GSH 耗竭介导5, 7- 二甲氧基黄酮诱导肺癌A 549 细胞凋亡

目的探讨5,7-二甲氧基黄酮（5,7-dimethoxyflavone,DMF）诱导人肺癌A549细胞凋亡作用是否涉及细胞内谷胱甘肽（glutathione,GSH）耗竭。方法体外培养A549细胞,分光光度法测定细胞内GSH含量;流式细胞术检测细胞凋亡率;琼脂糖凝胶电泳观察细胞DNA断裂。结果 DMF以浓度依赖方式诱导A549细胞凋亡率增高（P〈0.05）,并导致细胞DNA断裂。DMF显著降低A549细胞内GSH水平（P〈0.05）,呈浓度依赖性。500μmol·L-1GSH预孵育1h,能有效阻断DMF诱导细胞内GSH耗竭,并减弱DMF触发细胞凋亡作用（P〈0.05）。结论细胞内GSH耗竭是DMF诱导人肺癌A549细胞凋亡作用机制之一。     

富马酸二甲酯调控Nrf2-GPX4介导的铁死亡途径对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护作用研究

目的 基于核因子E2相关因子2(Nrf2)-谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)介导的铁死亡途径探讨富马酸二甲酯（DMF）对心肌缺血/再灌注（I/R）损伤的保护机制。方法 将72只SD大鼠随机分为假手术组（Sham组）、I/R组、Ferrostatin-1组（Fer-1组）、DMF低剂量组（DMF-L组,25 mg/kg）、DMF高剂量组（DMF-H组,50 mg/kg）、DMF+ML385组（50 mg/kg DMF+30 mg/kg ML385）,每组12只,给予相应的药物干预,1次/d,连续7 d;同时结扎左冠状动脉前降支建立心肌I/R大鼠模型。再灌注12 h后,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清乳酸脱氢酶（LDH）、肌钙蛋白I(c TnI)、肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)水平;苏木精-伊红（HE）染色观察心肌组织病理学变化;TUNEL染色检测心肌细胞凋亡;DHE荧光染色法检测心肌组织活性氧（ROS）水平;生化法检测心肌组织匀浆中丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性;比色法检测心肌组织Fe2+含量;Western blot检测心肌组织Nrf2、...     

活性氧介导5, 7- 二甲氧基黄酮诱导结肠癌HT- 29 细胞凋亡

目的研究5,7-二甲氧基黄酮（5,7-dimethoxyflavone,DMF）诱导体外培养人结肠癌HT-29细胞凋亡作用及其机制。方法以HT-29细胞为研究对象,利用ELISA法测定细胞DNA断裂,流式细胞术检测细胞凋亡率和活性氧（ROS）水平。结果DMF激活HT-29细胞ROS生成（P〈0．05）,呈浓度依赖性。DMF以浓度依赖方式促进HT-29细胞DNA断裂（P〈0．05）,同时,诱导细胞凋亡率增高（P〈0．05）;10μmol．L^-1N-乙酰半胱氨酸预孵育30min,能有效阻断DMF诱导ROS生成和细胞凋亡作用（P〈0．05）。结论DFM通过促进结肠癌HT-29细胞ROS生成诱导细胞凋亡。     

顶空气相色谱法测定氢化可的松琥珀酸钠中N，N-二甲基甲酰胺的残留量

目的建立测定氢化可的松琥珀酸钠中有机溶剂N，N-二甲基甲酰胺（DMF）残留量的方法。方法采用顶空气相色谱法，色谱柱为DB-624毛细管色谱柱（30m×0．32mm，1．8μm），载气为氮气，分流比为10：1，以二甲基亚砜（DMSO）为溶剂，柱温85℃，保持10min，然后以35℃／min的速率升温至200℃，保持6min，进样口温度为220℃，氢火焰离子化检测器（FID）温度为250℃。结果DMF质量浓度在0．0567～0．5090mg／mL范围内与峰面积线性关系良好，r=0．99998（n=7），平均加样回收率为101．4％，DMF的最低检出限为0．0028％。结论顶空气相色谱法可用于测定氢化可的松琥珀酸钠中有机溶剂DMF的残留量。     

