人脑星形细胞瘤中EphA2表达与肿瘤血管生成关系的研究

目的探讨酪氨酸蛋白激酶受体EphA2在人脑星形细胞瘤中的表达及其与肿瘤血管生成的关系。方法用免疫组化方法测定78例人脑星形细胞瘤和8例正常脑组织（NB）中EphA2蛋白表达情况。用免疫组化方法检测肿瘤微血管密度（MVD）。结果EphA2蛋白阳性染色主要定位于肿瘤细胞胞浆和细胞膜,呈棕黄色颗粒,肿瘤血管内皮细胞也呈阳性表达。在78例星形细胞瘤中,EphA2阳性表达率为93．6％,而正常脑组织中无EphA2表达,二者差异有统计学意义（P〈0．01）。而且随着肿瘤恶性程度增加,EphA2蛋白染色强度和阳性细胞数均明显升高,高级别星形细胞瘤（Ⅲ～Ⅳ）与低级别星形细胞瘤（Ⅰ～Ⅱ）相比差异有统计学意义（P〈0．05）。随着EphA2阳性表达强度增加,肿瘤组织的MVD也逐渐增加,从0～3级分别为（19．65±8．12）个／mm^3、（27．50±11．36）个／mm^3、（40．28±12．51）个／mm^3和（61．44±13．80）个／mm^3,组间差异有统计学意义（F=6．308,P=0．001）。EphA2表达与MVD显著相关（r=7．094,P〈0.01）。结论EphA2可作为判定人脑星形细胞瘤恶性程度的重要指标,与肿瘤微血管生成相关,有可能成为星形细胞瘤治疗的一个新靶点。     

胃球样异型增生细胞周期素和p21^WAF1、p53蛋白表达的组织芯片观察

目的：使用组织芯片探讨cyclin A、cyclin D1．cyclin E和p21^WAF1、p53蛋白在胃球样异型增生中表达的意义。方法：采用微波修复免疫组织化学S-P法和组织芯片技术，检测cyclinA、cyclinD1、cyclinE和p21^WAF1、p53蛋白在41例正常胃黏膜、86例低级别异型增生胃黏膜、21例高级别异型增生胃黏膜和124例胃癌组织中的表达，并进行比较分析。结果：cyclinA、cyclinD1、cyclinE和p53蛋白的表达由正常胃黏膜、轻度球样异型增生、重度球样异型增生到癌阳性率逐渐增高，cyclinA、cyclinD1和p53在重度球样异型增生与胃癌中的表达无显著差异（X^2=3．08．X^2=2．18．X^2=0．80，P〉0．05），与正常胃黏膜有显著差异（X^2=12．26，X^2=11．29，X^2=19．89，P〈0．01）。重度球样异型增生中p21^WAF1蛋白的表达比正常胃黏膜为低，差异有显著性（X^2=5．32，P〈0．05），与胃癌比较差异无显著性（X^2=1．39，P〉0．05）。cyclinD1与p21^WAF1的表达呈负相关（rs=-0．5326，P〈0．01）。结论：重度胃球样异型增生cyclinA、cyclinDl、cyclinE呈高表达，p21^WAF1蛋白失表达，显示与胃癌的发生关系密切。     

EZH2和P57在肾细胞癌中的表达及临床意义

目的检测肾细胞癌（简称肾癌）组织中EZH2和P57的表达,探讨其与肾癌临床病理特征间的关系。方法采用免疫组织化学法检测肾癌组织（n=64）和正常肾组织（n=12）中EZH2和P57的表达,分析EZH2和P57表达与’肾癌临床病理特征间的关系及其二者表达的相关性。结果正常。肾组织EZH2及P57蛋白的阳性表达率分别为16．67％和75．00％：肾癌组织EZH2和P57的阳性表达率为78．13％和25．56％,肾癌组织EZH2阳性表达率高于正常肾组织,P57阳性表达率低于正常肾组织（均P〈0．01）。EZH2阳性表达率随肾癌临床分期和病理分级升高而增加,且淋巴结转移组EZH2阳性表达水平明显高于无淋巴结转移组;P57阳性表达率随肾癌临床分期和病理分级升高而呈下降趋势,且淋巴结转移组P57表达水平低于无淋巴结转移组。二者差异表达与患者的性别及年龄均无关（均P〉0．05）。相关性分析显示：P57和EZH2在肾癌组织中的表达呈显著负相关（r=-0．648,P〈0．05）。结论EZH2和P57异常表达与肾癌发生和临床进展关系密切,P57可能是EZH2的下游靶基因,但其靶向抑制的具体机制尚需要深入研究。     

