AMPA受体在视觉可塑性中的研究进展

突触可塑性研究是探讨弱视发病机制的热点之一.长时程增强(LTP)是突触传递功能可塑性的重要表现形式.近年研究表明,沉默突触转化为功能性突触可能是LTP维持的重要机制.经典的沉默突触只含有NMDA受体,对突触前谷氨酸释放无反应,在突触形成和某些类型的突触可塑性过程中,神经元可通过突触后募集AMPA受体使突触激活.AMPA受体在视觉可塑性中的作用研究对探讨弱视的发病机制有重要意义.本文就AMPA受体的基本特征及其在突触可塑性尤其是视觉可塑性中的作用研究进展进行综述.     

Ⅰ组代谢性谷氨酸受体在单眼形觉剥夺大鼠视皮层神经元突触传递效能中的作用

背景 弱视的形成与视皮层中谷氨酸受体关系密切,研究已证实弱视大鼠视皮层代谢性谷氨酸受体1(mGluR1)表达下降,但弱视形成后,mGluR1在视皮层突触传递效能中的作用如何尚不清楚. 目的 探讨mGluR1在单眼形觉剥夺弱视大鼠视皮层V1区神经元突触传递效能中的作用. 方法 将16只14日龄SD大鼠按随机数字表法随机分为正常对照组和形觉剥夺组,每组8只.形觉剥夺组大鼠于出生后14d缝合左眼上下睑建立单眼形觉剥夺弱视模型,模型建立后饲养31d处死2个组大鼠,制备大鼠400 μm厚视皮层切片并在人工脑脊液中孵育.将视皮质切片分为3,5-二羟苯甘氨酸(DHPG)组、LY367385 +DHPG组、2-甲基-6-(苯乙炔)吡啶盐酸盐(MPEP) +DHPG组及LY367385 +MPEP+DHPG组,分别在人工脑脊液中添加相应药物,应用细胞外微电极记录法进行电生理学实验,记录视皮层V1区神经元场兴奋性突触后电位(fEPSP).结果 将药物处理前fEPSP斜率值设定为100％,DHPG处理后,正常对照组和形觉剥夺组视皮层神经元fEPSP斜率值分别增至(136.4±17.3)％和(120.7±12.8)％,2者比较差异均有统计学意义(t=2.280,P＜0.05).LY367385和MPEP处理后,正常对照组fEPSP斜率值分别为(114.9±9.3)％和(112.6±15.3)％,形觉剥夺组分别为(107.3±6.0)％和(110.1±4.1)％,均明显低于相应单纯DHPG处理的fEPSP斜率值,差异均有统计学意义(正常对照组:t=2.641、2.915,均P＜0.05;形觉剥夺组:t=2.410、2.372,均P＜0.05).LY367385联合MPEP处理后,正常对照组fEPSP斜率值为(104.5±2.2)％,形觉剥夺组为(102.8±14.9)％,均明显低于相应单纯DHPG处理的fEPSP斜率值,差异均有统计学意义(t=3.080、2.306,均P＜0.05).结论 mGluR1在单眼弱视大鼠视皮层神经元的突触传递中发挥的作用较正常大鼠减弱,mGluR1和mGluR5共同参与视皮层神经元突触的传递,2个亚型受体的作用基本相同.     

NMDA受体在视觉发育过程中的作用

N-甲基-D-天门冬氨酸（N—methyl—D-aspartate．NMDA）受体通过长时程增强（LTP）的建立参与了出生前后视皮质发育过程中可塑性的调控，在调节成年后视皮层神经元突触联系的可塑性中也起着关键作用，此外，NMDA受体还可诱导c—fos基因的表达。蛋白激酶C（PKC）对NMDA受体在视觉发育过程中的作用有着重要的影响。深入研究NMDA受体在视觉发育过程中的作用，对于儿童弱视的治疗具有非常重要的临床意义。     