延胡索酸酯对吞噬细胞产生超氧阴离子的调节作用

Fumaric acid esters （FAE）, mainly dimethylfumarate （DMF）, have been shown to be highly efficacious in the treatment of psoriasis. Among the potential side effects of FAE therapy, lymphocytopenia is sometimes observed. In order to address the question whether FAE may interfere with systems of the innate defense, the modulatory role of FAE on the generation of superoxide-anion by human monocytes and neutrophils was studied by measuring the reduction of cytochrome c. Various concentrations of DMF and its metabolite methylhydrogenfumarate （MHF） were used to observe their modulatory effect on superoxide-anion generation by monocytes and neutrophils in response to bacteria （S. aureus and E. coil） and candida （C. albicans）. Dexamethasone （DXM, 1 × 10^-7 mol · L^-1） was also studied at the same time. We found that DXM significantly inhibited superoxide-anion generation from monocytes in response to bacteria and C. albicans, whereas DMF and MHF （10- 20 μg · mL^-1） significantly increased the production of superoxide-anion in monocytes in response to the above mentioned bacteria. DXM, DMF and MHF did not affect superoxide-anion generation of neutrophils. Our data indicate that DMF and MHF enhance superoxide-anion generation in human monocytes as one of the important mechanisms of innate defense against microorganisms.     

苯丁酸钠和二甲基甲酰胺对乳腺癌细胞增殖抑制影响的研究

目的观察苯丁酸钠（PB）和二甲基甲酰胺（DMF）对乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响。方法应用MTT比色法,以梯度浓度的PB或DMF作用于MCF-7细胞,分别于24、48、72h对细胞增殖进行检测。结果0．391～3．125mmol／LPB和0．5—8．0mmol／LDMF作用MCF-7细胞24～72h,随着PB浓度的增加或作用时间的延长,细胞生长抑制率明显增加。随着DMF浓度的增加或作用时间的延长,细胞生长抑制率也较明显增加。结论PB和DMF可有效抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖。     

益智药 富马酸尼拉西坦

1合成富马酸尼拉西坦可通过两种不同的路线制备：1）1－苄基－4－（羟甲基）吡咯烷－2－酮（I）加SOC12在二氯甲烷中回流生成1－苄基－4－（氯甲基）吡咯烷－2－酮（Ⅱ），R在DMF中与邻苯二甲醇亚胺钢（m）缩合生成肝辛基一名，（苯二甲酸亚胺甲基）毗咯烷一2一酮（！VL最后IV在乙醇中经讲处理并用富马酸中和得本品。2）卜等基一2一氧代一毗咯烷一4一驳酸胺（v）用POCI。在热的DMF中脱水生成卜等基一4一氰基毗唯烷一2一酮（VI），VI在甲醇一氨中用HZ和RaNt还原并用富马酸中和得本品。2药理作用富马酸尼拉西坦是一具有拟胆碱作用…     

气相色谱法测定复方甲地孕酮注射液中二甲基甲酰胺的含量

目的：建立气相色谱法对5批复方甲地孕酮注射液中二甲基甲酰胺（DMF）的含量进行了考查.方法：采用气相色谱法,HP-5毛细管柱（30m×0.53 mm,5μm）,载气为氮气,氢火焰离子化检测器（FID）,柱温90℃,保持9 min,以40℃/min速度升温至200 ℃,保持5 min.结果：对5批复方甲地孕酮注射液中的DMF含量进行了考查,在所考查的浓度范围内线性关系良好,r为0.999 9,平均回收率为99.0％（n=9）.结论：本方法灵敏,结果准确.     

