胃癌CD4+CD25highFoxp3+调节性T淋巴细胞数量和分布及Foxp3基因表达与肿瘤分期的相关性

目的 研究胃癌患者CD4+CD25highFoxp3+调节性T淋巴细胞(Treg)的存在数量、分布情况,及其功能基因Foxp3的表达变化与胃癌临床国际肿瘤淋巴转移分类(TNM)分期的关系.方法 用四色流式细胞术以Foxp3-FITC/CD25-PE/CD4-PerCP/CD3-PC7抗体组合分析20名健康对照者及47例胃癌患者(临床TNM分期Ⅰ期11例、Ⅱ期18例、Ⅲ期10例、Ⅳ期8例)外周血、腹腔积液、肿瘤组织浸润淋巴细胞(TIL)及癌旁淋巴结中CD4+CD25highFoxp3+Treg的数量及分布情况.实时荧光定量PCR技术检测Treg Foxp3 mRNA表达水平.结果 胃癌患者外周血CD4+CD25highFoxp3+Treg占CD4+T淋巴细胞的百分比为(8.03±3.47)%,高于正常健康对照组(5.83±2.93)%,差异具有统计学意义(P＜0.05).胃癌患者腹腔积液、肿瘤浸润淋巴细胞、癌旁淋巴结中Treg占CD4+T淋巴细胞比例均高于外周血,差异有统计学意义(分别为P＜0.05、P＜0.01、P＜0.01).胃癌组织局部TIL和癌旁淋巴结中Treg的Foxp3平均荧光强度显著高于外周血和腹腔积液(P＜0.05).Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期胃癌患者Treg比例分别为(5.72±1.95)%、(6.45±2.23)%、(9.58±3.13)%、(11.70±2.30)%,这提示Treg与肿瘤TNM分期显著相关(r=0.784,P＜0.01).胃癌患者外周血单个核细胞Foxp3基因mRNA表达水平明显高于健康对照组(P＜0.01).Foxp3基因表达水平与胃癌TNM各分期呈显著相关性(r=0.623,P＜0.05).结论 胃癌患者CD4+CD25highFoxp3+Treg的比例升高,其增高程度与肿瘤临床分期呈显著正相关.胃癌患者外周血和癌组织局部Treg的数量、分布情况及特异性转录因子Foxp3的表达强度均有所不同,提示肿瘤局部免疫抑制功能增强,这可能是产生肿瘤免疫抑制的重要机制,CD4+CD25highFoxp3+Treg将来可作为胃癌患者病情进展的重要判断指标之一.     

乳腺癌患者外周血T淋巴细胞及调节性T细胞的检测意义

目的 探讨乳腺癌患者外周血中T淋巴细胞亚群及调节性T细胞的变化和临床意义.方法 采用流式细胞技术检测30例乳腺癌患者外周血中T淋巴细胞亚群及调节性T细胞的变化,并与健康对照组进行比较.结果 乳腺癌患者外周血CD4+CD25+及CD4+CD25+high调节性T细胞占CD3+CD4+T细胞的比率为(15.52±1.54)%及(3.49±0.54)%,高于健康对照组(6.11±0.72)%及(1.42±0.61)%,差异有统计学意义(P<0.05);乳腺癌患者CD3+T淋巴细胞比率为(50.98±6.79)%、CD4+Th细胞比率为(28.37±7.58)%和Th/Ts比值为(1.05±0.38),显著低于健康对照组(67.55±5.98)%、(40.12±5.27)%和(1.59±0.65),差异有统计学意义(均P<0.05),而CD8+Ts细胞比率为(30.05±7.79)%,与健康对照组(29.97±7.14)%比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 乳腺癌患者外周血调节性T细胞水平升高,T淋巴细胞及Th细胞降低可能是乳腺癌患者细胞免疫功能受损的重要原因之一.     