代谢性谷氨酸受体1在单眼形觉剥夺弱视大鼠视皮质17区的表达及超微结构观察

目的探讨视觉形成关键期内单眼形觉剥夺弱视大鼠初级视皮质17区中代谢性谷氨酸受体1（mGluR1）的表达规律及神经元超微结构变化,为临床上揭示弱视的病理机制及防治提供依据。方法随机对照同期动物实验。方法是建立大鼠单眼形觉剥夺弱视模型,经图形视觉诱发电位检测证实造模成功后,与正常对照组大鼠一起灌注、固定、取材、做石蜡切片,进行免疫组织化学染色和电镜观察,摄像显微镜分层照相,计算机图像分析系统进行图像分析,SPSS11．5统计学软件进行方差分析。结果弱视眼对侧大脑视皮质17区Ⅳ层与正常对照组大脑视皮质17区Ⅳ层和弱视眼同侧大脑视皮质17区Ⅳ层相比,mGluR1阳性着色神经元面积减少,差异有统计学意义（P〈0．01）。其他各层之间3组分别对比差异均无统计学意义。电镜结果显示：弱视眼对侧大脑视皮质17区Ⅳ层可见部分神经元胞质轻度水肿,线粒体嵴和膜融合或消失,排列紊乱,粗面内质网脱颗粒显像明显,核膜皱缩。正常对照组大脑视皮质17区Ⅳ层和弱视眼同侧大脑视皮质17区Ⅳ层神经元胞核正常,核膜完整,线粒体嵴规则,高尔基体发达,粗面内质网发达。结论单眼形觉剥夺弱视大脑视皮质17区Ⅳ层mGluR,的表达与正常相比减少。弱视眼对侧大脑视皮质17区Ⅳ层部分神经元发生形态改变,可能与视觉神经冲动传入减少致神经元萎缩所致。形觉剥夺致神经冲动传入减少,视皮质17区Ⅳ层mGluR,表达减少,突触可塑性变化,致神经元发生萎缩可能是弱视发病机制之一。（中华眼科杂志,2008,44：67—71）     

谷氨酸、γ-氨基丁酸及二者受体在形觉剥夺性近视、弱视动物模型中的表达变化及其意义

近视、弱视的确切发病机制尚不十分明确。目前主要采用形觉剥夺性近视(form-deprived myopia, FDM)、形觉剥夺性弱视(form-deprived amblyopia, FDA)动物模型研究近视、弱视的发病机制。谷氨酸(glutamine, GLU)、γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid, GABA)是中枢神经系统分布最广泛的兴奋性、抑制性神经递质, 在视觉发育关键期起着重要作用, 不仅可介导视皮层突触可塑性, 还可介导视网膜神经突触可塑性。GLU、GABA及其相关受体在FDM、FDA的形成及进展中均有不同程度的变化, 兴奋/抑制失衡机制在FDM、FDA中均有所表达。目前已有许多关于GLU、GABA及相关受体拮抗剂抑制FDM形成及进展的研究, 鉴于GLU、GABA相关受体在FDA与FDM模型中表达的相似性, 这些受体拮抗剂是否可预防或抑制FDA的形成亦值得进一步研究, 对于弱视临床治疗药物的开发具有重要的指导意义。(国际眼科纵览, 2022, 46:143-149)     

谷氨酸能沉默突触在视觉发育神经元可塑性中的作用

突触是神经环路中相邻神经元之间进行信息传递的点状接触区域,是神经可塑性变化的敏感部位,其中仅具有突触结构,在正常情况下不产生生理功能的突触称为沉默突触。沉默突触转化为功能性突触在神经可塑性巾具有重要作用,包括突触在形态和功能上的改变,长时程增强和长时程抑制是主要的表现模式。目前研究发现,沉默突触包括谷氨酸能沉默突触和γ-氨基丁酸能沉默突触。当前弱视发病神经机制研究的热点和前沿是视觉可塑性的研究,而后者是通过突触的修饰过程形成的。深入研究沉默突触,特别是谷氨酸能沉默突触在视觉发育过程中的作用,对于儿童弱视的治疗具有一定的临床指导意义。就近年来视觉发育可塑性中谷氨酸能沉默突触作用的研究进展进行综述。     

