Saitohin基因Q7R多态性与肌萎缩侧索硬化的相关性研究

目的 探讨中国人种Saitohin基因(STH)Q7R多态性与肌萎缩侧索硬化(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)的发病相关性.方法 采用病例-对照研究,应用递减聚合酶链式反应-限制性酶切片段长度多态性(Touchdown-PCR-RFLP)方法检测135例ALS患者和135例正常人STH基因Q7R多态性.结果 所有DNA样本的STH基因均为QQ型纯合子.结论 STH基因Q7R多态性与ALS无相关性.     

EphA2、FAK在口腔鳞状细胞癌中的表达及意义

目的:探讨Eph受体酪氨酸激酶A2(EphA2)和局部黏着斑激酶(FAK)在口腔鳞状细胞癌(鳞癌)组织中的表达情况及其在口腔鳞癌发生、发展中的意义。方法:采用免疫组织化学方法检测51份口腔鳞癌组织的EphA2和FAK表达情况,并与正常口腔黏膜组织作比较,同时分析口腔鳞癌EphA2和FAK的表达和病理因素的关系。结果:EphA2和FAK在口腔鳞癌阳性率均明显低于正常口腔黏膜(P<0.05)。不同临床分期及病理分期口腔鳞癌EphA2和FAK的表达比较差异有统计学意义(P<0.05)。EphA2与FAK的阳性率呈正相关(r=0.431,P<0.05)。结论:EphA2和FAK在口腔鳞状细胞癌发生、发展中共同作用,对于两者的综合评价有望作为判断口腔癌恶性程度的指标及选择治疗新靶点的参照。     

原发性肝癌组织cyclinB1表达水平及其临床诊断意义

目的探讨细胞周期蛋白B1(cyclinB1)在肝癌组织的表达及其临床诊断意义。方法用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)检测40例原发性肝细胞癌患者癌组织及其癌旁组织cyclinB1mRNA的表达。结果90%(36/40)癌组织及85%(34/40)癌旁组织cyclinB1mRNA呈阳性表达,癌组织cyclinB1mRNA表达量为0.531±0.015,明显高于癌旁组织0.263±0.023,两者比较有统计学意义(P<0.05)。cyclinB1mRNA表达与肝癌的病理分级、淋巴转移与否有关,而与性别、年龄、肿瘤大小、癌栓形成与否无关。结论在肝癌发生、发展中,cyclinB1可能起着重要作用,cyclinB1表达水平可作为肝癌分级、分化及癌转移的辅助衡量指标之一。     

SMTNL2基因在肾癌组织及细胞系中的表达特征研究

目的探讨SMTNL2基因在肾癌组织及肾癌细胞系中的表达特征和临床意义。方法采用RT-PCR方法检测SMTNL2 m RNA在肾癌患者肿瘤组织及配对癌旁正常组织的表达及在5种肾癌细胞系(ACHN、Caki、769-P、786-O、293)中的表达,实时荧光定量PCR方法检测SMTNL2 m RNA在36例肾癌组织及配对癌旁正常组织中的表达水平,Western blot和免疫组化方法检测SMTNL2蛋白在36例肾癌组织及配对癌旁正常组织中的表达水平,分析SMTNL2基因在肾癌组织中的表达特征和临床病理参数的相关性。结果 SMTNL2 m RNA在肾癌组织中的表达水平显著低于癌旁正常肾组织(0.089±0.135 vs.0.325±0.165,P<0.05),SMTNL2 m RNA在肾癌细胞系(ACHN、Caki、769-P、786-O、293)中同样表现为低表达或无表达。SMTNL2在肾癌组织中的阳性蛋白表达率明显低于癌旁正常组织(13.9%vs.77.8%,P=0.021)。SMTNL2在肾癌组织中的SMTNL2阳性蛋白表达率与患者的性别(P=0.659)、年龄(P=0.462)、病理分级(P=0.391)和分期(P=0.696)无相关性。结论 SMTNL2基因在肾癌组织及肾癌细胞系中低表达,可能与肾癌的发生和进展有关。     