氮杂环丙烷的区域选择性开环

N-对甲苯磺酰基氮杂环丙烷于-10℃下滴加DMF和（COCl）2、PBr3等活化的络合物后，室温搅拌2-24h，可高选择性地制备β-卤代胺。7例收率70％～99％。     

2014年美国仿制药市场研发动态（I）

本期报告介绍了2014年第1季度各国获得简化新药申请（ANDA）批准、《药品管理档案》（DMF）申报、遭遇专利挑战的情况,以及生物仿制药市场、仿制药行业交易和相关仿制药企业的进展。     

2013年美国仿制药市场发展动态（Ⅱ）

报告介绍了2013年第4季度各国获得简化新药申请（ANDA）批准、《药品管理档案》（DMF）申报、遭遇专利挑战的情况,以及生物仿制药市场、仿制药行业交易和相关仿制药企业的进展。     

气相色谱法测定阿克他利中的有机溶剂残留量

目的：建立毛细管气相色谱法测定阿克他利中的有机溶剂残留量。方法：采用HP-FFAP毛细管气相色谱柱,FID检测器,以正丙醇为内标进行测定。结果：乙醇、醋酸、DMF的线性范围分别为50～800μg/ml（r=0.999 9）、50～800μg/ml（r=0.999 7）和8.8～140.8μg/ml（r=0.999 9）;乙醇、醋酸、DMF的平均回收率分别为100.7%、100.2%和99.7%;RSD分别为0.87%、1.32%和1.47%（n=9）。结论：该方法简单、灵敏、准确、重现性好,适用于阿克他利中的有机溶剂残留量的测定。     

苯基硅烷作为酰胺化试剂制备酰胺和肽

羧酸和胺于无水DMF中，在苯基硅烷作用下，室温反应可制得酰胺或肽。反应可在液相（30例中27例收率62％～95％）和固相（12例中9例收率75％～90％）中进行。     

二甲基甲酰胺对HL7702肝细胞毒性及线粒体膜电位的影响北大核心CSCD

目的观察二甲基甲酰胺(DMF)对HL7702肝细胞的细胞活力、凋亡及线粒体膜电位的影响,探讨DMF引起肝细胞凋亡的可能机制。方法 HL7702肝细胞给予50、100、150、200和250 mmol/L DMF处理,于24 h后检测其细胞存活率,乳酸脱氢酶(LDH)释放量。根据细胞毒性测试结果设置对照组及DMF染毒组(200 mmol/L)。流式细胞术检测DMF对HL7702细胞凋亡以及对线粒体膜电位的影响。结果 DMF剂量依赖性地降低HL7702细胞的存活率,其中150、200和250 mmol/L DMF组与对照组相比,细胞存活率明显降低;并且,随着DMF染毒浓度增加,释放至细胞外的LDH的含量增加,与DMF浓度呈正相关。200 mmol/L DMF染毒24 h后,与对照组相比,细胞凋亡率增加,差异有统计学意义(P<0.001),线粒体膜电位降低,差异也有统计学意义(P<0.001)。结论 DMF对HL7702细胞的毒性作用具有剂量依赖性,DMF引起HL7702线粒体膜电位的改变与DMF导致细胞凋亡有关。     

GC-MS/MS测定头孢拉定原料中N,N-二甲基甲酰胺及N-甲基乙酰胺的残留量

摘要：目的:建立GC-MS/MS测定头孢拉定原料中N,N-二甲基甲酰胺（DMF）及N-甲基乙酰胺（NMAC）的残留量的方法。方法:色谱条件Agilent VF-WAXms毛细管柱（30 m×0.25 mm, 0.25μm）,进样口温度为250℃;载气为高纯氦气,进样口为恒流模式,流速1.0 ml·min-1;分流进样,分流比10∶1。程序升温:初始温度50℃,保持1min,以10℃·min-1的速率升至180℃,保持2 min,再以20℃·min-1的速率升至240℃,保持10 min。质谱条件离子源为电子轰击源（EI）,离子源温度280℃。碰撞气为氮气,流速1.5 ml·min-1。质谱传输接口温度250℃。质谱监测模式为多反应监测（MRM）。结果:DMF在0.109～7.270μg·ml-1内与其峰面积呈良好的线性关系（r=0.999 9）,加标回收率为92.70%（RSD=4.28%,n=6）;NMAC在0.109～7.280μg·ml-1内与其峰面积呈良好的线性关系（r=0.999 9）,加标回收率为109.89%（RSD=4.24%,n=6）。结论:本方法经方法学验证,可用于测定头孢拉定中DMF及NMAC的残留量。     