分泌型糖蛋白Reelin对N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)诱导的视网膜神经节细胞凋亡的抑制作用

目的 探讨分泌型糖蛋白Reelin对N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)诱导的视网膜神经节细胞(RGC)凋亡的抑制作用.方法 将大鼠RGC-5分为对照组、NMDA组、Reelin类似物组、Reelin阴性对照组和Reelin抑制物组.对照组细胞用含双抗的氨基酸双抗培养基培养,NMDA组在对照组细胞培养基中添加100μmo...     

儿童弱视的治疗效果及其影响因素分析——基于行为视觉训练

目的 探讨行为视觉训练对弱视儿童视力及视功能的治疗效果,并分析其相关影响因素。方法 回顾性分析2018年4月至2021年8月在郑州大学第一附属医院进行弱视治疗的210例(335眼)患儿的病例资料。将所有患儿按训练方法不同分为2组,A组应用行为视觉训练方法(102例167眼),B组应用常规弱视治疗方法(108例168眼)。其中每组按年龄分为5岁≤年龄<8岁组、8岁≤年龄<11岁组、11岁≤年龄<14岁组;按弱视类型分为屈光不正性弱视组、屈光参差性弱视组和形觉剥夺性弱视组;按弱视程度分为轻中度弱视组和重度弱视组。收集各组患儿训练前后的眼轴长度(AL)、等效球镜度数(SE)、最佳矫正视力(BCVA)以及立体视锐度等临床数据,并进行统计学分析。结果 训练后1个月,A组患儿总有效率高于B组,差异有统计学意义(P=0.019)。训练后1个月、3个月,A组中屈光不正性弱视组患儿有效率高于同一时间点屈光参差性弱视组(P_1个月=0.024,P_3个月=0.021)。B组中轻中度弱视组患儿有效率均高于同一时间点重度弱视组,差异均有统计学意义(均为...     

斜视性弱视猫发育过程中视皮层神经元NMDA-R1表达的免疫组织化学电镜观察

目的　研究不同发育阶段斜视猫视皮层神经元N 甲基 D 天门冬氨酸受体亚基 1(N methyl D aspartatereceptorsubunit 1,NMDA R1)在超微结构水平的表达与变化。方法　幼猫 11只 ,其中 6只猫在 2周龄行 1只眼外直肌断腱术产生单眼内斜。依动物处死时的年龄分为 3组 :3周龄组(斜视手术后 1周 ) ,2只正常和 2只斜视幼猫 ;5周龄组 (斜视手术后 3周 ) ,2只正常和 2只斜视幼猫 ;成年组 (6月龄 ) ,1只正常和 2只斜视性弱视猫。 3组动物均取初级视皮层组织进行冰冻切片 ,NMDA R1单克隆抗体标记后 ,分Ⅱ～Ⅲ层、Ⅳ层及Ⅴ～Ⅵ层各为一个区块行常规电镜染色切片 ,透射电镜观察。结果　 (1)电镜下分析 32 8个视皮层神经元 ,发现 3组正常猫的视皮层神经元NMDA R1标记阳性细胞数均高于斜视猫 (χ2 =4 2 8,4 4 1,4 89;P <0 0 5 )。 (2 )共计数 132 0个NMDA R1阳性突触 ,显示正常猫发育过程中 ,视皮层Ⅱ、Ⅲ层神经元细胞膜上的NMDA R1受体突触数多于Ⅳ～Ⅵ层 ,且随年龄增长而增加 (F =3 2 8,P <0 0 5 ) ;斜视猫视皮层神经元细胞膜上的NMDA R1受体突触数 ,3周龄组与正常幼猫组差异无显著意义 (F =0 17,P >0 0 5 ) ,5周龄组和成年组均较正常猫组显著减少 (F =2 6 94 ,4 7 0 1;P <0 0 0 1)。结论　 (1)正常猫发育过程     

