肝细胞黏附分子对膀胱移行癌细胞基因表达谱的影响

目的利用Affymetrix基因表达谱芯片探讨肝细胞黏附分子(hepaCAM)对膀胱移行癌细胞基因表达谱的影响及作用的分子机制。方法运用Affymetrix Human plus 2.0全基因组芯片检测膀胱移行癌细胞株EJ细胞腺病毒-绿色荧光蛋白-hepaCAM感染组与腺病毒-绿色荧光蛋白感染组的基因表达谱,用SAM法进行差异基因分析、DAVID软件进行基因本体论分析及wikiPathway分析,并用RT-PCR和Western blot验证芯片结果。结果 hepaCAM能引起EJ细胞系基因表达谱的广泛变化,表达差异超过2倍以上的基因共2469个,其中上调基因1602个、下调基因867个。这些差异表达的基因功能主要涉及细胞周期、细胞增殖调节等方面。用RT-PCR对差异基因DNA修复蛋白,肝脏激酶B1和细胞周期蛋白D1进行验证,结果与基因芯片相符;进一步在3细胞株中用Western blot佐证DNA修复蛋白、肝脏激酶B1变化与芯片结果一致。结论 hepaCAM能够诱导EJ细胞基因表达谱的广泛变化,在基因水平通过多条通路作用于膀胱癌细胞。     

细胞黏附分子CD44变异体V6和上皮性钙黏附素在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义

目的:探讨细胞黏附分子CD44的变异体V6(CD44V6)和七皮性钙黏附素(E-cad)在膀胱移行细胞癌(BTCC)中的表达及其临床意义.方法:应用SP免疫组化染色法检测87例膀胱移行细胞癌组织和10例正常组织中CD44V6和E-cad的表达.结果:正常膀胱黏膜CD44v6,E-cad均呈正常表达,细胞膜为黄褐色.87例膀胱癌组织中,CD44V6正常表达55.2%(48/87)、E-cad正常表达63.2%(55/87).CD44V6和E-cad在膀胱移行细胞癌组织中的表达与肿瘤的病理分级、临床分期及复发显著相关(P<0.05).结论:CD44V6和E-cad阳性表达率与膀胱移行细胞癌的生物学特性密切相关,其表达率降低表明肿瘤恶性程度增强.     

VEGF在膀胱移行细胞癌中的表达及意义

目的：探讨膀胱移行细胞癌中血管内皮生长因子（VEGF）的表达及其与临床病理指标的关系。方法：应用免疫组化方法对40例膀胱移行细胞癌及15例正常膀胱组织中VEGF进行检测。结果：正常膀胱移行上皮均为阴性表达；膀胱移行细胞癌中VEGF阳性表达24例，表达率为60％（24／40），明显高于正常膀胱组织（P＜0.01），其中VEGF表达阳性率随膀胱癌病理分级、临床分期上升而升高，表达强度也随之增强（P＜0.01）。结论：VEGF表达对膀胱移行细胞癌生物学行为有重要影响，VEGF有可能可作为判断膀胱癌生物学行为、转移潜能及预后指标。     

环氧化酶在膀胱移行细胞癌中的表达

目的　了解环氧化酶 (COX)在膀胱移行细胞癌中的表达及其与肿瘤分期和分级的关系。方法　对34例开放手术切除的膀胱癌组织标本及对照组 7例肾移植供体正常膀胱组织标本运用 COX- 1及 COX- 2的单克隆抗体进行免疫组织化学染色检测表达情况 ;并运用 RT- PCR对 COX- 1及 COX- 2的 m RNA表达进行检测。结果正常膀胱中未见 COX- 2表达 ,而在膀胱移行细胞癌细胞中均有 COX- 2表达。在移行细胞癌组织中 COX- 2的表达强度随肿瘤分级程度的增加呈现升高趋势 (P<0 .0 0 1)。肿瘤临床各期的 COX- 2免疫组织化学染色程度未见明显统计学差异 (P值均 >0 .0 5 )。COX- 1在膀胱移行细胞癌和正常膀胱中均有表达。结论　环氧化酶 - 2在膀胱移行细胞癌中异常表达 ,该异常表达可能与膀胱移行细胞癌的发生发展有关。     

