沉默 HOXA11-AS 靶向 miR-766-3p 对 ox-LDL 诱导的血管内皮细胞损伤的影响

目的 探讨长链非编码 RNA (lncRNA) 同源异形盒基因 A11 反义 RNA (HOXA11-AS) 靶向微小 RNA-766-3p (miR-766-3p) 对氧化低密度脂蛋白 ( ox-LDL) 诱导的血管内皮细胞损伤的影响。 方法 以 100 μg / mL 的 ox-LDL 处理人脐静脉血管内皮细胞 (human umbilical vein endothelial cell, HUVEC) 24 h 建立 细胞损伤模型。 将 HUVEC 分为对照 (con) 组、 ox-LDL 组、 ox-LDL + si-NC 组、 ox-LDL + si-HOXA11-AS 组、 ox-LDL + miR-NC 组、 ox-LDL + miR-766-3p 组、 ox-LDL + si-HOXA11-AS + anti-miR-NC 组、 ox-LDL + si-HOXA11-AS + anti-miR-766-3p 组。 RT-qPCR 检测 HOXA11-AS 和 miR-766-3p 表达。 流式细胞术分析细胞凋亡。 试剂盒检测 LDH 释放量、 胞内 SOD 活性。 ELISA 法检测培养液中 TNF-α、 IL-1β 水平。 双荧光素酶报告实 验确定 HOXA11-AS 和 miR-766-3p 的靶向关系。 结果 与 con 组比较, ox-LDL 组 HUVEC 细胞凋亡率、 LDH 释放量、 HOXA11-AS 表达量以及培养液中 TNF-α、 IL-1β 水平显著升高 (P< 0. 05), SOD 活性、 miR-766-3p 表达量显著降低 (P< 0. 05)。 与 ox-LDL + si-NC 组比较, ox-LDL + si-HOXA11-AS 组 HUVEC 细胞凋亡率、 LDH 释放量以及培养液中 TNF-α、 IL-1β 水平显著降低 (P< 0. 05), SOD 活性显著升高 (P< 0. 05)。 与 ox-LDL + miR-NC 组比较, ox-LDL + miR-766-3p 组 HUVEC 细胞凋亡率、 LDH 释放量以及培养液中 TNF-α、 IL-1β 水平显著降低 (P< 0. 05), SOD 活性显著升高 (P< 0. 05)。 miR-766-3p 是 HOXA11-AS 的直接靶点。 与 ox-LDL + si-HOXA11-AS + anti-miR-NC 组比较, ox-LDL + si-HOXA11-AS + anti-miR-766-3p 组 HUVEC 细胞凋亡 率、 LDH 释放量以及培养液中 TNF-α、 IL-1β 水平显著升高 (P< 0. 05), SOD 活性显著降低 (P< 0. 05)。 结论 沉默 HOXA11-AS 通过靶向上调 miR-766-3p 表达能够抑制 ox-LDL 诱导的血管内皮细胞凋亡、 氧化应 激和炎性反应。     

干扰HOXA9基因表达对BTT739细胞增殖、迁移和侵袭的影响北大核心CSCD

目的探讨同源盒基因HOXA9表达对小鼠膀胱尿路上皮癌细胞系BTT739细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法免疫组化检测膀胱尿路上皮癌以及癌旁正常组织临床标本中HOXA9基因的表达情况;采用sh-RNA技术干扰BTT739细胞中HOXA9基因的表达后,进行克隆形成、CCK8、流式细胞术、Transwell和划痕等实验检测BTT739细胞增殖、凋亡、迁移以及侵袭等生物学特性的变化,并通过Western blot检测上皮间质转化(epithelial to mesenchymal transition,EMT)特征因子E-cadherin、Vi⁃mentin和Snail的表达。结果膀胱尿路上皮癌组织中HOXA9基因的表达高于癌旁正常组织。sh-RNA敲低BTT739细胞中的HOXA9基因后,细胞增殖、迁移和侵袭能力显著下降,而细胞早期凋亡百分率增高,G1、G2期比例下降,S期升高;此外,EMT特征因子E-cadherin表达增强,Vimentin和Snail的表达下降。结论HOXA9基因具有促进小鼠膀胱尿路上皮癌细胞系BTT739细胞增殖、迁移和侵袭能力的作用,是膀胱尿路上皮癌潜在的免疫治疗靶点,其机制可能涉及EMT机制。     