mGluR5对大鼠视网膜对光反应的调控

目的探索代谢型谷氨酸受体5（mGluR5）对大鼠暗适应视网膜电图（ERG）不同成分的贡献。方法实验研究。出生后30日龄大鼠（RCS-rdy+-p+）12只,暗适应大于12 h后,分别行视网膜下腔注射mGluR5激动剂CHPG[（R,S）-2-chloro-5-hydroxyphenylglycine] 200 µmol（6只,CHPG组）和抑制剂MPEP[2-methyl-6-（phenylethynyl）-pyridine] 200 µmol（6只,MPEP组）,对侧眼注射同等体积PBS作为对照。注射后2 d采用RETI-scan系统记录其系列刺激光强度下（-4.5、-2.5、-0.5、-0.02、0.5 1 logcd×m×s-2）的暗适应ERG。导出数据,采用配对t检验进行双眼间数据比较。结果CHPG组,a、b波幅值在不同光强下均显著降低（除最低光强）（-4.5＜t＜-2.3,P＜0.05）,进一步分析得出a、b波最大幅值（Rmax和Vmax）均明显降低（-4.5＜t＜-2.3,P＜0.05）,但其敏感度均未出现明显变化,且b/a未见明显变化。MPEP组,a、b波幅值在不同光强下均显著升高（除最低光强）（-3＜t＜-2,P＜0.05）,进一步分析得出a、b波Rmax和Vmax均明显升高（-3＜t＜-2,P＜0.05）,但其敏感度均未出现明显变化,且b/a未见明显变化。2组的振荡电位（OPs）与相应的对照眼比较未见明显差别。结论mGluR5激动后,ERG a、b波幅值明显降低,mGluR5主要调控外层视网膜的对光反应。     

Neural reprogramming in retinal degeneration

PURPOSE: Early visual defects in degenerative diseases such as retinitis pigmentosa (RP) may arise from phased remodeling of the neural retina. The authors sought to explore the functional expression of ionotropic (iGluR) and group 3, type 6 metabotropic (mGluR6) glutamate receptors in late-stage photoreceptor degeneration. METHODS: Excitation mapping with organic cations and computational molecular phenotyping were used to determine whether retinal neurons displayed functional glutamate receptor signaling in rodent models of retinal degeneration and a sample of human RP. RESULTS: After photoreceptor loss in rodent models of RP, bipolar cells lose mGluR6 and iGluR glutamate-activated currents, whereas amacrine and ganglion cells retain iGluR-mediated responsivity. Paradoxically, amacrine and ganglion cells show spontaneous iGluR signals in vivo even though bipolar cells lack glutamate-coupled depolarization mechanisms. Cone survival can rescue iGluR expression by OFF bipolar cells. In a case of human RP with cone sparing, iGluR signaling appeared intact, but the number of bipolar cells expressing functional iGluRs was double that of normal retina. CONCLUSIONS: RP triggers permanent loss of bipolar cell glutamate receptor expression, though spontaneous iGluR-mediated signaling by amacrine and ganglion cells implies that such truncated bipolar cells still release glutamate in response to some nonglutamatergic depolarization. Focal cone-sparing can preserve iGluR display by nearby bipolar cells, which may facilitate late RP photoreceptor transplantation attempts. An instance of human RP provides evidence that rod bipolar cell dendrite switching likely triggers new gene expression patterns and may impair cone pathway function.     

