环加氧酶抑制剂对缺血再灌注大鼠肾脏的保护作用

目的：本实验研究了环加氧酶抑制剂对缺血再灌注损伤（ischemia/reperfusion injury,I/R）所致大鼠肾脏组织细胞凋亡、Bcl-2蛋白和超氧化歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）表达的影响。方法：将36只大鼠随机分为3组：对照组,I/R模型组,罗非昔步治疗组,每组12只。I/R大鼠模型采取夹闭双侧肾动脉60min,恢复再灌注24h的方法建立。对照组大鼠除不钳夹双侧肾蒂外,余步骤与手术组同。观察肾组织病理改变,检测肾组织中Bcl-2蛋白、SOD和MDA含量的表达,TUNEL法检测细胞凋亡水平。结果：组织学检查发现对照组肾小管排列整齐,间质无充血水肿,I/R组可见明显损害,肾小管上皮细胞肿胀变性,肾小管扩张,可见管型和坏死脱落细胞,间质充血水肿,炎细胞浸润。治疗组组织损伤较I/R组明显减轻。免疫组化结果半定量分析显示模型组Bcl-2蛋白明显增多,给药组Bcl-2的水平较模型组明显减低（P〈0.05）。模型组细胞凋亡明显增多,给药组细胞凋亡水平较模型组明显减低（P〈0.05）。模型组肾组织SOD的活性明显降低,MDA含量增高,给药组比模型组有所改善。结论：罗非昔步能抑制I/R肾脏组织Bcl-2蛋白的表达,减轻细胞凋亡,抑制脂质过氧化产物MDA的产生,并提高抗氧化酶SOD的活性,减轻肾脏缺血再灌注损伤。     

缺血后处理对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响

目的探讨缺血后处理对大鼠肾缺血再灌注（I／R）损伤的影响及其机制。方法18只雄性SD大鼠随机分为3组（n=6）：假手术组（S组）、缺血再灌注组（I／R组）和缺血后处理组（IPo组）。采用夹闭双侧肾蒂45min-再灌注6h制备肾脏缺血再灌注损伤模型。IPo组在夹闭双侧肾蒂45min后，再灌注10s，缺血10s，重复3次后，完全恢复肾血流。再灌注6h时开胸，取心脏血后处死大鼠，取肾组织。测定血清肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）和尿酸（UA）浓度，肾组织中丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性；光镜下观察肾组织病理学改变；采用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记（TUNEL）法检测肾组织中凋亡细胞，光镜下计数凋亡细胞，并计算肾小管上皮细胞凋亡指数（AI）。结果与S组比较，I／R组和IPo组Cr和BUN浓度升高（P〈0．05），UA浓度差异无统计学意义（P〉0．05），肾组织SOD活性降低，MDA含量升高，肾小管上皮细胞凋亡指数增加（P〈0．05），病理损伤明显。与I／R组比较，IPo组Cr和BUN浓度降低（P〈0．05），UA浓度差异无统计学意义（P〉0．05），SOD活性升高，MDA含量降低，肾小管上皮细胞凋亡指数减少（P〈0．05），病理损伤减轻。结论缺血后处理能减轻大鼠肾缺血再灌注损伤，其机制与增强肾脏抗氧化能力和抑制肾组织细胞凋亡有关。     

