重组白细胞介素12对小鼠哮喘气道炎症及NO、IgE水平的影响

目的 探讨重组小鼠白细胞介素12(rmIL-12)腹腔注射对哮喘小鼠气道炎症的抑制作用及对血浆NO、IgE水平的影响.方法 25只C57BL/6小鼠随机分为对照组、哮喘组和rmIL-12治疗组,后两组又各自分为末次激发后2d和8d两个亚组(每个亚组5只).以卵白蛋白(OVA)致敏和激发制作哮喘模型.治疗组在每次激发前30 min腹腔注射0.1mL含rmIL-12 0.14μg的PBS溶液.收集各组小鼠的支气管肺泡灌洗液(BALF)血浆,ELISA法检测血浆中NO和IgE水平,BALF沉淀行细胞总数和嗜酸性粒细胞(EOS)分类计数.HE染色观察肺组织病理变化.结果 ①哮喘组小鼠HE染色可见明显的嗜酸性粒细胞浸润,治疗2d和8d组的病理改变较哮喘组明显好转,与对照组无明显区别.②哮喘组小鼠的细胞总数、EOS百分比、NO和IgE水平较对照组均明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05).治疗2d亚组与相同时间段的哮喘组相比,细胞总数、EOS百分比、NO和IgE水平明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).治疗8d亚组与哮喘组相比,NO和IgE差异有统计学意义(P＜0.05).③NO与IgE存在密切相关(r=0.839,P ＜0.01).结论 rmIL-12能够明显抑制哮喘小鼠的肺部炎症,同时降低NO和IgE的表达.     

小鼠白细胞介素12研究新进展

小鼠白细胞介素１２研究新进展刘锰综述郑珊珊审阅（中国医学科学院基础医学研究所免疫学研究室，北京）白细胞介素１２（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ１２，ＩＬ－１２），又称天然杀伤细胞刺激因子（ＮａｔｕｒａｌＫｉ－ｌｌｅｒＣｅｌｌＳｔｉｍｕｌａｔｏｒｙＦａｃｔｏｒ...     

白细胞介素12对钴照射小鼠造血功能的影响

研究白细胞介素１２（ＩＬ－１２）对机体造血系统的调控作用。方法将ＩＬ－２两亚基的ｃＤＮＡ分别克隆入不同的真核表达载体，并导入同一ＮＩＨ３Ｔ３成纤维细胞，获得分泌ＩＬ－１２的基因修饰细胞，经胶原包裹后注射入受辐射的小鼠腹腔，观察其分泌的ＩＬ－１２小鼠造血功能指标的影响。结果ＩＬ－１２可以明显增加受照射小鼠的内源性脾结节的数目，７．０Ｇｙ照射后１０天，空白对照组，母本细胞（３Ｔ３－０）组，及分泌ＩＬ－     

白细胞介素12和13的研究进展

白细胞介素１２和１３的研究进展王鲁男（锦州医学院）近一年来，随着分子克隆技术的不断进展，一个又一个白细胞介素的ｃＤＮＡ被克隆成功，形成白细胞介素的研究高潮。到１９９３年，包括白细胞介素１～１３，已被发现和克隆化，极大地促进了白细胞介素的结构和功能的研...     

哮喘患儿外周血白细胞介素及其对白细胞介素调节作用

目的:探讨白细胞介素2、10(IL-2、10),一氧化氮(NO)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)在小儿哮喘发病机制中的作用。方法:采用双抗夹心酶联免吸附试验(ELISA)技术检测28例哮喘患儿血浆及外周血单个核细胞(PBMC)在植物血凝素(PHA)刺激下产生IL-10的水平,同时检测了NOI、L-2、和TNF-α的水平,并研究了重组人IL-10(rhIL-10)对PBMC体外诱生NOI、L-2、和TNF-α的调节作用。结果:(1)急性发作期哮喘患儿血浆及PBMC在PHA刺激下产生IL-10水平均比正常儿低(P<0.05);(2)急性发作期患儿血浆及PBMC在PHA刺激下产生NO水平均升高(P<0.05~0.01),而在缓解期恢复正常(P>0.05);(3)急性发作期哮喘患儿PBMC在PHA刺激下产生IL-2和TNF-α水平升高(P均<0.01);(4)急性发作期哮喘患儿PBMC在PHA刺激下产生IL-10水平与IL-2和TNF-α呈负相关(r=-0.319,P>0.05);(5)IL-10能明显抑制PHA刺激的哮喘患儿PBMC诱生NOI、L-2和TNF-α,呈剂量依赖关系。结论:哮喘发作时IL-10分泌及释放减少,NOI、L-2和TNF-α升高,rhIL-10对PHA刺激的哮喘患儿PBMC体外诱生NOI、L-2和TNF-α呈负相调节作用。     

