Ri质粒转化植物用于生产天然活性成分的研究进展(Ⅰ)

Ri质粒转化植物产生的发根生长迅速，能合成与原植物相同或相似的次生代谢物，在生产植物天然活性成分方面具有广阔的应用前景。作者对Ri质粒的分类及转化植物的机制，发根农杆菌感染植物的方法及发根的产生与鉴定，发根培养物的特点等方面作了较详细的综述。     

Ri质粒转化植物用于生产天然活性成分的研究进展(Ⅰ)

Ｒｉ质粒子转化植物产生的发根生长迅速，能合成与原植物相同或相似的次生代谢物，在生产植物天然活性成分方面具有广阔的应用前景，作者对Ｒｉ质粒的分类及转化植物的机制，发根农杆菌感染植物的方法及发根的产生与鉴定，发根培养物的特点等方面作了较详细的综述。     

发根农杆菌Ri质粒及在药用植物中的应用

近年来，随着西药抗药性及药源性疾病的增加，化学合成药由于合成困难，使得天然植物成为药用原料的主要来源之一，但由于盲目挖掘等原因，药用植物资源日渐匮乏，人工栽培品种又面临着品质退化等问题，植物中药用成分含量低，大规模提取会破坏生态平衡，用植物细胞培养的方法由于基因不稳定，需添加外源激素，不安全，大规模工业生产困难，使得从植物中获得药用产品受到很大限制？     

人参Ri质粒转化及代谢产物对HepG2细胞的作用

目的:发状根生产的次生代谢产物含量比植物自身合成的含量高几倍甚至几十倍,利用人参发状根可以生产大量人参皂苷,并有效的抑制癌细胞的增值。方法:通过正交试验设计筛选人参发状根诱导的条件,通过发状根生物积累量和皂苷含量的测定确定培养条件,然后利用MTT法测定了人参皂苷对HepG2细胞的影响。结果:本实验优化了人参发状根的最佳诱导条件,吸光度A 0.6,侵染时间为10 min,预培养时间为3 d,筛选出发状根的最佳培养条件,MS培养基,pH 6.1,24℃培养时,发状根的生物积累量和皂苷含量均较高,采用人参总皂苷对肝癌细胞HepG2的抑制效果进行研究,证实人参总皂苷对HepG2的抑制率与给药浓度呈正相关。结论:筛选出最适的人参发状根诱导及培养条件,不同部位的总皂苷对肝癌细胞HepG2的增殖均具有抑制作用。     

Ri质粒人参转化系统的建立及鉴定

目的 :建立人参毛状根转化体系。方法 :利用含有Ri质粒的发根农杆菌Agrobacterium rhizogenes感染人参Panax ginseng进行毛状根诱导 ,利用PCR技术及TLC分析方法对毛状根进行鉴定。 结果 :首次从人参带叶幼茎处诱导出毛状根 ,用激素和AS(乙酰丁香酮 )处理可提高转化率并缩短转化时间。毛状根在无激素B5培养基上生长并失去向地性 ,月增长倍数可达 50倍 (鲜重 )。PCR分析证实农杆菌Ri质粒含有rolC序列 (564bp)的T DNA已整合到人参转化株的染色体组中 ,TLC分析证明T DNA特异的表达产物冠瘿碱在转化细胞中合成。人参毛状根中人参总皂苷含量为 2.486% (干重 ) ,而人参原药材总皂苷含量为 1.403% (干重 )。结论 :人参毛状根生长迅速 ,皂苷含量高于原药材 ,该体系的建立为利用生物技术工业化生产人参活性成分奠定了基础。     

(+)-伪麻黄碱向(-)-麻黄碱的转化

目的：研究用“一步法”由（＋）－伪麻黄碱向（－）－麻黄碱的转化 。方法：加入等摩尔量的乙肝作催进剂,以冰醋酸为溶剂,回流反应１．５－４h。结果：（＋）－的麻黄碱以８０％－８５％的产率转化为（－）－麻黄碱。结论 本方法步骤少,操作简单,时间短,转化率高,后处理简便,成本低,易于工业在生产,具有良好的经济效益和社会效益。     