丁羟茴香醚对衰老大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的观察老年大鼠肾脏缺血再灌注（I／R）模型中。肾小管上皮细胞的损伤变化，探讨活性氧（ROS）清除剂对I／R损伤的保护作用。方法27月龄大鼠随机分为假手术组、I／R模型组、丁羟茴香醚（BHA）组和nicardipine组。夹闭双侧。肾动脉30min再灌注18h制成I／R模型。观察肾功能、肾脏病理改变、肾小管上皮细胞凋亡情况。检测肾组织半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（caspase）3、细胞色素C表达。测定肾组织脂质过氧化物丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性。结果（1）肾脏I／R损伤时，老年大鼠肾功能明显减退，肾组织病理改变比较明显，大量肾小管上皮细胞凋亡，肾组织caspase-3、细胞色素C表达明显上调。肾组织中MDA增加、SOD活性下降（P均〈0．05）。（2）BHA或nicardipine均能明显改善肾功能。肾组织病理改变和凋亡相关指标（P〈0．05）；BHA或nicardipine均能减少组织中MDA含量，部分恢复肾组织中SOD含量。结论老年大鼠肾脏I／R损伤时肾小管上皮细胞凋亡增加，肾功能减退。ROS堆积后，线粒体损伤导致肾小管上皮细胞凋亡。清除ROS可以抑制‘肾小管上皮细胞凋亡，减轻I／R损伤。     

葛根素对大鼠肝缺血再灌注损伤脑组织c-fos和Bcl-2表达的影响

目的：观察肝缺血再灌注损伤时c-fos、Bcl-2与脑细胞凋亡的关系及葛根素对其影响的可能机制。方法：建立肝缺血再灌注损伤动物模型。选健康雄性SD大鼠56只,随机分为对照组、缺血30min组（I组）、缺血30min即刻再灌注组（I/R组）、缺血30min再灌注1h组（I/R1h）、缺血30min再灌注2h组（I/R2h）、30min再灌注4h组（I/R4h）及葛根素预处理组（PUE＋I/R4h组）,每组8只。观缺血察各组肝、脑HE染色;应用免疫组织化学方法测定各组大鼠脑组织c-fos、Bcl-2的表达;应用原位细胞凋亡法测定脑细胞凋亡。结果：I/R2h组、I/R4h组肝组织中散在分布大量炎症细胞,肝细胞明显肿胀,有的呈空泡状变性,肝脏结构紊乱;PUE＋I/R4h组上述改变明显改善。I/R2h、I/R4h组脑组织水肿明显,PUE＋I/R4h组明显改善。与对照组比较,其余各组脑组织c-fos表达均增高﹙P〈0.01）,I/R4h组水平最高,PUE＋I/R4h组较I/R1h组、I/R2h组、I/R4h组明显降低（P〈0.01）。与对照组比较,其余各组脑组织Bcl-2表达增高（P〈0.01）,I/R4h组与I/R2h组差异无统计学意义﹙P〉0.05）,PUE＋I/R4h组较对照组、组表达增多（P〈0.01）,较I/R1h组、I/R2h组、I/R4h组明显降低（P〈0.01）。I组、I/R组细胞I凋亡指数较对照组明显增加（P〈0.01）,随着再灌注时间的延长细胞凋亡指数逐渐增加。PUE＋I/R4h组较I/R2h组、I/R4h组明显降低（P〈0.01）。结论：肝缺血再灌注损伤可引起脑组织的损伤及脑细胞凋亡。随着再灌注时间的延长,脑组织中c-fos表达增高,脑细胞凋亡与c-fos的表达有关。Bcl-2在缺血期发挥了抑凋亡的作用,随着再灌注时间的延长,其作用减弱,脑细胞凋亡指数增加。葛根素可能通过抑制c-fos的表达、增加Bcl-2的表达发挥减轻肝缺血再灌注损伤所致脑细胞凋亡的作用。     

