电化学发光免疫分析法和酶联免疫吸附法测HBsAb效果评价

用电化学发光免疫分析法(ECLIA)和ELISA分别测定不同浓度乙肝表面抗体(HBsAb),并对结果进行分析比较.结果表明: ECLIA法测HBsAb的批内CV: 高值为0.95%, 中值为1.13%, 低值为2.63%, 批间CV: 高值为4.03%, 中值为4.93%, 低值为7.34%, 灵敏度为4IU/L; ELISA法测HBsAb的批内CV: 高值为5.76%, 中值为12.8%,低值为15.9%,批间CV: 高值为10.1%, 中值为19.6%, 低值为25.2%, 灵敏度为19IU/L.5种用ELISA法筛选的165例标本, 除3例ECLIA法HBsAb阳性, ELISA法HBsAb阴性, 不符合外, 其他162例两种方法结果一致.总之,用ECLIA测定HBsAb的各技术参数优于ELISA法.     

尿游离皮质醇化学发光免疫分析

目的 :应用IMMULITE化学发光系统测定尿游离皮质醇并进行评价。方法 :尿液以二氯甲烷抽提后行化学发光免疫分析。结果 :抽提回收率为 (92 7～ 10 5 33) % ,平均为 97 74 % ;稀释试验O/E比值为 87 9～ 10 7 9,平均为 10 0 76 % ;批内变异系数分别为 9 4 %、3 7%、8 1% ,平均 7 1% ,批间变异系数为 7 7%、5 7%、9 7% ,平均 7 7% ;4 2份样本结果分析本法与RIA相关性好r =0 .90 5 (P <0 .0 1) ;正常人参考范围(17 34～ 116 0 2 ) μg/2 4h。结论 :本法具有良好的准确性、健全性和重复性 ,适用于临床常规测定。     

电化学发光免疫分析法在AFP定量检测中的应用

为了解电化学发光免疫分析 (ECLIA)双抗体夹心法定量检测血清甲胎蛋白 (AFP)的临床应用及其优越性 ,参照NCCLS的评价方案对定量检测AFP含量的ECLIA法和放射免疫分析 (RIA)法进行精密度评价、线性评价和回收试验的比较 ,并采用两种方法平行检测 6 5例病人血清标本的AFP含量 ,对其进行相关性分析。结果表明 :两种方法都有较好的重复性 ,但ECLIA法明显优于RIA法 ;ECLIA法和RIA法具有良好的相关性 (r=0 .981 ,P <0 .0 5 ) ;回收率均在 95 %以上 ,ECLIA法明显高于RIA法 (t=4 .6 9,P <0 .0 5 ) ;ECLIA法的线性范围 (>5 0 0 μg/L)较RIA法 (<5 0 0 μg/L)要宽。ECLIA法定量检测AFP的准确性和精确度都明显优于RIA法 ,较RIA法更能满足临床需要     

磁性分离酶免疫法在唐氏综合征产前筛查中的应用

目的 :探讨磁性分离酶免疫分析技术 (magnetic -separatedenzymeimmunoassay ,MEIA)在唐氏综合征产前筛查中的实用性。方法 :对MEIA方法测定孕中期母血清甲胎蛋白 (AFP)和游离 β -绒毛促性腺激素 (β -HCG)含量进行方法学检测 ,同时与酶联免疫吸附法 (ELISA)和放射免疫法 (RIA)相比较。并通过检测及随访 1745例孕产妇建立了青岛地区孕中期母血清各孕周AFP、β-HGC中位数值。结果 :MEIA -AFP方法的灵敏度 <0 .2 1IU/ml,批内平均变异系数 (CV)为 4.7% ,批间平均CV为 6 .8% ,平均回收率为 97.4% ,与ELISA、IRMA法高度相关 (r=0 .90 0和 0 .986 )。MEIA - β -HCG方法的灵敏度为 1mIU/ml,批内平均CV为 2 .4% ,批间平均CV为 2 .4% ,平均回收率为 99.6 % ,与ELISA、IRMA法高度相关 (r=0 .942和 0 .976 )。建立了青岛地区孕中期产前筛查各孕周中位数值 ,其随孕周变化趋势与文献报道一致。筛查中暂未发现漏检病例。结论 :MEIA方法适用于测定孕中期母血清AFP和 β -HCG含量 ,进行唐氏综合征和开放性神经管畸形的产前筛查。     