脐血CD4+CD25+CD127low调节T细胞及淋巴细胞亚群分析

目的 检测新生儿脐带血淋巴细胞亚群和调节性T细胞比率,了解脐带血免疫学的特征.方法 使用Sysmex XE2100血细胞分析仪分别计数脐带血、新生儿母亲及对照组外周血淋巴细胞;采用流式细胞术分别检测其CD3+T细胞、CD19+B细胞、CD3- CD16+56+ NK细胞、CD3+ CD4+细胞、CD3+ CD8+细胞占淋巴细胞百分比,以及CD4+ CD25+CD127low调节性T细胞占CD4+细胞的百分比.结果 脐带血、新生儿母亲及对照组淋巴细胞计数分别为(3.68±1.07)×109/L,(1.42±0.44)×109/L和(2.06±0.88)×109/L;B淋巴细胞为:15.71％±3.89％,11.13％±3.79％和9.69％±2.22％;CD4+T细胞为:50.27％±9.08％,37.25％±7.13％和34.65％±7.17％;调节性T细胞为:6.94％±1.09％,5.09％±0.95％和4.8％1±0.99％.上述检测结果脐带血均显著高于母亲及对照组,P＜0.01,母亲与对照组差异无统计学显著性意义P＞0.05.三组间CD3+T细胞(69.64％±9.97％,74.83％±5.91％和69.41％±5.42％)和NK(11.36％±7.93％,10.48％±6.78％和16.31％±4.69％)细胞无显著性差异,P＞0.05.脐带血中CD8+T细胞低于母亲及对照组(19.38％±6.62％,32.39％±2.08％和31.16％±1.87％),P＜0.01.结论 脐血中高水平的CD4+ CD25+ CD127low调节性T细胞和低水平的CD8+T细胞有助于保持脐带血的低免疫状态.     

单剂量巴利昔单抗对肾移植受者外周血Foxp3mRNA、CD4+CD25+调节性T细胞、白细胞介素2及其受体的影响

目的观察单剂量巴利昔单抗对肾移植受者外周血Foxp3mRNA、CD4+CD25+调节性T细胞、白细胞介素2及可溶性白细胞介素2受体的影响,分析其预防移植肾急性排斥反应的作用途径.方法选择2005-10,2006-12在上海解放军第四五五医院行同种异体肾移植的患者66例,移植前均行维持性血液透析治疗.按随机数字表法分为2组,常规组接受常规免疫抑制剂治疗,巴利昔单抗组在常规免疫抑制剂治疗的基础上加用巴利昔单抗(商品名舒莱,诺华制药公司,批号S20040059,20 mg/瓶),每组33例.另外选择年龄性别相配的健康体检者30例作为对照组.以上所有观察对象均知情同意,且得到医院伦理道德委员会批准.两组肾移植患者分别于移植前(手术当天)和移植后1,2,4,8周清晨采静脉血肝素抗凝,以流式细胞仪检测外周血中CD4+CD25+调节性T细胞含量,应用荧光定量PCR检测Foxp3mRNA的表达,应用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测血浆中自细胞介素2及其受体,采用生化仪检测血肌酐及尿素氮水平,必要时行移植肾多普勒超声检查和病理活检,观察其急性排斥反应发生情况.结果66患者全部进入结果分析,无脱落.①常规组患者急性排斥反应的发生率21.12%(7/33)显著高于巴利昔单抗组6.1%(2/33)(p＜0.05).②移植后第1,2,4和8周巴利昔单抗组Foxp3、CD4+CD25+调节性T细胞和白细胞介素2水平均高于常规组(P＜0.05～0.01),可溶性白细胞介素2受体水平均低于常规组[(306.31±98.43,327.60±109.74,316.71±104.54,388.33±13242;410.14+112.04,442.82±118.94,450.80±123.63,445.61±115.24)U/mL(p＜0.05～0.01)].③两组肾移植患者无论移植前还是移植后,其血浆CD4+CD25+调节性T细胞百分率与Foxp3mRNA表达水平均呈明显正相关(r=0.892～0.932,P＜0.01).结论单剂量巴利昔单抗可以有效地减少移植肾急性排斥反应的发生率,作用途径可能与其增加外周血中Foxp3mRNA、CD4+CD25+调节性T细胞和白细胞介素2表达,减少血浆可溶性白细胞介素2受体水平有关.     