TLR4和NF-κB在大鼠肾缺血再灌注损伤中的表达及意义

目的：观察大鼠肾缺血再灌注损伤后Toll样受体4（TLR4）和核因子-κB（NF-kB）的表达变化及其关系.方法：将40只SD大鼠随机等分为假手术组（S组）和肾缺血再灌注损伤组（I/R组）,建立肾缺血再灌注模型.在肾缺血再灌注后24 h切取肾脏.采用免疫组织化学法观察TLR4蛋自及NF-κB蛋白在肾脏组织中的表达变化及其相关性 采用半定肇逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测两组肾组织中TLR4、NF-κB的mRNA水平表达变化.结果：TLR4蛋白在S组大鼠肾小管细胞中有少量表达,在I/R组24 h后肾组织中表达明显增加,与S组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）.NF-κB P65蛋白在S组大鼠肾小管细胞胞浆和少量胞核中有表达.在I/R组24 h后肾小管细胞胞浆和胞核均可见NF-κB P65明显表达.差异有统计学意义（P〈0.01）.TLR4和NF-κB在肾缺血再灌注损伤组织中的表达具有明显的相关性.I/R组中的TLR4 mRNA、NF-κB mRNA表达均较S组上调,差异有统计学意义（P〈0.05）.结论：大鼠肾缺血冉灌注损伤后,肾组织TLR4和NF-κB P65的表达明显上调,且有明显的相关性.TLR4有可能通过激活NF-κB继而引起下游的炎症因子募集,介导肾缺血再灌注损伤.     

缺血预处理对大鼠移植胰腺缺血再灌注损伤的保护作用及其机制的研究

目的：探讨缺血预处理对大鼠移植胰腺冷缺血再灌注损伤和细胞凋亡的保护作用及其机制。方法：24只糖尿病SD大鼠随机分为缺血再灌注组（I/R组,n=6）和缺血预处理组（IPO组,n=18）,IPO组又根据不同方法分为3个亚组：IPO1组（再灌注30s,缺血30s1次,n=6）、IPO2组（再灌注30s,缺血30s3次,n=6）和IPO3组（再灌注30s,缺血30s6次,n=6）。24只SD大鼠为供体,I/R组和IPO组均行同种胰腺移植。另取6只SD大鼠为对照组。检测各组再灌注前、后血糖及再灌注后2h移植胰腺组织中SOD和MDA含量;TUNEL法观察移植胰腺组织细胞凋亡情况,WesternBlot检测移植胰腺组织Bax和Bcl-2蛋白表达情况。结果：1）再灌注后IPO各组相对于I/R组血糖低（P〈0.05,P〈0.01,P〈0.05）;IPO2组较IPO1组和IPO3组血糖低（P均〈0.05）;2）再灌注后IPO组较I/R组移植胰腺组织中SOD含量高（P均〈0.01）,MDA含量低（P均〈0.01）,IPO2组相对于IPO1组和IPO3组SOD含量高（P均〈0.05）、MDA含量低（P均〈0.05）。3）再灌注后IPO组较I/R组移植胰组织中AI值低（P均〈0.01）,IPO2组相对于IPO1组和IPO3组AI值低（P均〈0.05）;4）I/R组胰组织Bax蛋白高表达,Bcl-2蛋白低表达,IPO各组再灌注后移植胰组织Bax蛋白低表达,Bcl-2蛋白高表达,而IPO2组Bcl-2蛋白表达最高,Bax蛋白表达最低。结论：缺血预处理对大鼠移植胰腺的缺血再灌注损伤具有保护作用,并可以减少移植胰腺缺血再灌注后的细胞凋亡,机制与减少氧自由基、上调Bcl-2蛋白和下调Bax蛋白有关。再灌注30s缺血30s重复3次是最佳的大鼠移植胰缺血预处理诱导办法。     

姜黄素预处理对大鼠缺血再灌注肾小管上皮细胞凋亡的影响

目的：建立大鼠。肾脏缺血再灌注损伤（IRI）模型,观察姜黄素预处理对大鼠肾脏缺血再灌注肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法：36只SD雄性大鼠随机分为3组,分别为假手术（Sham）组、肾脏缺血再灌注模型（IR）组、姜黄素预处理（CUR）组,每组12只。CUR组在缺血前2h给予姜黄素100mg／kg剂量溶于0．1％二甲基亚砜1ml中,注入腹腔。24小时后沿原切口进入,切除左。肾。肾组织用4％多聚甲醛固定24h,常规石蜡包埋切片。采用TUNEL法检测各组缺血肾小管上皮细胞凋亡。结果：与Sham组相比,IR组肾小管上皮细胞凋亡明显增加。与IR组比较,CUR组肾小管上皮细胞凋亡减少（P＜0．05）。结论：姜黄素预处理可减轻肾脏IRI的肾小管上皮细胞凋亡。     