哮喘和过敏性肺炎患者肺泡巨噬细胞释放白细胞介素-12的差异及意义

目的:观察哮喘和过敏性肺炎(HP)患者肺泡巨噬细胞(AM)释放白细胞介素-12(IL-12)能力的差异并探讨其意义.方法:对哮喘及PH患者各10例进行支气管肺泡灌洗(BAL)获取AM,经脂多糖刺激培养后取上清液用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测量IL-12含量,并与10例健康者作对照.结果:哮喘组IL-12水平不但低于HP组也低于对照组(P均<0.01);HP组IL-12水平不但高于哮喘组也高于对照组(P<0.01).结论:IL-12水平的改变在哮喘及HP二者的病理过程中起着重要作用.     

白细胞介素-12与支气管哮喘研究进展

白细胞介素-12(IL-12)是一种具有广泛生物学活性的细胞因子，主要由激活的炎性细胞产生。IL-12具有调节Th1／Th2细胞免疫应答的作用，这种细胞因子的减少或缺失导致Th2细胞的优势分化，诱发哮喘发生。因此深入研究IL-12在哮喘中的发病机制，有可能为哮喘的防治提供新思路。     

白细胞介素-24及白细胞介素-12基因治疗小鼠黑色素瘤实验研究

[目的]研究重组质粒pEGFP-N1-白细胞介素(IL)-24基因及pGEG-IL-12基因单独应用与联合应用对小鼠黑色素瘤移植瘤的抑制作用及其机制.[方法]制备黑色素瘤B16细胞荷瘤小鼠模型,并随机分为5个组,分别向瘤体内注射给予脂质体包裹的基因重组质粒pEGFP-N1-IL-24(IL-24组),pEGFP-N1-IL-24和pGEG-IL-12(联合应用组),pGEG-IL-12(IL-12组),pEGFP-N1(空质粒组)及PBS(PBS组).每次给药前测量小鼠背部肿瘤的长径和短径,绘制肿瘤生长曲线.采用HE染色法观察各组肿瘤组织形态;RT-PCR法检测移植瘤组织中IL-24,IL-12,Bax,Bcl-2,VEGF,caspase-3及caspase-12mRNA的表达;Western Blot检测移植瘤组织中Bax,Bcl-2,VEGF,caspase-3及caspase-12蛋白的表达.[结果]肿瘤生长曲线观察结果表明,IL-24组、IL-12组及联合应用组肿瘤体积均明显小于空质粒组和PBS组(P<0.05),联合应用组肿瘤体积最小(P<0.05).HE染色结果显示,空质粒组多数细胞生长差,形态不规则,细胞皱缩,结构稀疏,细胞核溶解、变形,细胞成片坏死.RT-PCR检测结果表明,IL-24组和IL-12组分别有IL-24和IL-12基因mRNA表达,联合应用组同时有IL-24和IL-12基因mRNA表达,而空质粒组和PBS组均未见表达;IL-24组、IL-12组及联合应用组Bax基因mRNA表达水平均明显高于空质粒组和PBS组(P<0.05),联合应用组Bax基因mRNA的表达水平最高,而Bcl-2和VEGF基因mRNA的表达水平则显著降低(P<0.05).Western Blot检测结果表明,IL-24组、IL-12组及联合应用组Bax,caspase-3,caspase-12蛋白的表达水平均明显高于空质粒组和PBS组(P<0.05),联合应用组中Bax,caspase-3,caspase-12蛋白的表达水平最高,而Bcl-2和VEGF蛋白的表达水平则显著降低(P<0.05).[结论]IL-24和IL-12对荷瘤小鼠有治疗作用,二者联合应用治疗效果更强.     