化学发光免疫法与RIA法测定人血清抗TgAb和抗TpoAb结果的比较

比较CLIA和RIA法测定抗甲状腺球蛋白抗体 (抗TgAb)和抗甲状腺过氧化物酶抗体 (抗TpoAb)的临床应用意义。对经临床诊断甲状腺功能检查及病理证实的 37例慢性淋巴细胞性甲状腺炎患者 ,30例甲亢患者及36例患有内分泌疾病的患者 (包括甲状腺结节、甲状腺癌、糖尿病及库兴氏综合征 )和 35名正常人 ,用CLIA和RIA两种方法分别测定其血清的抗TgAb和抗TpoAb水平 ,并进行比较。结果表明 :(1 )CLIA和RIA法的批内变异分别为 3.0 %和 1 0 .0 % ,批间变异分别为 3.9%和 1 5 .0 % ;(2 )正常人抗TgAb水平分别为CLIA法是 2 5 .9± 9.6U/mL ;RIA为 1 1 .2± 2 .8% ,抗TpoAb水平分别为CLIA法是 31 .4± 6 .7U/mL ;RIA是 8.7± 3.0 % ;(3)慢性淋巴细胞性甲状腺炎患者分别用CLIA法测定抗TaAb为 2 92 .6± 334.1U/mL(1 7例 ) ,RIA为 5 6 .4±1 1 .2 % (2 1例 )。而用CLIA法测定抗TpoAb为 5 0 4 3.3± 31 96 .1U/mL(1 7例 ) ,RIA为 35 .4± 6 .9% (2 1例 ) ,该结果显示CLIA法所测抗TgAb和抗TpoAb水平均明显高于正常人 (P <0 .0 0 1 ) ,特别是抗TpoAb水平比正常人高百倍以上 ,说明其特异性更高 ;(4 )甲亢患者及内分泌病患者 ,用CLIA法测定抗TgAb为 2 0 2 .3±5 0 6 .3U/mL和 2 8.7± 1 5 .0U/mL ;用RIA法为 2 8.8± 2 0 .2 %和 1     

抗精子抗体増敏化学发光免疫分析方法在不孕症的临床应用

目的对増敏化学发光免疫分析方法(ECLIA)测定抗精子抗体(AsAb)进行方法学评价及临床初步应用。方法对増敏化学发光免疫分析方法测定抗精子抗体试剂盒的线性、重复性、批内及批间变异值(CV)及发光稳定性进行测定,并用试剂盒对171例不孕不育妇女及120例正常对照组进行测定。结果抗精子抗体强阳性标本在稀释到1∶128稀释度时,发光值随抗体含量下降而降低,基本上呈线性关系;精密度实验批内CV值为2.37%～2.85%,批间CV值为4.04%～5.01%;发光稳定性试验,受检标本平均每min发光值降低3.1%～4.0%;不孕不育妇女组阳性比例为15.7%,正常对照组阳性比例为0.83%,两组阳性率比较有有统计学意义。结论增敏化学发光法测定抗精子抗体,该方法测定的重复性好,快速、线性范围宽、试剂稳定,值得临床推广使用。     

甲状旁腺激素荧光免疫层析定量检测技术的研制及应用研究

研制一种操作简易、灵敏度高的荧光免疫层析试纸条,用于定量检测甲状旁腺激素(parathyroid hormone,PTH)。采用双抗体夹心法和荧光免疫层析技术,将标记抗体LA001与荧光微球结合于聚酯膜结合垫上,检测抗体CA001包被在硝酸纤维素膜上作为检测线(T),另将质控抗体(羊抗鼠IgG)包被在相互平行的硝酸纤维素膜上作为质控线(C),过量的鼠源标记的荧光微球在质控线处聚集产生质控荧光信号,待测样中的PTH在T处形成包被抗体-PTH抗原-标记抗体的夹心复合物并产生荧光信号,通过荧光检测仪计算出定量结果。试纸条检测PTH灵敏度最低可达0.8pg/mL,与促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone,TSH)无交叉反应,不同批次试剂4 oC放置6个月稳定性好,批内变异系数(coefficient of variation,CV)为5.32%,批间CV值为6.74%。与电化学发光免疫法(electrochemiluminescence immunoassay,ECLIA)比较相关性较好,R2=0.993,差异无统计学意义,甲状旁腺组织结果与非甲状旁腺组织结果则有明显差异(P0.01)。采用该荧光免疫层析试纸条,不仅可以提供较高的灵敏度和特异度,而且操作简单,适合临床工作的需要。     

