垂体腺瘤中凋亡抑制基因survivin的表达和bcl-2、p53相关性的研究

目的 :通过检测垂体腺瘤中的凋亡细胞 ,研究新的凋亡抑制基因survivin在垂体腺瘤组织中的表达及其与bcl- 2和 p5 3基因表达的相关性 ,探讨垂体腺瘤的发生与细胞凋亡的关系 ,以及survivin、bcl- 2、p5 3基因在垂体腺瘤AP发生中的调控作用。方法 :应用末端脱氧核糖核酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记技术 (TUNEL)和免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白 -过氧化酶连接法 (SP法 )检测 8例正常垂体组织和 4 8例不同分化程度的垂体腺瘤组织的细胞调亡和survivin、bcl- 2、p5 3基因的表达。统计学分析采用SPSS10 .0软件系统进行处理 ,检验水准取α=0 .0 5。结果 :本组 4 8例垂体腺瘤标本中 ,4 3例有不同程度的凋亡发生 ,凋亡细胞发生率为 89.6 % (4 3/ 4 8)。在非侵袭性垂体腺瘤组织中细胞凋亡指数 (apoptosisindex ,AI)平均为 12 .6 % ,在侵袭性垂体腺瘤组织中AI为2 .7% ,两者相比差异具有统计学意义 (P <0 .0 5 )。survivin基因在正常垂体组织中不表达 ;4 8例垂体腺瘤组织中 ,32例表达阳性 ,占 6 6 .7% ;其中侵袭性垂体腺瘤survivin基因的阳性表达率为 81.5 % (2 2 / 2 7) ,非侵袭性垂体腺瘤为 4 7.6 % (10 / 2 1) ,两者相比 ,差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。分泌型 (功能性 )垂体腺瘤中survivin基因表达阳性率为     

胰腺癌组织中survivin的表达及其与bcl-2和p53基因表达的相关性

目的：探讨细胞凋亡抑制基因survivin在胰腺癌组织中的表达，及其与p53和bcl-2基因表达的相关性。方法：应用免疫组织化学S-P法检测8urvivin，p53，bcl-2基因在46例胰腺癌组织中的表达。结果：survivin基因在46例胰腺癌组织中，31例表达阳性，占67．4％；survivin基因表达与患者年龄、性别、肿瘤部位及病理分级无明显相关性；胰腺癌组织中p53基因阳性和阴性表达者中survivin基因表达阳性率分别为81．5％(22／27)及47．4％(9／29)两者比较，差异有显著性；bcl-2基因表达阳性和阴性者中survivin基因表达阳性率分剐为53．9％(7／13)和72．7％(24／33)两者比较，差异无显著性。结论：surviviin基因在胰腺癌组织中存在异常表达上调，提示该基因可能参与了胰腺癌的发生与发展，survivin基因的表达与胰腺癌组织中p53基因的异常表达密切相关。     

Survivin在侵袭性垂体腺瘤中的表达及其与bcl-2、bax表达的关系

目的探讨凋亡抑制基因survivin在侵袭性垂体腺瘤中的表达，及其与bcl-2、bax蛋白表达的相关性。方法应用免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白-过氧化酶连接法（SP法），检测39例侵袭性垂体腺瘤瘤组织中survivin、bcl-2、bax蛋白的表达，与非侵袭性垂体腺瘤32例进行对照。结果侵袭性垂体腺瘤中survivin蛋白阳性表达率为61．5％，明显高于非侵袭性垂体腺瘤的阳性表达率21．9％（P〈0．01）；在侵袭性垂体腺瘤中survivin蛋白表达与bcl-2蛋白表达呈正相关（P〈0．01），而与bax蛋白表达呈负相关（P〈0．01）。结论survivin可通过抑制肿瘤细胞凋亡，对侵袭性垂体腺瘤的发生、发展起重要作用，并与凋亡相关基因bcl-2、bax在侵袭性垂体腺瘤的发展中分别起协同和拮抗作用。     

