纳米细菌大鼠肾结石模型初步建立及成石因素分析

目的：初步建立纳米细菌（nanobacteria,NB）大鼠肾结石模型,探讨NB与肾结石形成的相关性和成石机制。 方法：应用人肾结石患者血清培养NB。SD雄性大鼠30只随机分成NB诱石组（A组,鼠尾静脉注射NB）、NB+四环素组（B组,鼠尾静脉注射NB和胃饲四环素）、空白对照组（C组,鼠尾静脉注射生理盐水）,每组各10只。8周后处死大鼠,镜下观察肾组织晶体分布并计数。检测各组大鼠24 h尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（N-acety1-β-D-glucosaminidase,NAG）、乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）浓度。 结果：A组和B组大鼠肾脏肾小管内产生含钙结晶,Von kossa染色阳性,主要分布于远曲小管和近曲小管,C组大鼠肾组织未见晶体,3组间差异有统计学意义（P=0.033）。B组晶体少于A组,有减少趋势。24 h尿NAG和LDH浓度在3组间差异有统计学意义（P<0.001）。结论：NB通过肾小管上皮细胞损伤机制诱导大鼠肾脏肾小管内产生含钙结晶,参与肾结石形成。四环素通过抗NB机制,可能有抑制结晶形成和肾结石形成作用。     

植物提取物碳酸酐酶对肾结石大鼠的影响

目的观察碳酸酐酶(CA)对肾结石大鼠的影响。方法从植物叶片中提取CA并检测活性。将40只大鼠随机分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组,每组25只。Ⅰ组大鼠正常喂养颗粒饲料;Ⅱ组大鼠每天给予质量分数1%乙二醇+质量分数2%氯化铵2 m L灌胃;Ⅲ组大鼠每天给予质量分数1%乙二醇+质量分数2%氯化铵2 m L+CA 1 m L灌胃;Ⅳ组大鼠每天给予CA 1 m L灌胃。饲养1周后收集4组大鼠24 h尿量,并检测尿液的尿素氮、肌酐、尿酸及钙离子。30 d后处死大鼠,观察肾脏组织结晶形成情况。结果 4组大鼠尿液中的尿素氮、肌酐及尿酸水平比较差异均无统计学意义(P>0.05);Ⅲ、Ⅳ组大鼠24 h尿量与Ⅰ、Ⅱ组比较差异有统计学意义(P<0.05);4组大鼠尿钙两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。Ⅱ组可见明显的肾结石结晶;Ⅲ、Ⅳ组未见明显的肾结石结晶,但可见肾小管结构异常改变。结论植物提取物CA能够抑制大鼠肾结晶的形成,对肾结石的预防和治疗可能有一定的积极作用。     

泽泻活性成分对结石模型大鼠肾结石形成和bikunin表达的影响

目的 研究中药泽泻活性成分对结石模型大鼠肾结石形成和bikunin表达的影响,以探讨泽泻防治草酸钙尿石症的作用机理。方法 分离提取泽泻的化学活性成分,制作大鼠肾草酸钙结石模型。将30只Wistar大鼠随机分成对照组、结石模型组、泽泻组,每组10只大鼠。采用半定量逆转录聚合酶链反应检测大鼠肾组织bikunin mRNA的表达水平、镜下观察肾组织草酸钙晶体分布,同时检测大鼠血生化、肾钙含量、24 h尿钙和尿草酸的分泌量。结果(1)泽泻组大鼠肾组织草酸钙晶体分布、血生化等指标均明显低于结石组。(2)泽泻组和成石组大鼠肾组织bikunin的相对表达水平分别为0.53±0.17,0.71±0.25、肾钙含量分别为4.70 mg/g±0.08 mg/g,9.49 mg/g±0.45 mg/g、24 h尿钙分泌量分别为37μmol±2μmol,62μmol±2μmol,各组间差异均有显著意义(P<0.05)。结论 泽泻活性成分能下调bikunin在结石大鼠肾组织的表达,减少肾组织草酸钙晶体的形成,从而抑制大鼠肾结石形成。     

泽泻活性成分对肾结石模型大鼠bikunin表达的影响

目的研究中药泽泻活性成分对结石模型大鼠肾结石形成和bikunin表达的影响,以探讨泽泻防治草酸钙尿石症的作用机理.方法分离提取泽泻的化学活性成分,制作大鼠肾草酸钙结石模型.将Wistar大鼠随机分成对照组、结石模型组、泽泻组,采用半定量逆转录聚合酶链反应检测大鼠肾组织bikunin mRNA的表达水平、镜下观察肾组织草酸钙晶体分布,同时检测大鼠血生化、肾钙含量、24h尿钙和尿草酸的分泌量.结果①泽泻组大鼠肾组织草酸钙晶体分布、血生化等指标均明显低于结石组.②泽泻组和成石组大鼠肾组织bikunin的相对表达水平分别为(0.528±0.170,0.713±0.250)、肾钙含量分别为[(4.70±0.08)mg/g,(9.49±0.45)mg/g]、24h尿钙分泌量分别为[(37.23±1.84)μmol,(61.49±2.06)μmol],各组间差异均有显著性意义(P＜0.05).结论泽泻活性成分能下调bikunin在结石大鼠肾组织的表达,减少肾组织草酸钙晶体的形成,从而抑制大鼠肾结石形成.     