lncRNA DNAJC3-AS1/miR-3619-5p轴影响脑胶质瘤细胞迁移、侵袭和上皮-间质转化的分子机制研究北大核心CSCD

目的:探讨lncRNA DNAJC3-AS1对胶质瘤细胞迁移、侵袭和上皮-间质转化(EMT)的影响及可能机制。方法:收集34例脑胶质瘤组织和34例因外伤行颅内减压术患者的正常脑组织,体外培养正常神经胶质细胞HEB及胶质瘤细胞系LN18、SW1088和Hs683。RT-qPCR检测组织及细胞中lncRNA DNAJC3-AS1与miR-3619-5p表达量。以胶质瘤LN18细胞为研究对象,分别转染lncRNA DNAJC3-AS1小干扰RNA、miR-3619-5p模拟物或共转染lncRNA DNAJC3-AS1小干扰RNA与miR-3619-5p抑制剂,Transwell检测细胞迁移和侵袭,Western blot检测细胞中EMT相关蛋白E-cadherin、N-cadherin和Vimentin表达。双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA DNAJC3-AS1与miR-3619-5p的调控关系。结果:脑胶质瘤组织中lncRNA DNAJC3-AS1表达明显高于正常脑组织(P<0.05),而miR-3619-5p表达明显低于正常脑组织(P<0.05)。与HEB细胞相比,胶质瘤细胞系中lncRNA DNAJC3-AS1表达升高(P<0.05),miR-3619-5p表达降低(P<0.05)。下调lncRNA DNAJC3-AS1或上调miR-3619-5p后,LN18细胞迁移数、侵袭数及细胞中N-cadherin和Vimentin蛋白表达降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05)。lncRNA DNAJC3-AS1可靶向负调控miR-3619-5p,下调miR-3619-5p可逆转下调lncRNA DNAJC3-AS1对LN18细胞迁移、侵袭及EMT的影响。结论:lncRNA DNAJC3-AS1在胶质瘤组织及细胞系中呈高表达,下调其表达可能通过靶向上调miR-3619-5p阻碍胶质瘤细胞迁移、侵袭及EMT过程,其可能成为胶质瘤治疗的分子靶点。     

膀胱尿路上皮癌伴鳞状分化中DSG3、MAC387及p40的表达及其临床意义

目的探讨DSG3、MAC387及p40在膀胱尿路上皮癌伴鳞状分化中的表达及其在诊断和鉴别诊断中的意义。方法对18例膀胱尿路上皮癌伴鳞状分化进行常规形态学观察和免疫组化EnVision两步法染色,另收集12例膀胱鳞状细胞癌和15例普通膀胱尿路上皮癌作为对照分析。结果 DSG3、MAC387及p40在膀胱尿路上皮癌伴鳞状分化中的表达分别为15例(83%)、17例(94%)和17例(94%),在膀胱鳞状细胞癌中的表达分别为11例(92%)、12例(100%)和12例(100%),在普通膀胱尿路上皮癌中的表达分别为2例(13%)、4例(27%)和12例(80%)。结论 DSG3和MAC387在膀胱尿路上皮癌伴鳞状分化中的表达有较高的敏感性和特异性。     