白细胞介素12与肿瘤免疫

如何诱导并加强肿瘤特异性的细胞免疫功能，已成为当今的热门课题。白细胞介素１２（ＩＬ－１２）的问世，展示了肿瘤免疫治疗的前景。ＩＬ－１２可介导辅助Ｔ细胞（Ｔｈ１）的分化，干扰素γ（ＩＦＮ－γ）的产生及特异性和非特异性的细胞杀伤活性。在多种动物实验模型中，已证实ＩＬ－１２有抗肿瘤作用，同时ＩＬ－１２的临床应用已在世界范围内展开。本文就近年来关于ＩＬ－１２与肿瘤免疫的基础研究及临床初步治疗试验做一综述。１　ＩＬ－１２及ＩＬ－１２受体的分子生物学特性ＩＬ－１２主要由单核细胞及巨噬细胞产生，Ｂ细胞、肥大细…     

白细胞介素12对急性放射病小鼠造血系统的影响

目的 研究重组鼠白细胞介素12(rmIL-12)对急性放射病小鼠造血系统的影响.方法 42只BALB/c小鼠均给予6.0Gy(60)γ射线全身照射,随机分为照射对照组、5和20μg/kg的rmIL-12治疗组,治疗组分别于照后1h及此后每3d一次分别腹腔注射5和20 μg/(kg·d)的rmIL-12,共5次,每日2...     

CpG脱氧寡核苷酸对抗原致敏性小鼠气道反应的影响

目的：探讨以非甲基化胞嘧啶－鸟嘌呤（CpG)脱氧寡核苷酸（ODN）治疗支气管哮喘的免疫抑制作用。方法：以卵白蛋白（OVA）免疫C57BL／6小鼠建立支气管哮喘模型,致敏阶段腹腔注射CpG oDN,以不含CpG序列的ODN及生理盐水作对照,观察应用CpG ODN对支气管哮喘形成,气道过敏性免疫反应的影响,结果：应用CpG ODN组与对照组相比：（1）明显抑制抗原激发后气道内嗜酸粒细胞的浸润（P＜0．01）;（2）明显抑制肺内IL－4,IL－5产生,增加IL－12,IFN－γ的产生;（3）明显抑制抗原诱导的气道反应性的增高;（4）明显抑制外周血总IgE及抗原特异性IgE的水平。结论：致敏阶段应用CpG ODN对抗原诱导的气道过敏反应有明显的抑制作用,可阻断支气管哮喘的形成,这种抑制作用与IL－12,IFN－γ的产生增加相关。     

NGF参与支气管哮喘大鼠气道炎症的发生及作用机制

目的 探讨神经生长因子(nerve growth factor, NGF)对支气管哮喘大鼠气道炎症的影响及作用机制.方法 24只雄性SD大鼠分为正常对照组(A组)、哮喘组(B组)和抗NGF组(C组),每组8只.测定各组支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)总细胞及细胞分类计数;HE染色观察气道病理改变;RT-PCR和ELISA法检测各组大鼠白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)、NGF mRNA和蛋白表达水平.结果 B组与A组比较,BALF中细胞总数及细胞分类计数增多(P＜0.05);IL-4、NGF mRNA和蛋白表达增加(P＜0.01);而IFN-γ mRNA和蛋白表达减少(P＜0.01).C组与B组比较,BALF中细胞总数及细胞分类计数减少(P＜0.05);IL-4、NGF mRNA和蛋白表达减弱(P＜0.01);而IFN-γ mRNA和蛋白表达水平无显著差异.B组BALF中NGF含量与细胞总数、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞呈正相关(r=0.833、0.944、0.949,P＜0.05);与IL-4含量呈正相关(r=0.944,P＜0.01),与IFN-γ含量不相关(r=0.122,P＞0.05);与肺组织中IL-4 mRNA表达水平呈正相关(r=0.848,P＜0.05),与IFN-γ mRNA表达不相关(r=0.611,P＞0.05).结论 NGF与哮喘大鼠气道炎症密切相关,它可以通过使Th2型细胞因子分泌亢进参与哮喘的发生.     