多焦视觉电生理在弱视中的研究进展

弱视的视觉电生理检查是近年来弱视研究的新兴技术,主要包括视网膜电图、视觉诱发电位。多焦视觉电生理的临床应用对研究弱视的视皮质、视觉传导和视网膜的功能更具有重要的临床意义,它的发展及应用为弱视的早期诊断和治疗提供了新的有力依据。我们就此进行较全面的综述。     

双眼视功能训练在巩固弱视治疗中的作用

目的:探讨双眼视功能训练在巩固弱视治疗中的作用。方法:将于我院视光门诊就诊的屈光不正性弱视且经综合治疗基本治愈已进入巩固治疗阶段的弱视患儿100例随机分为2组,每组50例。对照组50例行常规弱视巩固治疗,治疗组除了常规弱视巩固治疗外另配合双眼视功能训练(包括同时视、融合、立体功能),并且随访3a。结果:对照组之前已基本治愈的50例患儿中,9例患儿出现视力回退现象,余41例患儿视力基本稳定。治疗组50例患儿均视力稳定,无回退现象。结论:双眼视功能训练在巩固弱视治疗中有重要作用。     

护理干预对先天性白内障患儿弱视治疗依从性的影响

目的:探讨护理干预对先天性白内障患儿术后弱视治疗依从性的影响以及治疗依从性对治疗效果的影响。方法:将先天性白内障术后患儿随机分为两组:对照组84例给予常规护理治疗;干预组105例在常规护理治疗基础上给予护理干预治疗。比较两组患儿弱视治疗依从性及疗效的差异,并分析护理干预与治疗依从性及疗效的相关性。结果:与对照组比较,护理干预可以显著提高依从性,有统计学差异(P<0.05);依从性与治疗效果显著相关,有统计学差异(P<0.01)。结论:护理干预可以显著提高先天性白内障患儿术后弱视治疗依从性,进而提高治疗效果和患儿生存质量。     

儿童远视合并弱视眼的高阶像差与视觉质量的关系

目的:探索儿童远视弱视眼的高阶像差与屈光度及对比敏感度的关系。方法:66例远视弱视患儿经10g/L阿托品散瞳7d后进行检影并使用Allegretto波前像差仪进行像差测定;20d待瞳孔完全恢复后在完全矫正屈光不正情况下用CSV-1000对比敏感度灯测试其暗室对比敏感度。结果:带状检影球镜度为+2.60±1.76D,柱镜度为+1.15±0.98D,散光轴为82.83±27.93。而波前像差测得的值分别为+2.76±1.69D,+1.35±1.02D,85.37±30.72D。随着球镜值增大,各阶像差值亦增大。中、低度弱视组两两比较,RMS1,RMS5,RMSh差异有显著性(P<0.01),中低度远视组两两比较RMS2,RMSg及C12差异有显著性(P<0.01)。弱视患儿全频段对比敏感度均下降,尤其高频区下降显著,高阶像差中C8及C12与高频段对比敏感度有相关性。结论:波前像差检查及对比敏感度检查均能较正确,全面地反映弱视儿童眼的屈光度及视觉质量,可作为远视、弱视儿童屈光检查的一种客观手段。有助于了解儿童弱视的原因及追踪观察其治疗的转归。     

Neuroprotective effect of Erigeron Breviscapus (vant) Hand -Mazz on NMDA -induced retinal neuron injury in rats

