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相似文献
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1.
目的:观察反义寡脱氧核苷酸(ODN)对脯氨酰4-羟化酶(P4H)两种亚基m RNA 表达的影响。方法:采用定量RT-PCR技术检测培养的人皮肤成纤维细胞中P4H m RNA的相对含量。结果:不同浓度(0.1,0.2,0.5,1.0 μm ol/L)反义ODN处理组,人皮肤成纤维细胞中P4H m RNA表达水平均显著低于对照组及错配ODN 处理组;其中0.1,0.2 μm ol/L反义ODN作用20 h 时,抑制效应达到最大,50~70 h 后,逐渐恢复到对照组水平。正义ODN与错配ODN对P4H m RNA表达则无明显抑制作用。结论:反义ODN 对P4H 两种亚基的m RNA表达均有显著和特异的抑制作用。  相似文献   

2.
反义寡脱氧核苷酸对人肝癌裸鼠模型生长及转移的影响   总被引:3,自引:0,他引:3  
目的 观察反义H-ras寡脱氧核苷酸(ODN)对高表达蛋白p21H- ras的人肝癌高转移裸鼠模型LCI-D20细胞生长、凋亡及转移潜能的影响。方法原代培养LCI-D20细胞,经10μmol/L浓度反义ODN处理后,以1.5×10细胞数分别接种于14只裸鼠皮下缝制皮囊内:6只接种反义H-rasODN处理细胞,4只接种H-ras非特异性反义ODN处理细胞,余4只接种未作处理的对照细胞。结果反义H-ras对LCI-D20细胞增殖具有显著抑制作用(t=31.529,P<0.01),反义ODN处理细胞,S期比率(36.0±1.4)显著低于对照组(58.5±0.9,t=13.519,P<0.01),而G1/G0期比率(56.7%±1.1%)高于对照组(37.4±0.7,t=14.802,P<0.01);反义H-rasODN处理细胞的凋亡发生率(34.0%±4.5%)显著高于对照组(2.5%±1.2%,t=13.434,P<0.01);反义H-ras处理对LCI-D20细胞在接种动物体内的生长具有显著延迟抑制作用(t=3.509,t=3.452,P<0.01);接种动物的肺转移率,反义H-rasODN处理组显著低于对照组。  相似文献   

3.
目的研究谷氨酸对神经细胞的毒性作用及其作用机制。方法取体外培养的胎鼠大脑皮层神经,分组加入不同浓度的谷氨酸、N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)或海藻酸(KA),DL-2-amino-5-phosphonovalericacid(APV)、4-Hydroxyquinoline-2-carboxylicacidhydrate(HQCA),作用30min,24h后测定培养液内乳酸脱氢酶(LDH)含量,并用苔盼蓝鉴定神经细胞活性。结果与空白对照组比较,加入谷氨酸组细胞培养内LHD以及神经细胞蓝染率均显著增加(P<0.01),且其程度与加入的药物剂量成正相关。谷氨酸LD50为51.10±4.29μmol/L,与NMDA(66.17±6.20μmol/L)相似,但显著低于KA(172.80±16.40μmol/L)。APV或HQCA能显著抑制谷氨酸所致的LDH增加。结论谷氨酸的确具有神经毒性作用,这种作用可能主要是通过NMDA受体介导的  相似文献   

4.
体内一氧化氮测定的技术及临床应用   总被引:5,自引:0,他引:5  
采用硝酸还原酶和甲酸脱氢酶偶联反应,建立了测定血清NO3-/NO2-含量的新方法,对酶浓度、还原时间、pH、NADH浓度进行了条件测试。本法重复性好,回收率高,操作简便,线性范围可达NO3-浓度200μmol/L。32例正常人血清NO3-/NO2-浓度为82.9±17.7μmol/L。一例小肠移植术后患者分别于术后3、5、7、14、30、45、60和90d测得血清NO3-/NO2-浓度为58.5~91.4μmol/L,属正常范围,表明无排异现象发生。20例慢性腹腔感染患者血清NO3-/NO2-浓度为46.0±17.5μmol/L,显著低于正常人(P<0.01),并与感染患者严重程度呈显著负相关。因此,感染患者NO检测可作为其感染严重程度的指标  相似文献   

