哮喘患者单个核细胞Th1／Th2和IFN-γ及IL-4 mRNA表达

目的探讨外周血单个核细胞Th1／Th2在哮喘发病中的作用和IFN-γ及IL-4 mRNA表达的情况。方法分别用流式细胞仪及RT-PCR方法检测97例哮喘患者及20例健康人外周血单个核细胞（PBMCs）Th1／Th2水平和IFN-γ及IL-4 mRNA表达。结果哮喘组外周血Th1细胞百分比低于对照组（P〈0．01），而Th2百分比高于对照组（P〈0.01）；哮喘组PBMCS IFN-γ的mRNA表达水平与对照组差异无统计学意义（P〉0．05），而IL-4 mRNA的表达显著高于对照组（P〈0．01）。结论哮喘患者体内存在Th1／Th2的失衡，并提示哮喘属于Th2优势疾病。     

急性冠脉综合征妊娠相关血浆蛋白-A与肿瘤坏死因子-α相关性的研究

【目的】探讨急性冠脉综合征（ACS）患者妊娠相关血浆蛋白A（PAPP—A）血清水平和外周血单核细胞表达的变化及其与肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的相关性。【方法】测定18例不稳定性心绞痛（UAP组）、37例急性心肌梗死（AMI组）和15例稳定性心绞痛（SAP组）及15例正常对照者的血清PAPP-A、TNF-α水平。同时分离外周血单核细胞，应用RT-PCR检测PAPP-A和TNF-α的mRNA表达。【结果】SAP组血清PAPP—A水平和单核细胞PAPP—A的mRNA表达水平与正常对照组相比，无显著差异；而在UAP组和AMI组均显著高于正常对照组（P〈0．01）和SAP组（P〈0．01）。ACS组患者的血清PAPP—A水平与血清TNF-α水平呈显著正相关（r=0．712，P〈0．01），同时外周血单核细胞PAPP-AmRNA表达水平与TNF-αmRNA表达水平也呈显著正相关（r=0．733，P〈0．01）。【结论】PAPP-A可能是由活化的单核细胞合成并分泌到动脉粥样硬化斑块内和血循环中，并与炎症密切相关。     

慢性阻塞性肺疾病和阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者外周血单个核细胞TNF—α、IL-8mRNA表达的研究

目的分析慢性阻塞性肺疾病（COPD）、阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（OSAHS）及重叠综合征（overlap syndrome）患者单个核细胞TNF-α和IL-8mRNA表达的特点,从炎症反应方面探讨重叠综合征的发病机制。方法选取已确诊为COPD11例、OSAHS15例和重叠综合征4例各为一组,所有研究对象均行夜间多导睡眠图监测和肺功能检查,用半定量RT-PCR法检测外周血单个核细胞TNF-α、IL-8的mRNA水平。结果外周血单个核细胞在TNF-α的mRNA表达水平中,OSAHS组〈COPD组〈重叠组,差异均具有统计学意义（P均〈0．05）;在IL-8的mRNA表达水平中,COPD组和重叠组均高于OSAHS组,差异具有统计学意义（P均〈0．05）,而COPD组和重叠组之间无显著性差异（P〉0．05）。COPD患者单个核细胞TNF—αmRNA表达水平与第一秒用力呼气容积（FEVI／Pre％）呈负相关（r=-0．894,P〈0．01）,与低氧时间呈正相关（r=0．781,P〈0．01）;IL-8mRNA表达水平与FEVI／Pre％呈负相关（r=-0．859,P〈0．01）,与低氧时间呈正相关（r=0．862,P〈0．01）。OSAHS患者单个核细胞TNF-αmRNA表达水平与呼吸暂停和低通气指数（AHI）、低氧时间均呈正相关（r=0．833、0．742,P均〈0．01）;IL-8mRNA表达水平与AHI、低氧时间均呈正相关（r=0．825、0．882,P均〈0．01）。结论COPD患者和重叠综合征患者的IL-8和TNF-α的mRNA表达高于OSAHS患者,且IL-8和TNF-α的mRNA表达与FEVI／Pre％、AHI和低氧时间均有较好的相关性,提示炎症反应也可能在重叠综合征的发病机制和发展中起着较为重要的作用。     