Survivin凋亡抑制基因在垂体腺瘤中的表达及其与bcl-2、p53相关性的研究

目的 :探讨凋亡抑制基因survivin在垂体腺瘤中的表达 ,及其与bcl 2和p5 3表达蛋白的相关性。方法 :采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白 过氧化酶连接法 (SP法 ) ,检测survivin、bcl 2、p5 3基因表达蛋白在 8例正常垂体组织及 3 8例垂体腺瘤组织中的表达。结果 :survivin基因表达蛋白在正常垂体中无表达 ,3 8例垂体腺瘤中 ,2 3例表达阳性 ,占 60 5 %病理分型中PRL型、GH型、混合型阳性表达率分别为 12 /17、7/13、4/8三者比较 ,差异无显著性 (P >0 0 5 )。垂体腺瘤bcl 2表达蛋白的阳性与阴性中 ,survivin蛋白表达阳性率分别为 15 /17、8/2 1。两者比较 ,差异有显著性 (P <0 0 5 ) :而p5 3表达蛋白的阳性和阴性中 ,survivin蛋白表达阳性率分别为 2 /6,2 2 /2 3 ,两者相比 ,差异无显著性 (P >0 0 5 ) :survivin基因蛋白的表达阳性率与垂体腺瘤组织中的bcl 2蛋白表达密切相关 ,与p5 3蛋白表达无相关性。结论 :survivin蛋白表达的异常而引起细胞凋亡抑制 ,在垂体腺瘤的发生中起一定作用 ,其过度表达提示垂体腺瘤增生极度活跃 ,survivin蛋白表达与垂体腺瘤中bcl 2蛋白的异常表达密切相关     

膀胱移行上皮细胞癌中凋亡、增殖、相关基因的研究

检测47例膀胱癌组织和8例正常膀胱组织的细胞凋亡和增殖状态,并就它们与p53,bcl-2和bax基因之间的关系进行了探讨。结果发现膀胱癌组织增殖水平和凋亡水平与正常对照组之间有非常显著的差异（P<0.001和P<0.01）。随着肿瘤分级的增加,细胞增殖水平的增幅远远大于细胞凋亡水平的增幅（P<0.001）。p53和bcl-2基因的表达分别与细胞增殖和凋亡水平明显相关。提示细胞增殖和凋亡均参与膀胱癌的发生发展,p53和bcl-2基因分别与细胞增殖、凋亡水平的调控有关。     

PTEN、Survivin和PTTG与垂体腺瘤侵袭性的关系

目的探讨抑癌基因（PTEN）、凋亡抑制基因（survivin）、垂体腺瘤转化基因（PTTG）表达与垂体腺瘤侵袭性的关系。方法将49例垂体腺瘤手术标本分为侵袭组与非侵袭组，采用免疫组化SP法。检测PTEN、survivin、PTTG的表达。分析它们在侵袭组与非侵袭组中表达水平的差异性。结果侵袭组中的survivin、PTTG表达明显高于非侵袭组，PTEN表达则相反（P均〈0．05）。survivin与PTEN的表达强度呈负相关：PTTG与survivin的表达强度呈正相关，与PTEN的表达强度呈负相关。结论PTEN、survivin、PTTG表达与垂体腺瘤的侵袭性密切相关，对垂体腺瘤的发生发展起重要作用。     

p53、bcl-2及PCNA在新疆不同民族骨肉瘤中的异常表达及临床意义

目的：了解p53、bcl-2、PCNA基因在新疆不同民族骨肉瘤发生发展中的表达情况及临床意义。方法：应用免疫组化LSAB法检测52例骨肉瘤(哈族ll，维族17，汉族24例)和32例瘤样病损组织(骨纤维结构不良，纤维异常增殖症)的p53、bcl-2蛋白及PCNA的阳性检出情况。结果：p53、bcl-2蛋白、PCNA、在52例骨肉瘤中的检出率分别为42．31％(22／52)、59．62％(3l／52)、75％(39／52)，在骨的瘤样病变组织中(骨纤维结构不良，异常增殖症)的阳性检出率分别为3．13％(1/32)、0％(0/32)、31．25％(10/32)。它们的阳性率在骨肉瘤与骨的瘤样病变组织问均存在显著差异(P＜0．05)；哈、维、汉各民族之间p53、bcl-2、PCNA、阳性率的差别均无统计学意义(P＞0．05)；舌肉瘤中bcl-2与p53之间、bcl-2与PCNA之间有相关关系(P＜0．05)。结论：p53蛋白、癌基因bcl-2、PCNA相关基因的异常表达在骨肉瘤病变过程中具有重要作用；骨肉瘤组织中p53、bcl-2、PCNA表达在民族之间未见统计学差别。     