食管鳞癌中凋亡相关蛋白激酶1基因甲基化及其蛋白表达

目的探讨食管鳞癌中凋亡相关蛋白激酶1（DAPK1）基因CpG岛甲基化及其蛋白表达与食管癌的相关性。方法收集食管鳞癌组织58例及癌旁上皮组织30例。采用免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白过氧化物酶（SP）法检测DAPK1蛋白表达,甲基化特异性聚合酶联反应（MSP）法检测基因CpG岛甲基化状态。结果DAPK1在癌组织的阳性表达率明显低于癌旁组织（36．2％ vs 68．3％,P〈0．05）;癌组织中DAPK1甲基化率明显高于癌旁组织（60．3％VS33．3％,P〈0．05）,提示DAPK1基因启动子甲基化与DAPK1蛋白表达呈负相关（X^2=18．362,P=0．000,r=-0．563）。结论DAPK1基因启动子甲基化减少其蛋白的表达,可能与食管癌的发生发展相关。     

Ⅰ型生长因子受体家族在非小细胞肺癌中的表达及其预后价值的研究

目的 探讨Ⅰ型生长因子受体家族在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中异常表达的临床意义及预后价值。方法 用免疫组化法研究了58例NSCLC组织中c-erbB-1、c-erbB-2、c-erbFk3、c—erbB-4蛋白的表达。结果 NSCLC组织中,C-erbB-1、C-erbD-2、c—erbB-3蛋白表达高于正常组织,过表达率分别为62．07％、60．34％和41．38％。C-erbB-4表达率为63．85％,显著低于正常组织（P=0．03）。c—erbB-1蛋白过表达与PCNA指数呈正相关（r=0．248,P〈0．05）;c-erbB-2蛋白过表达与肿瘤的分化程度呈负相关（r=0．29,P〈0．05）,c-erbB-2和C-erbB-3蛋白的过表达,及二者的共过表达,与TNM分期有密切关系（P〈0．01）;C-erbB-4蛋白表迭趋向于高分化肿瘤（P〈0．01）。C-erbB-2蛋白过表达及其与c—erbB-3蛋白共过表达显示预后不良（P〈0．01）。结论 Ⅰ型生长因子受体家族在NSCLC的发生、发展中起着重要的作用,并有助于判断预后。     

子宫颈癌患者新辅助化疗前后癌组织中mdr1、肺耐药蛋白mRNA及其蛋白的表达变化和意义

目的寻找预测子宫颈癌新辅助化疗效果的分子生物学指标。方法采用real time RT—PCR和免疫组织化学法检测40例子宫颈癌患者新辅助化疗前后癌组织中mdr1、肺耐药蛋白（LRP）mRNA及其编码蛋白P-gP、LRP表达水平。结果新辅助化疗前后子宫颈癌组织中mdr1的表达量分别为（45．800±0．636、62．381±0．743,t=-66．582,P〈0．01）;新辅助化疗前后子宫颈癌组织中LRP mRNA的表达量分别为（50．048±0．770、66．912±0．752,t=-78．604,P〈0．01）;新辅助化疗前后子宫颈癌组织中P-gP的阳性表达分别为40．0％（16／40）、70．0％（28／40）,x^2=7．273,P=0．007;新辅助化疗前后子宫颈癌组织中LRP的阳性表达分别为62．5％（25／40）、92．5％（37／40）,x^2=10．323,P=0．001,新辅助化疗后mdr1、LRPmRNA及其编码蛋白P-gP、LRP表达水平较化疗前明显升高,2组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。P-gP、LRP表达与患者年龄、肿瘤大小、临床分期、病理分级无关（P〉0．05）;P-gP蛋白的阳性与阴性患者其化疗有效率分别为6（37．5％）、17（70．8％）,2组比较差异有统计学意义（x^2=4．365,P〈0．05）。LRP蛋白的阳性与阴性患者其化疗有效率分别为12（48．0％）、13（86．7％）,2组比较差异有统计学意义（x^2=5．980,P〈0．05）;P-gP与LRP成正相关（x^2=4．177,r=0．323,P〈0．05）。结论P-gP、LRP表达状态有可能作为预测化疗效果的参考指标。     