lncRNA PSMA3-AS1 靶向 miR-3619-5p 调控宫颈癌 SiHa 细胞增殖、迁移及侵袭的分子机制研究

目的 探讨 lncRNA PSMA3-AS1 调控宫颈癌细胞增殖、 迁移及侵袭的分子机制。 方法 收集 2020 年 3 月至 2021 年 6 月西安医学院第二附属医院收治的 42 例宫颈癌患者的癌组织及其癌旁组织标本, 采用 qRT-PCR 法检测宫颈癌组织、 癌旁组织、 人宫颈上皮永生化细胞 H8、 与人宫颈癌细胞系 SiHa、 HeLa、 Caski 中 lncRNA PSMA3-AS1、 miR-3619-5p 的表达量; 以 SiHa 细胞为研究对象, 分组为: si-NC 组、 si-lncRNA PSMA3-AS1 组、 miR-NC 组、 miR-3619-5p 组、 anti-miR-NC + si-lncRNA PSMA3-AS1 组、 anti-miR-3619-5p + si-lncRNA PSMA3-AS1 组; MTT 法与 Transwells 实验分别检测每组 SiHa 细胞的增殖活力、 迁移及侵袭能力; 双 荧光素酶报告实验检测 miR-3619-5p 过表达对野生型载体 lncRNA PSMA3-AS1-WT、 突变型载体 lncRNA PSMA3-AS1-MUT 荧光素酶活性的影响; Western 印迹检测 MMP2、 MMP9 蛋白表达量。 结果 宫颈癌组织中 lncRNA PSMA3-AS1 的表达量比癌旁组织增加 ( P < 0. 01), miR-3619-5p 的表达量比癌旁组织减少 ( P < 0. 01); 与 H8 细胞比较, SiHa、 HeLa、 Caski 细胞中 lncRNA PSMA3-AS1 的表达量升高 (P< 0. 01), miR-3619-5p 的表达量降低 (P< 0. 01); 与 si-NC 组比较, si-lncRNA PSMA3-AS1 组细胞活力和 MMP2、 MMP9 蛋 白水平降低 (P< 0. 05), 迁移及侵袭细胞数减少 (P< 0. 05); 与 miR-NC 组比较, miR-3619-5p 组细胞活力 和 MMP2、 MMP9 蛋白水平降低 (P< 0. 01), 迁移及侵袭细胞数减少 (P< 0. 05); miR-3619-5p 过表达可抑 制 lncRNA PSMA3-AS1-WT 的荧光素酶活性 (P< 0. 01), 而未能影响 lncRNA PSMA3-AS1-MUT 的荧光素酶活 性; 与 anti-miR-NC + si-lncRNA PSMA3-AS1 组比较, anti-miR-3619-5p + si-lncRNA PSMA3-AS1 组细胞活力和 MMP2、 MMP9 蛋白水平升高 (P< 0. 01), 迁移及侵袭细胞数增多 (P< 0. 01)。 结论 干扰 lncRNA PSMA3- AS1 表达可通过促进 miR-3619-5p 而降低宫颈癌细胞增殖、 迁移及侵袭能力。     

miR-27a-3p靶向HOXA5基因通过Wnt/β-catenin信号通路调控糖尿病患者创面愈合

目的:研究微小RNA-27a-3p(miR-27a-3p)对糖尿病患者创面愈合的影响及作用机制。方法:采用qPCR和Western blot检测糖尿病患者创面愈合组织中miR-27a-3p、同源异型盒基因A5(HOXA5)mRNA和HOXA5蛋白的表达。使用高糖处理人微血管内皮细胞(HMECs),模拟糖尿病HMECs的损伤。在HMECs中转染miR-27a-3p mimic或HOXA5 siRNA,并进行高糖处理,MTT法测定细胞活力,Transwell小室法检测细胞迁移和侵袭能力,Western blot法测定HOXA5、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、基质金属蛋白酶2(MMP2)、基质金属蛋白酶9(MMP9)和β-连环蛋白(β-catenin)蛋白的表达。StarBase预测结合双萤光素酶活性检测分析miR-27a-3p和HOXA5的靶向关系。在HMECs中共转染miR-27a-3p mimic和pcDNA-HOXA5,并使用高糖处理,观察其对细胞活力、迁移和侵袭能力的影响。结果:糖尿病患者创面愈合组织中miR-27a-3p的表达量明显减少,HOXA5的mRNA和蛋白表达量显著增加(P<0.05)。高糖诱导的HMECs中miR-27a-3p的表达量、细胞活力、细胞迁移和侵袭数量及cyclin D1、MMP2和MMP9的蛋白水平均显著降低(P<0.05)。高表达miR-27a-3p或低表达HOXA5明显增加高糖处理HMECs的细胞活力、迁移和侵袭能力及cyclin D1、MMP2和MMP9的蛋白表达量(P<0.05)。miR-27a-3p靶向调控HOXA5表达。高表达HOXA5可以部分消除miR-27a-3p mimic对高糖处理的HMECs活力、迁移和侵袭能力以及cyclin D1、MMP2、MMP9和β-catenin蛋白表达的影响。结论:miR-27a-3p靶向HOXA5基因,并通过Wnt/β-catenin信号通路促进高糖诱导的微血管内皮细胞生长、迁移和侵袭,从而促进糖尿病患者的创面愈合。     