特异性细胞因子对T辅助17细胞和T调节性细胞表达的调节作用

目的 探讨多种细胞因子包括转化生长因子β(TGF-β)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素2(IL-2)对CD+4T淋巴细胞的分化调节作用.方法 将人外周血T淋巴细胞、鼠脾脏T淋巴细胞在不同的刺激条件下进行体外培养,采用流式细胞仪分析活化T淋巴细胞中CD+4IL-17+T辅助17细胞(Th17细胞)、C+4IL-17+T淋巴细胞、CD+4CD+25FOXP+3T调节性细胞(Treg细胞)的表达情况.结果 鼠脾脏T淋巴细胞培养液中有TGF-β存在时可促进Treg细胞、rh17细胞和CD+8;IL-17+T淋巴细胞分化,表达水平分别为(7.8±2.2)%、(12.6±3.1)%、(10.1±2.6)%.无细胞因子培养的同类细胞为实验对照组,表达水平分别为(4.8±0.6)%、(1.7±0.5)%、(1.0±0.4)%,差异均有统计学意义(q=4.09、8.80、9.61,P<0.05或P<0.01).TGF-β与IL-6细胞因子共同存在时可促进Th17和CD+8IL-17+T淋巴细胞分化,表达水平分别为(17.8±5.3)%、(15.0±4.2)%,而分化受抑制的Treg细胞的表达水平为(4.I±1.2)%,与TGF-β组同类细胞表达水平比较差异均有统计学意义(q=5.03、5.17、5.04,P均<0.01).在TGF-β刺激的T淋巴细胞中加入IL-2细胞因子可使Th17细胞、CD+8;IL-17+T淋巴细胞表达减少,同时伴有Treg细胞表达量的增加;在加入抗IL-2后结果相反,即Th17细胞、CD+8IL-17+T淋巴细胞表达水平增加,Treg细胞表达水平减少.人外周血T淋巴细胞上Th17、CD+8IL-17+、Treg细胞表达水平变化趋势与鼠脾脏淋巴细胞相似.结论 不同细胞因子对于调控Th17细胞和Treg细胞之间的平衡起着十分重要的作用.     

儿童过敏性紫癜急性期Th17细胞功能和CD4~＋CD25~＋调节性T细胞水平变化

目的观察过敏性紫癜（HSP）病儿急性期Th17细胞功能和CD4＋CD25＋调节性T细胞（CD4＋CD25＋Treg）水平变化,探讨其在HSP免疫发病机制中的作用。方法选择54例HSP急性期病儿为研究对象,根据尿检有无异常分为肾炎组（HSPN组）和非肾炎组（NHSPN组）,应用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测血浆白细胞介素17（IL-17）水平,采用流式细胞术检测外周血CD4＋CD25＋Treg、CD4＋细胞、CD8＋细胞、CD3＋细胞、NK细胞（CD3-CD56＋）、B淋巴细胞（CD19＋）和CD3＋HLADR＋细胞水平。以30名健康儿童作为对照。结果HSP病儿血浆IL-17水平较对照组明显增高（t=14.66,P〈0.01）,HSPN组和NHSPN组间比较差异无统计学意义（P〉0.05）。HSP病儿外周血CD4＋CD25＋Treg比例明显低于对照组（t=7.28,P〈0.01）,HSPN组和NHSPN组间比较差异无统计学意义（P〉0.05）。HSP病儿CD4＋CD25＋Treg水平与CD4＋细胞呈正相关（r=0.554,P〈0.01）,与CD19＋细胞呈负相关（r=-0.305,P〈0.05）,而与CD8＋细胞、CD3＋细胞、CD3-CD56＋细胞以及CD3＋HLADR＋细胞则无相关性（r=-0.109～0.287,P〉0.05）。HSP病儿血浆IL-17水平与CD4＋CD25＋Treg水平呈负相关（r=-0.295,P〈0.05）。结论 HSP病儿急性期Th17细胞功能增强,免疫抑制效应不足;HSP病儿存在Th17/Treg平衡紊乱,Th17/Treg失衡参与了HSP的发病过程。     