Fas、Bcl—2在肾癌中表达的研究

目的：检测Fas,Bcl-2在肾癌中的表达,分析其在肾癌发生发展中的作用。方法：采用免疫组化法,结果：1．肾癌Fas比正常肾组织阳性表达率低,Bcl-2比正常肾组织高（P＜0．05）,2．Fas,Bcl-2表达在肾癌的细胞学分类,病理分级,临床分期无显著性差异（P＞0．05）,3．肾癌Fas表达与Bcl-2负相关（P＜0．05,r=-0.322),4.单因素生存分析Fas,Bcl-2表达及肾癌的各细胞学分类生存率无差异（P＞0．05）,肾癌病理分级G1＋G2组比G3＋G4组生存率高（P＜0．05）,临床分期S1＋S2组比S3＋S4组高（P＜0．05）,Cox回归多因素生存分析只发现肾癌病理分级能单儿作为反映肾癌预后因素的指标（P＜0．05）。结论：Fas,Bcl-2在肾癌的发生中并不能单独起主导作用。不能独立作为反映肾癌预后的指标,它们可能只是参与肾癌发生多种因素之一。     

肾癌患者围手术期外周静脉血与肾静脉血中PDGF—BB、VEGF的测定及其意义

目的探讨肾癌患者围手术期外周静脉血与肾静脉血中PDGF-BB、VEGF的水平及其与肾癌临床分期、病理分级的关系。方法收集29例肾癌患者术前24h、术后48、96h外周血及其中19例肾癌患者术中肾静脉血，12例肾结石患者术前24h外周血。采用ELISA方法检测标本PDGF-BB、VEGF的水平。结果（1）肾癌组患者术前24h外周血清VEGF和PDGF-BB水平均高于’肾结石组，差异有显著性（P〈0．05）。（2）肾癌组患者术后48h外周血清VEGF和PDGF-BB水平较术前显著下降（P〈0．01），术后96h较术后48h显著上升（P〈0．05）；肾癌肾静脉血清VEGF和PDGF-BB水平高于外周血清（P〈0.05）。（3）临床分期Ⅲ-Ⅳ期肾癌组患者术前24h外周血清VEGF水平显著高于Ⅰ-Ⅱ期（P〈0．05）；病理分级G3显著高于G1～G2（P〈0．05）。（4）肾癌’肾静脉血清VEGF水平与肿瘤直径呈正相关（r=0．45，P=0．01）。结论正在肿瘤增殖的肾癌组织可能是PDGF—BB、VEGF的主要生成源；VEGF水平可作为一种肿瘤标记物，为肿瘤的诊断、疗效评定、监测复发以及评估预后提供信息。     

ARHI和环氧化酶-2蛋白在子宫颈腺癌组织中的表达及其意义

目的探讨ARHI蛋白和环氧化酶-2（COX-2）蛋白在子宫颈腺癌发生中的作用及其相互关系。方法采用免疫组织化学法检测40例子宫颈腺癌及30例慢性子宫颈炎组织中。ARHI蛋白及COX-2蛋白的表达情况。结果ARHI在40例子宫颈腺癌组织阳性率为50．0％（20／40）,低于慢性子宫颈炎患者子宫颈组织阳性率90．0％（27／30）,差异有统计学意义（X^2=12．43,P〈0．05）;COX-2在40例子宫颈腺癌组织阳性率82．5％（33／40）,高于慢性子宫颈炎患者子宫颈组织阳性率0（0／30）,差异有统计学意义（x^2=46．16,P〈0．05）;ARHI蛋白阳性表达率与子宫颈腺癌临床分期（x^2=3．96,P〈0．05）及组织分化程度高低有关（x^2=7．04,P〈0．05）。COX-2蛋白与子宫颈腺癌组织分化程度有关（x^2=7．04,P〈0．05）,与临床分期无关（P〉0．05）;ARHI蛋白和COX-2蛋白与淋巴结有无转移均无关（P均〉0．05）;ARHI蛋白和COX．2蛋白表达有关联（r=0．31,P〈0．05）。结论子宫颈腺癌的发生与ARHI基因失活和COX-2蛋白表达异常有关,两者可能协同作用参与子宫颈腺癌的发生。     