缺血后处理对骨骼肌缺血再灌注后肺损伤保护作用的机制

目的：探讨缺血后处理（I-postC）对大鼠双侧后肢骨骼肌缺血再灌注（I/R）后肺损伤的保护作用及机制。方法：阻断肾下腹主动脉建立大鼠双侧后肢骨骼肌I/R损伤模型。48只大鼠随机分为3组：I/R组、缺血预处理（IPC）组及I-postC组,每组16只。分别于再灌注后12、24h各处死8只,取肺组织标本,观察肺组织形态学、湿/干重比、丙二醛（MDA）及髓过氧化物酶（MPO）的变化。原位杂交和RT-PCR方法检测肺组织中细胞间黏附分子（ICAM）-1mRNA的表达,Western blot检测ICAM-1蛋白表达。结果：再灌注12或24h后I/R组有明显的弥散功能障碍,表现为间质浸润细胞增多并伴有明显水肿。IPC组和I-postC组的各项指标均较I/R组明显降低,差异有统计学意义（P〈0.01）,但2组之间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：I-postC可以减轻大鼠双侧后肢骨骼肌I/R后肺损伤,与IPC可能存在共同的作用机制。     

葛根素对大鼠肝缺血再灌注损伤心肌组织c-fos、Bcl-2表达的影响及意义

目的：研究肝缺血再灌注损伤时c-fos、Bcl-2在心肌组织中的表达与心肌细胞凋亡的关系及葛根素对其影响的可能机制。方法：建立肝缺血再灌注损伤动物模型,选健康雄性SD大鼠32只,每组8只,随机分为对照组、缺血再灌注组（I/R组）、葛根素预处理组（PUE组）和生理盐水预处理组（N组）。应用免疫组织化学方法分别测定各组大鼠心肌组织c-fos、Bcl-2的表达,应用原位细胞凋亡法测定心肌细胞凋亡情况,应用常规HE染色观察各组肝脏及心肌组织形态改变。结果：c-fos、Bcl-2表达及心肌细胞凋亡指数I/R组较对照组明显增加（P〈0.01）;PUE组c-fos表达与I/R组比较明显降低（P〈0.01）,Bcl-2表达及心肌细胞凋亡指数与对照组及I/R组相比,差异均有统计学意义（P〈0.01）;N组与PUE组各指标比较差异均有统计学意义（P〈0.01）。心肌组织HE染色切片观察显示I：/R组心肌细胞部分横纹不清楚,有炎性细胞浸润,间质出血,心肌嗜酸性增强及肌纤维肿胀,心肌水肿;PUE组心肌组织水肿明显减轻。肝组织HE染色切片观察显示I,/R组炎性细胞在肝组织中大量散在分布,肝细胞明显肿胀,有的呈空泡状变性,肝脏结构紊乱;PUE组上述改变明显改善。结论：肝缺血再灌注损伤可引起心肌组织的损伤及心肌细胞凋亡。葛根素可能通过抑制c-fos蛋白表达,增加Bcl-2蛋白表达起到抑制肝缺血再灌注损伤所致心肌细胞凋亡作用。     