类风湿关节炎CCP抗原特异性T淋巴细胞的ELISpot检测与临床应用评价

目的 优化并建立CCP/AST分泌干扰素γ(IFN-γ)与白细胞介素4(IL-4)的ELISpot方法,以探讨CCP/AST细胞在RA发生、发展中的作用与临床意义.方法 以CCP抗原肽为特异性刺激物,FLAG肽为对照,用ELISpot检测64例RA患者和64例非RA患者及30名健康人PBMC分泌IFN-γ、IL-4的阳性SFC频数与比值,并评估其在RA疾病中的诊断价值,同时对上述3项指标与RA患者的关节症状及其他指标间的相关性进行分析.结果 RA患者中特异性分泌IFN-γ和IL-4-的SFC分别为39(12～77)个/3×105PBMC和1(1～3)个/3×105PBMC,阳性率分别为81.3%和18.8%;IFN-γ与IL-4的SFC频数比值为15(5～39),阳性率78.1%.其中IFN-γ的SFC和两者频数比值均显著高于非RA疾病(Z分别为-7.458、-7.019,P均＜0.01)和健康对照组(Z分别为-6.643、-5.760,P均＜0.01),且这2项指标在抗CCP抗体阳性与阴性的RA组中均显著高于系统性红斑狼疮(Z分别为-6.573、-6.098、-4.552、-4.726,P均＜0.01)、强直性脊柱炎(Z分别为-3.520、-3.326、-2.950、-2.126,P均＜0.01或0.05)、其他自身免疫病(Z分别为-4.838、-4.418、-3.681、-3.839,P均＜0.01)和健康对照组(Z分别为-6.553、-5.578、-4.635、-4.163,P均＜0.01).用IFN-γ-SFC、IL-4-SFC和IFN-γ-SFC/IL-4-SFC频数比值3项指标联合检测RA的ROC曲线下面积和Youden指数分别为0.910和0.747,其诊断RA的敏感度和特异度分别为87.5%和87.2%,阳性和阴性预测值分别为82.4%和91.1%.相关分析结果显示,IFN-γ-SFC/IL-4-SFC频数比值不仅与抗CCP水平显著相关(r=0.393,P＜0.01),而且与患者的关节症状,如肿痛关节数(r=0.429,P＜0.01)、破坏关节数(r=0.463,P＜0.01)、RF(r=0.166,P＜0.01)及ESR(r=0.199,P＜0.05)亦显著相关.结论 RA患者体内广泛存在CCP/AST的活化和异常,并呈CCP抗原特异性Th1细胞优势状态,这为客观了解RA瓜氨酸化蛋白介导的特异性细胞免疫应答状态及细胞因子网络调节功能提供了新的试验依据,并具有潜在诊断和临床应用价值.     

T淋巴细胞活化检测方法的建立及在肝移植个案中的应用

1．1对象济南市中心医院2001-12～2003-05肝移植4例，分别于术前1d、肝移植术后3d、肝移植术后15d采空腹静脉血2ml，肝素钠抗凝。正常人30例，年龄24～41岁，平均35岁。1．2试剂和仪器由美国BD公司提供T淋巴细胞活化试剂盒，包括FTTC／PE／PerCP三色荧光IgGl阴性对照(批号340456)，CD4-FITC／(2D69-PE／(2D3-PerCP(批号340365)，CD8-FITC／(2D69-PE／(2D3-PerCP(批号340367)，溶血索(批号     

胃癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的变化

目的:探讨胃癌患者外周血CD4 CD25 调节性T细胞的变化及临床意义。方法:应用流式细胞仪检测52例胃癌患者(胃癌组)和24例健康对照者(健康组)的CD4 CD25 调节性T细胞水平。结果:胃癌组外周血CD4 CD25 调节性T细胞较健康组明显升高,胃癌Ⅲ Ⅳ期患者外周血CD4 CD25 调节性T细胞水平比Ⅰ Ⅱ患者明显升高。结论:胃癌患者外周血CD4 CD25 调节性T细胞水平明显升高,可能是机体免疫功能受抑制的重要机制,并可成为胃癌患者机体免疫状态临床监测的指标。     

