值分别为0.749±0.088和0.759±0.101.加尘组中各上清也刺激了c-myc mRNA和蛋白的表达,但作用高峰提前,以SiO2刺激6 h的上清作用最明显,比值分别0.982±0.147和0.978±0.141.与同期对照相比,SiO2刺激1、2和6 h的AM上清诱导mRNA和蛋白表达增多,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论 SiO2激活的AM培养上清可促进HEFB c-myc基因的表达.     

煤工尘肺患者血清中基质金属蛋白酶-9及其抑制因子水平的变化

目的 探讨煤工尘肺患者血清中基质金属蛋白酶(MMP-9)及基质金属蛋白酶抑制剂(TIMP-9)水平的变化及意义.方法 采用双抗体夹心ELISA法检测188例煤工尘肺(煤肺组53例,煤矽肺组67例,矽肺组68例)、57例0期(0~+期组)、64例接尘对照组和50例健康对照组血清中MMP-9及TIMP-9含量;分析血清中MMP-9和TIMP-9水平在各煤工尘肺组及各对照组间的变化,以及二者的相关性;并根据煤工尘肺期别、是否有并发症以及接尘年限等因素进行分析.结果 煤肺组血清中MMP-9水平为17.16 ng/ml、煤矽肺组为15.14ng/ml,矽肺组为17.50 ng/ml,与健康对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)与接尘对照组、0~+组比较,均呈降低趋势,其中矽肺组及煤矽肺组差异有统计学意义(P<0.05).3组煤工尘肺患者血清中MMP-9水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);煤肺组、煤矽肺组和矽肺组血清中TIMP-9水平分别为(330.00±108.42),(312.044±120.09),(366.81±135.50)ng/ml,均低于健康对照组,其中矽肺组和煤肺组血清中TIMP-9水平较接尘对照组、1~+组明显增高,差异有统计学意义(P<0.05),3组煤工尘肺组间比较,矽肺组血清中TIMP-9水平较煤矽肺组升高,差异有统计学意义(P<0.05).3组煤工尘肺患者血清中MMP-9和TIMP-9水平按不同的疾病分期、是否有并发症以及接尘年限进行分析,差异均无统计学意义(P>0.05);矽肺组血清中TIMP-9水平与年龄呈正相关(r=0.249,P<0.05),血清中MMP-9和TIMP-9水平在接尘对照组中呈正相关(r=0.294,P<0.05),其他组中未发现相关性.结论 血清中MMP-9与TIMP-9水平变化与粉尘对机体的损害程度有关,MMP-9与TIMP-9共同参与了煤工尘肺的病理生理过程;动态观察0~+期及健康煤矿工人血清中MMP-9和TIMP-9水平,可为煤工尘肺的预防及早期诊断提供参考.     

淮北矿区煤矿工尘肺发病及现况的调查

目的　探讨煤矿工尘肺发病年龄、接尘工龄、晋期年限、尘肺合并结核状况及影响尘肺预后的有关因素。方法　对淮北矿区40年来确诊的4421例尘肺患者(死亡1011例、现患3410例)的基本状况及发病、晋期、合并肺结核、死亡原因等资料建立数据库,按全国尘肺流行病学调查设计方案进行现况调查。结果　(1)淮北矿区40年来,Ⅰ期尘肺患者平均接尘时间为(22.40±2.08)年,平均发病年龄为(47.31±2.96)岁。尘肺种类以煤工尘肺(2780例)最多,占62.9%;矽肺(1590例)居第二位,占36.0%。(2)尘肺平均晋期年限Ⅰ期→Ⅱ期8.02年;Ⅱ期→Ⅲ期8.65年。(3)尘肺合并结核703例,占尘肺总例数的15.9%(703/4421)。尘肺结核的病死率(44.4%)远较单纯尘肺的(18.8%)为高。(4)尘肺前三位死因分别是肺结核、肺癌、肺心病。结论　随作业条件的改善,尘肺患者的平均发病年龄逐年增高、发病工龄逐年延长。尘肺并发症严重影响尘肺患者的身体健康。     

