腋淋巴阴性乳腺癌分子标记与预后相关性研究

为探讨ｃ－ｅｒｂＢ－２、ｐ５３、雌激素受体（ＥＲ）、孕激素受体（ＰＲ）和ＤＮＡ合成时相细胞百分率（ＳＰＦ）对腋淋巴阴性乳腺癌（ＡＮＮ）患者的预后提示价值,作者选择１８０例ＡＮＮ患者,以９项可能影响预后的临床病理指标作为病例配对条件,按１：２配对得到２７对（８１例）ＡＮＮ乳腺癌患者,分别测定其肿瘤ｃ－ｅｒｂＢ－２、ｐ５３、ＥＲ、ＰＲ蛋白表达和ＳＰＦ,结合随访结果进行ｌｏｇｒａｎｋ检验及ＣＯＸ回归数学模型进行危险度分析。结果显示,在５项生物特性指标中,ＳＰＦ对ＡＮＮ乳腺癌患者预后的提示作用最强。ＡＮＮ患者的５年无瘤生存率,ＳＰＦ＜１０％者为９２％,＞１０％者为５２％（Ｐ＜０．００１）。ＳＰＦ单独指标的复发危险度可达１１．３１。其余４项指标的复发危险度按次序分别为ＰＲ、ＥＲ、ｐ５３、ｃ－ｅｒｂＢ－２。作者认为多指标综合分析,ＰＲ和ＥＲ分别与ＳＰＦ联合应用,可进一步了解复发危险度。     

p53基因和C—erbB—2基因在胃癌中的表达

为探讨ｐ５３基因和Ｃ－ｅｒｂＢ－２基因与胃癌组织分型、浸润深度、淋巴结转移、肝转移、腹膜种植及预后关系，应用免疫组化方法检测了胃癌组织中的ｐ５３基因和Ｃ－ｅｒｂＢ－２的表达情况，结果发现ｐ５３阳性染色率为２４／７２（３３．３％），Ｃ－ｅｒｂＢ－２阳性染色率２０／１０６（１８．９％）。ｐ５３阳性染色与胃癌淋巴结转移、胃癌组织分型及Ｃ－ｅｒｂＢ－２基因表达呈高度相关。Ｃ－ｅｒｂＢ－２阳性染色与胃癌腹膜种植、肝转移以及肿瘤组织分型呈正相关。ｐ５３阴性表达５年生存率（４８．９％）显著高于阳性表达（１７．６％）（Ｐ＜０．０５）。Ｃ－ｅｒｂＢ－２阴性表达５年生存率（３８．６％）高于阳性表达（２１．７％），但无统计学差异。单因素和多因素分析显示ｐ５３表达是一个独立的预后因素。单因素分析Ｃ－ｅｒｂＢ－２表达对预后无影响。     

大肠癌细胞p53基因突变与细胞凋亡及细胞倍性的关系

目的　了解ｐ５３ 基因突变、细胞倍性、细胞凋亡三者的关系,探讨突变型ｐ５３ 基因在肿瘤发生中的作用机制。方法　采用 Ｐ Ｃ Ｒ Ｓ Ｓ Ｃ Ｐ（ 单链构象多态性） 检测ｐ５３ 基因突变,用流式细胞仪 Ｆａｃｓｃａｎ 检测大肠癌细胞染色体倍性、凋亡率及其在细胞周期各相中的分布情况。结果　大肠癌标本ｐ５３基因突变率为５０ ％ ;其中突变组肿瘤细胞凋亡率（２２ ．１１ ％ ） 明显低于未突变组细胞凋亡率（４０ ．５７ ％ ） ,（ Ｐ＜ ０ ．０５） ;突变组异倍体细胞百分率（ 占７６ ．９ ％ ） 明显高于未突变组（ 占４６ ．２ ％ ） ,（ Ｐ＜ ０ ．０５） ;异倍体肿瘤细胞凋亡率为３４ ．０ ％ ,二倍体肿瘤细胞凋亡率为４０ ．７ ％ ,二者差异无显著性（ Ｐ＞ ０ ．０５） 。结论　ｐ５３ 基因突变使肿瘤细胞凋亡率下降,进而促进肿瘤发生、发展。ｐ５３ 基因突变多见于异倍体细胞,细胞凋亡率与细胞倍性无关。     