子宫内膜癌变过程中MicroRNA-29b表达及其意义

目的了解子宫内膜组织中MicroRNA-29b的表达,探讨其在子宫内膜癌变中的意义。方法选取甲醛固定石蜡包埋组织96例,其中正常子宫内膜16例,不典型性增生内膜20例,子宫内膜癌60例。设计Mi-croRNA-29b和内参U6的茎环结构反转录引物和PCR扩增引物,利用实时荧光定量PCR技术检测各种子宫内膜组织中MicroRNA-29b的含量,分析MicroRNA-29b表达与子宫内膜癌临床病理特征及雌、孕激素受体（ER、PR）的关系。结果子宫内膜癌组织中MicroRNA-29b的表达低于正常子宫内膜、不典型性增生内膜组织,差异有显著性（F=2．998、3．690,t=3．163、2．297,P〈0．05）。子宫内膜癌组织中MicroRNA一29b的表达与FIG0分期及淋巴结转移有关（t=-2．070、-2．773,P〈O．05）。ER、PR表达阳性和阴性子宫内膜癌组织MicroRNA29b表达比较,差异无显著性（P〉O．05）。结论MicroRNA-29b的表达失调可能与子宫内膜癌的发生、发展有关,对子宫内膜癌的早期诊断、预后评估可能有一定的指导意义。     

淋巴管内皮细胞透明质酸受体1在胃肠肿瘤淋巴管增生中的表达研究

目的 探讨淋巴管内皮细胞透明质酸受体1(LYVE-1)在肿瘤组织中的表达与分布,研究其在肿瘤诊断中的价值及与淋巴管增生的关系.方法 收集22例消化道腺癌患者病理分期为Ⅱ～Ⅲ级的消化道腺癌组织标本,通过实时荧光定量PCR(FQ-PCR)及免疫组化技术对LYVE-1进行定量分析.结果 LYVE-1在所有标本组织中都有表达,肿瘤组织中LYVE-1/β-actin浓度中位数为1.8×10-3,距瘤组织5 cm的正常组织为1.5×10-3;胃肠肿瘤有区域淋巴结转移组的LYVE-1/β-actin浓度为1.9×10-3,无转移组为9.7×10-4;肿瘤与正常组织交界处的LYVE-1阳性细胞百分比为4.55%,高于癌组织内部(1.17%)和正常黏膜组织(0.43%).结论 胃肠肿瘤淋巴管增生高于远离肿瘤的正常组织,主要集中在肿瘤周边部;淋巴管增生程度可能与肿瘤淋巴转移有关.LYVE-1表达与淋巴管增生可能有一定特异性.     

神经生长因子及其受体在人脑胶质瘤细胞株U251中的表达及其生物学意义

目的：观察神经生长因子在人脑胶质瘤细胞株U251中的表达．分布及其生物学作用。 方法：实验于2005—07／12在江苏大学医学院基础与临床研究中心完成。①U251培养3d后，于培养基中加入终浓度为2mmol／L羟基脲继续培养24h（≥1个细胞周期），使细胞同步化于DNA合成期。②用免疫荧光法对细胞内神经生长因子及其高亲和力受体酪氨酸蛋白激酶受体A进行染色定位：③免疫印迹法检测U251培养上清液中的神经营养因子表达。④促胚胎脊髓神经细胞生长试验鉴定U251细胞培养上清液的神经营养因子活性。取怀孕16d的SD大鼠1只，断头处死，浸泡体积分数为0．75的乙醇20min后剖腹取胎鼠，分离脊髓组织，细胞培养2d后，分别加入无血清DMEM（对照组）及培养过U25124h的无血清DMEM（实验组）。 结果：①神经生长因子及酪氨酸蛋白激酶受体A在U251中高表达，神经生长因子主要呈颗粒状分布于胞浆及胞核内，酪氨酸蛋白激酶受体A分布于胞膜及核仁部位。②U251无血清培养上清液能够促进胚胎脊髓神经细胞集落的形成，实验组集落数明显多于对照组（345．38&;#177;14．15），（145．5&;#177;12．71）／孔，P〈0．01）；且在浓缩的U251无血清培养上清液中检测出相对分子质量为36000的神经生长因子肽链。 结论：人脑胶质瘤细胞株U251呈神经生长因子及酪氨酸蛋白激酶受体A强阳性表达，且能合成并分泌具有生物学活性的神经营养因子，相对分子质量为36000的神经生长因子是其中主要成分之一。     

肾癌组织中P16和周期蛋白D1的表达及其意义

目的 探讨肾癌及癌旁组织中P16、周期蛋白D1(Cyclin D1)的表达及与肾癌生物学行为之间的关系.方法 分别取肾癌标本、癌旁组织,制作单细胞悬液,间接免疫荧光技术标记后用流式细胞分析仪进行分析.结果 ①肾癌组织中P16蛋白阳性表达明显低于癌旁组织(P＜0.01).并且随着病理分级和临床分期上升而表达下降(均P＜0.05).②肾癌组织中Cyclin D1阳性表达率明显高于癌旁组织(P＜0.01),并且随着病理分级和临床分期上升而表达升高(均P＜0.05).③癌组织中,P16表达与Cyclin D1表达呈负相关(r=-0.24,P＜0.05).结论 P16的低表达及Cyclin D1的过度表达可能是细胞癌变的分子生物学事件,并且参与了肾癌的演进及恶化.     

