枯否细胞在肝移植脂肪供肝的缺血再灌注损伤中的作用研究进展

缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury,IRI)是肝移植的常见危险因素,与早期移植肝的无功能和功能障碍密切相关.当发生IRI时,会产生大量的氧自由基和炎症因子,引起肝脏损伤,枯否细胞(Kupffer cells,KCs)的激活与其密切相关.同时,由于肝移植供肝的需求不断增多,脂肪供肝在肝...     

缺血后处理在肝移植缺血-再灌注损伤中的作用

缺血-再灌注损伤是肝脏大手术(包括肝切除及肝移植)后不可避免的过程,是导致器官移植后脏器失活的重要原因之一,其危害性仅次于免疫排斥.因此如何减轻肝脏缺血-再灌注损伤仍是目前肝脏外科特别是移植外科的研究热点及难点之一.近年的研究结果表明缺血后处理能减轻肝脏缺血-再灌注损伤,我们主要探讨缺血后处理的作用机制及其在肝移植缺血-再灌注损伤中作用研究的最新进展.     

缺血后处理在肝移植缺血-再灌注损伤中的作用

缺血-再灌注损伤是肝脏大手术(包括肝切除及肝移植)后不可避免的过程,是导致器官移植后脏器失活的重要原因之一,其危害性仅次于免疫排斥.因此如何减轻肝脏缺血-再灌注损伤仍是目前肝脏外科特别是移植外科的研究热点及难点之一.近年的研究结果表明缺血后处理能减轻肝脏缺血-再灌注损伤,我们主要探讨缺血后处理的作用机制及其在肝移植缺血-再灌注损伤中作用研究的最新进展.     

边缘供肝及器官功能维护在肝移植中的应用进展

肝移植是治疗各种终末期肝病的唯一有效方法。标准供肝短缺是限制肝移植发展的主要因素,而边缘供肝的使用明显扩大了供肝的来源。体外膜肺氧合（ECMO）、机械灌注及低体温等新型技术能显著改善边缘供肝的质量,在器官功能维护中具有良好的发展前景。本文就边缘供肝的常见类型及相关新型技术在边缘供肝功能维护中的应用展开综述。     

缺血后处理在肝移植缺血-再灌注损伤中的作用

缺血-再灌注损伤是肝脏大手术(包括肝切除及肝移植)后不可避免的过程,是导致器官移植后脏器失活的重要原因之一,其危害性仅次于免疫排斥.因此如何减轻肝脏缺血-再灌注损伤仍是目前肝脏外科特别是移植外科的研究热点及难点之一.近年的研究结果表明缺血后处理能减轻肝脏缺血-再灌注损伤,我们主要探讨缺血后处理的作用机制及其在肝移植缺血-再灌注损伤中作用研究的最新进展.     

体外膜肺氧合对非可控型心脏死亡器官捐献供肾的保护作用

目的  探讨体外膜肺氧合（ECMO）对非可控型心脏死亡器官捐献（DCD）供肾的保护效果。方法  随机选取60例非可控型DCD患者,按ECMO体内灌注的时间将60例供体随机分为3组,实验组1利用ECMO灌注2 h,实验组2灌注4 h,实验组3灌注6 h,每组20例,相应受体亦分为3组,每组20例。同时随机选取20例接受循环功能稳定的脑死亡器官捐献（DBD）的受体作为对照组。比较各组受体的移植物功能延迟恢复（DGF）、原发性移植物无功能（PNF）和急性排斥反应的发生率;比较各组受体的移植肾恢复时间、术后第1日尿量和术后1年移植肾功能等指标;比较各组受体术后1年人、肾存活率。结果  与对照组比较,各实验组受体的PNF、DGF及急性排斥反应发生率的差异均无统计学意义（均为P>0.05）。与对照组比较,各实验组的移植肾功能恢复时间明显延长,差异有统计学意义（均为P < 0.05）,而各实验组受体术后第1日尿量及术后1年的肾功能差异均无统计学意义（均为P>0.05）。各实验组及对照组肾移植术后1年的人、肾存活率均为100%,差异均无统计学意义（均为P>0.05）。结论  利用ECMO技术辅助非可控型DCD的循环或呼吸功能可以很好地保护供肾功能,提高供肾使用率。     

雌激素在大鼠肝移植缺血再灌注损伤中的保护作用

目的 了解雌激素对大鼠肝移植缺血再灌注损伤是否具有保护作用及其可能的作用机制.方法 将大鼠分为三组:雄性组、雌性组以及给予外源性雌激素的雄性组,分别应用两袖套法实施肝移植手术.术后6 h麻醉后处死,取血及肝组织标本.观察外周血丙氨酸氨基转移酶(ALT)和谷氨酸氨基转移酶(AST)以及一氧化氮(NO)水平,免疫组化染色分析内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在各组肝组织中的表达.结果 与雄性组和雌性组比较给予外源雌激素的雄性大鼠血清ALT水平和AST水平显著降低(分别为561.69 U/L比730.78 U/L和678.82 U/L,726.44 U/L比914.21 U/L和861.86 U/L);血清NO水平明显升高,平均为63.54 μmol/L;肝组织eNOS表达显著增加,iNOS表达显著降低.结论 雌激素对于大鼠肝移植缺血再灌注损伤具有保护作用,这种保护作用一部分是通过调节eNOS和iNOS表达、提高NO水平实现的.