参附注射液对大鼠肠缺血再灌注损伤后肠黏膜细胞凋亡的影响

目的：研究参附注射液对大鼠肠缺血再灌注期间黏膜上皮细胞凋亡的影响，并探讨其可能机制。方法：采用大鼠肠缺血再灌注模型。24只大鼠随机分为假手术对照组（C组）、缺血再灌注组（I／R组）和参附治疗组（SF组），在规定时间检测小肠黏膜上皮细胞caspase-3、Bcl-2蛋白的表达，凋亡细胞数目，同时观察小肠黏膜病理形态学改变。结果：IR组肠黏膜上皮细胞凋亡指数（apoptosisindex,AI）、caspase-3、Bcl-2蛋白显著高于C组（P〈0．01）。SF组AI、caspase-3蛋白低于IR组（P〈0.01或P〈0．05），而Bcl-2蛋白较IR组上调（P〈0．01）。caspase-3表达与AI呈正相关（r=0，914，P〈0，01）；Bel-2的表达与AI、caspase-3呈直线负相关（r分别=-0．375，-0．367，P〈001）。SF组小肠黏膜病理损伤程度较I／R组明显减轻（P〈0.01）。结论：参附注射液通过抑制caspase-3表达和促进Bcl-2基因表达减少缺血再灌注期间肠黏膜上皮细胞的凋亡。从而一定程度上减轻肠黏膜缺血再灌注损伤。     

地塞米松预处理减轻肾缺血再灌注损伤

目的探讨地塞米松（dexamethasone,DEX）对小鼠肾缺血再灌注损伤的作用及其机制。方法建立小鼠肾缺血再灌注损伤模型。18只雄性C57BL／6小鼠随机分为3个组（n=6）,分别为假手术组（Sham）、肾缺血再灌注损伤模型组（IRI）和DEX预处理组。Sham和IRI组缺血前60min予生理盐水（腹腔注射）,DEX组缺血前60min给予DEX（4mg／kg）,IRI组和DEX组血管夹夹闭左侧肾蒂,置于32℃温箱后1h松开血管夹,去除右肾。Sham组操作同上,但不夹闭左侧肾蒂,再灌注24h后处死小鼠,收集血清和肾脏标本。PAS染色后观察肾脏病理形态学变化,PCR检测白细胞介素6（interleukin6,IL-6）、干扰素γ（interferonγ,IFN-γ）和肿瘤坏死因子（tumornecrosisfactorOt,TNF-a）Westernblotting检测pAkt和总的Akt。结果与Sham组相比,IRI组血清肌酐和血尿素氮明显升高。病理检查可见肾脏内肾小管上皮细胞明显肿胀坏死、蛋白管型形成明显,还可观察到炎症细胞浸润明显增加。PCR显示IL-6、IFN-γ和TNF-a mRNA水平明显上调,Westernblotting显示p-Akt蛋白表达量明显增加,但Akt蛋白表达量无明显差异。与IRI组相比,DEX治疗组血清肌酐、血尿素氮明显下降,肾小管上皮细胞肿胀坏死减轻、炎症细胞浸润减少,IL-6、IFN-γ和TNF-a表达降低,p-Akt表达减少,但Akt蛋白表达量无明显差异。结论DEX预处理可通过抑制Akt信号通路激活,从而抑制炎症反应,从而减轻肾缺血再灌注损伤。     

TLR4／NF—κB信号通路与肾脏缺血后处理的肾脏保护作用的关系

目的探讨小鼠。肾脏缺血后处理（ischemic postconditioning,IPC）对缺血再灌注损伤（ischemia-reperfusion injury,IRI）的保护作用及与Toll样受体（toll—like receptor,TLR）4／核因子（nuclear factor,NF）-κB信号通路的关系。方法BALB／c小鼠42只随机分组：假手术组6只、IRI组18只与IPC组18只,IRI组与IPC组均设术后1d、3d、5d亚组,每个亚组各6只小鼠。建立肾脏IRI及IPC模型;于术后1d、3d、5d取血检测血清肌酐（Scr）、血尿素氮（BUN）,取肾组织行病理学检查,计算术后1d急性肾小管损伤的Jablonski评分,采用蛋白质印迹（Western blot）法检测术后1d、3d、5d的TLR4、NF—κB表达水平。结果术后各时点,IRI组的Scr、BUN水平均明显高于假手术组（均为P〈0．05）;术后1d,IPC组的Scr、BUN水平均明显低于IRI组（均为P〈0．05）,且于术后5d两指标明显下降并恢复至正常范围。与假手术组比较,IRI组和IPC组肾小管损伤程度较为严重（均为P〈0．05）;与IRI组比较,IPC组的肾小管损伤程度显著减轻（P〈0．05）。术后1d、3d,IPC组的TLR4表达水平较IRI组明显降低（均为P〈0．05）。术后1d、3d、5d,IPC组的NF—κB表达水平较IRI组明显降低（均为P〈0．05）。结论IPC可减轻缺血再灌注对肾脏的损伤,其保护作用可能通过抑制TLR4／NF—κB信号通路实现。     

