豚鼠哮喘模型气道中炎症细胞浸润与c—jun表达相关性研究

探讨豚鼠哮喘模型气道中炎症细胞的浸润和活化与原癌基因ｃ－ｊｕｎ表达的关系。应用免疫组织化学技术和肺的组织学检查方法，观察豚鼠哮喘模型致敏原激发后，４，１２，２４ｈ气道中炎症细胞的浸润及炎症细胞内ｃ－ｊｕｎ表达情况。     

急性白血病细胞中原癌基因c－myc的表达

目的探讨原癌基因ｃ－ｍｙｃ在急性白血病中的表达及意义。方法应用免疫印渍及免疫细胞化学染色技术检测ｃ－ｍｙｃ原癌基因在急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）和急性非淋巴细胞白血病（ＡＮＬＬ）中的表达，以ＨＬ６０细胞作为阳性对照，正常人外周血淋巴细胞作为阴性对照，参照Ｇｒｅｉｌ等（１９８９）所建立的方法对ｃ－ｍｙｃ在急性白血病细胞中的表达进行定量，并对实验数据进行ｔ检验及相关分析。结果ｃ－ｍｙｃ在ＡＬＬ和ＡＮＬＬ中均有表达，阳性率分别为５０％和６３％，ＡＬＬ和ＡＮＬＬ病人白血病细胞中ｃ－ｍｙｃ表达差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。ｃ－ｍｙｃ在不同病人的白血病细胞中的表达水平并不一样，部分病人同一病例在不同白血病细胞上ｃ－ｍｙｃ蛋白分布和表达不同。ＡＬＬ和ＡＮＬＬ白血病细胞中ｃ－ｍｙｃ的表达和患者骨髓中白血病细胞百分率显著相关（分别ｒ＝０．８８，Ｐ＜０．０１，及ｒ＝０．８，Ｐ＜０．０１），和患者年龄、外周血白细胞计数、血红蛋白、血小板计数均无相关性。结论ｃ－ｍｙｃ在ＡＬＬ和ＡＮＬＬ中表达差异无显著性，急性白血病细胞中ｃ－ｍｙｃ的表达与患者骨髓中白血病细胞百分率显著相关。ｃ－ｍｙｃ表达高的患者，治疗效果较差。ｃ－ｍｙｃ在急性白血     

原癌基因c—myc与肿瘤

原癌基因ｃ－ｍｙｃ是ｍｙｃ家族的重要成员，它编码细胞核内磷酸化蛋白质。ｃ－ｍｙｃ基因在维持正常细胞功能活中起重要作用，参与细胞的增殖，分化及凋亡过程。ｃ－ｍｙｃ与人类肿瘤有密切关系，在许多肿瘤组织中均可以检测到原癌基因ｃ－ｍｙｃ及其蛋白表达产的的异常。而且体外实验证实ｃ－ｍｙｃ基因可与其他癌基因协同转化多种细胞。     

急性非淋巴细胞白血病细胞中原癌基因c—myc的表达

研究急性非淋巴细胞白血病细胞中原癌基因ｃ－ｍｙｃ的表达及临床意义。方法采用蛋白质免疫印渍和单克隆抗体免疫细胞化学染色方法检测３０例ＡＮＬＬ细胞中原癌基因ｃ－ｍｙｃ的表达。结果１９例表达阳性，阳性率为６３％。ＡＮＬＬ中白血病细胞的阳性细胞百分率为２９％－９６％，ｃ－ｍｙｃ在不同病人的白血病细胞中表达水平不一样；ｃ－ｍｙｃ的表达和患者骨髓中白血病细胞百分率显著相关，和患者年龄，性别，外周血白细胞计数。     