耐受性树突状细胞对哮喘小鼠气道变应性炎症反应的抑制作用

目的: 用卵白蛋白(OVA)刺激的未成熟树突状细胞(immature dendritic cell, imDC)免疫小鼠,观察其对小鼠OVA激发的气道过敏性炎症反应的抑制作用,探讨耐受性树突状细胞疫苗诱导免疫耐受的可能机制,为临床防治哮喘提供新的思路.方法: 制备BALB/c小鼠髓性imDC.其余BALB/c小鼠分4组,10只/组:其中两组于第-7天分别注射无菌PBS(PBS组)、OVA刺激的imDC(imDC组),第三组于第13～20天注射地塞米松(地塞米松组),第四组不作任何处理(健康对照组);除健康对照组外,其余各组诱导哮喘反应:第0天和第9天分别注射OVA致敏,14～20天每日予OVA气雾攻击.第21天每组处理5只小鼠,检测肺部炎症细胞浸润及嗜酸性粒细胞比例、气道黏液分泌、脾细胞Th1/Th2型细胞因子表达及脾细胞中CD4 CD25 细胞比例;第49天,处理剩余动物,观察哮喘预后.结果: mDC注射组肺部炎症浸润较轻,脾细胞表达白细胞介素(IL)-13、4降低而γ-干扰素(IFN-γ)无显著影响,脾细胞中CD4 CD25 细胞比例较高,气道黏液分泌则少于PBS组,且预后良好. 结论: 过敏原特异性imDC疫苗注射可在一定程度上缓解哮喘小鼠气道的变应性炎症反应.     

The effect of Astragapolysaccharide on the lymphocyte proliferation and airway inflammation in sensitized mice

Ａｉｒｗａｙｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎｂｙｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｃｅｌｓ,ｐａｒｔｉｃｕｌａｒｌｙｅｏｓｉｎｏｐｈｉｌｓａｎｄａｃｔｉｖａｔｅｄＴｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ,ｉｓｏｎｅｏｆｔｈｅｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｆｅａｔｕｒｅｓｏｆａｓｔｈｍａ...     

Effects of streptozotocin diabetes on antigen-induced airway inflammation

Asthma and diabetes mellitus are common diseases and the concurrence is correspondingly expected to occur commonly. Several studies,1,2 however, indicate that the incidence of asthma in diabetic patients is less than that in the residual population. In the same individual, clinical asthma appears to be less severe when diabetes is superimposed.3 In addition, the onset of the diabetic state is accompanied by diminution of symptoms of previously existing bronchial asthma. These observations pro…     

探讨过敏性哮喘中Eotaxin致气道炎症的机制

目的　探讨过敏性哮喘中嗜酸粒细胞趋化因子Eotaxin致气道炎症的机制 .方法　将豚鼠 4 0只随机分为哮喘组和对照组 ,卵蛋白致敏及诱发过敏性哮喘 . 1收集支气管肺泡灌洗液 (BAL F) ,观察细胞总数 (TC)及嗜酸粒细胞(Eos)、巨噬细胞 (AM)、淋巴细胞 (L)、中性粒细胞 (N)比例变化 ;2豚鼠肺组织病理标本经 HE染色 ,观察病理学改变 ;3采用原位分子杂交技术观察肺组织中 Eotaxin m RNA的表达 ;4采用 Northern blot方法观察肺组织中 Eotaxin m RNA表达情况 .结果　过敏性哮喘豚鼠 BAL F中 TC,Eos比例较对照组明显升高 (P<0 .0 1) ,AM比例显著下降 (P<0 .0 1) ,L和 N比例与对照组相差不明显 (P>0 .0 5 ) .哮喘豚鼠肺组织中可见气道炎症反应及 Eos和 L粘膜下浸润 .支气管粘膜、粘膜下层及周围肺组织中 Eotaxin m RNA阳性细胞表达率(198± 4 6 ) mm- 2较对照组 (16± 8) mm- 2明显增加 (P<0 .0 1) .Nortthern blot杂交可见哮喘组表达 Eotaxin m RNA较对照组明显升高 .结论　过敏性哮喘中 Eotaxin基因表达明显增强 ,同时伴有 Eos肺内募集及激活 ,进而导致气道炎症而诱发哮喘     