MiR-20b在胃癌中表达及其临床意义

【目的】探讨miR-20 b表达在中国人群胃癌中表达及临床意义。【方法】收集75例新鲜胃腺癌组织以及20例癌旁胃组织,利用Trizol常规方法提取组织总总核糖核酸（RNA）。进一步,将这些 RNA反转录成miRNA cDNA后,利用 qPCR的方法检测miR-20b在这些组织中的表达。SPSS 11．5软件统计分析 miR-20b在胃癌中表达与其临床参数之间的关系。【结果】与癌旁胃组织相比,miR-20b在胃癌中表达明显升高。miR-20 b表达与肿瘤大小、淋巴结转移以及临床分期呈明显正相关。【结论】miR-20 b 在胃癌组织中表达增加,并促进了胃癌发病的进展。     

PCR检测Ⅰ期HER-2阳性乳腺癌患者腋窝淋巴结HER-2表达的意义

[目的]探讨聚合酶链反应(PCR)检测对Ⅰ期人表皮生长因子受2(HER-2)阳性乳腺癌腋窝淋巴结H ER-2表达检出率的影响及其表达与腋窝淋巴结微转移与预后的关系.[方法]收集两院住院资料完整的128例女性Ⅰ期HER-2阳性乳腺癌患者的临床病理资料,采用PCR检测患者腋窝淋巴结HER-2表达并进行随访,用Kaplan-...     

胰岛素样生长因子结合蛋白2和细胞外调节蛋白激酶1/2在肾透明细胞癌中的表达及其临床意义

目的探讨胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP2)和细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)在肾透明细胞癌(ccRCC)中的表达及其临床意义。 方法收集2017年6月至2019年4月在济宁医学院附属医院泌尿外科行手术治疗的174例ccRCC患者的临床资料,并同期选择健康体检中心30例正常健康者的血液标本。应用免疫组织化学方法检测ccRCC患者肿瘤组织、癌旁组织(距肿瘤边缘2 cm)中IGFBP2和ERK1/2的表达情况,并与肿瘤临床分期、组织学分级及肿瘤大小进行相关性分析;同时应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测ccRCC患者及健康者血清中IGFBP2、ERK1、ERK2的水平。 结果IGFBP2和ERK1/2在ccRCC组织中的表达阳性率[87.93%(153/174),80.46%(140/174)]比癌旁组织[6.67%(2/30),10.00%(3/30)]高,均差异有统计学意义(χ²＝92.59,65.87;均P<0.01)。IGFBP2和ERK1/2在直径≥4 cm的肿瘤中的表达阳性率[高于<4 cm的肿瘤表达阳性率,均差异有统计学意义(χ²＝7.81,13.02;均P<0.05);IGFBP2和ERK1/2的表达在患者的年龄(χ²＝0.78,0.60)、性别(χ²＝0.05,1.33)、肿瘤左右侧位置(χ²＝0.96,0.57)中比较均差异无统计学意义(均P>0.05)。IGFBP2及ERK1/2的阳性表达率随着临床分期及组织学分级的升高而升高,且在不同组织分级(Z＝-8.17,-3.80)和不同临床分期(Z＝-5.63,-9.94)间差异具有统计学意义(均P<0.05)。IGFBP2和ERK1/2在ccRCC组织中的表达呈正相关(r＝0.32,P<0.05)。ELISA实验结果表明,IGFBP2、ERK1、ERK2在ccRCC患者血清中的表达水平[(858.33±132.89)μg/L,(12.49±1.22)μg/L,(153.61±33.37)ng/L]较健康对照组[(267.65±86.56)μg/L,(8.69±1.80)μg/L,(105.63±12.03)ng/L]明显升高,均差异具有统计学意义(t＝11.78,5.53,4.28;均P<0.05)。 结论IGFBP2和ERK1/2在ccRCC患者血清及肿瘤组织中均表达升高,组织中组织学分级越高、临床分期越晚、肿瘤体积越大,阳性表达率越高,两者在肿瘤的进展中可能起到协同作用。     