Abstract：

Objective To investigate the protective effects of 17β-estradiol on ischemia reperfusion injury in rat liver transplantation. Methods The rats were divided into three groups: male to male group(MG), female to female group (FG), and male to male group which were given 17β-estradiol 4000 μg/kg 24 hours before liver transplantation intraperitoneally (M + EG). Then transplantation was performed. At 6 hours after portal vein reperfusion, blood samples were obtained to determine the levels of alanine aminotransferase(ALT), aspartate aminotransferase (AST), and nitric oxide(NO). The expression of endothelial nitric oxide synthase (eNOS) and inducible nitric oxide synthase (iNOS) in liver were observed by immunohistochemistry. Results ALT and AST levels in the M+EG group were lower than those in MG and FG (561. 69 U/L vs 730. 78 U/L and 678. 82 U/L; 726. 44 U/L vs 914. 21 U/L and 861. 86 U/L). The NO level (63. 54 μmol/L) was much higher than those in the MG and FG groups. The expression of eNOS in the M+EG group was higher than those in MG and FG, while the expression of iNOS in M+EG were lower than those in MG. and FG. Conclusion 17β-estradiol can attenuate ischemia reperfusion injury in rat liver transplantation by improving the balance of eNOS and iNOS.     

持续低温氧合机械灌注对小鼠心脏死亡器官捐献供肝的保护作用

研究体外持续低温氧合机械灌注对小鼠心脏死亡器官捐献(donation after cardiac death,DCD)供肝的保护作用.方法 雄性ICR小鼠根据灌注保存方式不同分为新鲜供肝低温保存组(FC组)、DCD供肝低温保存组(DC组)和DCD供肝低温氧合机械灌注组(DP组),每组6只.低温灌注保存供肝6h后,收集保存过供肝的威斯康星大学保存液(University of Wisconsin solution,UW液),检测丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)水平.收集3组小鼠肝组织,切片,行常规苏木素-伊红(HE)染色,在光学显微镜下观察病理改变,用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法介导的dUTP缺口末端标记(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)法观察3组小鼠肝细胞凋亡情况.结果 保存6h后,DC组与DP组的UW液中的ALT、AST含量均明显高于FC组(均为P< 0.01);DP组的ALT和AST含量均明显低于DC组(均为P< 0.01).光学显微镜下,FC组未见明显坏死区域,DC组肝细胞损伤严重,DP组肝组织未见明显损伤及坏死.荧光显微镜下,FC、DP两组肝细胞凋亡程度轻微,DC组肝细胞形态极不规则,肝细胞坏死严重.结论 持续低温氧合机械灌注可减轻肝细胞损伤和凋亡,为DCD肝移植的器官保存研究提供了新的方法.     

巨噬细胞与缺血-再灌注损伤相关研究进展

缺血-再灌注损伤（IRI）是一个极其复杂的病理生理过程,可在心肌梗死、卒中、器官移植、涉及暂时中断血流的手术等过程中发生。巨噬细胞作为免疫系统的关键分子,在IRI的发病机制中起着至关重要的作用。M1型巨噬细胞是促炎细胞,参与病原体的清除;而M2型巨噬细胞具有抗炎作用,参与组织修复和重塑以及细胞外基质重塑。巨噬细胞表型之间的平衡对于IRI的结局和治疗十分重要。本文综述了巨噬细胞在IRI中的作用,包括巨噬细胞M1/M2表型平衡、向不同缺血组织浸润和募集的机制。此外,还讨论了IRI过程中靶向巨噬细胞的潜在治疗策略,为减轻IRI和促进组织修复相关研究提供参考。     

我国肝移植现状与面临的挑战

经过20余年的发展,我国目前已成为世界上肝移植发展较快的国家之一,无论在年移植例数还是术后患者生存率方面均接近国际先进水平.但是,肝移植在快速发展的同时却面临着许多亟待解决的问题,如供肝来源和分配体系不完善、基础研究成果缺乏创新和核心竞争力、临床研究水平滞后等.南京医科大学第一附属医院对扩大供肝来源,临床技术改进,加强基础研究方面开展了一系列工作,做出了有益尝试.     