长链非编码RNA NCK1-AS1作为海绵体与TCF4竞争结合miR-153-5p调节乳腺癌细胞侵袭、炎症和凋亡

目的：研究LncRNA NCK1-AS1与miR-153-5p调节转录因子4(TCF4)对乳腺癌细胞生长、运动和炎症因子的影响。方法：以乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7作为体外研究对象，将裸鼠作为体内研究对象。RT-qPCR检测组织和细胞中LncRNA NCK1-AS1、miR-153-5p和TCF4表达；TargetScan预测与双荧光素酶报告实验验证LncRNA NCK1-AS1与miR-153-5p的靶向关系；Transwell检测细胞侵袭；ELISA检测炎症因子水平；流式细胞术检测凋亡；Western blot检测TCF4、c-myc、c-jun蛋白水平；裸鼠皮下注射MDA-MB-231细胞建立移植瘤模型；免疫组化检测Caspase-3、VEGF阳性细胞百分比。结果：LncRNA NCK1及TCF4在癌组织和细胞中高表达，而miR-153-5p则低表达。与对照组比较，LncRNA NCK1-AS1干扰抑制乳腺癌细胞侵袭和炎症反应，并促进其凋亡。LncRNA NCK1-AS1与miR-153-5p存在靶向关系。与对照组相比，LncRNA NCK1-AS1干扰和miR-1...     

膀胱尿路上皮癌组织中miR-133b的表达水平与其化疗敏感性的关系分析

目的 探讨膀胱尿路上皮癌组织中miR-133b的表达水平与其化疗敏感性的关系分析.方法 回顾性分析2011年2月至2012年2月于本院确诊为膀胱尿路上皮癌患者65例,根据癌组织中miR-133b表达水平将其分为高表达组(n=25)和低表达组(n=40),采用茎环实时荧光逆转录聚合酶链反应(stem-loop real-time,RT-PCR)检测膀胱尿路上皮癌组织和癌旁正常组织中 mi R-133b的表达水平,随访5年,统计分析所有患者化疗效果、5年存活情况.结果 膀胱尿路上皮癌组织中miR-133b的表达量(U6标准化后的) 低于癌旁正常组织,差异有统计学意义(P<0.05);高表达组患者化疗有效率高于低表达组,差异有统计学意义(P<0.05);所有患者随访0.5~5年,平均随访时间3.86年,最终有45例存活5年以上,高表达组患者5年存活率(88.00%)高于低表达组(57.25%),差异有统计学意义(P<0.05);存活组患者膀胱尿路上皮癌组织中miR-133b水平高于死亡组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 与癌旁正常组织比较,膀胱尿路上皮癌组织中miR-133b呈明显低表达,且与术后化疗敏感性、预后有密切关系,有可能作为预测化疗疗效和判断预后的指标之一.     