人血清载脂蛋白H放射免疫分析试剂盒的研制

目的 :从人血浆中分离纯化载脂蛋白H(apolipoproteinH ,apoH) ,经免疫家兔 ,获得特异性抗血清 ,采用Iodogen法进行12 5I标记apoH ,建立了人血清apoH放射免疫分析 (RIA)方法。结果 :方法灵敏度为2 33mg/L ,工作范围 5～ 32 0mg/L ,批内和批间CV分别为 4 93和 4 0 1% ,回收率为 95 7% ,与apo -AI、apo-B未见交叉反应。测定了 91例正常人血清apoH含量 ,正常值 :男性为 2 30 17± 5 6 4mg/L ,女性为 2 0 0 2 7± 4 2 5mg/L ,男女两组之间血清apoH水平差异无显著性。     

免疫抑制法测定AST线粒体同工酶活性及其临床应用

目的　探讨AST线粒体同工酶 (m -AST)测定的方法及其在肝脏疾病中的临床意义 .方法　用免疫抑制法测定m -AST活性 ,速率法测定AST活力 ,计算m -AST/AST比值 .结果　m -AST活性在 2 0 0U/L范围内线性关系良好 .批内CV≤ 3.7% ,批间CV =4 .8% ,回收率 97.1%～ 111.9% ,平均 10 5 .1% . 10 2例正常人血清m -AST为 13.0 1± 2 .93,m -AST/AST比值为 0 .5 1 0 .0 8,12 5例各型肝病患者血清m -AST活性与m -AST/AST比值均比正常组明显升高 (p>0 .0 1) .结论　该方法简便 ,重复性好 ,适应于全自动生化分析仪 ,m -AST测定对肝脏疾病有临床诊断价值 .     

TgAb时间分辨荧光免疫分析间接测定法的建立及临床应用

目的建立甲状腺球蛋白抗体(TgAb)时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)间接检测法。方法用Tg抗原包板,用铕(Eu3+)标记兔抗人IgG做标记物,间接法TRFIA检测人血清中的TgAb。结果 TgAb-TRFIA的灵敏度为1.0 IU/ml;批内变异系数(CV)为3.1%～3.6%,批间CV为3.3%～3.6%;平均回收率为101.6%;热稳定性好;与电化学发光分析技术(ECLIA)比对,相关系数达0.8945;与临床结果高度相关。结论本法建立的TgAb-TRFIA是一个高灵敏和可靠的检测,有助于甲状腺疾病的临床诊断。     

时间分辨荧光免疫法测定血清AFP的方法学评价

对时间分辨荧光免疫法(TRFIA)测定血清AFP的方法学予以评价.评价TRFIA法测定AFP的线性范围、灵敏度、精密度、回收率及与ELISA法和RIA法的相关性.结果显示:AFP线性范围1～1000U/mL,检测下限≤0.1 U/mL,批内及批间变异系数分别为2.3%、5.3%,回收率97.85%,与ELISA法及RIA法高度相关,r值分别为0.982与0.991.正常血清AFP参考值0.8～10.5 U/mL.结论:TRFIA测定AFP线性范围宽,稳定性好,灵敏度与准确度高,无放射性污染,是当前免疫分析中有发展前途的一项超微量检测技术.     

