银屑病患者皮损和血清中血管内皮生长因子的表达分析

目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)与银屑病发病的关系.方法 ①用免疫组化法检测35例银屑痛患者皮损、非皮损和10例正常人皮肤中VEGF的表达情况;②用酶联免疫吸附法(ELISA)检测25例寻常性银屑病患者和15例正常人血清中VEGF的表达.结果 ①VEGF主要表达于银屑病皮损的角质形成细胞、真皮乳头血管内皮及真皮上层部分浸润的炎症细胞内.非皮损部位少量表达,而在正常人表皮中几乎不表达;皮损组有20人以上的患者染色级别在++以上,表达明显高于正常人皮肤,有统计学意义(P<0.05);非皮损组与正常人比较无明显差异,没有统计学意义(P>0.05).②静止期银屑病患者血清中VEGF表达比正常人高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 VEGF可能与银屑病病理过程有关.     

银屑病患者皮损中血管内皮生长因子和基质金属蛋白酶2的表达

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)在寻常性银屑病皮损血管生成中的作用。方法采用免疫组化法检测30例寻常性银屑病皮损、12例非皮损和12例正常人皮肤中VEGF、MMP-2的表达水平与分布特征。结果①VEGF在银屑病皮损组织中阳性表达明显高于非皮损组织和正常人皮肤(P<0.05)。②MMP-2在银屑病皮损组织中的阳性表达明显高于非皮损组织和正常人皮肤(P<0.05)。③VEGF、MMP-2在银屑病皮损中表达呈正相关(P<0.05)。结论VEGF、MMP-2在寻常性银屑病发病的血管生成中可能起协同作用。     

寻常型银屑病患者血管内皮生长因子及单核细胞趋化因子-1表达的研究

目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)在银屑病患者皮肤中的表达及其意义。方法 用免疫组化法检测银屑病患者皮损、非皮损及正常人皮肤中VEGF、MCP-1的表达与分布。用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测患者血清中VEGF、MCP-1水平。结果 ①银屑病患者皮损及非皮损中VEGF表达较正常人皮肤明显增强(P<0.05).皮损中MCP-1表达较非皮损及正常人皮肤明显增强(P<0.05).②患者血清中VEGF水平明显高于正常人(P<0.05),MCP-1水平与正常人比较差异无显着性(P>0.05).③皮损角质形成细胞中VEGF、MCP-1的表达与PASI评分无显着相关性(P>0.05)。结论 VEGF、MCP-1的表达增强在银屑病的发病机制中可能起重要作用。     

RXR-α mRNA 在寻常型银屑病皮损中的表达

目的:检测维A酸核内受体α(RXR-α)在寻常型银屑病皮损及非皮损皮肤中的表达。方法:采用RT-PCR对28例寻常型银屑病皮损及非皮损皮肤中RXR-α mRNA的表达进行检测,并以30例正常人皮肤作为对照。结果: 银屑病皮损中RXR-α mRNA的表达显著低于非皮损处皮肤(P0.001)和正常人皮肤(P0.001),进行期皮损处RXR-α mRNA的表达比静止期皮损表达显著降低(P0.01),但非皮损皮肤的表达与正常人皮肤无显著性差异(P0.05)。结论: RXR-α在银屑病的发病中可能起一定作用。     

寻常型银屑病患者表皮HLA-C位点mRNA表达的研究

目的:检测寻常型银屑病患者表皮HLA-C位点mRNA的表达.方法:应用qReal-time-PCR技术检测46例寻常型银屑病患者皮损、非皮损表皮中的HLA-C位点mRNA的表达,与28名正常人皮肤表皮进行对照.结果:银屑病患者皮损、非皮损和正常人皮肤表皮中HLA-C 位点mRNA表达分别是0.0063±0.0070,0.0048±0.0037和0.0036±0.014.3组样本比较,银屑病患者皮损mRNA表达明显高于非皮损(P＜0.05),非皮损mRNA表达与正常对照比较无显著性差异.进行期皮损表皮的mRNA表达明显高于稳定期(P＜0.05).结论:寻常型银屑病患者HLA-C位点mRNA表达异常,可能与该病发病机制有关.     