应用iTRAQ技术对动式染尘矽肺大鼠肺组织差异蛋白的定量分析

  目的   筛选动式染尘矽肺大鼠肺组织差异蛋白并在动物体内及体外中验证,以期为矽肺早期诊断及相关机制研究提供新思路。   方法   构建动式染尘矽肺大鼠动物模型,采用同位素标记相对和绝对定量（isobaric tags for relative and absolute quantification,iTRAQ）技术联合液相色谱-串联质谱（liquid chromatography-trandem mass spectrometry,LC-MS/MS）技术筛选肺组织中的差异蛋白。免疫印迹试验检测差异蛋白在动物模型肺组织和SiO₂诱导的小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞中的表达。   结果   共得到471个差异蛋白,其中252个上调蛋白,219个下调蛋白。差异倍数>1.5,共有28种差异表达蛋白,其中上调差异蛋白20种。在动物模型肺组织及SiO₂诱导的小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞中Factor B、PTPN2、VRK1和MOT4蛋白表达上调,差异均具有统计学意义（均有P < 0.05）。   结论   差异蛋白Factor B、PTPN2、VRK1和MOT4蛋白可能是矽肺纤维化进程中的关键蛋白,为矽肺纤维化的研究提供了新靶点。     

矽肺肺泡巨噬细胞对肺成纤维细胞基质金属蛋白酶及其抑制因子和胶原表达的影响

目的 探讨经SiO2刺激的肺泡巨噬细胞(AM)通过人胚肺成纤维细胞(HELF)对基质金属蛋白酶-1(MMP-1)及其抑制因子(TIMP-1)和Ⅲ型胶原表达的影响.方法 收集矽肺患者AM,将其分为加入SiO2粉尘悬液的处理组和仅加入无血清培养液的对照组.培养18 h后吸出培养上清.将原代培养的HELF分为4组:(1)处理组:加入经SiO2刺激的AM上清;(2)对照组:加人未经SiO2刺激的AM上清;(3)10%血清组:仅加入含体积分数为10%胎牛血清的DMEM;(4)空白对照组:仅加入含体积分数为3%胎牛血清的DMEM.4组均分别于6、12、18、24、36、48 h取出细胞爬片,吸出上清,用免疫细胞化学方法 检测HELF中MMP-1和TIMP-1的表达,用Western blot法检测HELF条件培养上清中Ⅲ型胶原的表达.结果 处理组18、24、36、48 h MMP-1表达分别为0.0605±0.0201,0.0519±0.0117,0.0412±0.0105,0.0213±0.0106,较对照组和空白对照组明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01).与对照组和空白对照组相比,处理组各时间点TIMP-1表达和Ⅲ型胶原含量明显增高,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01),TIMP-1/MMP-1与Ⅲ型胶原呈正相关(r=0.88,P<0.01).结论 SiO2经AM的介导可促进FB表达TIMP-1和Ⅲ型胶原,抑制HELF表达TIMP-1,TIMP-1/MMP-1的失衡与Ⅲ型胶原的病理性累积有关.     

SB431542对矽肺纤维化大鼠肺组织α-SMA和E-cadherin表达的影响

目的 探讨转化生长因子β（TGF-β）特异性受体抑制剂SB431542对矽肺纤维化大鼠肺组织中α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和钙黏蛋白（E-cadherin）表达的影响及其机制的研究。方法 40只健康雄性SD大鼠随机分为4组,每组10只。依次为:生理盐水对照组,矽肺模型组,SB431542抑制剂组和SB431542抑制剂对照组。除生理盐水对照组外,其余三组采用非暴露气管注入法一次性气管内注入游离二氧化硅（SiO2）粉尘50 mg,生理盐水对照组大鼠注入等量的生理盐水。SB431542抑制剂组于染尘第7、30天腹腔注射（5 mg/kg）SB431542,SB431542抑制剂对照组采用同样的方式注入等量的抑制剂助溶剂。染尘60天后取材,苏木素-伊红（HE）染色镜下观察肺组织的形态改变,实时荧光定量PCR（Realtime qPCR）法检测肺组织中α-SMA和E-cadherin mRNA表达水平,蛋白免疫印记（Western blot）法检测肺组织中α-SMA和E-cadherin蛋白表达水平。各组间基因和蛋白表达水平比较采用单因素方差分析（ANOVA）,组间两两比较采用SNK法,α-SMA和E-cadherin的相关性分析采用Spearman秩相关检验。结果 qRCR与Western blot结果显示,各组大鼠肺组织α-SMA基因和蛋白表达水平有所改变（F=7.632,P=0.001;F=39.098,P=0.002）;E-cadherin mRNA和蛋白表达水平均发生改变（F=3.751,P=0.024;F=9.014,P=0.03）。与生理盐水对照组相比,模型组大鼠肺组织有结节状结构,部分肺间质纤维化,呈肺气肿样改变,肺组织中α-SMA mRNA和蛋白表达水平升高,E-cadherin mRNA和蛋白表达量降低,差异均有统计学意义（P<0.05）;与SB431542抑制剂组比较,SB431542抑制剂对照组肺组织有结节状改变,肺泡腔扩张,腔内有少量渗出物,肺组织中α-SMA mRNA和蛋白表达水平升高,E-cadherin mRNA和蛋白表达量降低,差异均有统计学意义（P<0.05）;模型组与SB431542抑制剂对照组比较,基因和蛋白表达水平均无统计学差异（P>0.05）。相关性检验结果显示,α-SMA和E-cadherin mRNA和蛋白表达水平均呈现负相关,差异均有统计学意义（r=-0.452,P=0.016;r=-0.738,P=0.037）。结论 SB431542可通过阻断TGF-β与其受体结合,抑制α-SMA mRNA和蛋白表达,促进E-cadherin mRNA和蛋白表达,从而干预纤维化的进展。     