复发性口腔溃疡患者外周血调节性T细胞和白细胞介素2水平的表达

目的研究复发性口腔溃疡(RAU)患者溃疡期外周血调节性T细胞和白细胞介素2(IL-2)的水平变化。方法收集RAU患者溃疡期和健康人外周血,采用流式细胞术分析其CD4+ CD25+ Foxp3+ T细胞比例的变化,ELISA检测IL-2的水平。结果 RAU患者外周血中调节性T细胞[(3.29±0.86)%vs.(5.67±0.99)%]和IL-2的水平[(31.12±4.71)pg/mlvs.(36.11±4.99)pg/ml]低于正常对照组(P<0.05)。结论调节性T细胞和IL-2在RAU患者外周血中表达下降,提示在RAU免疫发病机制中两者起到了重要作用。     

哮喘患儿外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞的变化及其与哮喘病情的关系——附80例检测报告

目的：探讨哮喘患儿外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞（regulatoryTcell,Treg）的变化及其与哮喘病情的关系。方法：80例哮喘患儿（哮喘组）按,临床表现分为急性发作期组（60例）和缓解期组（20例）,其中急性发作期组按病情再分为轻度组（34例）和中度组（26例）,另选择50名健康儿童为正常对照组。应用流式细胞仪检测上述各组外周血CD4＋CD25＋Treg细胞水平（CD4＋CD25＋Treg占CD4＋T细胞的百分比）,采用整群和分层研究的方法,进行统计学分析。结果：哮喘组CD4＋CD25＋Treg水平明显低于正常对照组（P〈0．01）。急性发作期组CD4＋CD25＋Treg水平明显低于缓解期组和正常对照组（均为P〈0．05）。轻度组CD4＋CD25＋Treg水平则明显高于中度组（P〈0．01）。经Spearman等级相关分析,哮喘患儿外周血CD4＋CD25＋Treg水平与哮喘的病情严重程度呈负相关（r=-0．361,P〈0．01）。结论：与健康儿童比较,哮喘患儿外周血CD4＋CD25＋Treg水平明显降低,而在哮喘发作期降低更甚。随着哮喘患儿病情的加重,其外周血CD4＋CD25＋Treg水平逐渐降低。     

滤泡辅助性T细胞与自身免疫性皮肤病的研究进展

滤泡辅助性T细胞（Tfollicularhelpercells,Tth）是新近发现的CD4＋T细胞亚群中独立的一类细胞,其主要功能是辅助B淋巴细胞产生高亲和力抗体,完成体液免疫应答的过程。Tfh标志性表达趋化因子受体5、可诱导共刺激分子、IL-21、B细胞淋巴瘤分子-6等分子。上述分子异常表达,可导致自身免疫性疾病的发生。现将近几年来有关Till细胞的研究进展及其在自身免疫性皮肤病发病机制中的作用综述如下。     

人工抗原呈递细胞诱导CML28特异性T淋巴细胞杀伤急性白血病细胞的研究

目的 探讨以人工抗原呈递细胞模拟树突细胞(DC)体外诱导特异性T淋巴细胞活化、增殖,观察特异性T淋巴细胞杀伤白血病细胞的效应.方法 用慢性粒细胞白血病细胞特异性抗原肽(CML28)作为目标肽,并以磁珠同时负载人工合成的HLA-A2-Ig二聚体-抗原肽(CML28)复合物以及B7-1分子,作为诱导T淋巴细胞的活化、增殖的双信号分子,模拟抗原呈递细胞的生物功能,建立一种人工抗原呈递细胞;从HIA-A2健康骨髓捐献者骨髓或外周血中分离出单个核细胞作为效应细胞,并与人工抗原呈递细胞共孵育,以流式细胞术检测特异性T淋巴细胞活化、增殖程度.以初治急性白血病细胞作为靶细胞,将特异性T淋巴细胞与白血病细胞分别以5:1,10:1,20:1,40:1,80:1比例共孵育4 h,用乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测杀伤急性白血病细胞的效果.结果 以该人工抗原呈递细胞刺激T淋巴细胞后,其CML28特异性T淋巴细胞比例明显增高,实验组中抗原肽ALFCGVACA、FLQGDTSVL、DLMSSTKGL、VLTFALDSV所诱导的特异性T淋巴细胞比例分别为(13.5±1.6)%、(15.2±1.5)%、(14.7±1.8)%、(34.3±3.5)%,与对照组[(2.2±0.4)%]比较,差异均有统计学意义(P<0.01).当效应细胞与靶细胞分别以5:1,10:1,20:1,40:1,80:1混合后,随着效应细胞的增加,诱导杀伤急性白血病细胞效率也明显增强,与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 以磁珠为平台的人工抗原呈递细胞能有效模拟人抗原呈递细胞,诱导T淋巴细胞特异性杀伤白血病细胞,为白血病的免疫治疗提供了一种新的途径.     