黄花蒿发根的生长及部分代谢成分的特征研究

目的:研究黄花蒿发根的生长形态和部分次生代谢物特征。方法:比较发根和未转化根的形态差异,测定生长调节剂如萘乙酸(NAA)和赤霉素(GA3)对根生长的影响,分析了发根和未转化根的部分次生代谢物的含量特征。结果:低浓度NAA(0.01～0.05 mg.L-1)能明显促进发根侧根和次侧根的形成,对未转化根则无显著作用,高浓度NAA(0.1 mg.L-1)抑制发根的生长,而对未转化根的生长起促进作用。未转化根中不含有青蒿素,而在发根中检测到较高含量的青蒿素(0.64 mg.g-1),未转化根中青蒿乙素含量较高(1.24 mg.g-1)。在未转化根和发根中,青蒿黄酮chrysoplenetin含量相当,而发根中另一种黄酮化合物artemitin含量(0.76 mg.g-1)是未转化根的3.5倍。结论:黄花蒿发根具有较独特的生长和次生代谢特征。     

Ti和Ri质粒对栝楼双转化的研究

目的 :建立栝楼双转化毛状根培养系统。方法 :①利用根癌农杆菌Agrobacterium tumefaciens菌株C58感染栝楼Trichosanthes kirilowii.无菌苗诱导冠瘿瘤 ,然后用发根农杆菌Agrobacterium rhizogenes菌株 15834感染其再生植株 ,诱导出毛状根 ;②用纸电泳检测Ti和Ri质粒是否转化成功 ;③运用分光光度计和SDS PAGE检测栝楼组织中所含蛋白。结果 :Ti和Ri质粒转化成功并建立了栝楼双转化毛状根培养系统。结论 :双转化毛状根与一般毛状根相比 ,具有生长更迅速等特点而蛋白含量基本一样 ;因此 ,利用它来生产天花粉蛋白更具有开发潜力。     

甘草Ri质粒转化及不同理化因子对甘草毛状根生长的影响

目的:研究甘草毛状根的诱导及外界因子对其生长的影响。方法:用发根农杆菌Agrobacterium rhizo-genesLBA9402和R1601感染甘草Glycyrrhiza uralensis外植体。结果:2种发根农杆菌均能诱导甘草产生毛状根,LBA9402比R1601表现出较强的对甘草的感染能力,下胚轴的转化率高于子叶。在WP培养基上毛状根生长最快。光照对毛状根生长有抑制作用。毛状根中5种黄酮类化合物的总量比愈伤组织中高1.5倍,其中甘草查耳酮含量是愈伤组织中的15.5倍。结论:本实验所建立的甘草毛状根培养系统,为研究甘草毛状根大量培养生产黄酮类化合物奠定了基础。     

天然植物挥发油干预2型糖尿病的机制研究进展

2型糖尿病是以胰岛素分泌不足及胰岛素抵抗（IR）为主要病因的异质性疾病,且常伴随着并发症的出现。挥发油是从天然植物中提取的具有挥发性的油状液体,具有理气、止痛、抑菌、消炎等多种药理作用。近年来,关于天然植物挥发油及其有效成分治疗2型糖尿病的报道层出不穷,已成为治疗2型糖尿病研究的新方向之一。该文以天然植物挥发油及其有效成分为切入点,综合分析和总结了近年来国内外挥发油治疗2型糖尿病及其并发症的物质基础、作用机制及信号通路,着重阐述了挥发油及其有效成分如香芹酚、丹皮酚、β-石竹烯等,通过保护胰岛β细胞、抑制α-葡萄糖苷酶活性、调节肠道菌群丰度及多样性,以及调控葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）、腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）、磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号通路等多种途径抑制IR,多种作用机制改善2型糖尿病,以期为挥发油干预2型糖尿病及新型绿色降糖药的开发提供一些参考和依据。     