PCNA与nm23在膀胱移行细胞癌中的表达及意义

目的 :研究增殖细胞核抗原 (PCNA)与转移抑制基因 (nm2 3)在膀胱移行细胞癌中的表达 ,发现其与膀胱移行细胞癌生物学行为的关系及其临床和病理意义。方法 :采用免疫组化S -P法 ,测定PCNA、nm2 3在 78例膀胱移行细胞癌中的表达。用阳性水平指数 (PLT)作为表示PCNA、nm2 3基因蛋白表达水平指标。阳性水平指数(PLI) =阳性细胞百分率P/A(% )×平均光密度 (AOD)。结果 :8例正常膀胱黏膜细胞核均有PCNA阳性表达。与肿瘤相比 ,差异具有显著性 (P <0 0 1 )。 8例正常膀胱黏膜均有nm2 3表达 ,与肿瘤相比 ,差异具有显著性 (P <0 0 1 )。PCNA在膀胱移行细胞癌中表达与分期呈正相关 (P <0 0 1 ) ,与分级呈正相关关系 (P <0 0 1 ) ,与肿瘤大小呈正相关 (P <0 0 1 )。nm2 3在膀胱移行细胞癌中表达与分期、分级、大小不相关。二者在膀胱移行细胞癌中的表达均与复发与否相关 ,其中PCNA表达与复发与否呈正相关 ,P <0 0 1。nm2 3表达与复发与否呈负相关 ,P <0 0 1。结论 :用阳性水平指数 ,作为免疫组化研究阳性表达水平指标 ,使研究由定性、半定量转化为定量 ,便于科学的统计分析。测定PCNA、nm2 3在膀胱移行细胞癌中的表达 ,具重要的临床指导意义。PCNA表达的阳性水平可用于肿瘤良恶性的鉴别。利用阳性水平指数 ,     

COX-2在膀胱移行细胞癌中的表达及意义

目的研究膀胱移行细胞癌中COX-2表达及其与肿瘤临床分期、病理分级、复发和转移的关系。方法采用免疫组化技术检测40例膀胱移行细胞癌组织和12例正常膀胱黏膜组织中COX-2蛋白表达，并分析其与膀胱癌临床分期、病理分级、复发和转移的关系。结果膀胱移行细胞癌组织中COX-2蛋白表达增高，阳性率为77．5％；并随肿瘤分期、分级增高而增高，复发组高于无复发组，转移组高于未转移组。结论膀胱移行细胞癌组织中COX-2蛋白高表达，并与肿瘤临床分期、病理分级、复发和转移有关，对膀胱癌的诊断和判断预后有一定的意义。     

凋亡抑制基因XIAP在膀胱移行细胞癌中的表达

目的研究凋亡抑制基因XIAP在膀胱移行细胞癌组织中的表达,以探讨其在膀胱癌发生、发展中的作用。方法应用RT-PCR和免疫组织化学(SP)法,检测XIAP在60例膀胱移行细胞癌和10例非肿瘤膀胱组织中的表达情况。结果60例膀胱癌组织中XIAP基因阳性表达率为63.3%,XIAP蛋白阳性表达率65.0%,10例非肿瘤膀胱组织无1例XIAP表达阳性;XIAP的表达与膀胱癌的病理分级、临床分期无关;21例复发性膀胱癌组织中XIAP蛋白阳性表达率(90.5%)明显高于原发性膀胱癌(51.3%,P<0.05)。结论XIAP在膀胱癌的发生发展中具有重要意义,XIAP可作为反映膀胱癌生物学行为的指标之一,用于膀胱癌术后复发、预后的预测。     

Survivin在膀胱移行细胞癌中的表达及意义

目的：探讨膀胱移行细胞癌urvivin表达程度与分级的关系，以及尿脱落细胞中Survivin表达的意义。方法：采用免疫组化方法检测膀胱移行细胞癌中Survivin的表达，并用免疫组化图像分析系统分析其阳性率及表达程度。结果：Survivin在各级膀胱移行细胞癌中都有表达，但表达的程度不同，I级膀胱移行细胞癌呈弱阳性，Ⅱ级膀胱移行上皮细胞癌呈中度阳性，Ⅲ级膀胱移行上皮细胞癌呈强阳性。结论：Survivin是诊断膀胱移行细胞癌的优良指标。尿脱落细胞中Survivin的表达可作为诊断膀胱移行细胞癌的筛选试验。     