LncRNA NR2F2-AS1靶向抑制miR-129-5p调控胶质瘤细胞增殖和凋亡的机制研究

目的研究lncRNA NR2F2-AS1和miR-129-5p在胶质瘤中的表达及其对胶质瘤U251细胞增殖和凋亡的影响。方法 qRT-PCR检测lncRNANR2F2-AS1和miR-129-5p在胶质瘤组织和细胞中表达水平,MTT法和流式细胞术检测U251细胞增殖和凋亡,Westernblot检测细胞中CyclinD1、p21、Bax和Bcl-2的蛋白表达水平,双荧光素酶报告系统验证NR2F2-AS1和miR-129-5p的调控关系。结果与正常脑组织相比,在胶质瘤组织中lncRNA NR2F2-AS1的含量显著升高(P 0.05),miR-129-5p的含量则显著下降(P 0.05);干扰NR2F2-AS1表达和过表达miR-129-5p均可抑制胶质瘤U251细胞增殖并促进细胞凋亡,使细胞中CyclinD1和Bcl-2含量降低(P 0.05),p21和Bax含量升高(P 0.05);lncRNA NR2F2-AS1靶向负调控miR-129-5p的表达;抑制miR-129-5p表达逆转了干扰NR2F2-AS1表达对U251细胞增殖、凋亡的作用。结论干扰lnc RNANR2F2-AS1通过靶向促进miR-129-5p表达抑制胶质瘤U251细胞增殖,诱导细胞凋亡。LncRNA NR2F2-AS1可能是胶质瘤的分子靶点。     

miR-21及miR-300在膀胱尿路上皮癌中的表达意义分析

目的分析膀胱尿路上皮癌中的miRNA-21及miRNA-300的差异表达,研究miRNA在该疾病中的致病机制。方法选取我院于2015年1月-2018年1月间我院收治的40例膀胱尿路上皮癌患者作为实验组,选取同期收治的20例泌尿系统良性疾病患者作为对照组,采用RT-PCR方法对两组患者血清及尿液标本中的miR-21、miR-300表达含量进行比较。结果尿路上皮癌组中的血清及尿液miR-21、miR-300表达含量明显高于良性疾病组,组间比较差异有统计学意义(P0.05),浸润性膀胱尿路上皮癌组中的血清miR-21表达含量明显高于良性疾病组(P0.05),尿液miR-21及miR-300组间比较差异无统计学意义(P0.05),高级别膀胱尿路上皮癌组中的血清及尿液miR-21、miR-300表达含量明显高于良性疾病组(P0.05)。血清及尿液中的miR-21及miR-300水平在年龄、性别之间差异均无统计学意义(P0.05)。结论 miR-21、miR-300在膀胱尿路上皮癌组织中高表达,其可能对肿瘤的发生、发展及转移有一定影响,进而为膀胱尿路上皮癌的治疗提供一个新的潜在靶点。     

Long non-coding RNA DLGAP1-AS1 promotes the progression of gastric cancer via miR-515-5p/MARK4 axis

Long non-coding RNA (lncRNA) is an essential regulator of carcinogenesis and cancer progression. In the study, we explored the role of lncRNA DLGAP1-AS1 in gastric cancer (GC). qRT-PCR was carried out to detect DLGAP1-AS1 expression in GC tissues and cell lines. CCK-8 assay, EdU assay, and transwell experiments were employed to detect the malignant biological behaviors of GC cells with DLGAP1-AS1 knockdown or overexpression. Bioinformatics and dual-luciferase report assay were used to confirm the binding relationship between DLGAP1-AS1 and miR-515-5p. MARK4 expression was detected by western blot after DLGAP1-AS1/miR-515-5p was selectively regulated. DLGAP1-AS1 was up-regulated in GC tissues and cell lines, and its high expression was closely associated with larger tumor size, higher TNM stage, and lymph node metastasis. Furthermore, DLGAP1-AS1 overexpression enhanced cell proliferation, migration, and invasion, and miR-515-5p could reverse these effects. DLGAP1-AS1 participated in the regulation of the MARK4 signaling pathway by targeting miR-515-5p. DLGAP1-AS1 promoted GC progression through miR-515-5p/MARK4 signaling pathway.     