病理性瘢痕中c-myc原癌基因的表达

目的探讨原癌基因ｃ－ｍｙｃ的表达与病理性瘢痕形成的相关性。方法应用免疫组化ＳＰ法检测ｃ－ｍｙｃ蛋白在增生 性瘢痕、瘢痕疙瘩和正常皮肤组织中的表达和分布,并用图像定量分析比较其差异。结果在增生性瘢痕和瘢痕疙瘩的 成纤维细胞中ｃ－ｍｙｃ蛋白呈强阳性表达,与正常皮肤对照组均有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。结论增生性瘢痕与瘢痕疙瘩中 ｃ－ｍｙｃ蛋白表达升高提示存在ｃ－ｍｙｃ原癌基因的激活,ｃ－ｍｙｃ原癌基因可能参与了成纤维细胞的分化增殖、胶原合成与 降解以及对细胞因子的调控,并导致瘢痕增生。     

豚鼠气道及肺组织原癌基因表达与哮喘的相关研究

目的:为研究原癌基因在哮喘发病中的作用.方法:以卵白蛋白致敏豚鼠建立哮喘模型,用Dot-blot,Northern-blot分子杂交及免疫组化技术,分别观察正常及哮喘发作后豚鼠气道上皮及肺组织中原癌基因c-fos,c-myc的表达水平.结果:正常豚鼠气     

骨肉瘤 ras、c-myc 和 Rb 基因蛋白表达

应用免疫组织化学（ＬＳＡＢ法）检测９例人骨肉瘤ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ原癌基因和Ｒｂ抑癌基因蛋白产物的表达，研究结果表明：原癌基因ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ的蛋白表达阳性率分别为７８％（７例）、８９％（８例）。两种蛋白表达的强度无显著性差异。在９例骨肉瘤中，两种原癌基因蛋白共同表达有６例，占６７％。抑癌基因Ｒｂ蛋白阴性表达为３例，阴性表达率３３％，且都伴有Ｐ２１和ｃ－ｍｙｃ癌基因蛋白的阳性表达。本文研究结果提示Ｐ２１、ｃ－ｍｙｃ和Ｒｂ癌基因蛋白的异常表达可能在骨肉瘤的发生发展起着一定的作用。     

骨肉瘤rad,c—myc和Rb基因蛋白表达

应用免疫组织化学（ＬＳＡＢ法）检测９例人骨肉瘤ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ原癌基因和Ｒｂ抑癌基因蛋白产物的表达，研究结果表明：原癌基因ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ的蛋白表达阳性率分别为７８％（７例）、８９％（８例）。两种蛋白表达的强度无显著性差异。在９例骨肉瘤中，两种原癌基因蛋白共同表达有６例，占６７％。抑癌基因Ｒｂ蛋白阴性表达为３例，阴性表达率３３％，且都伴有Ｐ２１和ｃ－ｍｙｃ癌基因蛋白的阳性表达。本文研究结果提示     

胰岛素对血管平滑肌细胞增殖及原癌基因c—fos,c—myc异…

我们观察了不同浓度的胰岛素对体外培养人血管平滑肌细胞增殖的影响，及其该过程原癌基因ｃ－ｆｏｓ，ｃ－ｍｙｃ的表达，结果表明，胰岛素能促进血管平滑肌细胞（ＳＭＣ）增殖，即：ＳＭＣ目的增多，ＳＭＣＤＮＡ的合成，胰岛素能促进原癌基因ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｍｙｃ的异常表达；且以上作用均在着剂量－效应关系，这些结果提示，高胰岛素血症促进动脉粥样硬化（ＡＳ）发生，发展可能是通过促进某些原癌基因异常表达，进而促进ＳＭＣ     

生物素标记核酸探针检测白血病患者c—myc原癌基因的表达水平

用两种方法制备生物素ｃ－ｍｙｃ癌基因探针，通过ＲＮＡ－ＤＮＡ斑点杂交技术，检测了白血病３０例和２种白血病细胞株中ｃ－ｍｙｃ原癌基因的ＲＮＡ表达水平，结果显示，白血病细胞株，急性白血病和慢性粒细胞性白血病急性变患者的ｃ－ｍｙｃ的ＲＮＡ表达水平明显高于正常人和患其它血液病的患者，提示ｃ－ｍｙｃＲＮＡ水平的判定可提供一些有意义的临床信息，同时探讨了生物素和光敏生物素标记核酸探针的优越性。     