乳癌中p16,c-erbB-2的表达及意义

探讨ｐ１６和ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白表达与乳癌临床病理因素及预后的关系。方法 采用免疫组化和ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术,分别检测５０例乳癌ｐ１６,ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白的表达和２０例乳癌ｐ１６基因的纯合性缺失及突变。结果 ５０例乳癌中,１７例（３４．０％）ｐ１６蛋白表达阳性,２４例（４８．０％）ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白表达阳性。２０例乳癌中无ｐ１６基因的纯合性缺失,１例ｐ１６基因外显子２有点突变。结果表明,ｐ１６     

P53,C—erbB—2基因蛋白和EGFR在泌尿系移行细胞癌中的表达及 …

应用免疫组化技术研究６５例泌尿系移行细胞癌（包括４７例膀胱癌和１８例肾盂癌）组织中Ｐ５３、Ｃ－ｅｒｂＢ－２基因蛋白和表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）的表达及相互关系。结果显示Ｐ５３在膀胱癌中阳性率为５７．５％（２７／４７），在肾盂癌中５０．０％（９／１８）；Ｃ－ｅｒｂＢ－２基因蛋白在膀胱癌和肾盂癌中的表达率分别为４０．４％和３８．９％；ＥＧＦＲ的表达率分别为４２．６％和４４．４％。Ｐ５３、Ｃ－ｅｒｂＢ     

大肠癌组织中HPV和C—erbB—2基因的检测及其关系研究

检测大肠癌组织中ＨＶＰ和Ｃ－ｅｒｂＢ－２基因，探讨大肠癌组织中ＨＰＶ的存在与Ｃ－ｅｒｂＢ－２基因的扩增之间的关系。方法 应用ＰＣＲ技术检测２１例大肠癌标本中ＨＰＶ及Ｃ－ｅｒｂＢ－２基因。检测Ｃ－ｅｒｂＢ－２基因同时进行差异ＰＣＲ，以确定Ｃ－ｅｒｂＢ－２基因拷贝数的变化。     

人乳头瘤病毒DNA相关序列与p53基因突变对大肠癌生物学行为的影响50例报告

目的探讨人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）ＤＮＡ相关序列与ｐ５３基因突变及ｐ５３蛋白表达的关系及其对大肠癌生物学行为的影响。方法采用ＰＣＲ方法检测大肠癌及癌旁组织、肝转移灶中ＨＰＶＤＮＡ相关序列。并应用ＰＣＲＳＳＣＰ及免疫组化技术分别检测ｐ５３基因突变及ｐ５３蛋白表达。结果在５０例大肠癌中,检出ＨＰＶ１６、１８ＤＮＡ相关序列２６例（５２０％）,其中ＨＰＶ１６ＤＮＡ４例（８０％）,ＨＰＶ１８ＤＮＡ２２例（４４０％）。ｐ５３基因突变率为５６０％。ｐ５３蛋白表达阳性率为４２０％。ＨＰＶＤＮＡ相关序列与ｐ５３基因突变及ｐ５３蛋白表达呈正比关系。结论ＨＰＶＤＮＡ相关序列可促进细胞转化、致ｐ５３基因突变、抑制细胞的凋亡,与大肠癌的发生发展有密切关系。     

膀胱癌p53和C-erb B-2基因蛋白表达及与临床病理的意义

为了探讨抑癌基因ｐ５３和原癌基因ＣｅｒｂＢ２在膀胱癌发生发展中的作用,我们对６０例膀胱癌石蜡切片进行了检测。材料与方法　６０例膀胱癌均为手术切除并经病理证实的标本,病理分级按ＷＨＯ标准：Ｇ１２０例,Ｇ２２４例,Ｇ３１６例;临床分期按ＵＩＣＣ标准：Ｔｉｓ１３例,Ｔ１２１例,Ｔ２１７例,Ｔ３８例,Ｔ４１例。采用ＰＡＰ免疫酶标染色,染色按试剂盒说明操作。以乳腺浸润性导管癌作为阳性对照,用ＴＢＳ代替一抗作为阴性对照。阳性判断标准：细胞核或膜上有棕色颗粒为阳性细胞,阳性细胞数＞１０％为阳性病例。统计学…     