纳米细菌肾结石形成过程中骨桥蛋白、Tamm-Horsfall蛋白的表达及相关性研究

目的：探究在纳米细菌所致肾结石的形成过程中骨桥蛋白(OPN)和Tamm-Horsfall蛋白(THP)的表达及相关性分析。方法：随机选取Wistar雄性大鼠90只,随机分成三组,对照组(NC组,大鼠尾静脉注射生理盐水1.2 ml+生理盐水2 ml灌胃)、纳米细菌组(NB组,大鼠尾静脉注射纳米细菌悬液1.2 ml+生理盐水2 ml灌胃)和抗纳米细菌组(NBT组,大鼠尾静脉注射纳米细菌悬液1.2 ml+四环素溶液2 ml灌胃),每周每组随机抽取3只大鼠,采集肾脏等标本后处死,共计10周。运用Western印迹法检测大鼠肾脏组织中OPN、THP的表达量,并分析结果。结果：Western印迹检测各组大鼠肾脏组织中OPN、THP表达量,以第8周为例,结果显示：NB组分泌量最低,NC组居中,NBT组最高,三组之间两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,OPN与THP呈正相关(r=0.951,P<0.01)。结论：纳米细菌在导致肾结石的形成过程中起到重要作用,可能是通过诱发肾脏慢性炎性反应,进而引起相关蛋白OPN、THP表达下降,最终导致肾结石的发...     

草酸钙肾结石大鼠肾组织Tamm-Horsfall蛋白表达及温肾化石汤调节

目的:研究草酸钙肾结石大鼠肾组织TH蛋白的表达,并用中药温肾化石汤调节,探讨该方防治肾结石复发的作用机制。方法:雄性SD大鼠60只,随机分为对照组、肾结石组、温肾化石汤组,每组各20只,肾结石组和温肾化石汤组以含有0.5%的乙二醇和0.5%的氯化铵的混合溶液致石剂代替饮用水,温肾化石汤组同时每日灌服中药温肾化石汤,二周后处死大鼠,解剖观察肾脏剖面结石形成,并用免疫组织化学法测定肾组织TH蛋白的相对表达量。结果:肾结石组肾脏成石程度最重,与温肾化石汤组比差异显著,对照组肾组织TH蛋白表达最强,其次为温肾化石汤组,肾结石组,三组相比差异显著。结论:TH蛋白可以抑制肾结石形成,中药温肾化石汤可以恢复大鼠肾组织TH蛋白表达量,推测此可能为该方防治肾结石复发的重要作用机制。     

泽泻对肾结石形成的抑制作用研究

【目的】探讨泽泻抑制肾结石形成的作用机理。【方法】将大鼠随机分为正常对照组、肾结石对照组和泽泻治疗组,肾结石组和泽泻组均采用乙醛酸溶液制作大鼠肾结石模型,泽泻组腹腔注射泽泻注射液,正常组和肾结石组注射生理盐水,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测大鼠骨桥蛋白(Osteopotin,OPN)信使核糖核酸(mRNA)的表达。【结果】肾结石组可见双肾表面粗糙,有许多白色晶体形成,OPN mRNA.表达增加(与正常组比,P<0.05),泽泻组虽肾表面粗糙,但白色晶体较肾结石组少,OPN mRNA表达较肾结石组减少(P<0.05),并接近正常组水平(P>0.05)。【结论】泽泻可抑制由诱石剂引起的肾结石的形成。     

草酸钙肾结石大鼠肾组织 Tamm －Horsfall 蛋白表达及温肾化石汤调节

目的：研究草酸钙肾结石大鼠肾组织TH蛋白的表达，并用中药温肾化石汤调节，探讨该方防治肾结石复发的作用机制。方法：雄性SD大鼠60只，随机分为对照组、肾结石组、温肾化石汤组，每组各20只，肾结石组和温肾化石汤组以含有0．5％的乙二醇和0．5％的氯化铵的混合溶液致石剂代替饮用水，温肾化石汤组同时每日灌服中药温肾化石汤，二周后处死大鼠，解剖观察肾脏剖面结石形成，并用免疫组织化学法测定肾组织TH蛋白的相对表达量。结果：肾结石组肾脏成石程度最重，与温肾化石汤组比差异显著，对照组肾组织TH蛋白表达最强，其次为温肾化石汤组，肾结石组，三组相比差异显著。结论：TH蛋白可以抑制肾结石形成，中药温肾化石汤可以恢复大鼠肾组织TH蛋白表达量，推测此可能为该方防治肾结石复发的重要作用机制。     