原癌基因表达在哮喘气道重塑中的作用

目的观察原癌基因表达在哮喘气道重逆中的作用。方法卵蛋白致敏豚鼠 建立哮喘模型。Dot-blot,North-ern-blot分子杂交及免疫组织化学技术观察豚鼠气道上皮,肺组织中原癌基因c-fos,c-myc,c-jun和c-sis的表达及其与气道重塑的关系。结果：正常豚鼠气道及肺组织中c-fos和c-myc mRNA无或很少表达,哮喘发作后,豚鼠气道上皮及肺组织c-fos和c-mycmRNA的表达明显增加;免疫组织化学染色显示Fos,Myc,Jun及Sis在政党豚鼠低水平表达,4种原癌基因产物表达增,国,阳性反应细胞主要分布于气道上皮细胞胞质、气道及细支气的上皮细胞胞核及浸润的炎症细胞中,病理结果显示气道粘膜及小鼠气管平滑肌周围淋巴细胞、嗜酸性粒细胞及中性粒细胞浸润,气道平滑肌显著增生,结论原部达在气道重逆过程中有重要作用。     

哮喘豚鼠气道内NK-1R mRNA表达及其含量的研究

目的:研究哮喘豚鼠气道内神经激肽1受体(NK-1R)mRNA的分布及相对含量.方法:用卵蛋白超声雾化法制作哮喘豚鼠模型;原位杂交技术检测NK-1R mRNA,光镜观察其在气道内表达的部位.图像分析测定NK-1R mRNA的相对含量.结果:哮喘组NK-1R mRNA表达程度明显高于正常组;NK-1RmRNA分布于气管上皮细胞上层细胞表面、黏膜下层、血管周围上皮细胞、炎性细胞的表面和平滑肌细胞、腺体细胞表面.结论:NK-1R参与了卵蛋白诱导的哮喘豚鼠发病机制.     

吸入冷空气对哮喘豚鼠肺内神经激肽 A含量及基因表达的影响研究

目的研究冷空气吸入刺激对哮喘豚鼠血浆及肺组织中神经激肽A(NKA)含量及NKA mRNA表达的影响,并探讨其影响的机制.方法用卵蛋白超声雾化法制作豚鼠哮喘模型;哮喘组15例:按哮喘模型制作要求致敏及诱喘,诱喘后24 h取材.冷空气刺激组15例:致敏及诱喘同哮喘组,于诱喘前5 d、诱喘当天及取材当天(诱喘后24 h),每日吸入冷空气20 min;正常对照组:用生理盐水替代卵蛋白雾化溶液,方法同上.用酶联免疫法检测各组血浆及肺组织中NKA含量;用RT-PCR方法检测肺组织中NKA mRNA的相对含量.结果哮喘组豚鼠血浆、肺组织中NKA含量及肺组织中NKA mRNA的相对含量均明显高于正常组豚鼠,差异非常显著(均P＜0.01);冷空气刺激组哮喘豚鼠,其血浆、肺组织中NKA含量及肺组织中NKA mRNA的相对含量均明高于哮喘组豚鼠,差异显著(均P＜0.05).结论NKA参与了卵蛋白诱发的豚鼠哮喘发病机制;冷空气吸入刺激能显著增加哮喘豚鼠血浆及肺组织中NKA含量;冷空气吸入刺激具有在转录水平上调NKA mRNA表达的作用,由此导致血浆及肺组织中NKA蛋白含量增多.     

初生及成年牛眼小梁网,睫状体及视网膜中原癌基因的表达

目的：研究正常成年及新生牛眼组织原癌基因的表达水平。方法：分离牛眼组织，提取ＲＮＡ，应用缝隙印迹杂交和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交技术，分析眼组织中Ｎ－ｒａｓ，Ｃ－ｍｙｃ和Ｃ－ｆｏｓ基因的表达水平。结果：Ｎ－ｒａｓ基因在牛眼小梁网、睫状体及视网膜神经层均有表达，初生及成年牛间无差异，Ｃ－ｍｙｃ基因在这三种组织中有较高表达，且初生牛比成年牛眼表达水平高。Ｃ－ｆｏｓ基因不表达。结论：正常眼组织中原癌基因的     