检测胃癌组织中多基因表达的临床病理意义

目的 探讨指示胃癌临床病理学特征和预后的分子学指标。方法 应用生物素－卵白素复合物法（ＡＢＣ法）检测１７１例胃癌标本中ｐ５３、ＣｅｒｂＢ－２、表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）、ｎｍ２３和Ｅ－钙粘蛋白（Ｅ－ｃａｄ）的表达。结果 ⑴癌组织浸润越深,ｎｍ２３和Ｅ－ｅｒｂ表达越少（Ｐ〈０．０５）,ｎｍ２３和Ｅ－ｃａｄ表达与淋巴结转移和远处转移呈负相关（Ｐ〈０．０５）,Ｃ－ｅｒｂＢ－２和ＥＧＦＲ表达与远处转移呈     

前列腺癌中P53基因突变及蛋白表达的研究

运用免疫组织化学ＬＳＡＢ法（链菌素－生物素标记法），结合ＰＣＲ－ＲＦＬＰ（ＰＣＲ限制性片段长度多态）、ＰＣＲ－ＳＳＣＰ（ＰＣＲ单链结构多态）技术，探讨了３４例前列腺癌穿刺标本中Ｐ５３蛋白表达及基因（５～８外显子）突变情况，发现３４例前列腺场中７例有Ｐ５３蛋白表达阳性，阳性率为２０．６％。２０例前列腺良性增生及１０例正常前列腺组织中Ｐ５３蛋白表达均为阴性（Ｐ＜０．０５），在前列腺癌高、中分化组及前列腺癌低、未分化组Ｐ５３蛋白表达阳性率分别为５．３％及４０％（Ｐ＜０．０５），在ＰＣＲ－ＲＦＬＰ中提示１例前列腺癌中有Ｐ５３突变，ＰＣＲ－ＳＳＣＰ中提示３例Ｐ５３基因突变（５～６外显子），一例无Ｐ５３基因扩增产物，高度怀疑为Ｐ５３基因的缺失，３４例前列腺癌中，ＣＴ及骨扫描提示有转移者为１０例，其中５例为Ｐ５３蛋白表达阳性，阳性率５０％，与非转移组阳性率比较Ｐ＜０．０５。本研究表明Ｐ５３基因突变参与前列腺癌的发生发展过程，与其转移的生物学行为关系密切。分析了以上不同方法在检测Ｐ５３基因突变中的价值。     

结直肠癌中P53和Kras基因突变与血管内皮生长因子表达的关系

目的探讨结直肠癌中P53和K-ras基因突变与血管内皮生长因子(VEGF)的关系。方法采用RT-PCR技术和聚合酶链式反应-单链构像多态性分析(PCR-SSCP)方法,对46例结直肠癌的新鲜癌组织进行P53、K-ras基因突变率和VEGF表达率的检测。结果46例结直肠癌中VEGF表达阳性率为52.2%(24/46),P53基因突变率为63.0%(29/46),K-ras基因突变率为43.4%(20/46)。P53基因突变的29例中VEGF表达阳性20例,占68.9%,表达阴性9例,占31.0%,P<0.05。K-ras基因突变的20例中VEGF表达阳性14例,占70.0%,表达阴性6例,占30%,P<0.05。结论结直肠癌组织中P53基因突变和K-ras基因突变与VEGF表达呈正相关,此点为临床基因治疗肿瘤提供了重要理论依据。     