慢性HCV感染者外周血单个核细胞IL-18和IFNAR1检测的临床意义

目的 分析慢性丙肝（CHC）患者外周血单个核细胞（PBMC）白细胞介素18（IL-18）mRNA的诱导表达及α干扰素受体1（IFN-α receptor1，IFNAAR1）表达，评价慢性丙肝患者PBMC细胞免疫功能。方法 脂多糖（LPS）体外刺激正常对照组和慢性丙型肝炎病毒（Hepatitis C virus，HCV）感染组病人PBMC，RT-PCR检测干扰素治疗前后PBMC IL-18mRNA水平的变化。同时RT-PCR检测不同组PBMC IFNAR1mRNA水平的差异。结果 治疗前干扰素应答组病人（n=12）和无应答组病人（n=26）PBMC IL-18mRNA诱导表达水平显著低于正常对照组（P〈0．01；P〈0．01）；治疗后，应答组病人IL-18mRNA水平随治疗时间延长而升高，1个月时显著高于无应答组病人（P〈0．01），无应答组病人IL18mR-NA水平始终较低。IFN-α2b治疗期间，干扰素应答组病人PBMCIFNAR1mRNA水平从治疗前的高表达而逐渐减少，正常对照和干扰素无应答组病人PBMCIFNAR1mRNA的表达始终较低（治疗前与应答组相比P〈0．01）。结论 慢性HCV感染病人的细胞免疫功能受损，不能正常表达IL-18和IFNAR1，但应答组病人经干扰素治疗后表达能力逐渐恢复。慢性丙肝患者PBMCIL18mRNA和IFNAR1mRNA水平检测也许可以作为干扰素治疗预后的判断指标。     

急性冠脉综合征单核细胞PAPP-A表达与hsCRP的相关性研究

目的 研究急性冠脉综合征（ACS）外周血单核细胞妊娠相关血浆蛋白A（PAPP-A）的表达变化及其与血清高敏C反应蛋白（hsCRP）水平的相关性。 方法从18例不稳定性心绞痛、37例急性心肌梗死和15例稳定性心绞痛及15例正常对照者中分离外周血单核细胞。应用RT-PCR检测PAPP—A的mRNA表达，同时检测血清hsCRP水平。 结果 正常对照者和稳定性心绞痛患者外周血单核细胞存在PAPP—AmRNA低水平表达，ACS患者的表达显著增加；PAPP—A表达水平与血清hsCRP水平呈正相关（r=0．706，P〈0．01）。 结论 急性冠脉综合征时单核细胞PAPP—A表达增加，与hsCRP水平正相关，提示PAPP—A可能通过炎症机制参与ACS的发生发展过程。     

冠心病凝血纤溶指标的临床分析

目的：探讨不同类型冠心病患者血浆纤溶指标的变化及其临床意义。方法：测定40例不同类型冠心病患者和40例正常对照者血浆中的D-二聚体、纤维蛋白原、凝血酶原时间和部分凝血酶原时间。结果：急性心肌梗死（14例）和不稳定性心绞痛组（10例）的D-二聚体、纤维蛋白原含量明显高于对照组（40例）；急性心肌梗死组的D-二聚体、纤维蛋白原含量高于不稳定性心绞痛组（P〈0．05）；稳定性心绞痛组和不稳定性心绞痛组凝血酶原时间、部分凝血酶原时间比其它各组明显缩短（P〈0．01）；对照组、稳定性心绞痛组和陈旧性心肌梗死组各组间4个指标无明显差异（P〉0.05）。结论：冠心病患者体内存在着高凝状态和继发性纤溶活性增强，血小板活化，凝血激活系统及内皮细胞损伤在急性心肌梗死和不稳定性心绞痛的发生发展中起着重要作用。     