PTEN在食管鳞状细胞癌中的表达和意义

目的研究人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)在食管鳞状细胞癌中的表达与临床病理特点的关系。方法采用免疫组织化学及荧光定量聚合酶链反应(PCR)法分别检测60例胸外科食管鳞状细胞癌手术患者食管鳞状细胞癌组织、癌旁组织和正常食管黏膜组织中PTEN的表达水平。分析PTEN在食管鳞状细胞癌浸润、分化、转移中的作用。结果 PTEN在正常食管组织(2.01±0.07)、癌旁组织(1.50±0.10)、食管鳞状细胞癌组织(0.89±0.08)中的表达逐渐降低(P0.01)。PTEN在有淋巴结转移的食管鳞状细胞癌组织中(0.87±0.08)的表达比在无淋巴结转移(0.94±0.07)的表达低;PTEN在高分化(0.91±0.06)、中分化(0.90±0.07)、低分化(0.85±0.10)的食管鳞状细胞癌组织中的表达逐渐降低,PTEN在浸润深(0.88±0.08)的食管鳞状细胞癌组织中的表达比浸润浅(0.93±0.07)的表达低(P0.05或0.01)。在60岁组与≥60岁组中的阳性表达差异无统计学意义(P0.05)。结论 PTEN基因的丢失或突变均与食管鳞状细胞癌的生长、分化和浸润转移相关。     

食管鳞癌中凋亡相关蛋白激酶1基因甲基化及其蛋白表达

目的探讨食管鳞癌中凋亡相关蛋白激酶1（DAPK1）基因CpG岛甲基化及其蛋白表达与食管癌的相关性。方法收集食管鳞癌组织58例及癌旁上皮组织30例。采用免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白过氧化物酶（SP）法检测DAPK1蛋白表达,甲基化特异性聚合酶联反应（MSP）法检测基因CpG岛甲基化状态。结果DAPK1在癌组织的阳性表达率明显低于癌旁组织（36．2％ vs 68．3％,P〈0．05）;癌组织中DAPK1甲基化率明显高于癌旁组织（60．3％VS33．3％,P〈0．05）,提示DAPK1基因启动子甲基化与DAPK1蛋白表达呈负相关（X^2=18．362,P=0．000,r=-0．563）。结论DAPK1基因启动子甲基化减少其蛋白的表达,可能与食管癌的发生发展相关。     

胎盘生长因子在肝癌组织中的表达及意义

目的:研究胎盘生长因子(PLGF)在肝癌组织中的表达,探讨其与肝癌的联系.方法:收集标本:肝细胞肝癌组织49例及正常肝组织8例,用免疫组化方法和逆转录聚合酶链式反应 (RT-PCR)技术检测PLGF的表达.结果:PLGF蛋白和mRNA在肝癌组织有高水平表达,与正常肝组织比较差异有显著性意义(P ＜ 0.01).结论:PLGF与肝细胞肝癌的发生有一定的关联,可能在肝肿瘤血管新生过程中起重要作用.     

Expression and clinical significance of PTPN12 in clear cell renal cell carcinoma

BackgroundClear cell renal cell carcinoma (ccRCC) is a common urological disease. Expression of the protein tyrosine phosphatase 12 gene (PTPN12) is decreased in many cancers; however, the relationship between PTPN12 gene function and renal cancer remains unclear.MethodsWe detected PTPN12 protein expression in ccRCC and corresponding normal tissues from 64 patients with ccRCC by immunohistochemistry, and relative PTPN12 mRNA levels by real-time quantitative polymerase chain reaction. The relationships between the relative expression levels of PTPN12 mRNA and the patients’ clinical data were analyzed.ResultsPTPN12 protein and mRNA expression levels were significantly lower in ccRCC compared with the corresponding normal tissues. The mRNA expression levels in the ccRCC and corresponding normal tissues from the 64 patients with ccRCC were 0.459±0.445 and 1.001±0.128, respectively, compared with the control (glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase). There was a significant correlation between relative expression of PTPN12 mRNA in ccRCC tissues and tumor diameter and clinical stage.ConclusionThe expression levels of PTPN12 protein and mRNA were significantly lower in ccRCC tissues compared with normal tissues. The role of PTPN12 may provide new insights and evidence to aid the diagnosis and targeted therapy of ccRCC.     