Expression and function of Erbin protein in renal ischemia-reperfusion injury

Objective To investigate the expression of ErbB2 interacting protein (Erbin) in renal ischemia-reperfusion injury (IRI) in vivo and in vivo, and the effect of Erbin over-expression on IRI. Methods (1) In vivo, the model of renal IRI was constructed in mice, and set up sham group and reperfusion 3, 6, 12, 24 and 48 h IRI group. BUN and Scr were detected and PAS staining was used to observe the pathology change of renal tissues. Cell apoptosis was detected by TUNEL staining. Erbin and NF-κB expression in renal tissue was detected by Western blotting, and immunohistochemistry was used to detect the distribution of Erbin. (2) In vivo, IRI model in HK2 cells was constructed and cells were harvested after culturing in normal medium for 3, 6, 12 and 24 h. Erbin expression was detected by Western blotting. Flow cytometry and ELISA were used to evaluate the level of cell apoptosis and inflammatory cytokine secretion respectively. HK2 cells were transiently transfected with Prk5-myc-Erbin plasmid via lipofectamine 2000, and were divided into control group, IRI group, Erbin group and Erbin+IRI group. The protein expression of Erbin and NF-κB, cell apoptosis and inflammatory cytokine secretion was detected. Results (1) Compared with sham group, serum BUN and Scr were dramatically increased in IRI model, especially in 24 h after reperfusion (P＜0.05). Moreover, PAS staining showed that a lot of renal tubular epithelial cells were necrosis and fell off, and many protein cast were formed, renal injury score and apoptotic index were higher in 6 h, 12 h, 24 h, 48 h IRI model than those in sham group (all P＜0.05). The expression of Erbin, which was expressed in renal tubules, and nuclear NF-κB in 24 h IRI model were significantly increased, as compared with sham group (all P＜0.05). (2) Compared to those in control group, nuclear NF-κB expression, apoptosis and inflammatory cytokine secretion were significantly increased in IRI group. Meanwhile, Erbin expression was also induced and peaked at 24 h (P＜0.05). Compared to those in IRI group, cell apoptosis, the expression of nuclear NF-κB, inflammatory cytokine IL-6 and TNF-α were decreased in Erbin+IRI group (all P＜0.05). Conclusions Erbin expression is up-regulated in renal IRI, and over-expression of Erbin can partly inhibit NF-κB activation, cell apoptosis and inflammatory cytokine secretion in IRI group, which indicates Erbin may playing a protective role in renal IRI.     