乳腺癌c-erbB2过表达与生存率、内分泌治疗效果和预后的关系

目的　研究乳腺癌c erbB 2改变与生存率、内分泌治疗效果及预后的关系 ,探讨有效反映乳腺癌c erbB2变化的简单检测方法。方法　半定量PCR检测c erbB2基因扩增 ;免疫组化检测c erbB2蛋白表达。随访 5 8例患者。结果　c erbB 2蛋白过表达 (+ + )与基因扩增有显著的一致性 (P<0 .0 1) ,一致率 93 .7%。c erbB2蛋白过表达 (+ + )患者的 5年生存率 (4 4.4% )显著低于c erbB 2阳性表达 (+ ) (66.7% )和c erbB 2阴性表达患者 (78.6% ) (P <0 .0 5 )。c erbB 2蛋白过表达患者服用三苯氧胺不能显著提高 5年生存率。结论　c erbB2蛋白过表达患者 5年生存率低、预后差 ,且对内分泌治疗不敏感。免疫组化可以简单、有效地检测乳腺癌c erbB2的改变。     

ER、PR、p53、c—erbB-2在乳腺囊性增生病中的表达意义

目的：研究乳腺囊性增生病中雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）、p53和c—erbB-2表达的临床意义。方法：用免疫组化SP法检测62例乳腺囊性增生病中ER、PR、p53和c—erbB-2表达分布情况。结果：62例患者中ER阴性6例,占10％;阳性56例,占90％。PR阴性7例,占11％;阳性55例,占89％。p53阴性35例,占57％;阳性27例,占43％。c—erbB-2阴性41例,占66％;阳性21例,占34％。结论：乳腺囊性增生病的发生与ER、PR有关,其病变发展与c—erbB-2和p53关系密切,同时也是检测是否癌变的一种实用可靠的方法。     

Genetic detection of lymph node micrometastases: a selection criterion for liver transplantation in patients with liver metastases after colorectal cancer

BACKGROUND: Liver transplantation for nonresectable liver metastases from colorectal cancer was abandoned in 1994 on account of high recurrence rates. The aim of this study was to investigate whether the genetic detection of micrometastases in histologically negative lymph nodes of the primary colon cancer could be applied to select patients for liver transplantation. METHODS: We analyzed 21 patients with colorectal cancer who had undergone liver transplantation between 1983 and 1994 for liver metastases. Eleven patients were histologically lymph node negative at the time of surgery; ten patients with lymph node metastases served as control group. DNA sequencing was used to screen tumor material for p53 and K-ras mutations. Mutant allele-specific amplification (MASA) was then used to search for micrometastases in DNA from regional lymph nodes of the primary colorectal cancer. RESULTS: p53 and K-ras mutations were detected in 12 (57%) and 3 (14%) of 21 patients in the colorectal cancer, respectively. The mutations were confirmed in the corresponding liver metastases. Of 11 patients with histologically negative lymph nodes, nine were eligible for MASA due to presence of p53 or K-ras mutation. MASA revealed six of nine patients to be genetically positive for micrometastases. Three patients were both genetically and histologically negative. These three patients showed a significantly longer overall survival (P = 0.011) of 4, 5, and 20 years, respectively. CONCLUSIONS: We conclude that the genetic detection of micrometastases by MASA could be a powerful prognostic indicator for selecting patients with colorectal liver metastases who could benefit from liver transplantation.     

变性凝胶电泳和自动DNA序列分析检测结直肠肝转移癌p53基因突变的研究

目的　了解变性梯度凝胶电泳(DGGE)和自动DNA序列分析方法检测肿瘤基因变异及p53基因、p53蛋白在大肠癌发生、转移过程中的动态变化。方法　以DGGE及自动DNA序列分析法检测41例大肠癌原发病灶和肝转移灶p53外显子5～11的基因突变。以免疫组织化学方法检测p53蛋白表达。结果　41例中24例有p53基因突变(62%),其中6例仅在肝转移灶发现p53基因突变,其余均为原发灶、转移灶有一致性的突变。另有3例原发灶即有p53基因突变的病人,在转移灶除保留原有突变外,还出现新增加的突变。在原发、转移灶同时有突变的16例中,14例呈现突变的p53碱基峰和正常峰之比在肝转移灶明显高于大肠癌原发灶(P＜0.001)。p53免疫组织化学染色结果和DGGE、DNA序列分析结果高度一致。但在基因分析呈无义突变的癌灶,免疫组织化学显示p53蛋白的过度表达。结论　在大肠癌肝转移过程中,p53基因突变主要开始于肠癌原发灶,并被保持于转移至肝脏的癌细胞内,在转移灶其含量或含突变型p53癌细胞量明显增加。p53基因突变与p53蛋白过度表达呈正相关关系。DGGE和自动序列分析法只有在于免疫组织化学方法结合使用时,才能对基因改变作出最全面的判断。     