大肠癌组织中survivin表达及其与bcl-2和p53的相关性研究

目的研究survivin在大肠癌组织中的表达及其与p53和bcl-2表达的关系. 方法应用免疫组织化学SP法检测survivin, p53和bcl-2基因在32例大肠癌组织中的表达. 结果 survivin基因在32例大肠癌组织中,20例表达阳性,占62.5%;survivin基因表达与肿瘤部位和病理分级无明显相关性;大肠癌组织中p53基因阳性和阴性表达者中survivin基因表达阳性率分别为78.9%（15/19）及38.5%（5/13）两者比较,差异有显著性;bcl-2基因表达阳性和阴性者中survivin基因表达阳性率分别为70.6%（12/17）和53.3%（8/15）两者比较,差异无显著性. 结论 survivin基因在大肠癌组织中存在异常表达,与p53基因的异常表达密切相关,它可能参与了大肠癌的发生与发展.     

胶质瘤p53、p16、bcl-2、c-fos蛋白表达和细胞凋亡

目的：探讨p53、p16、bcl-2、c—fos基因在胶质瘤的表达水平和细胞凋亡与胶质瘤的发生、发展的关系。方法：采用免疫组织化学和原位末端标记（ISEL）技术,对不同组织学级别150例胶质瘤石蜡标本进行基因蛋白和细胞凋亡的检测。结果：150例胶质瘤中p53、p16、bcl-2、c—fos蛋白的阳性率分别为50．00％、38．67％、61．33％、46．67％;p53、p16、bcl-2蛋白表达差异在各组间均有统计学意义（P〈0．005）,c．fos蛋白表达差异无统计学意义（P〉0．05）;随胶质瘤级别升高,bcl-2蛋白表达水平增高,瘤细胞凋亡减少,但差异无显著性（P〉0．05）。结论：p53、p16、bcl-2、c—fos基因的异常表达在胶质瘤的发生、发展过程中起重要作用。p53、p16、bcl-2、c—fos基因的协同作用促使细胞凋亡机制障碍,细胞增殖和凋亡失控。p53、p16、bcl-2、c—fos基因蛋白的检测对判断预后、指导临床基因治疗有重要意义。     

人脑垂体腺瘤 p16、hst基因和细胞增殖周期检测及其调控机制探讨

目的探讨垂体腺瘤中p16、hst基因表达及细胞增殖周期的改变与其肿瘤发生、瘤体大小、侵袭性生长方式等之间的关系.方法运用RT-PCR、Western blot分别检测70例垂体腺瘤,免疫组化ABC法检测48例垂体腺瘤,FCM技术检测40例垂体腺瘤细胞增殖周期.结果垂体腺瘤中较广泛存在p16 mRNA和p16蛋白表达缺失或低下,分别为78.6% (55/70)和84.3%(59/70),两者成高度正相关(P<0.01).p16表达缺失或低下肿瘤的体积为2.21±0.72 cm3,明显高于阳性表达肿瘤的0.80±0.45 cm3 (P<0.01).侵袭性垂体腺瘤hst表达阳性率为55.6% (10/18),非侵袭性垂体腺瘤hst表达阳性率为13.3% (4/30),有显著性差异(P<0.01).hst表达阳性肿瘤体积为3.68±1.02 cm3,显著大于hst表达阴性肿瘤的体积2.16±1.12 cm3 (P<0.05).细胞增殖周期分析,侵袭性垂体腺瘤DI、PI及S期细胞比例分别为1.38±0.62、11.35±1.26和4.0±1.96,显著高于非侵袭性垂体腺瘤1.17±0.31、7.28±0.80和1.95±1.02 (P<0.05).结论垂体腺瘤组织形态属良性,却存在不同类型的生物学特性.这些生物学特性的改变与其瘤体大小、侵袭性生长方式等肿瘤特性相关,并为垂体腺瘤的个体化诊治及预后的评价提供重要的依据.     