抑癌基因P16在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义

目的　探讨抑癌基因P16蛋白在膀胱移行细胞癌中的表达。方法　采用S -P放射免疫法检测 3 2例膀胱移行细胞癌、10例正常膀胱粘膜中P16蛋白的表达。结果　 3 2例膀胱移行细胞癌中 ,P16蛋白表达总阳性率为 40 .63 % ;在膀胱移行细胞癌Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级中分别为 63 .64 %、3 3 .3 3 %、2 5 .0 0 %。P16蛋白表达的阳性率随病理分级增高而降低 ,Ⅰ级与Ⅱ级、Ⅲ级比较差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　P16蛋白检测有助于对膀胱移行细胞癌的诊断 ;P16蛋白的缺失与膀胱移行细胞癌的发生、发展和预后有关。     

膀胱移行细胞癌组织中MAGE-A基因的表达

目的:研究膀胱移行细胞癌中黑色素瘤抗原(MAGE)基因mRNA的表达及其临床意义。方法:采用逆转录聚合酶链反应技术检测35例膀胱移行细胞癌患者癌组织(新鲜标本)MAGE-A1、MAGE-A3及MAGE-A12基因mRNA表达。结果:35例膀胱膀胱移行细胞癌组织中全部(100%)至少表达1种MAGE-A基因,21例MAGE-A1阳性,19例MAGE-A3阳性,24例MAGE-A12阳性,三者均阳性17例。结论:MAGE基因在膀胱膀胱移行细胞癌中有较高表达,可望成为膀胱移行细胞癌免疫治疗的靶基因。     

hepaCAM基因对膀胱癌细胞体外生物学的影响

目的 研究野生型hepaCAM基因对人类膀胱癌T24细胞体外生物学影响.方法 脂质体法转染pEGFP-N2-hepaCAM质粒入T24细胞,激光共聚焦显微镜检测其蛋白定位;筛选稳定表达细胞株,Western blot检测蛋白表达.细胞黏附、基质胶侵袭实验及MTT实验研究该基因对细胞黏附力、活动力及增殖力的影响.结果 hepaCAM在单个细胞中分布在细胞核周边区域,相互连接细胞中主要分布于细胞间相互接触区域.获得稳定表达hepaCAM基因的T24细胞.体外黏附实验、基质胶侵袭实验证明实验组细胞黏附力及活动力明显高于空白组及阴性对照组(P＜0.01).MTT法检测转染hepaCAM基因细胞增殖力明显低于空白组及阴性对照组(P＜0.01).结论 hepaCAM基因可显著抑制人类膀胱癌T24细胞恶性行为,可能是通过增强细胞-基质间黏附及抑制细胞增殖力,从而对抗肿瘤细胞的浸润和转移.     

膀胱移行细胞癌DBCCR1基因启动子甲基化分析

目的探讨膀胱移行细胞癌DBCCR1基因启动子甲基化状态及其临床意义。方法应用甲基化特异性PCR方法检测40例膀胱移行细胞癌和8例正常膀胱粘膜组织中DBCCRI基因甲基化程度,x^2检验分析其甲基化程度与膀胱癌病理分级分期之间的关系。结果正常膀胱组织未检测到DBCCR1基因启动子甲基化,在膀胱移行细胞癌启动子甲基化扩增阳性化率达42．5％,与膀胱癌病理分级分期没有相关性（P〉0．05）。结论DBCCR1基因启动子异常高甲基化是其失活的主要机制之一,也是膀胱移行细胞癌中一早期事件。     

aFGF在膀胱移行细胞癌中的表达及意义

目的:探讨酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)的表达与膀胱移行细胞癌发生及发展的关系.方法:应用原位杂交(ISH)及RT-PCR方法检测aFGF mRNA在膀胱移行细胞癌中的表达.结果:RT-PCR及ISH结果显示膀胱移行细胞癌中aFGF mRNA表达增高,与分期、转移相关,与分级无关;ISH显示aFGF的阳性染色主要位于间质血管周围.结论:aFGF的表达增高与膀胱移行细胞癌的侵袭、转移密切相关,可作为帮助判断预后的一种指标.     