IL-12真核表达质粒对小鼠气道变应性炎症的免疫调节作用

目的:研究IL-12真核表达质粒(psIL-12)在气道内表达对成年小鼠气道变态反应炎症的影响.方法:以卵白蛋白(OVA)复制成年小鼠气道变态反应炎症模型,气道内应用单剂量psIL-12,pcDNA3.1(+),PBS/脂质体复合物,同时设正常对照组.分别检测肺单链IL-12表达,计数支气管肺泡灌注液(BALF)中嗜酸粒细胞的百分比和IL-4,IFN-γ含量,观察肺组织形态学变化.结果:气道转染psIL-12可在小鼠肺组织中表达IL-12mRNA;psIL-12干预组BALF中嗜酸粒细胞百分比为(2.6±2.3)%,较PBS对照组(11.6±2.3)%明显降低,两组组间差异具有显著性(P<0.05).psIL-12干预组BALF中IL-4含量为(103±53)ng/L,IFN-γ含量为(171±20)ng/L,而PBS对照组IL-4含量为(319±12)ng/L,IFN-γ含量为(77±36)ng/L,两组组间差异具有统计学意义(P<0.05).psIL-12可明显阻止模型鼠肺组织病理改变,降低血清中OVA特异性IgE抗体含量.结论:psIL-12转染气道表达IL-12,增加Th1型细胞因子IFN-γ的产生,...     

哮喘分期序贯治疗对大鼠气道重构及过敏性气道炎症的影响

目的 研究哮喘分期序贯治疗对大鼠哮喘模型气道重构及过敏性气道炎症的作用。方法 56只SD大鼠随机分成正常组、哮喘组、序贯治疗1组、序贯治疗2组、序贯治疗3组、布地奈德组、孟鲁司特钠组,每组8只,除正常组外,其余各组均以卵蛋白（OVA）辅以氢氧化铝为佐剂于第1、8、15天注射致敏,22d后隔天雾化吸入OVA8周激发哮喘,建立哮喘模型。从实验第8天开始,给药组序贯治疗1组急性期麻杏二陈汤灌胃;序贯治疗2组急性期麻杏二陈汤灌胃,缓解期胃饲金水六君煎加减;序贯治疗3组急性期麻杏二陈汤灌胃,缓解期胃饲金水六君煎加减方,稳定期胃饲六味地黄颗粒;布地奈德组大鼠激发后雾吸沙丁胺醇,缓解期和稳定期雾吸布地奈德;孟鲁司特钠组激发后雾吸沙丁胺醇,缓解期和稳定期胃饲孟鲁司特钠;哮喘模型组以生理盐水胃饲代替,干预7周后观察实验大鼠全血白细胞总数、嗜酸性粒细胞计数,支气管平滑肌层、上皮下胶原、内管壁的厚度,肺组织羟脯氨酸含量。结果 ①大鼠肺支气管病理学观察表明哮喘大鼠支气管平滑肌层、上皮下胶原、内管壁厚度[（27．87±0．81）、（9．11±0．58）、（39．00±3．68）μm]均较正常组[（10．76±0．67）、（3．37±0．42）、（20．40±2．85）μm]明显增厚,肺组织羟脯氨酸含量[（11．50±3．81）mg／g]较正常组[（5．71±0．80）mg／g]明显增高,差异均有统计学意义（P=0．00）,表明哮喘时存在气道重构。②序贯治疗1、2、3组、布地奈德组及孟鲁司特钠组对大鼠支气管平滑肌层、上皮下胶原、内管壁厚度、肺组织羟脯氨酸含量、全血白细胞总数及嗜酸性粒细胞计数均比哮喘模型对照组低,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论 中药分期序贯治疗具有减轻哮喘气道慢性炎症和延缓气道重构的作用。