WWOX抑癌基因与肿瘤

WWOX基因位于染色体16q23．3—24．1区域，并跨越了整个常见染色体脆性位点FRA16D。在普通型脆性位点FRA16D上的新基因WWOX已被认为是与多种肿瘤相关的抑癌基因，其DNA序列，mRNA、蛋白结构已基本清楚，其促凋亡的作用已经肯定，然而具体的作用机制存在着争议。WWOX基因的外显子丢失，杂合性缺失（loss of heterozygosity，LOH）及蛋白表达异常在多种肿瘤中频发出现。     

肝细胞癌中p14ARF基因启动子甲基化及蛋白表达的研究

目的 通过检测肝细胞癌中p14ARF基因启动子甲基化状态与蛋白表达的关系,探讨p14ARF基因启动子甲基化与肝细胞癌的关系.方法 通过甲基化特异性PCR(MSP)方法及免疫组化(IHC)法分别检测50例肝细胞癌组织和癌旁组织中p14ARF基因启动子甲基化状态和蛋白表达水平.结果 癌组织及癌旁组织中p14ARF基因启动子甲基化阳性率分别为28%(14150)和4%(2/50)(P<0.01).癌与癌旁组织p14ARF蛋白表达差异极显著(P<0.01).p14ARF基因启动子甲基化和蛋白表达与临床分期、门脉癌栓、术后复发、肝外转移、肿瘤大小、肿瘤个数及血清AFP值无关,而在肿瘤分化程度上p14ARF盯蛋白表达有显著差异,p14ARF基因启动子甲基化则无差异.p14ARF基因启动子甲基化与蛋白表达呈负相关.结论 启动子区甲基化是p14ARF基因失活的重要机制.p14ARF启动子区异常甲基化可能参与了肝癌的发生、发展,在肝癌的进展中起重要作用.     

HCCR mRNA在原发性肝细胞癌患者中的表达及临床意义

目的：探讨人宫颈癌基因(human cervical cancer oncogene,HCCR) mRNA在原发性肝细胞癌(primary hepatocellular carcinoma,PHC)患者中的表达及其临床意义。方法采用RT-PCR检测PHC癌组织、癌旁肝组织和肝硬化组织及各组外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中的HCCR mRNA表达水平,并进行分析。结果 HCCR mRNA 在PHC组织中的相对表达强度为0.83±0.10,癌旁肝组织中的相对表达强度为0.12±0.07,肝硬化组织中的相对表达强度为0.57±0.12,三组均数间两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。 PBMC中,肝癌患者HCCR mRNA的表达强度为0.55±0.06,肝硬化患者HCCR mRNA的表达强度为0.34±0.04,而正常人未检测出,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 PHC和肝硬化患者的组织和PBMC中HCCR表达明显增高,HCCR基因可能参与了PHC的发生与发展,其与PHC的恶变演进有一定的相关性。     

甲状腺乳头状癌患者p16基因表达及意义

肿瘤是一类细胞周期疾病,是多基因长期共同作用的结果。抑癌基因是指能够抑制细胞癌基因活性的一类基因,其功能是抑制细胞周期,阻止细胞数目增多以及促使细胞死亡。p 16基因是新近发现的抑癌基因,它以甲基化、突变或缺失等异常形式广泛存在于各种肿瘤患者中。p16基因又称为多肿     

急诊病人肝脏P53、PCNA的检测及意义

目的：分析急诊创伤病人肝脏结节中P53、PCNA的表达和肝癌的关系。方法：应用免疫组织化学方法,检测88例腹部创伤及急腹症病人肝脏结节中上述两种蛋白的表达,并HE染色病理分类,结果：39例为肝癌组织,P53和PCNA阳性率分别为43．58％和82．05％;33例证实为肝硬变组织,P53和PCNA阳性率分别为39．39％和45．45％;45例为癌旁肝组织,P53和PCNA阳性率分别为25．00％和75．00％;12例为正常肝组织,P53及PCNA阳性率分别为8．38％和75．00％。结论：P53表达异常及细胞及细胞增殖异常与肝脏的早期癌变有关,P53改变可促使肝细胞增殖。P53及PCNA表达改变,可能成为急诊临床（含剖腹探查）病人判定肝脏结节异常增殖及癌变的分子生物学标记。     