5.
观察不同浓度的三氧化二砷(As2O3)对急性早幼粒细胞性白血病(APL)细胞株NB4细胞的影响。方法不同浓度的三氧化二砷(0.1~2μmol/L)与APL细胞株NB4细胞共同孵育一定时间后,观察NB4细胞的存活,细胞形态学,免疫表型(CD11b,CD33),细胞DNA含量分布及PML/PML-RARα蛋白在细胞内定位的改变。结果经1~2μmol/L氧化砷处理的NB4细胞呈现凋亡的特征性改变。在细胞形态学上表现为胞膜完整,染色质固缩及核碎裂。流式细胞仪分析显示与三氧化二砷作用浓度及时间相关的亚G1期细胞。经0.1~0.25μmol/L三氧化二砷处理10天的NB4细胞呈现某些与分化相关的形态学改变和分化相关抗原(CD11b和CD33)的调变,而0.1~2μmol/L的三氧化二砷均能快速调变和减少PML/PML-RARα蛋白的表达。结论氧化砷对NB4细胞具有诱导凋亡和不完全分化双重作用,并能快速调变及降解PML/PML-RARα蛋白的表达。  相似文献   

6.
目的:观察一氧化氮(NO)对大鼠小肠缺血/再灌注(I/R)的作用及内皮素的改变。方法:复制内脏血管阻塞(SAO)性休克模型,用左旋精氨酸(L-Arg)及硝基精氨酸甲脂(L-NAME)处理动物模型后分别测定血浆中ETs、MDA、组织蛋白酶D(CD)、NO-2/NO-3含量。结果:L-Arg减缓了大鼠I/R血压下降(P<0.01),降低了血浆MPO、LDH、CD、MDA的含量(P<0.01)及肠组织中伊文思蓝(EB)的含量(P<0.05);L-NAME与L-Arg相反。MPO与EB正相关(P<0.01),NO-2/NO-3与ETs负相关(P<0.05)。结论:NO对小肠I/R损伤有保护作用,ETs参与SAO休克过程。  相似文献   

7.
肾病综合征病人抗氧化功能的研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
为研究肾病综合征(NS)时抗氧化功能状况,我们测定36例患者血超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及维生素E,以及尿SOD、MDA。结果表明:NS患者血总SOD、Cu-Zn-SOD及维生素E水平明显低于正常对照组(分别为76.22±27.48μU/L比104.20±18.80μU/L,P<0.001;20.40±22.63μU/L比62.99±15.60μU/L,P<0.001;6.68±3.52mg/L比16.38±1.05mg/L,P<0.001);尿SOD及MDA明显高于对照组(分别为:114.98±31.73μU/L比82.34±26.50μU/L,P<0.001;3.99±1.98μmol/L比2.64±0.78μmol/L,P<0.001).研究提示,NS时抗氧化功能减退,肾脏易遭受氧自由基损害。  相似文献   

8.
非胰岛素依赖型糖尿病患者血NO、IL-2和TNF-α的检测   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:为探讨非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM)免疫调节情况及NO、TNF-α在其肾病发病机制的作用。方法:NO:比色法测定;TNF-α:双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA法)。结果:NIDDM肾病组的IL-2水平(1.26±0.24)μg/L明显低于正常(P<0.01),而NO(NO-2/NO-3)(91.2±24.3)μmol/L和TNF-α(3.40±1.20)μg/L则显著高于正常对照组(P<0.01);无并发症组有相同趋势,但无统计学意义。结论:提示NIDDM患者NO、TNF-α、IL-2调节紊乱,而且与NIDDM肾病、感染等并发症有密切关系  相似文献   

9.
消炎痛(0.003-1.0μmol/L)抑制由花生四烯酸(AA,3μmol/L)诱导的家兔洗脱血小板细胞内游离钙浓度增加及血小板聚集反应,呈剂量依赖性。血栓烷A2拮抗剂ONO-3708(0.3.0μmol/L)使AA的上述两个反应的量效曲线平行右移。另一种血栓烷A2拮抗剂S145也非竞争性的抑制AA的上述反应。延长S-145的温培时间可增加S-145的抑制作用,另外S-145的抑制作用不能被冲洗掉,而ONO-3708冲洗后其抑制作用消失。平行线测定的结果表明,以S-145处理后的洗脱血小板其AA量效曲线的斜率与S-145加ONO-3708处理组的量效曲线并不平行,这一结果提示至少S-145和ONO-3708很可能与同一受体的不同位点相结合,但分别与S-145和ONO-3708结合的两种不同TXA2/PGH2受体存在的可能性依然存在。  相似文献   