MiR-515-5p通过调控硫酸软骨素蛋白聚糖4表达对卵巢癌A2780细胞增殖和转移的影响及其机制

目的 探讨miR-515-5p对硫酸软骨素蛋白聚糖4(CSPG4)的靶向调控作用,以及对卵巢癌细胞系A2780细胞增殖和转移的影响.方法 通过生物信息学工具预测miR-515-5p的靶基因.Real-time PCR和Western blotting法检测65例卵巢癌组织和与其对应的癌旁组织中miR-515-5p和CS...     

LncRNA NCK1-AS1 promotes non-small cell lung cancer progression via regulating miR-512-5p/p21 axis

ObjectiveThis study aimed at probing into the effect of lncRNA NCK1-AS1 on proliferation, migration and invasion of non-small cell lung cancer (NSCLC) cells and its regulatory function on miR-512-5p/p21 molecular axis.MethodsQuantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR) was used to assess the expressions of NCK1-AS1 and miR-512-5p in NSCLC tissues and cell lines. The alterations of cell proliferation, migration, invasion and cell cycle were examined by cell counting kit-8 (CCK-8) assay, BrdU experiment, Transwell experiment and flow cytometry, respectively. The dual-luciferase reporter assay and RNA immunoprecipitation experiment were performed to validate the binding relationships between miR-512-5p and NCK1-AS1, and miR-512-5p the 3'UTR of p21 mRNA. Western blot was used to determine the effects of NCK1-AS1 and miR-512-5p on p21 protein expression.ResultsNCK1-AS1 expression was up-regulated in NSCLC tissues and cells, and its high expression was correlated with shorter overall survival time and faster progression of patients. Overexpression of NCK1-AS1 promoted NSCLC cell proliferation, migration and invasion, and accelerated the cell cycle, whereas NCK1-AS1 siRNA inhibited these malignant biological behaviors, and arrested cell cycle. NCK1-AS1 could bind to miR-512-5p, p21 was verified as a target gene of miR-512-5p, and NCK1-AS1 could up-regulate the expression of p21 in NSCLC cells via repressing miR-512-5p expression.ConclusionNCK1-AS1 promotes NSCLC progression by regulating miR-512-5p/p21 molecular axis.     

Mechanism underlying the regulation of lncRNA ACTA2-AS1 on CXCL2 by absorbing miRNA-532-5p as ceRNA in the development of ovarian cancer

Objective: To explore the mechanism underlying the regulation of long non-coding RNA (LncRNA) ACTA2-AS1 on CXCL2 as a ceRNA of miR-532-5p in the progression of ovarian cancer (OC). Methods: A qRT-PCR assay was carried out for analyzing the expression changes of ACTA2-AS1, miR-532-5p, as well as CXCL2 in OC tissues and corresponding healthy paracancerous tissues HOSEpiC (human ovarian epithelial cells), and OC cells. OC cells were grouped and transfected, and the fluorescent in situ hybridization was adopted for evaluating ACTA2-AS1 in the cells. Additionally, a dual luciferase reporter (DLR) assay was carried out for verifying the correlation of ACTA2-AS1 with miR-532-5p and of miR-532-5p with CXCL2. Cells were transfected with si-ACTA2-AS1, miR-532-5p, or CXCL2 overexpression plasmids, and then the cell proliferation, invasion, and apoptosis were determined using MTT, Transwell, and flow cytometry assays, respectively. Results: Compared with paracancerous tissues and HOSEpiC cells, OC tissues and cells showed increased ACTA2-AS1 and CXCL2 expression and decreased miR-532-5p expression (all P<0.05). ACTA2-AS1 acted as ceRNA in OC by negatively regulating miR-532-5p. Additionally, upregulating ACTA2-AS1 intensified the proliferation and invasion of cancer cells and suppressed their apoptosis (all P<0.05), and inhibition of it resulted in opposite results. In contrast, overexpressing miR-532-5p suppressed the proliferation, invasion, and clone formation of the cells and promoted their apoptosis (all P<0.05). The effect of ACTA2-AS1 on OC cells can be partially reversed by overexpressing miR-532-5p. Moreover, CXCL2, positively correlated with ACTA2-AS1 in expression (P<0.0001, r=0.7385), was the target of miR-532-5p, and its overexpression could partially offset the influence of miR-532-5p on OC cells. Conclusion: LncRNA ACTA2-AS1 can act as a tumor promoter in OC by absorbing miR-532-5p as ceRNA and regulating CXCL2, and ACTA2-AS1 inhibitor is expected to play a role in targeted therapy of OC.     