天然植物中活性成分白藜芦醇的作用研究进展

<正>白藜芦醇(Resveratrol,Res),化学名3,4’,5-三羟基-反-均二苯代乙烯(3,4’,5-trihydroxysitlbene),分子式C14H12O3,分子量228.2,是许多植物中存在的一种活性非黄酮类多酚化合物,呈白色针状晶体,难溶于水,能溶于乙醇,乙酸乙酯,丙酮等极性强的溶剂中。1940年首次发现该成     

通过GSDMs介导细胞焦亡的天然药物成分在抗肿瘤治疗中的研究进展

近年来发现除凋亡、坏死外的一种非典型新型细胞死亡方式——细胞焦亡,其生物学特征为依赖于胱天蛋白酶（Caspases）家族蛋白切割焦孔素家族（GSDMs）蛋白,使活化的GSDMs蛋白在质膜上作用形成穿孔,导致细胞肿胀裂解,引发炎症及免疫反应。目前,有4种不同的信号途径可诱导细胞焦亡,包括经典和非经典炎性小体通路、凋亡相关Caspases介导的通路和基于颗粒酶的焦亡通路。在这些信号通路中,GSDMs蛋白是最终的细胞焦亡执行者。细胞焦亡与肿瘤细胞死亡及正常组织炎性损伤密切相关,近年的研究发现,适度的细胞焦亡会导致肿瘤细胞死亡,发挥抗肿瘤作用,同时刺激肿瘤免疫微环境;而细胞焦亡不当激活又可促进肿瘤发展。药物抗肿瘤治疗中,如肿瘤免疫治疗、化疗、靶向治疗等手段发挥了较好的抗肿瘤作用,但仍存在耐药、复发、损伤正常组织等不足,而最新的研究表明多种天然药物成分具有通过介导焦亡途径的抗肿瘤作用及辅助抗肿瘤作用,且有多靶点和多通路的特点,这为抗肿瘤治疗的研究提供了新的思路和方法。笔者对细胞焦亡的分子机制、焦亡在肿瘤及肿瘤免疫微环境中的调控作用进行综述,同时重点对调控细胞焦亡的相关天然药物成分在抗肿瘤治疗中的新近研究进行总结,以期为基于细胞焦亡的抗肿瘤治疗与研究提供思路。     

天然植物活性成分通过转录因子调节UGT的研究进展

尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶能催化诱变剂,内源性和包括草药中的植物活性物质在内的外源性物质与辅因子尿苷二磷酸葡萄糖醛酸结合。作为药理活性分子的前体,植物化学物质已经受到越来越多的关注。在中药和常见药物的使用中,植物化学物质对UGT的表达应该没有显著的影响。然而,大量的植物化学物质可以通过调控各种转录因子影响UGT基因表达,并诱导药物间的相互作用。本文总结了植物化学物质通过13个关键转录因子AhR、CAR、PXR、PPARα、LXR、FXR、Nrf2、HNF1α、HNF3α、HNF4α、ERα、AR、NF-kB调节人UGT基因表达的当前研究进展,并对其潜在的机制进行了讨论。     

马山前胡化学成分的研究(Ⅱ)

从广西特有的前胡属植物马山前胡Peucedanummashanense根中分得4个化合物，经理化常数和波谱分析，鉴定为3'（R）-（＋）-亥茅酚（Ⅰ），3'（S）-（－）-亥茅酚（Ⅱ），褐煤酸（Ⅲ）和甘露醇（Ⅳ）。化合物Ⅰ为首次从自然界分得，其余均为首次从该植物中分得。     