肝细胞癌中细胞周期G1期相关基因蛋白的表达及临床病理意义

原发性肝细胞癌(HCC)近年来其发病率有增高趋势,估计每年新发病例在10万人以上。肝癌是发展快、早期诊断率低、生存期短、预后极差的恶性肿瘤之一,且其发病机制尚未阐明。随着分子生物学的发展,有研究表明细胞周期调控异常是细胞过度增殖和肿瘤发生的重要原因,细胞周期调控已成为当前肿瘤学研究的热点之一。作者应用免疫组     

原发性肝细胞癌736例诊疗分析

原发性肝细胞癌(HCC)是我国高发的恶性肿瘤之一,近年来采用以外科手术为主的各种新的治疗手段,使肝癌的疗效得到了提高.本院199l～1997年共收治HCC患者736例 ,作者针对各种不同的治疗方法对肝癌的远期疗效进行分析,现报道如下.     

原发性肝细胞癌组织芯片的制备及其在原发性肝细胞癌分子病理研究中的应用

目的:制备原发性肝细胞癌组织芯片,并利用该组织芯片在分子病理水平探讨原发性肝细胞癌(hep-atocellularcarcinoma,HCC)的发生发展与乙型肝炎病毒感染、细胞周期G1期调节基因Rb的功能状态,以及库普弗细胞的分布规律之间的关系。方法:选取40例HCC肿瘤组织及其相应癌旁、远癌肝组织块制备共含120个标本的组织芯片,应用免疫组织化学技术(SP法)检测在HCC肿瘤、癌旁、远癌肝组织中,HBsAg、HBcAg和Rb蛋白的表达情况以及库普弗细胞的分布情况。结果:HCC肿瘤组织中的HBsAg、HBcAg的表达率明显低于癌旁及远癌肝组织(P<0·01);Rb蛋白缺失率在HCC肿瘤组织中为42·5%,显著高于癌旁和远癌正常肝组织(P<0·05),但与HCC肿瘤的大小和组织学分级均无统计学相关性(P>0·05);肝癌组织中的Kupffer细胞数明显少于癌旁及远癌肝组织(P<0·05)。随着肿瘤体积的增加和肿瘤组织分化程度的降低,肿瘤组织中Kupffer细胞数量减少(P<0·05)。结论:HCC的发生、发展可能与HBV感染、Rb蛋白表达缺失和库普弗细胞数量的减少均有着密切联系;组织芯片是一种有效的肿瘤分子病理研究技术平台,具有检测质控的高度均一性和检测操作的高通量性。     

扶正抗癌汤对裸鼠接种人肝细胞癌的抑制作用

作者对根据辨证施治法则自拟中药方－扶正抗癌汤进行抗肝癌动物实验。选用人肝细胞癌皮下接种裸鼠模型。预试验：灌胃１０天，停药１０天，抑瘤率为６８．９％。之后再给药１０天，停药１９天，抑瘤率为６８．９％。之后再给药１０天，停药１９天，抑瘤率４１．９％。重复试验：用药２０天，停药１０天，抑瘤率为３９．４％。实验组血清ＩｇＧ含量显著高于对照组。作者认为扶正抗癌汤具有抑制裸鼠接种人肝细胞癌生长的作用，其机理可     

肝癌组织中D-氨基酸氧化酶基因表达的临床意义

目的探讨肝癌组织中D-氨基酸氧化酶(DAO)基因表达水平与其临床特征及预后的相关性。方法收集214例肝癌患者的肝癌组织的基因表达谱及相关临床数据,对DAO基因表达水平与其临床特征及预后进行单变量和多变量分析。结果单变量分析提示,DAO高表达组中,血AFP水平较低(P=0.001),结节数目较少(P=0.042),TNM分期较好(P=0.014),转移风险较低(P=0.001),且预后较好(P=0.011)。多变量分析发现,DAO高表达组中,血AFP水平较低(OR为0.162,95%CI为0.078~0.336),转移风险较低(OR为0.140,95%CI为0.069~0.284),且预后明显优于低表达组患者(OR为0.833,95%CI为0.700~0.992)。结论肝癌组织中,DAO表达水平与患者血AFP水平、转移风险及预后相关,其高表达是肝癌的保护性因素之一。     