儿童肺炎支原体感染者．Thl7／Treg的变化分析与临床意义

目的探讨外周血辅助性T细胞17型（helperTcelltype17,Thl7）和CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（RegulatoryTcells,Treg）在肺炎支原体感染儿童体内的变化及临床意义。方法肺炎支原体（mycoplasmapneumoniae,MP）感染组32例．分为普通肺炎组18例、肺炎合并肺外症状组14例;健康对照组26名。常规分离外周血单个核细胞,流式细胞术检测各组外周血Thl7细胞、Treg的表达频率;ELISA方法检测血清细胞因子IL-6、IL-17水平。结果1．MP感染组外周血Thl7细胞频率高于正常对照组（P〈0．01）,肺外症状组血Thl7细胞频率水平高于普通肺炎组（P〈O．01）;MP感染组外周血Treg细胞表达频率低于正常对照组（P〈0．01）,肺外症状组血Treg细胞频率低于普通肺炎组（P〈0．01）。2．MP感染组血清IL．6、IL．17水平高于正常对照组（P〈0．01）;肺外症状组血清IL-6、IL-17水平高于普通肺炎组（P〈0．01）。结论在儿童MP感染者体内存在Treg与Thl7细胞频率明显改变,并伴有炎症性细胞因子水平升高．提示Treg与Thl7细胞的频率异常在儿童MP感染的发病机制中起着重要的作用。     

老年冠心病患者血浆中细胞凋亡抑制因子和炎性因子的变化及意义

目的：探讨老年冠心病患者血浆中细胞凋亡抑制因子和炎性因子的改变及意义。方法：120例老年冠心病患者分为稳定性心绞痛、不稳定性心绞痛和急性心肌梗死三组，40例非冠心病患者为对照组，采用酶联免疫吸附法测定血浆中细胞凋亡抑制因子、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6及超敏C反应蛋白水平。结果：急性心肌梗死组及不稳定性心绞痛组血浆中细胞凋亡抑制因子、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6及超敏C反应蛋白水平高于稳定性心绞痛纽（P〈0．05），急性心肌梗死组与不稳定性心绞痛组之间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：高水平的血浆中细胞凋亡抑制因子可能与急性冠状动脉综合征有关，可作为判断动脉粥样硬化斑块稳定性的指标，炎症对破坏动脉粥样硬化斑块稳定性起着促进作用。     

核因子kB活性在急性冠状动脉综合征中的变化

目的探讨核因子胡在急性冠状动脉综合征发病中的作用。方法选取急性心肌梗死患者76例，不稳定性心绞痛患者41例，稳定性心绞痛患者43例，并选取20例正常人为对照组。在入院第1、3、5天用ELISA法分别检测其外周血单核细胞核因子-kB的活性。结果急性心肌梗死组和不稳定心绞痛组外周血单核细胞核因子-kB活性度明显高于稳定性心绞痛组和对照组（P〈0．01），其中急性心肌梗死组最高。前两组随时间有下降趋势，但仍明显高于后两组，后两组随时间无明显变化。结论急性冠状动脉综合征血核因子-kB活性明显升高，在急性冠状动脉综合征发生中可能起着重要作用。     

白细胞介素12 mRNA在肝损伤患者外周血单个核细胞中的表达

目的探讨肝损伤患者外周血单个核细胞（PBMCs）中IL-12mRNA的表达水平及其意义。方法采用RTPCR法检测36例慢性肝病患者（21例乙型肝炎、15例丙型肝炎）、17例急性重型肝炎患者、11例原发性肝癌患者和18例正常对照者中IL-12 P40 mRNA的表达水平。结果在肝损伤患者中．IL-12的表达较正常人显著增高（P〈0．001）．其中急性重型肝炎患者的丧达水平显著高于慢性肝病组（P〈0．001）。而原发性肝癌患者IL-12 mRNA表达又高于急性重型肝炎（P=0.002）,且与血清胆红素浓度和内毒素血症相关。结论IL-12可能促进肝脏的炎性损害．导致严重的肝细胞损伤。检测IL-12 mRNA表达水平对于了解肝损伤患者的肝损害程度、早期诊断和顶后具有重要意义。     