免疫胶体金法定量检测促甲状腺激素的实验性能测试

目的 免疫胶体金法用于快速检测受试者手指全血的促甲状腺素(TSH),可以定量分析且快速简便.本研究拟对免疫胶体金法定量检测TSH的精密度性能及检测仪器间是否存在差异进行实验研究.方法 设计7个不同浓度的促甲状腺激素(TSH)质控品和人血清样本,每天对各样本重复测定4次,持续5天,计算重复性(批内CV)和中间精密度(CV).选用33份不同浓度的TSH血清标本,分别用检测仪器1和检测仪器2进行判读分析,比较两者结果的相关性.结果 质控品和病人血清TSH浓度为1.20、2.51、3.46、5.02、7.63、10.03、11.08 μIU/mL,对应的批内CV分别为30.00％、17.84％、16.50％、15.00％、13.92％、10.62％、9.62％,中间精密度CV分别为29.23％、20.19％、18.15％、16.60％、15.34％、10.42％、8.76％.二台检测仪器检测TSH值相关性r为0.968,无统计学差异.结论 免疫胶体金法定量检测TSH在低浓度TSH水平的精密度变异较大,但在中高浓度TSH尤其＞10μIU/mL情况下,检测精密性能良好.不同检测仪器间检测结果也无明显差异.     

单克隆抗体ELISA双抗体夹心法测定人白细胞介素2

本文叙述了测定人白细胞介素2(IL-2)含量的ELISA双抗体夹心法。用辣根过氧化物酶标记IL-2单克隆抗体。聚苯乙烯反应板预先用0.1％戊二醛处理,然后以单克隆抗体包被。本法批内变异系数CV=3.99％,批间变异系数CV=5.96％,标准曲线的测定范围为3.1～100u/ml,检测下限为1.55u/ml。应用本法已测定了2S例正常人和11例恶性肿瘤患者的IL-2含量。     

两种尿微量白蛋白测定方法的临床评价

对化学发光免疫测定法(CLIA)测定尿微量白蛋白的方法进行临床评估, 旨在为尿微量白蛋白测定选择一种简便快速, 准确和特异的方法.85例糖尿病患者及80名对照均留取8h尿样本, 用CLIA和RIA法测定, 并进行比较和分析精密度, 准确性、特异性及干扰因素.结果显示CLIA和RIA两种方法均具有很好的精密度, 批内CV小于4%, 批间CV小于6%,回收率在95.1%-105.9%,且测定不受样本中γ球蛋白的影响.CLIA的最低检测浓度为2.5μmol/L.两种方法测定的尿微量白蛋白值相关较好(Y=0.9974X-0.0291),r=0.9902.结论: CLIA和RIA尿微量白蛋白测定方法均具有高精密度, 高特异性, 两种方法的结果明显相关.然而, 与RIA比较CLIA简便、快速, 没有放射性污染, 且自动化程度高, 比较适合临床常规实验室应用.     

TgAb对ECLIA和RIA测定Tg影响的对比研究

采用电化学发光免疫分析(ECLIA)法和放射免疫分析(RIA)法同时测定甲状腺球蛋白(Tg)、自身甲状腺球蛋白抗体(TgAb),用回收实验研究TgAb对Tg测定的影响。选取84例甲状腺疾病患者血样,分别测定Tg、TgAb,将结果进行相关性分析。回收实验第一组分别加入50、100和200ng/ml的标准Tg;第二组对倍稀释5次,加入100ng/ml标准Tg;第三组为TgAb浓度梯度组,加入100ng/ml标准Tg。结果表明,两种方法Tg值均大于10ng/ml的31例标本,相关系数为0.676(P=0.000)。TgAb值的相关系数为0.677(P=0.000)。TgAb浓度增加,ECLIA法Tg值逐渐降低,RIA法Tg值逐渐升高。血清稀释后,ECLIA法Tg值和回收率逐渐升高,RIA法Tg值和回收率逐渐下降。不同标准Tg对Tg回收率无明显影响。两种方法测定Tg和TgAb有较好的相关性。ECLIA法比RIA法测定范围更宽,灵敏度更高。TgAb使ECLIA法可能低估Tg值,使RIA法可能高估Tg值。TgAb干扰Tg测定没有阈值存在。回收实验不能完全校正TgAb干扰导致的偏差。     

纤维素固相放射免疫测定甲胎蛋白

本文在国内首次报道了纤维素固相RIA法测定甲胎蛋白。本法简便灵敏,快迅稳定,平均回收率95.7±8.08％,批间变异系数r=7.8±1.7％,批内变异系数r=5.8±2.6％,线性关系较好(r=0.999),灵敏度比液相RIA提高6倍,32份血样品用双位点夹心法和试剂盒的液相RIA进行比较,结果经统计学处理,相关系数分别为r=0.82,r=0.80,均具有显著相关性。     