10.
反义寡核苷酸体外抑制丙型肝炎病毒的研究   总被引:5,自引:0,他引:5  
刘勇  陈智 《中华医学杂志》1997,77(8):567-570
研究反义寡核苷酸体外抑制丙型肝炎病毒(HCV)的方法。方法以重组丙型肝炎病毒(pCD-HCV)转染的H9细胞为对象,通过半定量逆转录聚合酶链反应和dotELISA检测HCVmRNA和抗原表达的变化,观察与HCV结构区(包括AUG)互补和同源以及随机的硫代磷酸化寡核苷酸(PS-ASON、PS-ODN、rPS-ODN)对HCV的抑制作用。结果PS-ASON和PS-ODN可有效地进入靶细胞并在体外与靶基因杂交结合,终浓度为10μmol/L的PS-ODN、rPS-ODN对HCV均无抑制作用,但PS-ASON可明显降低HCVmRNA和抗原表达水平,具有药物浓度和时间依赖效应,脂质体修饰可增强PS-ASON的反义抑制作用,磷酸钙修饰却无此作用。结论与HCV互补的PS-ASON是HCV的反义寡核苷酸,在翻译水平上具有反义抑制作用。  相似文献   

11.
目的 观察乙醇对伏核神经元电活动的影响,探讨乙醇的中枢作用机制及与内源性阿片肽的关系。方法 制备大鼠伏核脑片,采用细胞外记录。结果 ⑴单独灌流乙醇(0.2μmol/L)使神经元放电频率先增加后降低,并可被Nal(0.2μmol/L)翻转。⑵联合灌流阿片受体特异性激动剂DAGO、U-50、D-PEN(0.5μmol/L)和乙醇,神经元抑制程度增强,以DAGO最为显著。结论 乙醇抑制伏核神经元电活动,  相似文献   

12.
目的 探讨流式细胞术(FCM)三色分析血液中循环活化血小板(CAP)在缺血性脑血管病中的临床意义。方法 以纤维蛋白原受体(FIB-R0、P-选择素(CD62P)作为分子标志物,FCM三色免疫荧光分析CAP。结果 正常人静止血小板膜表面FIB-R和CD62P表达极低(阳性百分离的中位数分别为1.4%和0.7%)。0.1μmol/L ADP可使血小板明显活化,10μmol/L ADP使活化血小板膜表面  相似文献   

13.
作者报道中药石楠藤提取物对急性出血坏死性胰腺炎(AHNP)大鼠治疗作用的实验研究。将100只SD大鼠随机分为三组:①假手术组(SO组);②AHNP组(AP组),该组动物在AHNP诱发后,不做特殊治疗;③石楠藤提取物治疗组(SN组)。该组动物在AHNP诱发后10分钟经腹腔内注射石楠藤提取物(1%石楠藤提取物5ml/kg体重)。结果表明:SN组血清淀粉酶值明显下降(SN组16130±5030U/L6h、19290±5380U/L12hvsAP组23780±3960U/L、28470±4150U/L,P<0.01)。血中PAF含量明显降低(SN组1.3±0.30ng/ml1h、2.0±0.34ng/ml6h、2.1±0.32ng/ml12hvsAP组2.2±0.25ng/ml、6.1±0.42ng/ml、10.1±0.53ng/ml,p<0.01)。血浆内毒素含量明显下降(SN组69.9±7.2EU/L、6h、91.1±8.4EU/L、12hvsAP组98.4±6.9EU/L、151.7±9.1EU/L,P<0.01)。石楠藤提取物治疗组术后平均存活时间明显长于AP组(SN组:43.5h,AP组11.5h,p<0  相似文献   

14.
目的采用一段人工合成的互补于人mdr1基因的反义硫代硫酸脱氧寡核苷酸(简称反义核酸)转染白血病多药耐药细胞株K562/ADM,来逆转白血病细胞的多药耐药。方法MTT法检测K562/ADM细胞对阿霉素的IC50,流式细胞仪分析细胞内的柔红霉素含量,免疫细胞化学染色方法确定P170的表达水平,RT-PCR检测mdr1-mRNA的相对水平(mdr1/β2-MG)。结果浓度为2μmol的反义核酸使K562/ADM细胞对阿霉素的IC50从处理前的25.72μg/ml降至处理后的6.97μg/ml,相对逆转效率为73.01%。反义核酸亦使K562/ADM细胞内的柔红霉素含量增加,P170表达阳性率从处理前的98.6%±1.0%降至处理后的18.3%±0.7%,mdr1/β2-MG下降了0.5,mdr1-mRNA相对水平有所下降。结论反义核酸通过下调mdr1基因,阻断P170的表达,从而降低K562/ADM的耐药性。  相似文献   