蛋白磷酸酶2A的癌性抑制因子在肾透明细胞癌中的表达及其意义

目的探讨蛋白磷酸酶2A的癌性抑制因子（CIP2A）在肾透明细胞癌中的表达情况及其与临床病理指标的关系。方法利用免疫组织化学方法检测35例肾透明细胞癌组织和对应癌旁组织（距离肿瘤≥0.5cm）中CIP2A的表达水平,并将癌组织CIP2A表达水平与临床病理指标进行比较。结果肾透明细胞癌组织CIP2A表达的阳性率为82.9%（29/35）,明显高于癌旁组织的阳性率22.9%（8/35）,差异有统计学意义（P〈0.001）;pT3/pT4期肾透明细胞癌CIP2A表达水平高于pT1/pT2期（P=0.007）,有远处转移者CIP2A表达水平高于无远处转移者（P=0.006）。CIP2A表达水平和年龄、性别及淋巴结转移无关。结论 CIP2A在肾透明细胞癌中呈高表达,并与肿瘤的局部侵袭和远处转移密切相关。     

环氧化酶-2在肝细胞癌中的表达及临床意义

目的 观察环氧化酶-2(COX-2)在肝细胞癌(HCC,简称肝癌)中的表达特征.方法 应用免疫组织化学S-P法、逆转录聚合酶链反应检测重庆医科大学附属第二医院2005年10月至2007年6月手术切除并经病理切片证实的52例HCC标本、52例癌旁组织及10例正常肝组织中COX-2及其基因的表达情况.结果 COX-2/COX-2 mRNA在肝癌组织中的表达明显上调,与其在正常肝组织、癌旁组织中的表达相比差异有统计学意义(P<0.01).结论 (1)COX-2高表达参与了肝癌的发生和发展,其表达水平与肝癌的分化程度及是否合并乙型肝炎及肝硬化有关,与HCC组织的国际癌症病期分期、肿瘤大小、甲胎蛋白水平、大体类型及是否转移等无明显关系.(2)COX-2抑制剂有望为预防HCC的发生和发展提供一条新的途径.     

环氧合酶-2在肾细胞癌中的表达及其意义

目的:探讨环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)表达与肾细胞癌(renal cell carcinoma,RCC)发生及生物学行为的关系。方法:采用免疫组织化学SP法,检测120例RCC组织和25例正常肾脏组织COX-2表达及肾癌组织中微血管密度(microvascular density,MVD)。结果:肾癌组织COX-2阳性表达率为36.7%,而正常肾脏组织则无COX-2表达,COX-2的阳性表达率与RCC分级及分期呈显著相关。肾癌组织中COX-2阳性表达组的MVD明显高于COX-2阴性表达组(84±18vs35±10,t=19.19,P<0.01)。结论:肾癌组织中存在COX-2的表达,COX-2可促进肿瘤血管形成从而进一步促进肿瘤的生长,抑制COX-2表达有可能成为治疗RCC的一个新的途径。     

Fascin蛋白在肾细胞癌中的表达及临床意义

目的观察Fascin蛋白在肾细胞癌中的表达情况,并探讨其表达与肿瘤生物学行为及临床病理指标的关系。方法用免疫组织化学方法检测109例肾细胞癌组织、20例肾脏良性肿瘤和20例正常肾脏组织中Fascin蛋白和Ki-67的表达,分析Fascin蛋白表达与不同临床病理指标及Ki-67表达之间的关系。结果109例肾细胞癌中有58例（53．2％）Fascin蛋白呈阳性表达,20例肾脏良性肿瘤和20例正常肾脏组织中的阳性表达例数分别为2例（10．0%）和0例（0%）,肾细胞癌中Fascin蛋白表达与肾脏良性肿瘤和正常肾脏组织中Fascin蛋白表达比较差异均有统计学意义（均P〈0．01）。肾细胞癌组织中Fascin蛋白表达与肿瘤组织学分级、临床分期、淋巴结转移以及Ki-67表达均呈正相关（均P〈0．01）;与肿瘤组织学分类无相关性（P〉0．05）。结论Fascin蛋白在肾细胞癌中表达上调且和肿瘤的恶性程度及侵袭行为有关。Fascin蛋白表达与病理分级和临床分期结合能够更好地判断肾细胞癌的预后,且其有可能成为肾细胞癌治疗的一个新靶点。