基质细胞衍生因子-1及其受体CXCR4在进展期胃癌中的表达及意义

目的 研究趋化因子基质细胞衍生因子-1(SDF-1)及其受体CXCR4与胃癌生物学行为的关系,探讨SDF-1/CXCR4轴在胃癌侵袭、转移中的生物学意义.方法 应用免疫组化EnVision两步法检测58例胃癌组织中SDF-1、CXCR4的表达.结果 (1)SDF-1、CXCR4在胃癌组的阳性表达率分别为87.9%、56.9%,显著高于切缘对照组的47.8%、30.4%,差异有显著性(P<0.05);(2)SDF-1和CXCR4的表达在淋巴结转移组高于无转移组(P<0.05),SDF-1、CXCR4表达程度与淋巴结转移、浆膜侵犯、临床分期指标相关(P<0.05);(3)SDF-1与CXCR4的表达呈正相关(P<0.05).结论 胃癌细胞SDF-1、CXCR的表达水平与胃癌的发生、侵袭及淋巴结转移密切相关,可作为预测胃癌淋巴结转移及预后的免疫病理学指标;胃癌细胞可能通过SDF-1/CXCR4生物轴促进肿瘤的浸润和转移,提示SDF-1可能是药物靶向治疗的重要靶点.     

甘草酸二铵对慢性乙型肝炎患者外周血CD4＋CD25＋Foxp3＋调节性T细胞的影响

目的探讨应用甘草酸二铵后,慢性乙型肝炎（CHB）患者外周血CD4＋CD25＋Foxp3＋调节性T细胞（Treg）的变化情况。方法选取CHB患者60例（CHB组）,甘草酸二铵治疗30d并采集治疗开始前、开始后15d、治疗结束后第2天的外周血,同时选择60例乙肝表面抗原阴性的健康体检者作为对照组。采用三色荧光标记流式细胞术检测两组外周血中CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Treg的含量。结果CHB组在治疗开始前外周血Treg高于对照组（P〈0．05）;治疗15d后,外周血Treg含量较治疗开始前下降,但仍高于对照组（P均〈0．05）;治疗30d后Treg含量进一步下降,与前两次相比,差异均具有统计学意义,且仍高于对照组（P均〈0．05）。结论外周血Treg可能参与CHB患者乙型肝炎病毒（HBV）免疫耐受。甘草酸二铵可降低患者外周血Treg数量,提示其可能通过对HBV的免疫调节实现其治疗作用。     

肺癌患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的分布及临床意义

目的检测肺癌患者外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的分布，探讨其临床意义。方法采用流式细胞术检测45例肺癌患者和30例健康对照者外周血中的CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的变化，并通过体外淋巴细胞增殖实验对肺癌患者CD4^＋CD25^＋调节性T细胞进行鉴定。结果（1）肺癌患者外周血中CD4^＋CD25^＋T细胞比例明显增高（P〈0．05），但治疗后其比例明显下降（P〈0．05）；（2）肺癌患者CD4^＋CD25^＋T细胞能抑制CD4^＋CD25^-T细胞的增殖和干扰素γ的分泌。结论肺癌患者外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞比例明显增高，其动态监测有助于肺癌患者免疫状态及疗效评价。     