15.
测定原发性肝癌(HCC)81例,肝硬化32例,病毒性肝炎30例,良性肝占位10例,消化道癌31例及72例正常人血清过氧化物酶(POD)。结果正常血清POD值为1.43±0.56(μmol/s)/L。HCCPOD值为3.4±0.179(μmol/s)/L明显高于正常对照组及其他各组。以POD≥3.0(μmol/s)/L为HCC诊断标准,其阳性率为56.8%,特异性为93.6%,准确性为81.3%。POD与AFP含量无相关关系(r=0.16,P=0.16)。在AFP阴性HCC病例中,POD阳性率62.2%,两者联合检测HCC,其检出率可高到79%。结果提示,血清POD检测可用于HCC的诊断及对良恶性肝病的鉴别诊断。  相似文献   

16.
目的单独应用bcr-abl反义硫代磷酸寡聚脱氧核糖核酸(ASPO)或c-mybASPO作用于慢性粒细胞白血病(CML)细胞的研究已有报道,但抑制的不彻底性是个主要问题。由于CML的发生是多癌基因协同作用及相互影响的结果,为进一步提高AS-PO对CML细胞的作用效果,用互补于两种类型(b2a2及b3a2)的bcr-abl基因融合位点两侧各13个核苷酸的ASPO(b2ASPO和b3ASPO)及c-myb基因起始密码子2-7互补的ASPO(mASPO)联合作用于K562细胞株和原代CML细胞。方法硫代磷酸寡核基酸(PS-ODN)的合成由392-05型DNA-RNA合成仪自动合成,经OPC柱纯化;细胞与PS-ODN共培养后24,48,96,120h倒置显微镜下活体观察,0.4%台盼蓝拒染法进行死活细胞计数;CFU-K562、CFU-GM、CFU-GEMM采用0.8%甲基纤维素半固体培养法;采用两对引物RT-PCR半定量法检测细胞bcr-ablmRNA表达;通过流式细胞仪检测及电镜观察细胞凋亡情况。结果(1)ASPO能够特异性抑制bcr-abl基因表达;经RT-PCR的检测发现10μmolASPO作用48h,两种反义  相似文献   

17.
目的 探讨缓激肽在对血小板源性生长因子(PDGF)诱导的培养的大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的影响中一氧化氮(NO)含量与诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达的变化。方法 取SD大鼠胸主动脉平没肌细胞进行培养,传至4~6代,分成以下几组:1.对照组;2.PDGF组(50ng/ml);3.PDGF+缓激肽(10^-4mol/L组;4.PDGF+缓激肽+Hoe140(10^-4mo  相似文献   

18.
目的:为探讨L-精氨酸(L-Arg)对异丙肾上腺素(ISP)致害心肌的影响。方法:将大鼠随机分为4组:ISP组,ISP40mg/kg·day×2,皮下注射;对照组,体重匹配的大鼠注射同容量的生理盐水;L-Arg组腹腔注射L-Arg1.5g/kg·d×2;ISP+L-Arg组。结果:ISP处理的大鼠心重/体重比值、心肌内NO、钙的水平以及血清LDH、NO水平高于对照组(p<0.05),而心肌中GSH-PX及L-Arg水平低于对照组(p<0.05),L-Arg可部分逆转ISP致心肌肥厚,心肌中NO、钙、L-Arg、GSH-PX及血清LDH、GSH-PX水平的变化。结论:L-Arg对ISP致害心肌有抗损伤的作用。  相似文献   

19.
测定100例健康人和72例非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM)患者血清中1,5-脱水葡萄糖醇(1,5-anhydroglucitol,AG)及果糖胺(FA)的含量。结果:NID-DM患者血清AG含量(28.0±25.6μmol/L)明显低于健康对照组(185.2±57.2μmol/L),FA含量(2.52±0.68mmol/L)明显高于对照组(1.54±0.26mmol/L)。患者血清AG含量与空腹血糖(FBG)及FA呈明显负相关(r值分别为-0.483和-0.284,P值分别<0.01和0.05)。AG和FA对糖尿病诊断的敏感性分别为93%和83.3%。提示:血清AG含量测定可做为糖尿病诊断、筛选和血糖控制监测的指标。  相似文献   

20.
L—Arg—NO途径对铝抑制大鼠海马CA3区诱发电位的影响   总被引:3,自引:0,他引:3  
实验在70只乌拉坦麻醉的SD大鼠上进行,在海马CA3区记录诱发的群体锋电位(PS)探讨了左旋精氨酸一氧化氮(L-Arg-NO)途径对铝抑制PS波幅的作用。结果:(1)0.5mol/LAlCl3注入CA3区后,PS幅度较注药前显著减小(P〈0.05)。(2)CA3区内注入0.1和0.3mol/L硝基左旋精氨酸(NLA)能分别加强0.25和0.5mol/LAlCl3的抑制效应,(3)CA3区注入0.3  相似文献   

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