食管鳞癌PTEN表达的研究

目的探讨食管鳞癌中PTEN蛋白的表达与食管鳞癌分化、浸润及远处转移之间的关系。方法选择手术切除食管鳞癌手术后大体标本58例,检测PTEN在58例食管癌大体标本中的食管鳞癌组织、癌旁不典型增生组织及其相应的正常食管黏膜组织中的表达。结果 PTEN蛋白从正常黏膜-不典型增生-浸润癌渐进性表达减低,PTEN蛋白在正常黏膜与浸润癌中的表达有显著性差异;PTEN蛋白表达与食管癌分化程度、浸润深度、淋巴结转移有关。结论 PTEN基因的失活(或缺失)及蛋白表达的下降在食管鳞癌的发生、分化及浸润转移过程中起重要作用。PTEN在食管鳞癌组织表达的下降或缺损,提示食管鳞癌可能发生了浸润甚至淋巴结转移,预后不良。这可能为临床上食管鳞癌治疗及预后研究提供新的手段。     

肿瘤浸润淋巴细胞的生物学功能及其在肝细胞癌中的意义

目前,肝细胞癌(HCC)患者的存活率低,复发率高,临床治疗效果不佳.随着HCC免疫治疗研究的不断进展,肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)成为研究热点.TILs是在肿瘤中发挥免疫应答及调控作用的特殊淋巴细胞,既可发挥抗肿瘤效应,又可促进肿瘤免疫逃逸,其抗肿瘤效应是各淋巴细胞间相互作用的结果.TILs的类型和密度都影响着患者的预...     

肝细胞癌多基因甲基化研究

目的 通过研究肝癌中多基因启动子区的甲基化,说明抑癌基因甲基化在肝癌发生的普遍性。 方法分别抽提冻存的肝癌、癌旁组织和正常肝组织的DNA,利用亚硫酸氢钠具有使未甲基化的胞嘧啶转为尿嘧啶而不改变甲基化胞嘧啶的特性分别设计甲基化引物和非甲基化引物,然后分别进行PCR 反应。我们分别检测了转移抑制基因p15, SYK, TIMP-3, E-cadherin,RASSAF1 和肿瘤相关基因p53, RB1, WT1, p14, p16启动子区在60个肝癌、癌旁和6个正常肝组织的甲基化情况。 结果60个肝癌标本中10个基因的甲基化情况各不相同：从p53的8%~90%的RASSAF1;肝癌组织比癌旁组织的甲基化平均水平高,二者在统计学上有显著差异（P<0.05）。 结论肝癌中有多个基因存在甲基化,且肝癌组织甲基化水平较癌旁组织高。     

多重聚合酶链反应检测多肿瘤抑制基因初探

目的建立一种敏感、特异和快速检测多肿瘤抑制基因（ＭＴＳ１）的方法。方法选择ＭＴＳ１基因组中的外显子２为扩增靶序列，设计合成了一对引物，同时选择人的β球蛋白基因作为对照扩增，建立了多重聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测ＭＴＳ１ＤＮＡ的方法。结果以常规ＰＣＲ与多重ＰＣＲ对正常组织进行检测，扩增产物均出现５３６ｂｐ和３１０ｂｐ条带，两种实验方法结果相同。对２０例肿瘤组织进行检测，检出３例肿瘤组织ＭＴＳ１基因发生了变异。结论所建立的方法较为敏感、特异，可反映ＭＴＳ１基因是否发生变异，为临床诊断、治疗和判断预后提供辅助的实验指标，也为进一步研究打下基础。     

实时定量PCR检测骨髓间质干细胞及肿瘤细胞BMI-1基因

目的　建立BMI- 1基因(theBcell specificsmoloneymurineLeukemiaVirusintegrationsite 1)表达的实时荧光定量PCR,利用该方法在基因转录水平上研究BMI- 1在间质干细胞 (MSCs)及肿瘤细胞中的表达水平。方法　通过RT- PCR,T- A克隆,real timePCR等方法精确测定并比较BMI 1基因在胚胎MSCs、成人MSCs、A549(人肺腺癌细胞株)、SW 480(人结肠腺癌细胞株)、U937(人髓系白血病细胞株)、健康人外周血淋巴细胞以及白血病细胞中表达水平。结果　测定绘制BMI 1基因的标准曲线(相关系数r=0. 998),胚胎MSCs中BMI- 1的表达水平高于成人MSCs,慢性粒细胞白血病(CML)和慢性淋巴细胞白血病(CLL)中BMI- 1的表达量分别高于急性粒细胞白血病和急性淋巴细胞白血病,U937和A549中的表达量高于SW 480,健康人外周血淋巴细胞中BMI 1的表达明显低于慢性髓系白血病(P<0. 01)。结论　定量测定BMI -1的real- timePCR方法较稳定、准确。BMI- 1基因可以作为某些肿瘤特别是白血病治疗的靶点,其表达水平可作为判断肿瘤恶性程度的参考指标。     