荧光定量PCR检测查菲埃立克体

依据查菲埃立克体16SrRNA基因序列设计特异性引物和TaqMan-MGB探针,以克隆的查菲埃立克体16SrRNA基因片段作DNA模板,建立实时荧光定量PCR检测方法。与套式PCR相比较,荧光定量PCR检测的灵敏度是其30倍;用荧光定量PCR检测其他相关立克次体和细菌DNA样本,检出结果为0;对荧光定量PCR检测重复性进行分析,变异系数(CV)批内和批间误差在0·2%~2·0%之间。结果证明本研究建立的荧光定量PCR方法具有种特异性和良好的重复性,可用于检测感染样本中的微量查菲埃立克体DNA。     

实时荧光定量PCR方法检测非霍奇金淋巴瘤患者B淋巴细胞刺激因子表达水平

目的:建立实时荧光定量PCR方法(RFQ-PCR)检测非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者B淋巴细胞刺激因子(BAFF)表达水平。方法:47例NHL患者及20例健康对照,采用实时荧光定量PCR方法检测其外周血单个核细胞中的B淋巴细胞刺激因子表达水平。结果:RFQ-PCR检测BAFF含量的示灵敏度为10 pg/ml,低浓度样本批内和批间变异系数(CV)分别为8.56%和11.32%,高浓度样本批内和批间CV分别为0.76%和4.58%。NHL患者和健康对照者BAFF mRNA表达量分别为(0.48±0.023,0.25±0.023),两者具有显著性差异(P=0.0001)。结论:RFQ-PCR检测BAFF mRNA含量的方法,具有较好的检测灵敏度和重复性。NHL患者BAFF mRNA高表达,提示BAFF可能在NHL发生发展中发挥重要作用。     

KX-21全自动血液分析仪的使用评价

目的对日本Sysmex公司KX-21全自动血液分析仪的主要指标进行评价.方法按照美国临床标准化委员会有关文件的要求,对KX-2l全自动血液分析仪的精密度、线性、携带污染率、可比性等内容进行评价.结果重复测定正常值和高值质控品的Hb、RBC、WBC、PLT的批内精密度在1.93%～4.68%和1 90%～4.03%之间,批间精密度在1 97%～4.88%和1.96%～4.64%范围内;KX-21测定Hb、RBC、WBC、HCT、PLT线性试验的相关系数均为0 999;测定Hb、RBC、HCT、WBC、PLT的携带污染率分别为0.58%、0.19%、0.196%、0.71%、0.49%;与SF-3000全自动血液分析仪测定Hb、RBC、HCT、WBC、PLT结果的相关性分析r值分别为0 9995、0.9897、0 9970、0.9996、0.9998.结论KX-2l全自动血液分析仪测定正常值和高值质控品均能获得良好的重复性、线性和携带污染率,与同类仪器测定结果具有很好的可比性.     

胶乳免疫比浊法检测CA19-9的性能验证研究

目的 对基于生化分析平台检测CA19-9活性的胶乳免疫比浊试剂盒进行检测性能的验证研究。方法 收集2022年1月至4月期间就诊于中国医学科学院肿瘤医院的肿瘤患者315例及表观健康人43例的血清样本进行性能验证试验。参考CLSI EP15-A方案，用两种水平的质控品验证待测试剂盒的精密度；参考EP6-A方案，评价待测试剂盒的线性范围；验证血清样本的稀释准确性；参考EP7-P方案，用含特定浓度干扰物(胆红素、血红蛋白、乳糜、类风湿因子)的混合血清评价试剂盒的抗干扰能力；使用表观健康人的新鲜血清样本验证待测试剂盒的生物参考区间，使用肿瘤患者的新鲜血清比较待测试剂盒与电化学发光法检测结果的相关性和偏差。结果 精密度验证显示，两种水平质控品的批内CV和批间CV(低浓度：4.08%和4.33%;高浓度：3.01%和3.55%)均小于允许不精密度(批内CV≤6.85%和批间CV≤9.14%)。在21.08～843.21U/mL的检测范围内，检测曲线呈一阶线性分布，理论值与实测值的平均百分偏倚1.57%,线性良好。本试验验证的最大稀释度为1∶64倍稀释，稀释验证样本与原倍血清的相对偏移为9.11%。4...