寻常性银屑病皮损及非皮损中IL-23(p19/p40)和IL-12(p35/p40)mRNA的表达

目的检测寻常性银屑病患者皮损及非皮损处IL-23(p19/p40)和IL-12(p35/p40)mRNA表达,探讨其临床意义。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测寻常性银屑病患者皮损、非皮损处及正常人皮肤中IL-23(p19/p40)和IL-12(p35/p40)mRNA的表达水平。结果寻常性银屑病患者皮损中IL-23p19及p40(IL-23/IL-12)mRNA的表达均高于非皮损组织和正常皮肤组织(P<0.05),且非皮损处高于正常对照组,差异有显著性(P<0.05);IL-12p35mRNA在银屑病皮损处、非皮损处和正常对照中表达水平差异无显著性(P>0.05)。结论在寻常性银屑病发病过程中,IL-23可能发挥较IL-12更重要的作用。     

寻常型进行期银屑病皮损中VEGF、EGFR的表达及其与PASI指数的相关性研究

目的观察血管内皮生长因子(VEGF)、表皮生长因子受体(EGFR)在进行期寻常型银屑病皮损及非皮损中的表达及其与PASI指数的关系,探讨银屑病发生发展中表皮增殖和血管生成的关系。方法以30例寻常型进行期银屑病患者为研究对象,记录患者的银屑病皮损面积和严重度(PASI)积分,采用免疫组化技术(PV-9000两步法)检测30例进行期寻常型银屑病皮损及其邻近皮肤、15例正常皮肤中VEGF、EGFR的表达情况。结果①皮损组VEGF表达总阳性率为100%,明显高于邻近组和正常对照组,具有显著性差异;EGFR表达总阳性率为100%,与邻近组相比无显著性差异,明显高于正常对照组,具有显著性差异。②皮损组VEGF阳性染色评分与PASI积分无相关性(rs=0.2821,P>0.05),EGFR阳性染色评分与PASI积分呈正相关(rs=0.4529,P<0.05)。③VEGF阳性染色评分与EGFR阳性染色评分无相关性(r=0.2247,P>0.05)。结论①VEGF、EGFR在进行期寻常型银屑病患者皮损中异常高表达。②VEGF与PASI积分之间无相关性,提示VEGF与银屑病的病情活动性有关,而与疾病的严重程度无关。EGFR与PASI呈正相关,提示EGFR与银屑病的严重程度相关,而与疾病的活动性无关。③VEGF和EGFR无相关性提示两者在银屑病的发病机制中无直接的协同作用。     

神经生长因子受体P75和P140trkAmRNA在寻常型银屑病患者皮损中的表达

目的研究神经生长因子(nerve growth factor,NGF)受体P75和P140trkA在寻常型银屑病发病机制中的作用.方法应用原位杂交技术检测了33例寻常型银屑病患者(18例为进展期,15例为静止期)和10例正常人皮肤组织中两受体(P75和P140trkA)mRNA的表达情况.结果与正常人皮肤比较,寻常型银屑病皮损及非皮损中P75和P140trkA受体mRNA的表达明显上调,且皮损中的表达明显高于非皮损区(P＜0.01);进展期患者皮损与非皮损中P75和P140trkA受体mRNA的表达分别高于静止期患者的皮损与非皮损区(P＜0.01).结论神经生长因子及其两受体可能是参与银屑病病理机制的重要因子.     

银屑病患者皮损中转化生长因子β受体及SMADs mRNA的低表达

目的 观察银屑病患者皮损与非皮损组织以及正常人对照皮肤组织中转化生长因子β受体及其细胞内信号转导分子SMADs mRNA的表达,分析转化生长因子β信号转导在银屑病发病中的作用.方法用定量实时PCR法检测13例银屑病患者皮损与非皮损组织以及10例正常人对照皮肤组织中转化生长因子β受体Ⅰ型和Ⅱ型以及不同类型的SMADs(SMAD2、3、4、6、7)mRNA的表达.结果转化生长因子β受体Ⅰ型、Ⅱ型及各种SMADs mRNA水平在银屑病患者皮损处均明显低于正常人对照(P＜0.05或P＜0.01).然而,转化生长因子β受体Ⅰ型、Ⅱ型及SMAD2、3、6、7 mRNA的表达在非皮损组织与正常人对照皮肤组织中差异无显著性(P＞0.05).结论银屑病患者的皮损处存在有转化生长因子β信号转导功能下调,提示缺乏转化生长因子β介导的生长抑制在银屑病的发病中可能起着一定的作用。     

银屑病患者皮肤鳞屑真菌的分离及流式细胞计数分析

目的了解真菌特别是糠秕孢子菌与银屑病的关系。方法对82例银屑病患者和40例正常人的头皮、指甲、背部、上肢或下肢4个部位的皮肤鳞屑在3种不同培养基上进行了真菌培养分离 ,并应用流式细胞计数检测了8株银屑病皮损处糠秕孢子菌和4株正常人的糠秕孢子菌的DNA总含量及周期变化。结果①发现银屑病患者的真菌带菌率明显高于对照组(P<0.05) ,银屑病患者皮损处真菌阳性率与非皮损处的阳性率有非常显著性差异(P<0.01)。②在银屑病组培养出59株糠秕孢子菌 ,而对照组仅有9株 ,有显著性差异。③S期的细胞比率和PI值银屑病组低于对照组。结论真菌特别是糠秕孢子菌在银屑病患者的皮损处和正常皮肤上都较正常人高 ,对银屑病的发病有一定影响。     