血红素加氧酶-1在大鼠矽肺纤维化中的作用

目的观察血红素加氧酶-1在大鼠矽肺纤维化中的作用。方法 Wistar大鼠60只,随机分为4组,分别为对照组(A组)和染尘模型组(B组)、B组+HO-1抑制剂(锌原卟啉)组(C组)、B组+HO-1诱导剂(钴原卟啉)组(D组)。采用气管暴露法滴注二氧化硅悬液制造大鼠矽肺模型。C、D组分别腹腔注射锌原卟啉12.5 mg/kg、钴原卟啉5 mg/kg,隔日一次,连续4周后,取肺,HE染色观察各组肺组织病理结构,Western blot检测各组肺组织HO-1蛋白含量,荧光定量PCR检测各组肺组织HO-1mRNA的表达。结果与对照组比较,B组出现典型的矽肺纤维化的病理改变,C组较B组加重,D组较B组改善;对照组中HO-1蛋白表达明显低于其他各组(P0.05),抑制剂C组较B组HO-1蛋白表达明显降低,而诱导剂D组较B组HO-1蛋白表达量明显升高(P0.05)。RT-PCR检测A、B、C、D组HO-1 mRNA相对表达量分别为1、2.25±0.38、1.81±0.74、7.75±0.56,抑制剂C组较B组表达明显降低,而诱导剂D组较B组表达显著升高(P0.05)。结论 HO-1参与了大鼠矽肺纤维化的形成过程,通过对其干预可以改变大鼠矽肺纤维化的程度,可为矽肺纤维化的诊断与治疗提供新途径。     

超氧化物歧化酶复合酶对尘肺患者肺泡巨噬细胞Fas/FasL信号转导及细胞凋亡的调控作用

目的 探讨超氧化物歧化酶(SOD)复合酶对尘肺患者肺泡巨噬细胞(AM)Fas/FasL信号转导及细胞凋亡的调控作用,为尘肺的早期防治提供依据.方法 收集在某专科医院进行大容量双肺灌洗治疗的0+接尘工人、Ⅰ期、Ⅱ期尘肺患者(共50例)的肺泡灌洗液中的细胞成分,将每例的AM分为非处理组、SOD组、Fas/FasL组.分别取5×106个细胞于DMEM中纯化培养2 h,3组均换新的DMEM,SOD组加SOD复合酶200 U/ml、Fas/FasL组加抗肿瘤坏死因子α((TNF-α)抗体50 ng/ml、抗-TRAIL抗体200 ng/ml后继续培养24 h.取1×106个AM进行细胞裂解,用western blot方法检测Fas、FasL、Caspases-8、Caspases-3蛋白表达,用quantity one 7.0图像分析软件测定各蛋白的相对含量.采用末端脱氧核酸转移酶(TdT)介导的duTP缺口末端标记技术(TFUNEL)检测AM凋亡情况;琼脂糖凝胶电泳法定性检测AM DNA片断化.结果 SOD组、Fas/FasL组凋亡指数分别为(9.50±2.76)%和(14.01±2.56)%,均低于未处理组[(19.18±2.83)%],差异有统计学意义(P＜0.05);未处理组呈现细胞凋亡的特征性DNA梯状带,Fas/FasL组梯状带隐约可见,SOD组未见特征性梯状带.SOD组Ⅰ期、Ⅱ期尘肺患者的Fas、FasL、Caspase-8、Caspase-3蛋白表达水平均低于未处理组和Fas/FasL组,差异有统计学意义(P＜0.05).不同处理组各期尘肺的AM Fas、FasL、Caspase-8、Caspase-3的蛋白表达水平差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 SOD复合酶可下调Fas/FasL系统的Fas、FasL、Caspase-8、Caspase-3的蛋白表达水平,抑制AM的凋亡.     