bcl—2、P53和p21基因蛋白在肝细胞癌中的表达及意义

目的：了解抑凋亡基因bcl-2、抑癌基因p53和癌基因p21基因蛋白在肝细胞癌（HCC）中的表达状况及意义。方法：用bcl-2、p53和p21基因蛋白抗体对55例肝细胞癌合并结节性肝硬变手术标本进行S－P免疫组化检测,分析基因蛋白表达率与病理分级和预后的关系。结果：bcl-2基因蛋白在HCC和结节性肝硬变中的表达率分别为72．7％（40／55）和36．4％（20／55）,两者存在差异（P＜0．05）;p53蛋白在HCC中表达率为54．5％（30／55）,而肝硬变组织均呈阴性表达,两者存在显著差异（P＜0．01）;p21蛋白在HCC和结节性肝硬变中的表达率分别为63．6％（35／55）和38．2％（21／55）,两者无差异（P＞0．05）;而bcl-2、p53和p21的表达率和表达强度均与HCC的病理分级无关（P＞0．05）。另外,在随访29例HCC患者中发现生存率短组（6个月至1年）的16例中,bcl-2、p53和p21的共同表达率为50％（8／16）。研究结果提示：HCC的发生、发展与bcl-2、p53和p21蛋白的异常表达或突变有关;bcl-2、p53和p21之间可能存在相互协同作用,对HCC的预后有一定的影响;bcl-2、p53和p21蛋白过度表达反应了HCC癌细胞的分化程度及增殖情况,因而可作为HCC诊断和预后的参考指标之一。     

肺肿瘤癌基因与抑癌基因表达的研究

目的探讨癌基因与抑癌基因的表达与肺癌发生、发展的关系。方法对61例肺肿瘤标本,用免疫组化方法同时检测癌基因Bcl-2、抑癌基因视网膜母细胞瘤(Rb)、p53、p16。结果Rb与p16表达、p53与Bcl-2表达呈负相关(P<0．05),Rb与p53表达、p16与Bcl-2表达呈正相关(P<0．05)。结论肺癌的发生与发展是癌基因激活、抑癌基因失活及细胞凋亡调控基因异常等多基因损害的积累过程和协同作用使各细胞增殖调控途径失控,最终导致肺癌发生并使肺癌发展。     

乳腺癌组织中抗凋亡基因survivin、P53和PCNA蛋白的表达及其相关性的探讨

目的 检测乳腺癌组织中生存素(survlvin)、p53和PCNA蛋白的表达，探讨它们对肿瘤凋亡通路调节的机制，进一步了解与凋亡相关的两个蛋白的内在联系。方法 用免疫组织化学法检测40例乳腺癌和15例乳腺良性肿瘤survivin、p53和PCNA蛋白的表达。结果 乳腺癌组织中survivin、p53和PCNA的阳性率分别为90％、37．5％和100％。Survivin的表达在良、恶性乳腺肿瘤间有显著差别(P=0．001)。Survivin基因阳性表达与患者年龄、p53蛋白的表达无相关性(P＞0．05)；与肿瘤组织学类型有关，预后好的髓样癌和粘液腺癌阳性程度较低，而预后差的浸润性小叶癌和浸润性导管癌阳性程度较高，两者差异有显著性差别(P＜0．05)。Survivin的表达与PCNA密切相关，表明乳腺癌细胞增殖大于凋亡。结论 抗凋亡基因survlvin和增殖细胞核抗原PC-NA的高表达、p53蛋白的失活抑制了肿瘤的凋亡，也预示着肿瘤的预后不佳。Survivin可能是乳腺癌中一个独立的预后指标。     