检测胆汁P53和K—ras突变基因对诊断大肠癌肝转移的价值

探讨检测胆汁ｐ５３和Ｋ－ｒａｓ基因突变对诊断大肠癌肝转移的价值２。方法采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法对６２例大肠癌病的原发生和胆汁标本进行检测Ｐ５３和Ｋ－ｒａｓ基因突变的结果进行分析。     

胆囊癌组织细菌L型的检测与p21及p53基因突变的关系

目的 探讨胆囊癌的发生与细菌L型感染和p21及p53基因突变的关系。方法 采用免疫组化SP法和革兰氏染色技术，对40例胆囊癌及40例慢性胆囊炎组织中的细菌L型和突变型p53蛋白及p21蛋白进行检测，并对胆囊癌组织中的细菌L型阳性伴p21及p53蛋白阳性表达结果和细菌L型阴性伴p21及p53蛋白阳性表达结果进行对比分析。结果 胆囊癌组织中革兰氏染色细菌L型检出率为77．5％(31／40)，明显高于胆囊炎的57．5％(23／40)，P＜0．05，且与免疫组化细菌L型抗原表达阳性率[80．0％(32／40)]具有一致性；胆囊癌组织中的p21及p53蛋白表达阳性率分别为62．5％(25／40)和65．0％(26／40)，明显高于胆囊炎组织中的p21及p53蛋白表达阳性率[2．5％(1／40)和5.0％(2／40)]，P＜0．05；胆囊癌组织中的细菌L型阳性者其p21及p53蛋白表达阳性率分别为75．0％(24／32)和78．1％(25／32)，明显高于细菌L型阴性者的p21及p53蛋白的表达阳性串率[12.5％(1／8)，12．5％(1／8)]，P＜0。05。结论 细菌L型参与了p21及p53基因的突变，并在胆囊癌的发生中可能起协同作用。     

P53 and her-2 alterations in renal cell carcinoma

ObjectivesTo investigate protein expression and genetic aberrations of p53 and HER-2 in renal cell carcinoma (RCC) as well as possible association of p53 and HER-2 abnormalities with the tumor behavior of RCC.MethodsFormalin-fixed and paraffin-embedded tissue blocks from 70 patients with RCC were studied. Protein expression of p53 and HER-2 was assessed immunohistochemically. Following deoxyribonucleic acid extraction from the paraffin sections using a microdissection technique, p53 gene mutations within exons 5 to 8 were examined by polymerase chain reaction (PCR) single-strand conformation polymorphism and HER-2 gene amplification by a differential PCR.ResultsOf the 70 RCCs, 16 (22.9%) showed protein expression of p53, with 7 (10%) demonstrating mutations within exons 5 to 7. Additionally, 28 RCCs (40%) displayed protein expression of HER-2, with 12 (17.1%) demonstrating gene amplification. All cases showing p53 mutations or HER-2 amplification represented protein expression of p53 or HER-2, respectively. No cases with negative immunostaining for p53 or HER-2 protein displayed positive results at gene level. Statistical analysis revealed a close relationship between p53 protein expression and the tumor grade, as well as a significant association of HER-2 protein expression and gene amplification with the tumor stage of RCC.ConclusionsOur observations suggest that the abnormalities of p53 and HER-2 may be involved in the pathogenesis of RCC and that other mechanisms leading to protein expression of p53 and HER-2 may coexist within a single tumor in addition to the genetic aberrations.