二甲基甲酰胺对HL7702肝细胞毒性及线粒体膜电位的影响

目的观察二甲基甲酰胺(DMF)对HL7702肝细胞的细胞活力、凋亡及线粒体膜电位的影响,探讨DMF引起肝细胞凋亡的可能机制。方法 HL7702肝细胞给予50、100、150、200和250 mmol/L DMF处理,于24 h后检测其细胞存活率,乳酸脱氢酶(LDH)释放量。根据细胞毒性测试结果设置对照组及DMF染毒组(200 mmol/L)。流式细胞术检测DMF对HL7702细胞凋亡以及对线粒体膜电位的影响。结果 DMF剂量依赖性地降低HL7702细胞的存活率,其中150、200和250 mmol/L DMF组与对照组相比,细胞存活率明显降低;并且,随着DMF染毒浓度增加,释放至细胞外的LDH的含量增加,与DMF浓度呈正相关。200 mmol/L DMF染毒24 h后,与对照组相比,细胞凋亡率增加,差异有统计学意义(P0.001),线粒体膜电位降低,差异也有统计学意义(P0.001)。结论 DMF对HL7702细胞的毒性作用具有剂量依赖性,DMF引起HL7702线粒体膜电位的改变与DMF导致细胞凋亡有关。     

毛细管气相色谱法测定甲磺酸伊马替尼中残留有机溶剂

目的：建立可同时测定甲磺酸伊马替尼原料药中甲醇、乙醇和NN-二甲基甲酰胺（DMF）等3种残留有机溶剂的毛细管气相色谱法。方法：采用WondaCAPWAX毛细管柱为色谱柱,程序升温,N2为载气,载气流速为4,0mL·min^-1,氢火焰离子化检测器,检测器温度为250℃,进样口温度为200℃,进样量为1．0μL。以正丁醇为内标,通过内标法计算样品中3种有机溶剂残留量。结果：甲醇、乙醇和DMF在所建立的色谱条件下均能完全分离,分别在2．94-44,11、4．91-73．68和0．084-12．60mg·L^-1。的质量浓度范围内线性关系良好（r=0．9940-0．9985）,进样精密度（RSD）均小于5．0％（n=6）．平均回收率为104．8％-105．8％（RSD〈5,0％,,7：9）,定量限分别为O．20、0．33和0．08ng（信噪比为10：1）,检测限分别为0．05、0．11和0．02ng（信噪比为3：1）。样品中未检出甲醇和DMF,乙醇含量低于有关限度规定。结论：该方法简便、准确、灵敏、重复性好．可用于甲磺酸伊马替尼原料药中残留有机溶剂的检测。     

二甲基甲酰胺对大鼠肝细胞钙稳态的影响

二甲基甲酰胺(DMF)是一种用途广泛的有机溶剂,文献报道,DMF为亲肝性毒性,其作用详细机理尚未阐明。为探讨DMF对肝细胞钙稳态的影响及其与肝细胞损伤的关系,我们选用磷酸化酶a作为肝细胞浆钙离子浓度的间接指标,测定DMF与原代培养的大鼠肝细胞孵育一定时间后胞浆磷酸化酶a活性,同时测定GPT、GOT漏出量,并用台盼蓝拒染法观察细胞生长状况。     

胺与二氧化碳合成氨基甲酸酯

溴化四丁铵和过氧化钾制备的过氧化四乙铵在DMF中，室温通入二氧化碳，加胺反应2～7h得到氨基甲酸酯，13例收率54％～90％（1例38％）。     

ZnO催化苄位氧化成苯甲酸

烷基苯、ZnO于DMF中用微波或油溶90℃加热，生成相应的苯甲酸。萘、1,2，3，4-四氢萘氧化成邻苯二甲酸。15例收率75％～89％（微波3～15min）或65％～81％（油浴1～7h）。