凋亡抑制基因survivin在膀胱移行细胞癌中表达的初步研究

目的:探讨新的凋亡抑制基因 survivin在膀胱移行细胞癌(bladder transitional cell cancer,BTCC)中的表达,及其与p53、bcl-2和ki67基因表达的相关性.方法:应用免疫组织化学链霉抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法(SP法),检测survivin、bcl-2、p53和ki67在58例BTCC中的表达,另选10例癌旁正常组织作对照.结果:survivin基因在癌旁正常组织中无表达,而在BTCC中呈高表达,survivin的表达与BTCC的临床分期和病理分级密切相关.58例BTCC中,41例表达阳性,占70.7%.同时发现survivin的表达与p53、bcl-2、ki67的表达也密切相关.结论:survivin基因的过度表达单独或和p53、bcl2、ki67协同在BTCC的发生发展中起重要作用,其过度表达提示BTCC预后不良.survivin可能会成为膀胱移行细胞癌一个新的诊断指标和治疗的靶点.     

p53、bcl—2基因在喉鳞癌中的蛋白表达及其临床意义

目的 探讨细胞凋亡相关基因p53,bcl-2与喉鳞癌的关系。方法 应用免疫组化ABC法对60例喉鳞癌和8例声带息肉标本中的p53,bcl-2基因的蛋白表达进行检测。结果 60例喉鳞癌中p53,bcl-2基因蛋白的表达阳性率均较高,分别为61．7％（37／60）和43．3％（26／60）,并且其阳性表达率与喉鳞癌的病理分化程度和预淋巴结转移有关（P＜0．05）。而与喉鳞癌的临床分期和分型无关（P＞0．05）。8例声带息肉标本的p53,bcl-2基因蛋白的表达均为阴性。结论 本实验从蛋白水平上证实了喉鳞癌与p53,bcl-2基因的关系,提示此两种基因可能参与了喉鳞癌细胞凋亡的调节,对喉鳞癌的发生可能起着重要的作用。     

大肠腺瘤及腺癌细胞凋亡与p53和bcl-2的表达

目的探讨大肠粘膜癌变中细胞增殖和凋亡的特征以及凋亡相关调控基因的表达。方法对60例大肠腺瘤．癌用原位末端标记（TUNEL）法检测细胞凋亡,免疫组化SP法检测PCNA增殖指数（proliferative index,PI）及bcl-2和p53蛋白的表达。另选大肠高分化腺癌和正常粘膜20例作为对照检测。结果①正常粘膜、腺瘤和腺癌的p53蛋白表达率为5％、33．3％和70％。三组间有显著的差异（P均〈0．05）。②正常粘膜、腺瘤和腺癌的bcl-2蛋白表达率分别为15％、70％和65％．腺瘤和腺癌组均高于正常对照组（P均〈0．01）,腺瘤与腺癌组间差异不显著（P均〉0．05）。③大肠腺瘤和腺癌细胞的凋亡指数（AI）均高于正常粘膜（P均〈0．01）,bcl-2和p53蛋白的表达率与细胞AI呈显著负相关（rs=-0．66,rs=-0．62）。结论凋亡和增殖在肿瘤的发生、发展、转化中起着重要作用,上述指标的联合检测可以作为临床早期判断人肠腺瘤癌变的重要参考指标。     

转染survivin对HLF细胞增殖及凋亡的影响

【目的】 探讨survivin基因表达对人肺纤维母细胞（humanlungfibroblast，HLF）增殖、凋亡的影响。【方法】 构建survivin基因真核表达质粒peDNA3．1／SVN；利用脂质体转染法将其转入不表达survivin mRNA的HLF细胞系。连续培养10周。筛选出稳定表达的阳性克隆（HLF／SVN）及转空质粒对照（HLF／K）。用RT-PCR、免疫组化、Western blot检测细胞中survivin、bel-2和caspase3mRNA表达：通过观察细胞生长曲线、细胞凋亡指数。探讨转染survivin基因对HLF细胞生长、凋亡的影响。【结果】转染peDNA3．1／SVN后。在4、6、8和10周HLF／SVN细胞查见survivinmRNA表达；免疫组化和Westernblot见HLF／SVN细胞survivin阳性表达；转染后caspase3mRNA受到抑制，表达减弱或消失。HLF／SVN细胞凋亡指数（0．3％、1．0％、1．5％）皆低于HLF（0．9％、4．3％、2．1％）及HLF／K（0．8％、1．4％、2．8％）。细胞生长曲线示HLF／SVN细胞生长快于HLF和HLF／K，差异有统计学意义（P〈0．05）。【结论】survivin基因能促进HLF细胞生长。可能通过抑制凋亡和促进细胞分裂而发挥作用。     