VEGF和PCNA在肾细胞癌中的表达及意义

目的研究肾细胞癌中血管内皮生长因子（VEGF）和增殖细胞核抗原（PCNA）表达与肾癌临床分期、病理分级、组织学类型、预后之间的关系。方法采用免疫组织化学技术检测40例肾细胞癌和10例正常肾组织标本中VEGF和PCNA的表达。结果正常肾组织与肾细胞癌组织中VEGF和PCNA阳性表达率比较差异均有统计学意义（P〈0．01,P〈0．05）。在不同病理分级肾细胞癌中,高分化组、中分化组的VEGF和PCNA阳性表达率分别与低分化组比较差异有统计学意义（P〈0．01,P〈0．05）。在不同临床分期肾细胞癌中,VEGF阳性表达率随临床分期的升高而逐渐升高;PCNA阳性表达率随临床分期的升高有升高的趋势。在不同组织类型肾细胞癌中．VEGF和PCNA阳性表达率差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论VEGF在肾细胞癌组织中的表达与肾癌的病理分级及临床分期有相关性,其高表达与肾细胞癌的浸润转移密切相关。PCNA的表达与肾癌的病理分级具有相关性,能较为客观、准确地反映肾癌的恶性程度。     

肾细胞癌中Wif-1基因的甲基化状态及表达

目的检测肾细胞癌(RCC)中Wnt抑制因子-1(Wif-1)基因的甲基化状态及表达水平,探讨其在肾细胞癌发生发展中的可能机制。方法分别应用甲基化特异性PCR(MSP)和逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测56例肾细胞癌及相应癌旁正常肾组织中Wif-1基因的甲基化状态及表达水平。结果 Wif-1基因在RCC组织中的甲基化率显著高于相应癌旁正常肾组织(P<0.05)。Wif-1基因在RCC组织中的相对表达量显著低于相应癌旁正常肾组织(P<0.05)。在RCC组织中,Wif-1基因甲基化阳性组mRNA的相对表达量与甲基化阴性组mRNA的相对表达量比较无显著差异(P>0.05)。结论 Wif-1基因启动子区的高甲基化在肾细胞癌的发生中是一个频发事件。     

Vimentin在肾癌组织中的表达及临床意义

目的探讨波形蛋白（Vimentin）在肾癌组织中的表达与病理分期、分级及预后的相关性。方法采用免疫组织化学方法检测38例肾癌组织中Vimentin的表达。结果 Vimentin表达阳性率,在肾癌组织中为78.9%,在癌旁组织中为5%,两组比较,差异有统计学意义（P〈0.001）;Vimentin在肾癌组织中的表达,是预后不良的指标,随病理分期、分级的增高,有升高趋势,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 Vimentin在肾癌组织中的高表达有助于明确诊断,可作为肾癌分期、分级及预后判断的指标,对肾癌术后辅助治疗,可能有一定的参考价值。     

TSP-1在肾透明细胞癌与外周血中的表达及临床意义

目的 检测并分析凝血酶敏感蛋白-1(thrombospondin-1,TSP-1)在肾透明细胞癌患者肾癌、癌旁组织、正常肾组织及外周血中的表达及临床意义.方法 收集47例肾透明细胞癌患者的标本包括:47例肾癌组织、41例癌旁组织、38例正常肾组织、35例患者外周血标本,制备组织抽提液及外周血清.运用ELISA法检测三种组织及血清中TSP-1的表达,并结合临床资料分析其临床意义.结果 TSP-1在肾癌组织、癌旁组织、正常肾组织三者间的表达水平分别为36.44±4.80ng/mL、42.55±4.12ng/mL、46.55±1.55ng/mL,依次递增,三种组织间的表达水平,两两比较均有统计学差异(P均＜0.01).TSP-1在肾癌组织中的表达,随着肾癌TNM分期与Fuhrman分级的提高而均降低,且都呈负相关(r=-0.84,P＜0.01;r=-0.70,P＜0.01).结论 TSP-1在肾透明细胞癌组织中低表达,可能在抑制肿瘤血管形成过程中起重要作用;TSP-1在肾透明细胞癌组织中的表达与肾癌的TNM分期和Fuhrman分级关系密切,可作为评判肾透明细胞癌发展及恶性程度的指标.     