低剂量西罗莫司协同CD4~+CD25~+ T-reg诱导大鼠肝移植免疫耐受的实验研究

目的我们通过体外诱导、扩增并分选出CD4+CD25+T-reg回输入受体大鼠,并协同低剂量西罗莫司去诱导大鼠肝移植免疫耐受,研究探讨CD4+CD25+T-reg细胞亚群在移植免疫耐受过程中扮演的角色。方法将实验动物分为急性排斥组(DA→LEW)、免疫耐受组(LEW→DA)、低剂量西罗莫司(0.1 mg·kg-1·d-1)和CD4+CD25+T-reg协同作用组(实验组)。每组8只实验动物。各组肝移植大鼠的存活率比较,应用HE染色法观察移植肝术后7 d组织病理学变化,检测CD4+CD25+Foxp3+T-reg细胞亚群在各组大鼠移植肝脏、外周血总单核细胞数中所占的百分比。RT-PCR检测术后7 d移植肝脏Foxp3 m RNA的表达水平。用ELISA检测血浆中细胞因子IL-10、TGF-β的水平。结果实验组对比排斥组,能够长期存活,获得免疫耐受(P<0.05)。实验组移植肝脏中CD4+CD25+Foxp3+T-reg细胞亚群所占的比例明显高于排斥组(P<0.001),且在移植肝脏中,实验组Foxp3 m RNA表达含量明显增加(P<0.001)。实验组血浆中细胞因子IL-10、TGF-β的表达水平高于排斥组(P<0.001)。结论我们通过流式细胞分选技术将体外扩增诱导成熟的受体大鼠CD4+CD25+T-reg细胞分离收集,然后回输受体协同低剂量的西罗莫司能够成功地诱导了长期肝移植免疫耐受。从而为临床应用CD4+CD25+T-reg细胞抑制免疫排斥反应,诱导移植免疫耐受提供了一条新思路和理论实验依据。     

趋化因子受体CCR4、CCR5在系统性红斑狼疮患者外周血CD4＋T淋巴细胞上的表达及其意义

目的探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者趋化因子受体CCR4和CCR5在外周血淋巴细胞表面的表达及其意义。方法流式细胞仪计数法对113例SLE患者和50例健康体检者外周血淋巴细胞表面CCR4和CCR5的表达情况进行检测,分析及评价SLE患者外周血淋巴细胞中CCR4＋和CCR5＋T淋巴细胞的百分数。结果非狼疮性肾炎（nLN）SLE组外周血CCR4＋CD4＋T%明显高于健康对照组（P〈0.01）;狼疮性肾炎SLE组外周血CCR4＋CD4＋T%明显高于健康对照组（P〈0.001）;LNSLE组外周血CCR4＋CD4＋T%明显高于nLNSLE组（P〈0.01）;nLNSLE组外周血CCR5＋CD4＋T%高于健康对照组（P〈0.05）;LNSLE组外周血CCR5＋CD4＋T%明显高于健康对照组（P〈0.001）;LNSLE组外周血CCR5＋CD4＋T%明显高于nLNSLE组（P〈0.01）。SLE活动组血清CCR4＋CD4＋T%与CCR5＋CD4＋T%较非活动组和对照组明显升高（P〈0.01）;活动性狼疮性肾炎（LN）与活动性无肾损伤组及对照组比较,其差异具有显著统计学意义（P〈0.01）。nLNSLE组外周血CCR4＋CD4＋T%与CCR5＋CD4＋T%有相关性（r=0.619,P〈0.05）;LNSLE组外周血CCR4＋CD4＋T%与CCR5＋CD4＋T%有明显相关性（r=0.68,P〈0.01）;血清CCR4＋CD4＋T%水平随着SLE疾病活动水平明显升高,与总的系统性红斑狼疮疾病活动性指数（SLEDAI）评分密切相关（r=0.6382,P〈0.001）;与SLEDAI肾评分亦密切相关（r=0.6980,P〈0.001）;而CCR5＋CD4＋T%与疾病活动度不相关（r=0.16,P〉0.05）。结论以上结果表明CCR4和CCR5在T细胞趋化至病变部位的过程中可能发挥重要作用,CCR4＋CD4＋T%与CCR5＋CD4＋T%可能在肾损伤中起着十分重要的作用,血清CCR4＋CD4＋T%、CCR5＋CD4＋T%与SLE疾病活动密切相关,可作为SLE疾病活动,尤其是监测狼疮性肾损伤的重要指标。