急性髓细胞性白血病患者外周血单个核细胞CD28 mRNA的表达

背景：大量研究显示,肿瘤患者外周血T细胞表面共刺激分子CD28蛋白表达存在差异,提示共刺激通路异常可能与恶性肿瘤的发生进展有关。目的：观察急性髓细胞性白血病外周血单个核细胞共刺激信号分子CD28 mRNA在中的表达。方法：急性髓细胞性白血病患者80例,其中M0型7例,M1型6例,M2型18例,M3型15例,M4型17例,M5型9例,M6型8例。并根据急性白血病疗效标准将80例患者分为完全治愈组、缓解组、未缓解组。采用Taqman探针实时荧光定量PCR检测80例患者及76名健康人群外周血单个核细胞CD28 mRNA的表达。结果与结论：急性髓细胞性白血病外周血单个核细胞M1,M3和M4亚型中的CD28 mRNA表达量低于健康人群（P〈0.05）;急性髓细胞性白血病未缓解组中CD28 mRNA低于健康人群（P〈0.05）,完全治愈组和缓解组中CD28 mRNA表达与健康人群差异无显著性意义。说明急性髓细胞白血病患者外周血单个核细胞存在CD28 mRNA表达缺陷,并与临床分期、病情进展及预后有关。     

普伐他汀短期治疗充血性心力衰竭对炎症因子的影响

目的观察短期普伐他汀治疗对慢性心力衰竭患者血浆肿瘤坏死因子（TNF-α）、高敏C反应蛋白（hs—CRP）和白介素-6（IL-6）的影响，并分离外周血单个核细胞（PBMC），观察普伐他汀对单核细胞分泌IL-6的影响，探讨普伐他汀在慢性心力衰竭中的作用。方法32例慢性心力衰竭患者被随机分为A、B两组。A组接受常规治疗（对照组，n=14），B组在常规治疗的基础上加用普伐他汀20mg／d治疗2周（普伐他汀治疗组，n=18）。在治疗前后分别检测左室舒张末期内径（LVED）和射血分数（LVEF）、血浆TNF-α、hs—CRP和IL-6的浓度，同时分离外周血单个核细胞，检测培养上清液IL-6的浓度。心功能测定是应用彩色超声诊断仪进行左室功能的测定，LVEF应用Simpson法在四腔心切面测定。血浆TNF—α、IL-6和上清液IL石的浓度，均采用夹心酶联免疫吸附测定法（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）测定。结果经治疗2周后，对照组的血脂水平无显著性变化。与治疗前相比，普伐他汀治疗组中慢性心力衰竭患者的TC和LDL明显下降，差异有显著性（P〈0．05）。与治疗前比较，对照组和普伐他汀组LVEF均未达到显著性差异。经治疗2周后，与治疗前比较，对照组和普伐他汀治疗组血浆hs-CRP水平、TNF—α浓度、IL-6浓度均显著降低（P〈0．01）。与对照组相比，普伐他汀组血浆hs-CRP水平、TNF-α浓度以及IL-6浓度下降更为明显（P〈0．05）。与治疗前比较，对照组和普伐他汀治疗组外周血单个核细胞分泌的IL-6浓度均显著下降（P〈0．01）。与对照组相比，外周血单个核细胞分泌的IL-6浓度下降更为明显（P〈0．05）。结论普伐他汀短期治疗充血性心力衰竭能够降低血浆hs—CRP、TNF—α、IL-6，并可抑制外周血单个核细胞分泌IL-6，但不影响患者的心功能。提示普伐他汀在慢性心力衰竭中具有抗炎作用，可能与抑制单核细胞的活性有关。     

D-二聚体和血尿酸检测在冠心病患者中的相关性研究

目的研究不同类型冠心病（CHD）患者血浆D-二聚体（D-D）和血尿酸（UA）含量的变化，探讨D-D和UA含量与CHD危险程度的相关性及其临床意义。方法测定85例不同类型CHD患者和30例健康对照组血浆中的D-D和UA水平。结果各种类型CHD患者的D-D、UA含量均明显高于健康对照组（P〈0．05）；其中D-D含量在急性心肌梗死组（32例）和不稳定性心绞痛组（28例）明显高于对照组（30例）和稳定性心绞痛组（25例），P〈0．05；UA含量在急性心肌梗死组中增高明显，而在不稳定性心绞痛组和稳定性心绞痛组中差异无统计学意义。结论血浆D-D水平与CHD危险程度呈正相关，是心血管疾病的危险因素，血浆UA水平与CHD关系密切，与不稳定病变无明显相关性。将D-D和UA结合起来研究有助于更好地指导CHD的诊治工作，具有重要的临床意义。     