健儿强身膏对哮喘豚鼠肺组织病理的影响

目的:观察健儿强身膏对支气管哮喘豚鼠模型肺组织病理的影响。方法:采用卵蛋白(OVA)致敏法制备豚鼠哮喘模型,将豚鼠随机分为6组,即空白对照组、模型组、阳性对照组、中药(高、中、低)3个剂量组,分别观察各组引喘潜伏期(T)、支气管和肺组织的病理及超微结构变化。结果:健儿强身膏3个剂量组均能延长豚鼠哮喘诱发潜伏期,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05);中药各剂量组上气道炎症及肺组织病理症状与模型组相比均有不同程度改善,其作用与剂量呈相关性,效果与地塞米松相似。结论:健儿强身膏能有效降低肺组织炎性细胞浸润,改善肺组织的病理学变化。     

骨骼肌肿瘤中c—myc癌基因的改变及其预后意义

探讨ｃ－ｍｙｃ癌基因在骨骼肌肿瘤中的改变及其预后意义。方法，运用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交和ＲＮＡ打点杂交技术分析１８例骨骼肌肿瘤及相对应瘤组织中ｃ－ｍｙｃ癌基因的发迹并对术后患者进行３年随访。结论：ｃ－ｍｙｃ癌基因以扩增，重排及高表达方式参与骨骼肌肿瘤的发生发展，检测有无ｃ－ｍｙｃ癌基因的异常可辅助判断骨骼肌肿瘤的预后。     

健儿强身膏对哮喘豚鼠血清IL-10、IL-6、TNF-α表达的影响

目的观察健儿强身膏对哮喘豚鼠血清IL-10、IL-6、TNF-α表达的影响。方法采用卵蛋白（OVA）致敏法制备豚鼠哮喘模型,将48只豚鼠随机分为6组,即空白对照组、模型组、阳性对照组、健儿强身膏（高、中、低）3个剂量组,观察各组引喘潜伏期（T）及肺组织的病理变化,应用酶联免疫吸附试验法测定血清IL-10、IL-6、TNF-α的表达水平。结果各治疗组均可延长引喘潜伏期,与模型组相比差异有统计学意义（P〈0.05）。与空白对照组相比,模型组的IL-6、IL-10表达显著增加（P〈0.01）,TNF-α的表达无显著差异;各治疗组与模型组相比IL-6、IL-10表达显著下降（P〈0.01）,TNF-α的表达无显著差异。结论健儿强身膏能下调哮喘豚鼠IL-6、IL-10的表达,可能为其抑制哮喘呼吸道炎症的重要作用机制之一。     

喉癌及癌旁不同距离组织中ras、c-myc、p53蛋白的复合表达

目的 :研究癌基因 (ras,c myc)及抗癌基因 (p5 3)蛋白在喉癌及癌旁不同距离处的复合表达及意义。方法 :应用LSAB微波免疫组织化学法 ,检测了ras、c myc及p5 3在 30例喉癌组织、边缘区、癌旁 0 .5cm ,1.0cm ,1.5cm ,2 .0cm处粘膜组织和 4例正常喉粘膜组织中的复合表达情况。结果 :① 2种以上基因蛋白产物同时表达阳性者在喉癌组织中为 2 8例 (93.3 % ) ,其中ras +c myc +p5 3为 17例 (5 6 .7% ) ,癌旁组织中也存在着不同程度的复合表达 ,而正常喉粘膜组织中无一例复合表达 ;②复合表达阳性率依正常粘膜组织→癌旁 2 .0cm→ 1.5cm→ 1.0cm→0 .5cm→边缘区→癌组织递增 ,且癌旁 1.0cm处与 0 .5cm范围内的表达存在显著差异 (P <0 .0 5 ) ;③ 3种癌基因产物的复合表达与喉癌的部位 ,分化程度 ,临床分期无关 (P >0 .0 5 )。结论 :喉癌及癌旁组织中存在着 3种癌基因的复合表达 ,其在喉癌的发生中有协同作用 ;距癌 0 .5cm以内的癌旁组织应视为危险性病变。