肾茶提取液对肾结石模型影响的实验研究

目的:探讨肾茶对大鼠肾结石模型影响的相关机制.方法:在乙二醇法诱导的大鼠肾结石模型上,灌胃予肾茶提取液,以大鼠的尿pH值、尿草酸、尿量、尿钙及肾组织学检查作为观察指标.结果:(1)肾茶提取液组大鼠饮水量正常,尿量增加,可降低尿钙浓度与尿草酸的含量,其与模型组比较(P＜0.01)有极显著性差异;与枸橼酸钾组相比(P＜0.05),有显著性差异.(2)肾茶提取液组对尿液pH值无改变,其与正常组比较(P＞0.05)无显著性差异;与枸橼酸钾组相比(P＞0.05),无显著性差异.(3)肾茶提取液组能显著减轻肾结石程度,与枸橼酸钾组相比,无显著性意义.(4)肾茶提取液组使肾小管管腔内结晶形成物明显减少,对肾组织恢复,与枸橼酸钾组相比,有优于枸橼酸钾组的趋势.结论:肾茶提取液可以增加尿量;降低尿草酸含量及尿钙的浓度;能抑制肾脏草酸钙结晶沉积;对尿pH值无改变.     

山楂黄酮对微波辐射大鼠肾脏损伤的治疗作用

目的：究山楂黄酮对微波辐射造成大鼠肾脏组织损伤的影响。方法50只Wistar雄性大鼠随机分为空白对照组辐射模型组和低剂量40 mg／kg· d）中剂量60 mg／kg· d）高剂量80 mg／kg· d）给药组。辐射模型组和给药组大鼠给予200 mW／cm2微波辐照6 min,辐射给药组按各剂量给予山楂黄酮,连续7 d。7 d后处死大鼠,光镜下观察肾脏细胞的形态变化,检测大鼠肾脏组织中总超氧化物歧化酶 T－SOD ）丙二醛MDA）含量。结果与辐射模型组比较,辐射给药组大鼠肾脏组织损伤情况有一定好转,肾小管及其上皮细胞排列比较规则,细胞边界较清晰,胞核肿胀淡染情况明显减轻,充血现象明显减轻。各剂量组MDA含量明显下降 P＜0．01）,T－SOD含量显著上升 P＜0．05）。结论200 W／cm2的微波辐照可引起大鼠肾脏组织损伤,且山楂黄酮对微波辐射引起的肾脏组织损伤有一定的治疗效果。     

感染性结石大鼠模型的尿路组织病理学改变

目的:通过构建感染性结石的大鼠模型,观察感染性结石的形成对尿路组织病理学的损害.方法:将SD雄性大鼠分为空白对照组(n=4)、假手术组(n=10)和实验组(n=10).空白对照组膀胱内不置入任何异物.假手术组膀胱内不置异物,仅行膀胱无菌穿刺.实验组大鼠在腹腔麻醉后,于下腹部正中切开腹腔,提起膀胱,以无菌G18穿刺针穿刺膀胱,于膀胱顶部穿刺入膀胱,经穿刺针内腔,使用推杆将聚乙烯管(此前浸泡于107CFU·ml-1的奇异变形杆菌悬液中,置于恒温箱中共同培养8 h以上)推入膀胱,退出穿刺针后关闭腹腔.手术后第21天,将大鼠以过量麻醉方法全部处死,分离大鼠肾脏、输尿管和膀胱,并将获取的尿路组织标本置入4%多聚甲醛液中固定24 h,常规石蜡包埋尿路组织标本后进行相关的病理及免疫组化分析.结果:空白对照组与假手术组大鼠尿路组织病理学无明显变化,膀胱内无结石生成.实验组大鼠的尿路组织主要表现为肾输尿管膀胱的炎症改变;膀胱内有感染性结石的形成.结论:奇异变形杆菌及其解脲酶对尿路上皮细胞可以造成损伤,损伤后所产生的一系列病理生理改变以及细胞的适应性反应在感染性结石的形成中起了重要的作用.     