大鼠肾缺血-再灌注后JNK mRNA及蛋白表达的变化及银杏达莫注射液的干预作用

目的：观察JNK在肾缺血-再灌注损伤大鼠肾组织中的表达,研究银杏达莫注射液对肾缺血-再灌注损伤的防治作用。方法：将健康雄性SD大鼠50只随机分为5组：假手术对照组（n=10）,缺血-再灌注损伤模型组（n=10）,银杏达莫高剂量、中剂量、低剂量组（每组10只）。对于模型组、高、中、低剂量组,切除右肾,夹闭左侧肾蒂缺血1h,移去动脉夹再灌注1h,除此之外,对于银杏达莫处理组,手术前分别按每天0.9,1.8,3.6ml/kg的剂量尾静脉注射给药1周,假手术对照组和模型组手术前按每天1.8ml/kg的剂量尾静脉注射生理盐水,给药1周。检测肾组织丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）的活性及血肌酐（Scr）、血尿素氮（BUN）的含量。取肾组织光镜、电镜下观察各组肾组织的形态学变化,用RT-PCR技术检测各组大鼠肾组织JNKmRNA的表达情况,Western印迹法观察p38MAPK、JNK的活化情况。结果：与假手术对照组相比,模型组大鼠Scr（214.2±40.1）μmol/L、BUN（8.75±1.28）mmol/L及MDA（11.27±2.43）nmol/mgprot含量均比假手术组增高（P〈0.01）,SOD（103.62±6.59）nmol/mgprot活性显著下降（P〈0.01）;肾组织JNKmRNA（1.38±1.36）水平显著升高（P〈0.01）;肾组织p-JNK蛋白水平显著上升,与模型组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。银杏达莫注射液干预后,Scr、BUN及MDA含量显著降低,SOD活性显著升高;肾组织JNKmRNA水平显著下调,与模型组比较差异有统计学意义（P〈0.01）;肾组织p-JNK蛋白水平显著下调,与模型组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;银杏达莫不同剂量组之间差异无统计学意义。结论：银杏达莫注射液可通过降低氧自由基水平、减轻脂质过氧化反应,从而下调JNKmRNA及蛋白表达水平以改善缺血-再灌注损伤大鼠肾功能,减轻其损伤程度。     

低氧诱导因子1α高表达对小鼠急性缺血性肾损伤的影响

目的 探讨低氧预处理诱导低氧诱导因子1α（HIF-1α）高表达对小鼠肾缺血再灌注损伤（IRI）的影响及其可能机制。 方法 雄性C57BL/6N小鼠35只，随机分为健康对照组、氯化钴（CoCl2）组和8%O2组，每组10只；预处理12 h后，以上3组各取5只，分为缺血再灌注（IR）组、CoCl2＋IR组、8%O2＋IR组；另设5只作为假手术对照组。采用夹闭双侧肾蒂30 min的方法建立肾缺血动物模型，观察CoCl2和8％O2预处理对小鼠IR 24 h后肾功能、肾组织病理和相关肾损伤指标的影响及与CoCl2和8％O2诱导HIF-1α及其保护性靶基因血红素氧化酶1（HO-1）表达之间的关系。 结果 CoCl2＋IR组小鼠的肾功能[BUN (35.2±12.2) mmol/L，Scr (34.0±9.7) μmol/L]和8%O2＋IR组小鼠的肾功能[BUN (31.8±9.1) mmol/L，Scr (41.6±10.6) μmol/L]均较IR组[BUN (65.8±2.6) mmol/L，Scr (229.5±11.2) μmol/L]显著改善（P < 0.01）；与此相一致，CoCl2＋IR组和8%O2＋IR组的病理学改变、细胞凋亡程度和波形蛋白的表达均明显低于IR组。另外，CoCl2组和8%O2组中HIF-1α及其靶基因HO-1的表达明显高于健康对照组。 结论 低氧预处理可上调体内HIF-1α表达，对小鼠IRI肾脏具有良好保护效果     

Kallistatin对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护及机制研究

目的:探讨Kallistatin对大鼠肝缺血再灌注后肝损伤的保护作用及机制。方法:建立大鼠肝脏缺血再灌注模型,随机将Wistar大鼠分成假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)、空壳腺病毒组(O组)和Kallistatin组(K组)。测定血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平评价肝功能。HE染色观察肝组织病理学改变。TUNEL法观察肝细胞凋亡情况。Westen-blot法检测肝组织中Caspase-3、Bcl-2、Bax的表达。结果:与S组比较,I/R组AST、ALT水平明显升高(P<0.05),病理损伤严重,Cas-pase-3和Bax表达也相应增加(P<0.05),而Bcl-2表达减少(P<0.05)。与I/R组比较,K组各项指标均明显改善(均为P<0.05)。O组与I/R组间无明显差别(P>0.05)。结论:Kallistatin对大鼠肝脏缺血再灌注后具有明显的保护作用,其机制可能通过促进Bcl-2表达、抑制Bax表达实现。     