膀胱移行细胞癌组织中环氧合酶-2蛋白的表达

目的:探讨膀胱移行细胞癌组织中环氧合酶-2(COX-2)蛋白的表达及其与预后的关系.方法:应用免疫组织化学SP法,检测68例膀胱移行细胞癌组织中COX-2蛋白的表达.以10例正常膀胱黏膜组织作对照.结果:汉68例膀胱移行细胞癌组织中,COX-2蛋白表达阳性率63.2%(43/68),正常组织中无COX-2阳性表达.COX-2蛋白表达阳性率随病理分级、临床分期增高而增高,与血管浸润、淋巴结转移和预后相关(P均＜0.05),而与肿瘤大小无关(P＞0.05).结论:COX-2蛋白检测有助于判断膀胱移行细胞癌恶性程度及预后.     

骨桥蛋白在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义

目的 检测膀胱移行癌(TCCB)中骨桥蛋白(OPN)的表达,探索其与膀胱癌的病理分级和临床分期及临床预后的关系.方法 应用免疫组化方法检测45例膀胱移行细胞癌和12 例正常膀胱壁标本中的OPN 表达,并分析OPN表达与肿瘤分期、分级、复发、转移及患者5年生存率之间的关系.结果 12例正常膀胱组织中,11例(96.7%)为阴性,1例(3.3%)为弱阳性;45例膀胱移行细胞癌中21例(46.7%)为强阳性,14例(31.1%)为中等阳性,7例(15.5%)为弱阳性,3例(6.7%)为阴性.OPN 强染色预示患者较高的复发率和较短的生存时间.结论 OPN表达强度同肿瘤分级、分期、复发、转移、5 年生存率有密切关系,可作为临床评估TCCB进展及检测肿瘤预后的指标.     

Cyclooxygenase-2在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨Cyclooxygenase（COX-2）在膀胱移行细胞肿瘤中的表达及临床意义。方法采用免疫组化方法对43例膀胱肿瘤、18例良性膀胱组织中COX-2的表达进行检测，观察分析COX-2在膀胱肿瘤和良性膀胱组织中的表达情况及与临床分期、病理分级的关系。结果COX-2蛋白主要表达于膀胱移行细胞癌的细胞浆中，其阳性例数为27例，阳性率为62．8％，但在正常良性膀胱组织（n=18）中均为阴性表达。在43例膀胱肿瘤中COX-2表达与肿瘤分级和分期有关，恶性程度高的肿瘤阳性表达高于恶性程度低的肿瘤，浸润性癌高于浅表性癌（P〈0．05）。结论COX-2在膀胱移行细胞癌中的表达明显升高且与膀胱肿瘤恶性程度相关．COX-2可能成为判断膀胱移行细胞癌预后的一个重要指标。     

膀胱移行细胞癌中金属蛋白酶组织抑制因子3 的表达及其启动子甲基化的研究

目的检测膀胱移行细胞癌中金属蛋白酶组织抑制因子3(TIMP-3)启动子甲基化及其蛋白表达,探讨TIMP-3在该肿瘤中的作用及临床意义。方法采用免疫组化SP法和高清晰度彩色医学图文分析系统对38例膀胱移行细胞癌和10例正常膀胱黏膜中TIMP-3的表达进行检测分析,用甲基化特异的PCR(MSP)法检测TIMP-3基因启动子的甲基化状态。结果TIMP-3在膀胱癌中呈高表达,且与分级呈正相关,但不与分期相关,其启动子甲基化发生率为5.3%(2/38)。结论TIMP-3参与膀胱癌侵袭转移,其启动子甲基化发生率不高,检测其表达水平对膀胱移行细胞癌预后判断具有一定的参考价值。     

膀胱移行细胞癌组织肿瘤增殖核抗原Ki-67的表达意义

目的: 探讨Ki-67在膀胱移行细胞癌(TCC)中的表达意义.方法: 用Ki-67抗原mAb对79例TCC和30例癌旁组织进行免疫组化染色.结果: TCC Ki-67指数高于正常膀胱组织(P<0.01),且Ki-67指数与肿瘤病理分级、临床分期和淋巴结转移有关.结论: Ki-67蛋白可作为TCC细胞增殖能力及估计预后的指标.