体外膜肺氧合在供者维护中的应用进展

器官移植是治疗终末期疾病的有效手段之一,但供者来源不足桎梏了器官移植的发展。体外膜肺氧合（ECMO）可以改善器官低氧状态及低灌注情况,缩短热缺血时间,在器官紧急获取或血流动力学不稳定等情况下,有效维护供者器官功能,使供者器官得到充分利用,造福更多亟需器官移植的患者。本文总结了ECMO在供者维护中的应用进展,为其在器官移植中的应用提出建议。     

烟酰胺单核苷酸通过Sirt3减轻心脏死亡供肝诱导的缺血-再灌注损伤

目的  探讨烟酰胺单核苷酸（NMN）对大鼠心脏死亡供肝诱导的缺血-再灌注损伤（IRI）的作用及机制。方法  通过“磁环+双袖套”法建立大鼠原位肝移植模型。将SD大鼠随机分为假手术组（Sham组）、原位肝移植组（OLT组）、NMN处理+原位肝移植组（NMN组）、NMN+去乙酰化酶-3（Sirt3）抑制剂（3-TYP）+原位肝移植组（NMN+3-TYP组）。观察各组大鼠肝组织病理学改变及肝细胞凋亡情况,检测血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）水平,测定肝组织超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）含量,检测肝组织Sirt3、微管相关蛋白1轻链3（LC3）Ⅱ、PTEN诱导假定激酶1（PINK1）、Parkin、线粒体外膜转位酶20（TOMM20）表达水平。分析各组大鼠术后生存情况。结果  与Sham组比较,OLT组ALT、AST水平升高;与OLT组比较,NMN组ALT、AST水平均下降;与NMN组比较,NMN+3-TYP组ALT、AST水平升高（均为P < 0.05）。Sham组大鼠肝组织结构基本正常;OLT组大鼠肝组织可见明显的淤血、空泡变性和肝细胞坏死等病理改变。OLT组Suzuki评分、细胞凋亡率较Sham组升高;NMN组Suzuki评分、细胞凋亡率较OLT组降低;NMN+3-TYP组Suzuki评分、细胞凋亡率较NMN组升高（均为P < 0.05）。与Sham组比较,OLT组SOD含量下降,MDA含量升高;与OLT组比较,NMN组SOD含量升高,MDA含量下降;与NMN组比较,NMN+3-TYP组SOD含量下降,MDA含量升高（均为P < 0.05）。与Sham组比较,OLT组Sirt3、TOMM20蛋白相对表达量下降,PINK1、Parkin、LC3Ⅱ蛋白相对表达量升高;与OLT组比较,NMN组Sirt3、PINK1、Parkin、LC3Ⅱ蛋白相对表达量升高,TOMM20蛋白相对表达量下降;与NMN组比较,NMN+3-TYP组PINK1、Parkin、LC3Ⅱ蛋白相对表达量下降,TOMM20蛋白相对表达量升高（均为P < 0.05）。Sham组、OLT组、NMN组、NMN+3-TYP组大鼠术后7 d生存率分别为100%、50%、75%、58%。结论  NMN可通过上调Sirt3,增强肝脏抗氧化能力及诱导PINK1/Parkin介导的线粒体自噬,减轻肝IRI,从而对心脏死亡供肝发挥保护作用。     

ECMO技术在公民逝世后器官捐献供肝保护中的临床应用

目的  探讨体外膜肺氧合（ECMO）技术在公民逝世后器官捐献供肝保护中的可行性。方法  回顾性分析应用ECMO技术保护供肝的16例肝移植供、受者临床资料。观察ECMO技术对供者各项指标的影响,观察肝移植术后受者的肝功能情况以及预后情况。结果  与应用ECMO前比较,应用ECMO后供者的心率、总胆红素（TB）、丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）明显降低,收缩压、舒张压、动脉血氧分压（PaO₂）明显升高（均为P < 0.05）。肝移植受者术后肝功能恢复理想,术后7~28 d肝功能逐渐恢复正常。术后3例受者发生并发症,包括移植肝功能延迟恢复1例、胆道狭窄1例、门静脉血栓1例。其中门静脉血栓受者经二次手术取栓后病情不能缓解死亡,其余2例均经对症治疗后康复出院。结论  公民逝世后器官捐献供者应用ECMO后血流动力学、肝功能等指标均得到明显改善,肝移植受者术后肝功能恢复理想。     