罗格列酮对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用研究

目的研究罗格列酮对肾缺血再灌注损伤的保护作用及潜在机制。方法将60只大鼠随机分成假手术组、缺血再灌注损伤组、罗格列酮10 mg/kg组、罗格列酮20 mg/kg组、罗格列酮40 mg/kg组和罗格列酮80 mg/kg组,每组各10只。利用血管夹夹闭大鼠双侧肾蒂构建肾缺血再灌注损伤模型。ELISA检测大鼠血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、白介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子(TNF-α)和白介素-6(IL-6)表达量;Western blot检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)和p-PPAR-γ表达水平;RT-PCR检测肾脏IL-8、TNF-α和IL-6信使核酸序列(mRNA)水平;黄嘌呤氧化酶法检测过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)和超氧化物歧化酶(SOD)活性;TBA法检测丙二醛(MDA)的含量;过碘酸雪夫氏(PAS)染色检测肾组织病理形态。结果与假手术组相比,缺血再灌注损伤组肾组织病理损伤和Cr、BUN、IL-8、TNF-α、IL-6、p-PPAR-γ以及MDA表达水平均明显增加,而CAT、GPX和SOD活性明显降低以及PPAR-γ表达差异无统计学意义;与缺血再灌注损伤组相比,罗格列酮预处理可明显减少肾组织病理损伤和Cr、BUN、IL-8、TNF-α、IL-6以及MDA表达水平,但可明显增加CAT、GPX和SOD活性以及p-PPAR-γ表达水平,但对PPAR-γ表达水平无影响。结论罗格列酮预处理对大鼠肾脏缺血再灌注损伤具有保护,其作用机制与激活PPAR-γ抑制氧化应激和炎症相关。     

外源性硫化氢抑制TLR2和TLR4表达并减轻大鼠肾脏缺血再灌注损伤

目的观察外源性硫化氢(H₂S)供体硫氢化钠(NaHS)能否抑制Toll样受体2(TLR2)和Toll样受体4(TLR4)表达、减轻大鼠肾脏缺血再灌注损伤(IRI)。 方法24只6~8周龄雄性SD大鼠随机分为3组：假手术(Sham)组、肾脏缺血再灌注(I/R)组、NaHS+I/R组。采用右肾切除联合左肾动脉夹闭45 min后再灌注24 h的方法诱导肾IRI。夹闭左肾动脉前，NaHS+I/R组给予NaHS(300 nmol/min)连续输注10 min，Sham组和I/R组则给予等体积生理盐水。分别留取各组腹主动脉血及肾组织标本。Western印迹法检测肾组织TLR2、TLR4蛋白的表达；免疫组织化学法检测肾组织白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达；比色法检测血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)。HE染色观察肾脏组织学改变；TUNEL法检测肾组织细胞凋亡。 结果与Sham组比较，I/R组的TLR2、TLR4、IL-6、TNF-α表达均增加(P<0.05)，BUN、Scr亦明显升高(P<0.05)，肾小管上皮损伤评分较高(P<0.05)，肾组织凋亡细胞增加(P<0.05)。与I/R组比较，NaHS+I/R组的TLR2、TLR4、IL-6、TNF-α表达均减少(P<0.05)，BUN、Scr亦明显下降(P<0.05)，肾小管上皮损伤评分较低(P<0.05)，肾组织凋亡细胞减少(P<0.05)。 结论外源性H₂S可以抑制TLR2、TLR4途径，减少炎症因子释放及细胞凋亡，减轻大鼠肾脏IRI。