转染survivin对HLF细胞增殖及凋亡的影响

 【【目的】 探讨survivin基因表达对人肺纤维母细胞（humanlungfibroblast，HLF）增殖、凋亡的影响。【方法】 构建survivin基因真核表达质粒peDNA3．1／SVN；利用脂质体转染法将其转入不表达survivin mRNA的HLF细胞系。连续培养10周。筛选出稳定表达的阳性克隆（HLF／SVN）及转空质粒对照（HLF／K）。用RT-PCR、免疫组化、Western blot检测细胞中survivin、bel-2和caspase3mRNA表达：通过观察细胞生长曲线、细胞凋亡指数。探讨转染survivin基因对HLF细胞生长、凋亡的影响。【结果】转染peDNA3．1／SVN后。在4、6、8和10周HLF／SVN细胞查见survivinmRNA表达；免疫组化和Westernblot见HLF／SVN细胞survivin阳性表达；转染后caspase3mRNA受到抑制，表达减弱或消失。HLF／SVN细胞凋亡指数（0．3％、1．0％、1．5％）皆低于HLF（0．9％、4．3％、2．1％）及HLF／K（0．8％、1．4％、2．8％）。细胞生长曲线示HLF／SVN细胞生长快于HLF和HLF／K，差异有统计学意义（P〈0．05）。【结论】survivin基因能促进HLF细胞生长。可能通过抑制凋亡和促进细胞分裂而发挥作用。     

Apoptin基因诱导膀胱癌耐药细胞凋亡的研究

目的观察Apoptin基因对膀胱癌耐药细胞株EJ／MDR细胞的杀伤效果，探讨其可能的机制。方法用脂质体将Apoptin基因导人EJ／MDR细胞，通过RT-PCR法检测ApoptinmRNA的表达，同时用SABC免疫组化法分析Apoptin和p53的表达。采用细胞计数法检测细胞生长抑制率，TUNEL法标记凋亡细胞，流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果转入Apoptin基因后，EJ／MDR细胞的生长明显受抑制（P％0．05）。细胞周期分析可见凋亡峰，凋亡率35％。细胞中可见Apoptin阳性表达（P〈0．05），p53表达无显著性差异（P〉0．05）。凋亡细胞在荧光显微镜下形成凋亡小体。结论转入Apoptin基因可显著促进EJ／MDR细胞的凋亡，Apoptin诱导的凋亡不依赖功能性p53的生成。     

老年人结直肠腺瘤癌变细胞凋亡及免疫组化研究

目的了解结直肠腺瘤癌变转化过程中细胞增殖与凋亡相关基因表达在癌变过程中的作用,并寻求判断腺瘤癌变的分子生物学指标。方法应用免疫组化法检测61例结直肠腺瘤癌变标本中p53、bcl-2、Fas、bax在腺瘤癌变区及腺瘤轻、重度异型增生区的表达;以ki-67指数和TUNEL法计量细胞增殖率及凋亡率。结果61例结直肠腺瘤癌变标本中p53蛋自在腺瘤癌变区、重度异型增生区及轻度异型增生区的表达分别为67．2％、57．4％和19．7％;bcl-2蛋白的表达分别为77．1％、80．3％和49．2％;腺瘤癌变区、重度异型增生区及轻度异型增生区的平均ki-67指数分别为38．4％、36．5％和16．1％;平均细胞凋亡指数分别为2．2％、1．9％及0．5％。p53蛋白、bcl-2蛋白的表达和ki-67指数、细胞凋亡指数在腺瘤重度异型增生区与癌变区比轻度异型增生区显著增高（P〈0．05）。结论凋亡抑制和增殖异常共同参与了腺瘤癌变的转化过程。重度异型增生是一类具有明显癌变倾向的病变,检测上述蛋白可作为腺瘤癌变早期诊断的重要参考指标。