Blocking lncRNA MIR155HG/miR-155-5p/-3p inhibits proliferation,invasion and migration of clear cell renal cell carcinoma

This study aimed to investigate the effect of blocking the MIR155HG/miR-155-5p/-3p axis on proliferation, invasion and migration of clear cell renal cell carcinoma. RT-qPCR was used to detect the expression of MIR155HG, miR-155-5p, miR-155-3p in clear cell renal cell carcinoma cell lines. To study the effects of blocking LncRNA MIR155HG and interfering with miR-155-5p and miR-155-3p on the biological function. The g proliferation of tumor was detected by CCK-8, and the cell invasion and migration abilities were detected by wound healing and transwell experiments. Western blot analyzed protein levels of KI67, PCNA, MMP2 and MMP9. Furthermore, TargetScan and miRDB were used to predict the co-target gene of miR-155-3p and miR-155-5p, and the functional analysis of co-target genes was performed using the DAVID. In the current research, the expression of MIR155HG was increased in ccRCC. Interference of MIR155HG inhibited the cellular functions of ccRCC cells, which was reversed by overexpression of miR-155-3p and miR-155-5p.In addition, MIR155HG interference repressed the expression of miR-155-5p and miR-155-3p in ccRCCs, while inhibition of miR-155-5p and miR-155-3p restrained the proliferation, invasion and migration of ccRCCs. Bioinformatics software analysis showed 13 co-targeting genes of miR-155-3p and miR-155-5p. Functional analysis presented that the target genes of miR-31-3p were involved in numerous of biochemical processes and pathways.Blocking lncRNA MIR155HG/miR-155-5p/-3p inhibits proliferation, invasion and migration of renal clear cell carcinoma, which provided a new method for early diagnosis and precise treatment of ccRCC.     

miRNA-451在膀胱癌细胞中的表达及对其生物学功能的影响

目的：检测微小RNA(microRNA,miRNA)在膀胱癌细胞中的表达及探讨其对膀胱癌细胞迁移、侵袭、黏附及增殖能力的影响。方法：采用实时荧光定量PCR(quantitative Real-time PCR,qPCR)检测miR-451在不同转移潜能膀胱癌细胞株T24、5637、J82中的表达;使用Lipo-2000脂质体将miR-451拟似物(miR-451 mimics)转染入5637细胞,qPCR验证其转染效率,采用划痕愈伤实验、Transwell实验、细胞黏附及MTT增殖实验分别检测细胞二维迁移、侵袭、黏附及增殖能力的变化。结果：miR-451在T24、5637及J82中的相对表达量分别为0.06±0.001、0.13±0.024、1(将J82细胞中其表达量标准化为1),差异显著,具有统计学意义(P<0.01);miR-451过表达后,5637细胞的迁移、侵袭、黏附能力及增殖率显著降低,具有统计学意义(P<0.05)。结论：miR-451在不同膀胱癌细胞中差异表达,其表达异常可影响癌细胞生物学功能,这为膀胱癌靶向分子治疗提供了新的切入点。     