银屑病表皮热休克蛋白27、70、60的表达

目的：探讨热休克蛋白（HSP）在银屑病发病中的作用。方法：通过免疫组化和图像分析检测了25例银屑病患者治疗前后皮损、非皮损区表皮组织中HSP27、HSP70和HSP60的表达，并与6例正常人作对照。结果：HSP27、HSP70在非皮损、正常人表皮中呈基础表达，在银屑病患者皮损中的表达很弱，治愈后表皮后HSP27、HSP70的表达又恢复；HSP60的表达在银屑病皮损组表皮中均为阳性，而银屑病非皮损组、治愈后组表皮中及正常人对照表皮组织中HSP60的表达均阴性。结论：热休克蛋白在银屑病应激保护机制中可能发挥一定的作用。     

银屑病皮损及非皮损中垂体腺苷酸环化酶激活肽及其受体的研究

目的 探讨垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)及其受体(PACAP-R)在银屑病发病中的意义。方法 采用免疫组化的方法研究寻常性银屑病患者皮损及非皮损部位PACAP及PACAP-R的原位表达情况。结果 银屑病患者皮损部位PACAP及PACAP-R的原位表达均明显低于非皮损部位,表现为皮损组PACAP及PACAP-R的面积密度及平均吸光度值显著低于正常人对照组(均为P<0.01);与正常人相比,非皮损部位PACAP及PACAP-R的原位表达也呈下调表达,即非皮损组的PACAP及PACAP-R的面积密度及平均吸光度值明显低于正常人对照组(P<0.05)。结论 PACAP及PACAP-R在银屑病皮损中下调表达,提示PACAP可能与银屑病表皮细胞的过度增殖有关。     

Neuropeptides in psoriasis: an immunocytochemical and radioimmunoassay study

The present study examines the presence of neuropeptides in the skin and plasma of patients with psoriasis using the techniques of immunocytochemistry and radioimmunoassay. Immunocytochemistry failed to demonstrate differences in the pattern of neuropeptide innervation in psoriatic lesional skin when compared to normal skin. However, radioimmunoassay of skin biopsy extracts, both substance P and vasoactive intestinal polypeptide, were significantly elevated in psoriatic lesional skin when compared with both psoriatic non-lesional and normal control skin (p less than 0.001). There was no significant difference between the plasma levels of neuropeptides in psoriatic patients compared to those of control subjects, and no significant correlation among the plasma levels of neuropeptides with the surface area of involvement with psoriasis. The finding of elevated levels of substance P and vasoactive intestinal polypeptide in lesional psoriatic skin suggests that these peptides may be involved in the pathogenesis or maintenance of the psoriatic skin lesion and the development of safe and stable antagonists of these neuropeptides may have applications in the treatment of psoriasis.     

过氧化物酶增殖物激活受体β/δ在银屑病角质形成细胞中的表达

【摘要】 目的 探讨过氧化物酶增殖物激活受体β/δ（PPARβ/δ）在银屑病患者表皮角质形成细胞（KC）中的表达和调节因素。 方法 免疫组化方法检测PPARβ/δ在银屑病患者皮损及非皮损表皮中的表达。分离、培养银屑病患者非皮损区和皮损区的KC,以RT-PCR和Western印迹法分别检测银屑病患者皮损区和非皮损区KC中PPARβ/δ mRNA和蛋白质的表达水平。利用PPARβ/δ外源性激动剂GW501516及Ca2+刺激银屑病非皮损区KC,观察其对PPARβ/δ表达的调节影响。 结果 免疫组化显示,银屑病皮损区PPARβ/δ的表达强度显著高于正常对照组（t = 19.28,P < 0.01）和非皮损区（t = 23.26,P < 0.01）。银屑病皮损区PPARβ/δ mRNA和蛋白质的表达水平均高于正常对照组（P < 0.01）和非皮损区（P < 0.01）。10 ng/ml GW501516最大效能促进PPARβ/δ的表达（P < 0.01）;1.0 mmol/L Ca2+对KC中PPARβ/δ的表达促进效应最明显（P < 0.01）。 结论 PPARβ/δ在银屑病患者皮损区表达显著升高,GW501516 和Ca2+能够促进角质形成细胞PPARβ/δ表达水平。     