DCD供肝肝移植术后早期急性肾损伤相关危险因素分析

目的  分析心脏死亡器官捐献（DCD）供肝肝移植术后早期急性肾损伤（AKI）的相关危险因素。方法  回顾性分析184例DCD供肝肝移植供、受体资料。根据术后早期是否发生AKI分为AKI组和非AKI组,并且对AKI组行AKI分期。比较两组一般资料和术前、术中、术后相关指标的差异。用Kaplan-Meier曲线分析非AKI组和AKI组不同分期累积存活率等预后情况。结果  本研究纳入病例184例,术后早期发生AKI 68例（37.0%）,其中AKI 1期31例,AKI 2期26例,AKI 3期11例,且发生多在术后3 d内。单因素分析结果显示术前白蛋白 < 35 g/L、术前血清钠≤ 137 mmol/L、手术时间>7.5 h、术中出血量>3 000 mL、术中红细胞输注量>15 U、术中尿量≤ 100 mL/h这6项指标为肝移植术后早期发生AKI的危险因素（均为P < 0.05）。Logistic多变量回归分析结果表明术中红细胞输注量>15 U是肝移植术后早期发生AKI的独立危险因素[比值比（OR）1.061,95%可信区间（CI）1.008~1.118,P=0.024]。Kaplan-Meier生存曲线结果表明随着AKI程度不断加重,其累积存活率逐渐降低,差异有统计学意义（均为P < 0.05）。结论  肝移植患者术后早期AKI的发生率较高,且严重程度与受体的短期和长期预后密切相关,术中大量输注红细胞是AKI发生的独立危险因素。     

应用LifePort器官转运器改善肾移植效果的大宗临床研究（附573例报告）

目的  探讨供肾脉冲灌注保存转运器（LifePort）保存心脏死亡器官捐献（DCD）供肾和扩大标准供体（ECD）供肾对肾移植术后受者肾功能恢复的影响。方法  回顾性分析466例器官捐献（DCD+ECD）供者和882例肾移植受者围手术期的临床资料。根据供肾保存方式不同,将309例DCD供者的左右两侧肾脏随机分为LifePort（DCD-LP）组（309例）和DCD冷藏组（309例）; 132例ECD供者的双侧供肾全部采用LifePort保存并转运,设为ECD-LP组（264例）。分别观察3组受者术后总体情况、术后早期移植肾功能指标、术后并发症发生情况; 对比观察肾移植术前零点穿刺肾组织病理学检查结果; 比较肾移植术后有否发生移植物功能延迟恢复（DGF）受者的供肾LifePort灌注参数。结果  与DCD冷藏组比较,DCD-LP组、ECD-LP组受者的住院时间明显缩短,差异均有统计学意义（均为P < 0.05）。DCD冷藏组、DCD-LP组、ECD-LP组围手术期的人存活率均为100%,肾存活率分别为99.7%、100%、99.2%,差异均无统计学意义（均为P > 0.05）。与DCD冷藏组比较,DCD-LP组、ECD-LP组的DGF发生率明显降低,差异均有统计学意义（均为P < 0.05）。3组受者的术后早期肾功能,急性排斥反应、感染和外科并发症的发生率比较,差异均无统计学意义（均为P > 0.05）。病理学检查结果显示,采用LifePort灌注能明显减轻肾小管的水肿、变性、坏死。发生DGF者的供肾LifePort灌注阻力指数明显高于未发生DGF者,而供肾LifePort灌注流量则明显低于未发生DGF者,差异均有统计学意义（均为P < 0.05）。结论  LifePort能有效改善离体DCD和ECD供肾质量,降低术后DGF发生率,促进移植肾功能恢复,并可在离体肾脏维护及评估中对术后恢复情况作出预判。     

心脏移植的发展现状和新挑战

心脏移植是终末期心力衰竭患者的首选治疗。供者不足一直以来都是限制心脏移植数量增长的主要问题,随着新技术的不断更新和引入,供者池被不断扩大,比如使用年龄较大的供者、丙型肝炎病毒感染的供者、毒品过量致死的供者或心脏死亡器官捐献（DCD）供者的心脏等。与此同时,高龄、多器官功能不全、机械循环支持及人类白细胞抗原抗体致敏受者的比例近几年明显增加。供者数量的不足、受者状况的复杂化、免疫抑制治疗的个体化管理和远期移植物血管病的防治等都是心脏移植领域面临的挑战。本文通过概述现今全球在扩大供者库、提高受者质量、加强排斥反应的诊治和心脏移植物血管病变的预防等方面的新进展,以期有助于改善在等待或已经接受心脏移植的终末期心力衰竭患者的生存时间和生活质量。     

体外膜肺氧合在器官移植领域中的应用进展

体外膜肺氧合(ECMO)是一种能代替心肺功能、维持器官持续灌注的体外循环技术。近年来,因其出色的心肺支持功能,ECMO被越来越多地运用于器官移植领域,从器官捐献供者器官的保护,到器官移植受者移植前的安全过渡、移植中生命支持及移植后呼吸循环系统并发症的处理。ECMO在扩大供者来源、提高移植手术安全性和移植受者存活率方面发挥了重要作用。本文就ECMO在器官移植领域中的应用研究进展进行综述。