lncRNA CERS6-AS1 通过调控 miR-138-2-3p 抑制人胶质瘤细胞系增殖

目的 探讨 lncRNA CERS6-AS1 对胶质瘤细胞生物学行为的影响及其可能作用机制。 方法 qRT-PCR 法检测胶质瘤组织、 癌旁组织中 CERS6-AS1 和 miR-138-2-3p 的表达量; Pearson 法分析胶质瘤组织中 CERS6-AS1 与 miR-138-2-3p 表达量的相关性; 体外培养人胶质瘤细胞 T98G, 将 si-NC、 si-CERS6-AS1、 miR-NC、 miR-138-2-3p mimics、 si-CERS6-AS1 与 anti-miR-NC、 si-CERS6-AS1 与 anti-miR-138-2-3p 分 别 转 染 至 T98G 细胞; CCK-8 法、 平板克隆形成实验、 Transwell 小室实验分别检测细胞增殖、 克隆形成、 迁移及侵袭 能力; 双荧光素酶报告基因实验检测 CERS6-AS1 和 miR-138-2-3p 的靶向关系。 结果 与癌旁组织比较, 胶 质瘤组织中 CERS6-AS1 的表达量升高 (P< 0. 05), miR-138-2-3p 的表达量降低 (P< 0. 05); CERS6-AS1 与 miR-138-2-3p 呈负相关 (r = - 0. 8899, P< 0. 001); si-CERS6-AS1 组细胞活力、 克隆形成细胞数、 迁移及侵 袭细胞数均低于 si-NC 组 (P< 0. 05); CERS6-AS1 可靶向调节 miR-138-2-3p 的表达; miR-138-2-3p 组细胞活 力、 克隆形成细胞数、 迁移及侵袭细胞数均少于 miR-NC 组 (P< 0. 05); si-CERS6-AS1 + anti-miR-138-2-3p 组细胞活力、 克隆形成细胞数、 迁移及侵袭细胞数均比 si-CERS6-AS1 + anti-miR-NC 组增多 (P< 0. 05)。 结论 干扰 CERS6-AS1 表达可通过调控 miR-138-2-3p 而抑制胶质瘤细胞增殖、 克隆形成、 迁移及侵袭。     

lncRNA MALAT1靶向调控miR-146b-5p影响膀胱癌细胞侵袭和迁移

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)肺腺癌转移相关转录因子1(MALAT1)靶向微小RNA-146b-5p(miR-146b-5p)影响膀胱癌细胞侵袭和迁移的机制。方法:在膀胱癌BIU-87细胞中转染MALAT1 siRNA,以real-time PCR方法测定转染效果,Transwell法测定侵袭及迁移能力,Western blot法检测细胞中上皮-间充质转化(EMT)相关蛋白波形蛋白(vimentin)、上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)和迁移侵袭相关蛋白基质金属蛋白酶-2(MMP-2)蛋白表达的变化。生物信息学软件预测MALAT1与miR-146b-5p有靶向互补位点,利用双萤光素酶报告系统鉴定靶向关系。用real-time PCR方法检测下调MALAT1后BIU-87细胞中miR-146b-5p表达的变化。将MALAT1 siRNA和miR-146b-5p inhibitor共转染至BIU-87细胞中,用上述方法分析细胞侵袭、迁移及vimentin、E-cadherin和MMP-2蛋白表达的变化。结果:转染MALAT1 siRNA可明显下调BIU-87细胞中MALAT1的表达水平(P<0.05)。敲减MALAT1表达后,BIU-87细胞的侵袭和迁移能力下降,细胞中vimentin和MMP-2蛋白水平降低,E-cadherin蛋白水平升高。MALAT1靶向调控miR-146b-5p的表达,敲减MALAT1的表达可以提高BIU-87细胞中miR-146b-5p的水平。miR-146b-5p inhibitor可以明显逆转敲减MALAT1的表达对BIU-87细胞侵袭、迁移能力和vimentin、E-cadherin、MMP-2蛋白表达的影响。结论:下调MALAT1可靶向促进miR-146b-5p表达,抑制膀胱癌细胞侵袭、迁移能力和EMT。