Quantitative analysis of gene expressions of vascular endothelial growth factor-related factors and their receptors in renal cell carcinoma

Vascular endothelial growth factor (VEGF)-related factors are believed to regulate angiogenesis, an essential event in the growth of solid tumors. In this study, we investigated the expression of VEGF-related factor genes (VEGF, VEGF-B, and VEGF-C) and their receptor genes (VEGFR-1 and VEGFR-2) in renal cell carcinoma (RCC). There were significant differences in the expression level of VEGF, VEGFR-1 and VEGFR-2 between RCC and the corresponding normal renal tissue. The expression level of VEGF in the tumor tissue significantly correlated with those of VEGFR-1 and VEGFR-2. Expression levels VEGF-B and VEGF-C genes were not significantly different between RCC and normal renal tissue. A moderate to high protein expression for VEGF, VEGFR-1, and VEGFR-2 was observed in both the tumor cells and the endothelial cells, whereas the protein expression was low for VEGF-B and VEGF-C. The present results suggested that VEGF and its receptors VEGFR-1 and VEGFR-2 cooperates to play a crucial role in the angiogenesis of RCC, while VEGF-B and VEGFR-C may not. Furthermore, since VEGFR-1 and VEGFR-2 proteins were expressed in the tumor cells as well as in the endothelial cells, these receptors may also be responsible for the progression of RCC.     

MMP-2和VEGF在肾细胞癌中的表达及其与MVD的相关性

目的探讨肾细胞癌（RCC）组织中基质金属蛋白酶-2（MMP-2）与血管内皮生长因子（VEGF）表达与血管生成的关系。方法用免疫组织化学SP法检测57例肾细胞癌、9例正常肾组织中的MMP-2与VEGF的表达,计数微血管密度（MVD）,血管生成采用CD34免疫组化染色方法标记微血管内皮。结果 RCC组织中MMP-2与VEGF表达明显高于正常肾组织（P〈0.05）,不同临床分期的RCC组织中MMP-2与VEGF表达差异有统计学意义（P〈0.05）,不同病理类型的RCC组织中MMP-2与VEGF表达差异无统计学意义。MVD与VEGF、MMP-2蛋白表达之间呈显著相关性（P〈0.05）;VEGF与MMP-2蛋白表达之间有显著相关性（P〈0.05）。结论 MMP-2与VEGF的表达可反映RCC侵袭和转移潜能的生物学指标,对临床判断肾癌预后有着直接意义。     

miRNA-592在肾细胞癌进展中作用及其与预后关系研究

目的 探讨miRNA-592在肾细胞癌(RCC)中的作用及其与预后的关系.方法 逆转录-聚合酶链反应检测110例RCC组织及其配对的癌旁组织、正常人肾上皮细胞系(HK-2)和人RCC细胞系(786-O、ACHN、Caki-1和769-P)中miRNA-592的表达.分析miRNA-592与RCC临床病理特征及生存预后的...     

碳酸酐酶Ⅸ在肾癌中的表达及临床意义

目的 探讨碳酸酐酶Ⅸ(CAⅨ/G250)在肾癌组织和血液中的表达情况和临床意义.方法 采用RT-PCR技术检测62例肾癌患者癌组织和外周血液中碳酸酐酶Ⅸ(G250)mRNA的表达,以32例正常肾组织和非肾癌患者外周血作为对照.结果 62例肾癌患者碳酸酐酶Ⅸ(G250)mRNA阳性率在癌组织中为82.3%(51/62),在外周血中为54.8%(34/62),各对照组均无阳性表达,差异有统计学意义(P<0.05);在肾透明细胞癌患者癌组织和外周血中碳酸酐酶Ⅸ(G250)mRNA阳性率分别为98%(49/50)和66%(33/50),显著高于其他类型肾癌(P<0.05).结论 碳酸酐酶Ⅸ(G250)在肾癌尤其是透明细胞癌中有特异性的高表达,可以用于肾癌以及肾癌微转移的诊断和预后评价.     

应用组织芯片研究人肾癌中Survivin、EGFR和PCNA的表达与预后的关系

目的检测Survivin、EGFR和PCNA在人肾癌组织中的表达，以探讨三者在肾癌中表达的相关性及其与预后的关系。方法利用组织芯片技术构建82例肾癌与26例癌旁正常肾组织芯片，应用免疫组织化学Envision法检测Survivin、EGFR和PCNA在肾癌组织中的表达。结果肾癌中Survivin、EGFR和PCNA的总表达率分别为74．4％（61／82）、57．3％（47／82）和78．0％（64／82），显著高于正常肾组织（P〈0．05）。Survivin和PCNA在肾癌中的表达随着病理分级升高而升高，Survivin和EGFR在肾癌中的表达随着临床分期的升高而升高。肾癌的预后与Survivin、EGFR的阳性表达率有关（P〈0．05）。Survivin、EGFR、PCNA三者在肾细胞癌的发生发展中关系密切（P〈0．01）。结论Survivin、EGFR、PCNA在肾癌中均有过量表达，可能参与肾癌的发生、发展。Survivin、EGFR阳性表达均可以提示肾癌的不良预后。