实时定量PCR检测乳腺癌患者内皮素-1的表达及其临床意义

目的检测内皮素-1(EDN-1)基因在乳腺癌患者外周血中的表达情况,并探讨它在乳腺癌的发生、发展中的作用。方法选取2013年1月1日至2014年5月20日在花都区人民医院接受乳腺手术且经病理学证实为乳腺癌的患者54例纳入试验组,另选取同期体检健康女性60例纳入对照组。采用实时定量聚合酶链反应(PCR)检测所有研究对象外周血EDN-1的表达情况,并分析其与各临床参数的关系。结果乳腺癌患者外周血EDN-1表达水平高于体检健康女性,组间比较差异有统计学意义(P0.01),其表达水平为健康女性人群的5.877倍;EDN-1的表达水平与患者的年龄和肿瘤的组织类型均无关(P0.05),与患者的肿瘤大小、区域淋巴结转移情况、是否有远处转移密切相关(P0.05)。结论 EDN-1基因与乳腺癌的发生、发展关系密切,实时定量PCR可以敏感、特异地检测乳腺癌患者外周血中EDN-1的表达,可以为乳腺癌的筛查与早期诊断提供帮助,宜在临床工作中开展。     

RNA结合蛋白Sam68 mRNA在原发性肝癌中的表达及意义

目的探讨RNA结合蛋白Sam68 mRNA在人原发性肝癌组织中的表达及意义。方法选取20例原发性肝癌的肿瘤组织及相应癌旁组织,采用TRIzol一步法提取总RNA,采用RT-PCR法检测Sam68 mRNA在肝癌组织及相应癌旁组织中的表达。结果PCR产物电泳显示肝癌组织中Sam68 mRNA平均表达强度为60.71%±9.26%,相应癌旁组织中Sam68 mRNA平均表达强度为76.98%±11.61%,经配对t检验,P〈0.05,具有统计学差异。结论与相应癌旁组织相比,人原发性肝癌组织中Sam68 mRNA的表达明显降低,提示在人原发性肝癌组织中Sam68的表达在转录水平受到明显抑制。     

原发性肝癌组织中甲胎蛋白mRNA定量检测的临床意义

目的研究肝细胞癌及癌旁组织甲胎蛋白mRNA定量检测的临床意义。方法用RT-PCR技术检测40例肝细胞癌和40例癌旁组织中甲胎蛋白mRNA。结果第一轮PCR扩增AFP mRNA,癌及癌旁组织阳性率分别为45%和20%,第二轮PCR癌及癌旁组织阳性率分别为80%和50%,癌组织AFP mRNA检出率高于癌旁组织。结论AFPmRNA的含量是判断肝癌预后的较好指标。对临床工作具有一定的指导意义。     

Dkk-3在原发性肝细胞癌的表达及其临床意义

目的 研究Dkk-3在原发性肝细胞癌的表达及其临床意义.方法 采用免疫组织化学(SP)法检测该院普外科手术切除的80例原发性肝细胞癌肿瘤及癌旁正常组织Dkk-3表达,比较原发性肝细胞癌不同临床病理因素中Dkk-3表达的差异,分析Dkk-3表达与临床病理因素的相关性.结果 癌旁正常肝组织Dkk-3表达评分[(10.1±2.6)分]显著高于肝癌组织[4.8±1.1)分],差异有统计学意义(P<0.01).原发性肝细胞癌Dkk-3蛋白质表达在性别和年龄中的差异无统计学意义(P>0.05),肿瘤最大径越大、临床分期越晚及有转移时原发性肝细胞癌Dkk-3蛋白质低表达越低(P<0.05).原发性肝细胞癌Dkk-3蛋白质表达与肿瘤最大径、临床分期及有转移呈负相关关系(P<0.05).结论 Dkk-3在原发性肝细胞癌中呈低表达状态,可作为原发性肝细胞癌病情及预后评估的标志物.