寻常型银屑病患者外周血Th17细胞型因子的检测及意义

【目的】探讨Th17细胞相关因子在银屑病患者中的表达及意义。【方法】选择寻常型银屑病患者36例和健康体检人员18例,检测并比较银屑病患者和正常者外周血血清中白细胞介素-17（IL-17）、白细胞介素-23（IL-23）及转化生长因子-β（TGF-β）mRNA表达水平。【结果】银屑病患者血清中IL-17及IL-23水平均显著高于正常对照组（P〈0．01）;银屑病患者外周血PBMC中TGF-βmRNA表达水平显著低于正常对照组（P〈0．01）。【结论】Th12,细胞相关因子在银屑病的免疫发病机理中可能起着重要作用。     

SOCS-3在脓毒症患者外周血单个核细胞中表达的研究

目的探讨细胞因子信号转导抑制因子-3（SOCS-3）在脓毒症发病机制中的作用。方法选择36例脓毒症患者,30例健康志愿者为对照组,应用RT-PCR方法测定SOCS-3在外周血单个核细胞中的表达,并和患者APACHEⅡ评分进行相关分析。结果SOCS-3在脓毒症组和对照组的外周血单个核细胞中均有表达,脓毒症组较对照组表达显著增加（P〈0．001）,SOCS-3 mRNA的表达和脓毒症A—PACHEⅡ评分呈负相关,相关系数（r）为-0．746（P〈0．01）。结论SOCS-3参与了脓毒症的发病过程,SOCS-3的表达在脓毒症患者中可能起着保护作用。     

TLR4 mRNA在中国HIV/AIDS患者外周血单个核细胞中的表达及其与疾病进展关系的研究

目的通过实时荧光定量PCR（RT-PCR）的方法检测中国HIV／AIDS患者外周血单个核细胞（PBMC）中TLR4 mRNA的表达水平，探讨TLR4 mRNA表达水平与HIV感染后疾病进展的关系。方法构建pUCm-TLR4质粒作为定量模板，在LightCycler检测仪上测定62例HIV／AIDS患者和30名健康对照者PBMC中TLR4 mRNA的含量。结果（1）HIV／AIDS患者PBMC中TLR4 mRNA的表达范围是（4．0×10^5-1．04×10^8）拷贝／μg RNA，显著高于健康对照组的（4．5×10^5-1．25×10^6）拷贝／μg RNA，（P〈0．01）。（2）在HIV／AIDS患者组中，艾滋病（AIDS）组外周血中，TLR4 mRNA的含量高于HIV慢性感染（HIV）组及长期不进展（LTNP）组，HIV组高于LTNP组（P〈0．05），LTNP组与对照组比较差别无统计学意义。（3）HIV／AIDS患者外周血中TLR4 mRNA的含量与HIV-1RNA病毒载量呈显著正相关（r=0．697，P〈0．01）。结论成功建立了人TLR4 mRNA表达水平的荧光定量检测方法；中国HIV／AIDS患者外周血单个核细胞中TLR4 mRNA的含量显著高于健康对照组，且与疾病进展密切相关。     

TRAIL及其受体与隐球菌性脑膜炎的关联性研究

目的研究建立实时荧光定量（RFQ）-PCR法测定TRAIL及其受体DeR1、DcR2、DR4、DR5 mRNA含量的方法，探讨其在隐球菌性脑膜炎患者外周血单个核细胞中表达的检测价值，并分析隐球菌性脑膜炎患者细胞因子与TRAIL及其受体的相关性。方法设计特异性的引物和探针，以人基因GAPDH为内参照，用实时定量PCR的方法检测35例健康人和35例隐球菌性脑膜炎患者外周血单个核细胞中TRAIL及其受体mRNA的表达水平，采用ELISA方法检测血清IL-4、IL-10、TNF-α、IFN-γ浓度。结果与健康人比较，隐球菌性脑膜炎患者外周血单个核细胞中TRAIL mRNA的表达明显下降（P〈0．01）；受体DeR1 mRNA的表达显著升高（P〈0．01），受体DeR2、DR4、DR5 mRNA的变化无统计学意义。隐脑患者血清中IL-10显著升高（P〈0．01），与TRAIL的变化成负相关；IFN-γ显著下降（P〈0．01），与TRAIL的变化成正相关。结论隐球菌性脑膜炎患者TRAIL下降及其受体DeR1mRNA的表达明显升高，提示TRAIL及其受体DeR1可能参与隐球菌性脑膜炎的疾病进程，这为有效治疗隐球菌性脑膜炎提供了新的线索。     