基于上皮间质转化的人参活性成分抗肿瘤作用的研究进展

上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)是胚胎发育、细胞纤维化及肿瘤转移过程中的重要环节,其因可促进肿瘤细胞侵袭和扩散而成为肿瘤转移的关键促进剂,也是许多肿瘤的最终病理变化过程。在EMT过程中,上皮细胞失去极化结构并获得迁移和侵袭能力,导致肿瘤转移,是造成恶性肿瘤临床治疗失败且死亡率高的重要原因之一。研究表明,人参活性成分在不同类型肿瘤的EMT过程中均可发挥抑制作用,具有较好的临床疗效且不良反应少。因此,总结人参活性成分通过抑制EMT过程的抗肿瘤作用,以期为肿瘤治疗提供新思路以及为新型抗肿瘤中药的开发提供支撑。     

柚皮甙抗氧化活性与心血管疾病关系的研究进展

柚皮甙（苷）（NG）又称柚甙、柑橘甙、异橙皮甙,属二氢黄酮类化合物,主要存在于芸香科植物葡萄柚、橘、橙的果皮和果肉中,也是中草药骨碎补、枳实枳壳、橘红的主要有效成分。研究表明,柚皮甙在抗氧化、降血脂、抗肿瘤、抗真菌、抗动脉粥样硬化、镇痛、镇静、解痉、调节血糖等方面具有较强的生物活性。本文就其抗氧化活性与心血管疾病关系的研究现状进行综述。     

Ⅱ型糖尿病患者血清脂蛋白(α)水平的变化

采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）测定50例Ⅱ型糖型尿病人血清脂蛋白（α）水平并与正常对照比较,以了解Ⅱ型糖尿病人血清脂蛋白（α）的变化。结果显示：Ⅱ型糖尿病人血清脂蛋白（α）水平较正常对照明显升高,病程长短及血脂水平对其影响不著,而出现血管并发症时进一步升高。提示Ⅱ型糖尿病人血清脂蛋白（α）水平升高,并可能与血管并发症相关。     

植物源抗菌活性成分的研究进展

介绍近年来国内外研究发现的多种已知结构类型及新结构类型的植物源抗菌活性成分。简要归纳了其抗菌活性及其相应的MIC值。同时对构效关系进行了分析。并对其中抗菌活性较强。具有进一步研究开发价值的化合物及结构类型进行了概括。     

中药活性成分调节MAPK信号通路抗食管鳞癌的研究进展

食管鳞癌（ESCC）是中国最主要的食管癌组织学分型,其发病机制复杂,可能与多个基因发生突变及丝裂原活化蛋白激酶（MAPK） 通路、磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）通路等失调有关。MAPK信号通路可以被生长因子、原癌基因、氧化应激等激活,从而参与细胞的增殖、分化、迁移、凋亡等生物学功能。越来越多的证据表明MAPK信号通路在ESCC的发生发展中起到重要的作用,有望成为ESCC治疗的有效靶点。经典的MAPK家族包括细胞外信号调节激酶1/2（ERK1/2）、c-Jun氨基末端激酶1/2/3（JNK1/2/3）、p38激酶α/β/γ/δ（p38α/β/γ/δ）和细胞外信号调节激酶5（ERK5）,每条通路由3种级联顺序磷酸化激活的蛋白激酶体系构成。其中ERK1/2通路的激活与ESCC的增殖、迁移、耐药及凋亡抑制有关,JNK、p38、ERK5通路似乎表现出双向调节作用,并且存在MAPK内部通路之间的信号整合。食管癌化疗药物往往不良反应较大且易产生耐药性,寻找高效、低毒的药物替代治疗成为一种新的思路。研究发现黄酮类、萜类、生物碱类、皂苷类、酚类等中药活性成分能够通过靶向MAPK通路发挥抗ESCC作用,主要体现在抑制增殖、迁移、侵袭,诱导周期阻滞,促凋亡,逆转耐药等方面。因此该文就MAPK信号通路在ESCC中的调节作用及中药活性成分调节MAPK通路抗ESCC的研究进展进行总结,以期为中药防治食管癌的机制研究和新药开发提供参考。