银屑病患者角质形成细胞对T淋巴细胞CD25、CD69表达的影响

目的 探讨银屑病患者角质形成细胞（KC）对T淋巴细胞CD25、CD69表达的影响。方法 分离10例银屑病患者KC，密度梯度离心法分离单一核细胞（PBMC）；流式细胞仪检测混合培养后T细胞活化标志CD25、CD69的表达。结果 银屑病患者皮损KC作用的自体外周血T细胞CD25、CD69表达水平分别与非皮损KC作用组及自体T细胞自然增殖组相比显著增高，银屑病非皮损KC+自体T细胞共培养组与自体T细胞自然增殖组相比，差异无统计学意义。银屑病皮损、非皮损KC作用的正常人T细胞CD25、CD69表达均显著高于正常人外周血T细胞自然增殖组，银屑病皮损KC+正常人T细胞共培养组与非皮损组相比，差异无统计学意义。结论 银屑病患者局部存在慢性炎症反应，可能是由于皮损KC免疫表型发生改变从而作为自身抗原，启动自身免疫反应。     

血管内皮生长因子及其受体在银屑病发病中的作用及意义

目的 研究血管内皮生长因子(VEGF)及其受体在银屑病皮损中的表达。方法 采用原位杂交和免疫组化SABC法,检测42例寻常性银屑病患者皮损和15例正常人皮肤组织VEGFmRNA和其蛋白、VEGF受体2(KDR蛋白)、微血管密度(MVD),分析其表达情况。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测患者和正常人血清中VEGF水平。结果 ①寻常性银屑病患者皮损处的VEGFmRNA及其蛋白、KDR和MVD表达明显强于正常人对照组(P<0.001);皮损处与非皮损组相比,VEGFmRNA和其蛋白的表达差异无统计学意义,但KDR、MVD的表达差异有统计学意义;进行期与静止期比较四者差异均有统计学意义。②高密度组(MVD≥17.88)与低密度组(MVD<17.88)的VEGFmRNA及其蛋白表达差异无统计学意义,但KDR表达差异有统计学意义(P<0.01),且PASI评分差异也有统计学意义(P<0.001)。③患者血清中VEGF水平明显高于正常人对照组。结论 ①VEGF及其受体在银屑病新生血管形成中起重要作用。②MVD值可反映寻常性银屑病的严重程度,可作为判断病情和预后的指标。     

早幼粒细胞白血病基因及其蛋白在银屑病表皮中的表达

目的探讨早幼粒细胞白血病(PML)基因及其蛋白在银屑病发病中的作用机制。方法用原位杂交和免疫组化方法检测正常组织、进行期银屑病皮损及非皮损区PMLmRNA和蛋白表达。结果在正常人皮肤组织中,PMLmRNA和蛋白不表达(阴性);在非皮损区,PMLmRNA和蛋白在基底层和基底上层细胞核内低表达(52%,36%);在银屑病皮损周边PMLmRNA和蛋白在基底层和基底上层细胞核内呈灶状表达(72%,64%);在银屑病皮损中心表皮中,PMLmRNA和蛋白高表达(96%,88%)。结论PML基因和其蛋白在银屑病表皮中的过表达提示,PML基因可能与银屑病表皮细胞的过度增殖相关。     

Alterations of glucosylceramide-beta-glucosidase levels in the skin of patients with psoriasis vulgaris

Hydrolysis of glucosylceramides by the enzyme glucosylceramide-beta-glucosidase (GlcCer'ase) results in ceramide, a critical component of the intercellular lamellae that mediates the epidermal permeability barrier. A disturbance of ceramide formation is supposed to influence the transepidermal water loss in common skin diseases like atopic eczema or psoriasis. The aim of this study was to investigate whether GlcCer'ase levels were altered in the skin of subjects with psoriasis vulgaris. Skin punch biopsies were taken from lesional and non-lesional psoriatic skin and GlcCer'ase was evaluated both at the RNA and at the protein level. Normal skin from surgical patients provided the baseline GlcCer'ase expression in healthy subjects. Our results show that GlcCer'ase mRNA expression was decreased in psoriatic non-lesional skin compared to normal controls in all cases. Interestingly, in lesional psoriatic skin the level of GlcCer'ase was increased compared to non-lesional skin in all cases. For the immunohistochemical analysis, we used a newly synthesized monoclonal antibody anti-human GBC (GlcCer'ase-GST fusion protein). The results confirmed that GlcCer'ase, mainly present in the upper epidermis, was decreased in psoriatic skin compared to normal control and was increased in lesional compared to non-lesional psoriatic skin. Our findings support the concept that alteration in water permeability barrier in lesional psoriatic skin can serve as a trigger for the upregulation of the expression of enzymes like GlcCer'ase with consequent stimulation of ceramide generation.