维生素D和维生素K对结石大鼠肾脏骨桥蛋白mRNA表达的影响

目的：进一步明确维生素Ｄ 和维生素Ｋ 与肾结石的关系。方法：健康成年雄性ＳＤ大鼠３６ 只随机分成６组,即对照组、单纯成石组、维生素Ｄ组、诱石剂＋ 维生素Ｄ 组、维生素Ｋ 组和诱石剂＋ 维生素Ｋ组,测定肾脏骨桥蛋白（ｏｓｔｅｏｐｏｎｔｉｎ, ＯＰＮ） ｍＲＮＡ 的表达量和尿晶体成分的浓度。结果：维生素Ｄ 和维生素Ｋ 均可促进肾脏表达ＯＰＮ ｍＲＮＡ;维生素Ｄ可升高尿钙,维生素Ｋ则抑制尿草酸的分泌,诱石剂有降低尿镁和柠檬酸的作用。结论：维生素Ｄ过多可促进肾结石形成,而维生素Ｋ 有抑制结石形成的作用。     

六味化石通对大鼠草酸钙结石形成影响的实验研究

目的：观察六味化石通过实验性大鼠草酸钙结石形成的影响。方法：在乙二醇法诱导的大鼠肾结石模型上,口服给予六味化石通,以大鼠肾组织草酸和钙含量以及肾结石发生率、肾组织学检查作为观察指标。结果：六味化石通高剂量组肾组织草酸含量非常明显的低于对照组（P＜0．01）;对照组、低、中、高剂量组及阳性对照组肾结石发生率分别为：75％、45．5％,50％,18．2％和81．8％。结论：六味化石通能明显降低实验性大鼠草酸钙结石的发生率。     

雄激素对结石诱导雄鼠离体肾质量、肾组织内钙、镁、磷代谢的影响

目的 探讨解偶联蛋白（ＵＣＰ）基因表达水平与人类肥胖的关系。方法 应用竞争性ＲＴ－ＰＣＲ方法测定１０４例肥胖者，１４例经胃箍术减肥恢复正常体质量的前肥胖者，和２３例非肥胖对照者的腹膜内与腹膜外脂肪组织ＵＣＰ ｍＲＮＡ表达水平。结果 肥胖者腹膜内脂肪组织ＵＣＰ ｍＲＮＡ表达水平显著低于非肥胖对照者（Ｐ〈０．０１）；前肥胖者腹膜内脂肪组织ＵＣＰ ｍＲＮＡ表达水平仍然较低，减肥前后差别无显著性（Ｐ〉０．     

妊娠特用固体饮料对鼠胚胎的优化作用

以自制的“妊娠特用固体饮料”喂养妊娠后wistar鼠,每只每天1～1.5ml。于孕鼠分娩后与对照组比较新生鼠的身长、体重,同时取肝、肾等器官常规制片,显微镜观察。结果表明,喂养组新生鼠身长、体重均较对照组有显著增加(Ρ<0.05)。喂养组无1只死亡,对照组死亡5只,两组的死亡率有显著差异(Ρ<0.05)。两组各器官发育均正常,但喂养组的组织分化较好。     

肾阴虚型糖尿病大鼠模型的建立

目的:研究建立肾阴虚型糖尿病大鼠模型的方法。方法:将30只大鼠随机分为空白组、四氧嘧啶组、四氧嘧啶合甲状腺素组(简称四合甲组)。观察造模后各组大鼠的一般生理情况、血糖和痛阈变化。结果:四氧嘧啶组、四合甲组大鼠均表现为神态呆滞,反应迟钝,体毛无光泽,大便干结、色黑,测定肛温和血糖值升高,体重和痛阈值降低,饮水量、食量、尿量均增加,与空白组比较均有显著差异(P<0.01,P<0.05)。结论:用四氧嘧啶成功建立了肾阴虚型糖尿病大鼠模型,加用甲状腺素后,加重了阴虚火旺的症状,且对血糖无影响,保证了糖尿病模型的稳定。     

结石形成中骨桥蛋白与CD44的作用研究

[目的]探讨骨桥蛋白(OPN)与CD44在泌尿系结石形成中的作用.[方法]采用0.5％乙二醇+0.5％氯化氨饮水法建立高草酸尿症大鼠模型.HE染色光镜下观察肾小管腔内的结石晶体;钙盐染色光镜下观察肾小管上皮细胞基底膜和间质处的钙盐沉积情况;免疫组化染色观察OPN和CD44表达水平和位置,分析不同时段(第3、5、7、14...     

利用电镜技术对尿路钙化性纳米微粒的初步观察

目的:从肾结石患者的结石和肾盂尿液中分离和培养钙化性纳米微粒并进行形态学鉴定。方法:收集10例肾结石患者的结石和肾盂尿液标本,进行钙化性纳米微粒的分离和用不含血清的培养基培养8周,并用电子显微镜观察该微粒的形态和内部的超微结构。结果:10例患者中,7例患者的结石、5例患者的肾盂尿液可分离、培养出纳米微粒,其形态、生长特性与钙化性纳米微粒很相似。透射电镜下可观察到纳米微粒表面有层特殊致密结构,扫描电镜下其直径大小在100～600 nm。结论:在肾结石患者的结石和肾盂尿液标本中可分离和培养出与钙化性纳米微粒类似的纳米微粒,该微粒可能在肾结石的形成以及复发中起到重要作用。