二氧化硅刺激矽肺肺泡巨噬细胞上清介导的人胚肺成纤维细胞Ⅲ型胶原和Ⅲ型前胶原的表达

目的 探讨经SiO2刺激的肺泡巨噬细胞(AM)通过人胚肺成纤维细胞(HELF)对Ⅲ型胶原(CⅢ)和Ⅲ型前胶原(pCⅢ)表达的影响及抗TGF-β1抗体的干预作用.方法 收集矽肺患者AM,将其分为加入SiO2粉尘悬液的处理组和仅加入无血清培养液的对照组.培养18 h后获取培养上清.将原代培养的HELF分为:(1)处理组:加入经SiO2刺激的AM上清;(2)对照组:加入未经SiO2刺激的AM上清;(3)空白对照组:仅加入含体积分数为3%胎牛血清的DMEM;(4)处理组+抗转化生长因子β1(TGF-β1)抗体干预组:在处理组的基础上加上抗TGF-β1抗体(10 μg/ml);(5)对照组+抗TGF-β1抗体干预组:在对照组的基础上加上抗TGF-β1抗体(10 μg/ml).前3组分别培养6、12、18、24、36、48 h,后2组分别培养18、24、36 h,用免疫细胞化学法检测HELF中pCⅢ的表达,用免疫印迹(Western blot)法检测HELF条件培养上清中CⅢ的表达.结果 与对照组(0.1212±0.0079、0.1414±0.0058、0.1620±0.0081、0.1965±0.0103、0.1715±0.0116)相比,处理组12、18、24、36和48 h pCⅢ表达(0.1423±0.0107,0.1624±0.0011,0.1925±0.0056,0.2421±0.0097,0.2102±0.0103)明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).与对照组(0.2296±0.0121、0.2778±0.0116、0.3367±0.0269、0.3722±0.0214)相比,处理组12、18、24、36、48 hCⅢ含量(0.2559±0.0061、0.3249±0.0110、0.4171±0.0193、0.5441±0.0452、0.4751±0.0252)明显增高,差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).与同期相对应的非干预组相比,18、24、36 h抗TGF-β1抗体干预组CⅢ和pCⅢ均明显降低,差异均有统计学意义(P＜0.01或P＜0.05).结论 SiO2经AM的介导,诱导HELF高表达CⅢ和pCⅢ,部分效应是通过TGF-β1起作用.

Abstract：

Objective To study the effects of supernatant of alveolar macrophages (AM) exposed to SiO2 on the expression of type Ⅲ collagen and type Ⅲ procollagen in human lung fibroblasts (HELF) and the intervention effects of anti-TGF-β1 antibody Methods AMs collected from a silicotic by bronchoalveolar lavage were divided into 2 parts, one part was exposed to SiO2 and other part served as control. The supernatant was obtained from AMs cultured for 18 h. HELF were divided into (1) exposure group, which was added with supernatant from AMs exposed to SiO2; (2) control group, which was added with the supernatant from AMs not exposed to SiO2; (3) blank control group, which was added with DMEM; (4) exposure group plus anti-TGF-β1antibody (10μg/ml); (5) control group plus anti-TGF-β1 antibody (10 μg/ml). (1)-(3) groups were cultured for 6, 12, 18, 24, 36, 48h, respectively. (4)-(5) groups were cultured for 18, 24, 36, respectively.Immunocytochemical test and Western blot assay were used to detect pC Ⅲ expression levels in HELF and C Ⅲ expression levels in the supernatant of HELF culture, respectively. Results The pC Ⅲ expression levels of exposure group were 0.1423 ±0.0107,0.1624±0.0011,0.1925 ±0.0050,0.2421 ±0.0097 and 0.2103 ±0.0103,respectively, which were significantly higher than those (0.1212±0.0079、0.1414±0.0058、0.1620±0.0081、0.1965±0.0103 、0.1715±0.0116) of control group (P＜0.05 or P＜0.01). The C Ⅲ levels of exposure group were (0.2559±0.0061、0.3249±0.0110、0.4171±0.0193、0.5441 ±0.0452、0.4751±0.0252), respectively, which were significantly higher than control group (0.2296±0.0121、0.2778±0.0116、0.3367±0.0269、0.3722±0.0214). The pC Ⅲ and C Ⅲ expression levels of exposure plus anti-TGF-β1 antibody group were significantly lower than those of control plus anti-TGF-β1 antibody group (P＜0.05 or P＜0.01).Conclusion AMs exposed to SiO2 can induce the elevated pC Ⅲ and C Ⅲ expression levels in HELF by TGF-β 1 to some extent.