To investigate whether Erigeron Breviscapus (vant) Hand-Mazz (EBHM) has neuroprotective effect against N-methyl-D-aspartate (NMDA)-induced neuron death in retinal ganglion cell layer (RGCL). · METHODS: Sixty healthy SD rats were randomly divided into four groups. 6 animals were normal control group (group A). The others were divided as group B (EBHM group), group C (normal saline+NMDA group) and group D(EBHM + NMDA group), each group had 18 rats. 10nmol NMDA was intravitreally injected to induce partial damage of the neurons in RGCL in the right eyes of Groups C and D. Same volume PBS was intravitreally injected into the left eyes as self-control. Groups B and D were pretreated intraperitoneally with 6g/L EBHM solution at a dose of 150mg/kg body weight/day seven days before and after NMDA treatment. Group C were administrated intraperitoneally with 9g/L normal saline at the same time of EBHM injection. Rats were sacrificed at 4,7,14 day after NMDA treatment. Flat whole retinas were stained with 5g/L cresyl violet and neuron counting in RGCL from both eyes were observed. Each subgroup had 6 rats. · RESULTS: There was no significant difference of neuron counting in RGCL between the right eye and the left eye in group A. There was no significant difference between normal control group and EBHM group either in the right eyes or in the left eyes at 4, 7 and 14 day respectively after intravitreal injection of 10nmol NMDA in group C and group D. (P = 0.636, P =0.193). Neuron counting of RGCL in group C and D was significantly decreased in the NMDA- treated eyes 4, 7 and 14 days after intravitreal injection (P < 0.001). There was no significant difference between self-control eyes group and normal control group. However, neuron counting was significantly higher in the EBHM+NMDA group than normal saline +NMDA group 14 days after intravitreal injection (P = 0.044), but lower than normal control group (P <0.05). · CONCLUSION: EBHM has no effect on neuron counting of RGCL when administered alone in normal rats. The results indicate that EBHM plays a partial protective role in NMDA-induced neuron loss in RGCL in rats.     

儿童弱视综合治疗的疗效分析

目的:探讨弱视综合训练治疗不同年龄儿童弱视效果分析。方法:对196例347眼弱视眼进行综合治疗,3～11岁弱视儿童用10g/L阿托品眼膏进行散瞳检影,11岁以上的儿童进行复方托品卡胺眼液点眼进行散瞳检影验光,复检后配戴合适眼镜,进行弱视综合治疗。结果:在本组病例中从弱视程度与疗效比较,弱视的基本治愈率为70.0%;从患儿治疗弱视的年龄与疗效的比较,基本治愈率为75.5%;从屈光性质与疗效的比较,弱视基本治愈率为78.4%;从患儿坚持治疗的时间与疗效的比较,弱视基本治愈率为61.4%。结论:综合疗法的疗效与弱视的类型、程度、年龄及坚持治疗时间密切相关,治疗时间越早、弱视程度越轻、坚持治疗时间越长,疗效越好。     

腺苷抑制P2X7和N-甲基-D-天冬氨酸受体诱导的视网膜神经节细胞死亡

目的研究腺苷（adenosine）对嘌呤受体P2X₇和谷氨酸N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受体激活诱导的大鼠视网膜神经节细胞（RGC）死亡的神经保护作用。方法（1）对新生Long-Evan大鼠进行上丘注射荧光标记物荧光金（aminostilbamidine）以标记RGC，检测P2X₇激动剂BzATP（50 μmol/L）、谷氨酸NMDA受体激动剂（100 μmol/L）和腺苷（300 μmol/L）对体外培养RGC存活率的影响;（2）体外培养未经荧光金标记的新生大鼠RGC，以10 μmol/L 钙离子（Ca²⁺ ）荧光染料Fura-2乙酸甲酯（Fura-2 Am）标记后，利用Ca²⁺影像测定仪分别测定BzATP、NMDA和腺苷对RGC内Ca²⁺浓度的影响。结果BzATP和NMDA均可引起体外培养的RGC死亡，BzATP在50 μmol/L、NMDA在100 μmol/L 浓度下，均杀死约30%RGC。而300 μmol/L 腺苷则可明显减轻两者对RGC的毒性作用，使RGC 存活率分别从68.9%±2.3%、69.9%±3.2% 提高至91.2%±3.5%（P＜0.001）、102.1%±3.9%（P＜0.001）。BzATP可引起RGC内Ca2+持续升高，在50 μmol/L浓度下可使细胞内Ca²⁺升高至（1183±109） nmol/L。在300 μmol/L腺苷作用下，BzATP介导的Ca²⁺升高幅度显著降低，仅升高为（314±64）nmol/L（P＜0.001）。结论腺苷能阻止P2X⁷受体和NMDA受体激活诱导的RGC死亡和细胞内钙离子浓度升高，具有神经保护作用。（中华眼底病杂志，2007，23：133-136）