Foxp3在慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞及肝组织中的表达及作用机制

目的 观察慢性乙型肝炎（CHB）患者外周血单个核细胞中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Tregs）特异性标志物Foxp3mRNA的表达水平,以及Foxp3蛋白在活检肝组织中的表达及定位情况,并分析其与病理炎症活动度的相关性,以探讨Tregs在CHB发病中的特性及作用机制。方法选取进行肝组织活检的CHB组103例,并设对照组（G0）16例。应用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）技术检测患者外周血单个核细胞Foxp3mRNA水平,并对肝组织进行苏木素-伊红（HE）染色,进行病理炎症活动度分级（G0～G1）。免疫组织化学法测定肝组织中Foxp3表达,并进行半定量分析。结果CHB组（G1～G4）外周血单个核细胞Foxp3mRNA均高于对照组（G0）,3．57±0．59、3．71±0．32、3．74±0．77、4．45±0．39VS3．32±0．87（P〈0．05）,且G4组Foxp3mRNA水平明显高于其他各组（P〈0．05）;肝组织汇管区及小叶内Foxp3分值均高于对照组（P〈0．01或〈0．05）,且随着炎症活动度的逐渐增加,各组汇管区阳性表达量逐渐增强,与炎症活动度呈正相关（rs=0．996,P〈0．05）,但小叶内的阳性表达并无明显增强（rs=0．316,P〉0．05）。结论CHB患者外周血单个核细胞及肝组织中FoxP3的表达水平与病理炎症活动度具有显著相关性。Tregs具有主动调节抑制作用,迁延不愈的免疫损伤可能与机体缺少足够的Tregs抑制有关。     

冠心病患者血浆脂联素水平变化的探讨

目的 探讨冠心病患者血浆脂联素（Adiponectin）水平的变化及与动脉粥样硬化发生的关系。方法 选择冠心病（CAD）患者40例作为实验组，其中急性冠脉综合征（ACS）20例，包括急性心肌梗死（AMI）11例．不稳定性心绞痛（UA）9例．稳定性心绞痛（SAP）20例；选择排除心血管系统疾病的健康体检者20例作为对照组．分别采血测定血浆脂联素水平，比较冠心病组与对照组血浆脂联素水平有无差异。结果 ACS组血浆脂联素水平低于SAP组和对照组．有显著性差异（P〈0．05，P〈0．001），SAP组与对照组相比差异无统计学意义（P〉0．05）。结论 脂联素与冠脉病变稳定性显著相关，脂联素水平可做为预测病情，诊断冠心病的一个指标。     

急性冠脉综合征患者白介素-18及基质金属蛋白酶-9检测的意义

目的探讨白介素-18（IL—18）及基质金属蛋白酶-9（MMP-9）预测急性冠脉综合征（ACS）的意义。方法心内科住院患者79例，根据临床表现及冠脉造影结果分为对照组24例、不稳定性心绞痛（UAP）组预测3l例和急性心肌梗死（AMI）组24例，用酶联免疫吸附法（ELISA）测量其股动脉血清IL—18及MMP-9水平。结果IL—18水平，对照组较UAP组显著降低（P〈0．01），UAP组较AMI组显著降低（P〈0．01）；MMP-9水平，对照组较UAP组显著降低（P〈0．01），UAP组较AMI组显著降低（P〈0．01）。结论IL—18及MMP-9在正常人中表达，在ACS患者中显著升高，可作为ACS重要预测指标，并可能成为ACS的治疗靶点。