硅胶G层析法提取心磷脂及其鉴定

采用９５％乙醇抽提、丙酮沉淀粗提新鲜牛心中的心磷脂；应用硅胶Ｇ高压梯度洗脱液对其进行纯化；应用硅胶Ｇ薄层层析进行了鉴定；应用修改的Ｆｉｓｋｅ－Ｓｕｂｂａｒｏｗ方法对纯化的心磷脂进行定量。结果显示硅胶Ｇ纯化的心磷脂纯度高，经薄层层斫呈单一黄色斑点，定磷法定量产率为每１００ｇ新鲜牛心可获心磷脂８．２３ｍｇ。结果提示：通过硅胶Ｇ层析法可获得高纯度、高产率的心磷脂。     

柱层析法分离与纯化心磷脂

目的 建立提取、分离和纯化心磷脂的研究方法。方法 将新鲜猪心制作为肌匀浆，从中提出总脂类，分离出丙酮沉淀物，制备为酸性磷酸脂钙盐，上样于硅胶Ｇ层析注，用洗脱液进行洗脱，分部收集洗脱液，作薄层层析，合并Ｒｆ值为０．８３的洗脱液，减压浓缩即为纯化的心磷脂。结果 薄层层析鉴定心磷脂显色呈单一斑点，其Ｒｆ值与参照物的值一致，每１００ｇ新鲜猪心可获４．５０ｍｇ纯化的心磷脂。结论 本研究是一种简便、有效的分离     

猪脑中神经肽的提取分离及氨基酸组成分析

目的 从猪脑中分离神经肽，并对其氨基酸组成进行分析。方法 新鲜猪脑经匀浆后用生理盐水和蒸馏水提取。提取液用Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ５０柱层析纯化。收集液做薄层层析并用茚三酮显色。收集Ｒｆ（Ｒｅｍｏｖｅ ｆａｃｔｏｒ）０．５０的组分，进行硅胶柱层析。收集液再次做薄层层析的茚三酮显色，收集Ｒｆ值为０．５０的组分，冷冻干燥制成猪神经肽。结果 该肽经日立８３５－５０型氨基酸分析仪分析，证明其含有Ａｌａ和Ａｓｐ     

薄层扫描法测定真心平胶囊中延胡索乙素含量

采用硅胶Ｇ薄层层析对含有延胡索，丹参等７味材的制剂中延胡索乙素进行分离分析，得到分离度高，背景干扰小的薄层层析图谱。建立了含量测定的方法，平均回收率为１００．５８５％，ＲＳＤ为２．３％。     

二种牛神经肽的分离

牛脑经匀浆后用生理盐水提取，提取液再经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ５０柱层析纯化，用部分收集仪收集不同组分，收集液经硅胶薄层层析后用茚三酮显色，收集与神经传导肽Ｒｆ（Ｒｅｍｏｖｅｆａｃｔｏｒ）值相近的含有２组分的混合物（牛神经肽１和牛神经肽２），再经硅胶柱层析纯化。用部分收集仪收集纯化后的２种牛神经肽。经薄层层析展层和茚三酮显色，结果表明：２种牛神经肽已被分开，牛神经肽１的Ｒｆ值为０５０，牛神经肽２的Ｒｆ值为０４５。     

二种牛神经肽的分离

牛脑经匀浆后用生理盐水提取，提取液再经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ５０柱层析纯化，用部分收集仪收集不同组分，收集液经硅胶薄层层析后用茚三酮显色，收集与神经传导肽Ｒｆ值相近的含有２组分的混合物（牛神经肽１和牛神经肽２），再经硅胶柱层析纯化。用部分收集仪收集纯化后的２种牛神经肽。经薄层层析展层和茚三酮显色，结果表明：２种牛神经肽已被分开，牛神经肽１的Ｒｆ值为０．５０，牛神经肽２的Ｒｆ值为０．４５。     

猪脑中神经肽的提取分离及氨基酸组成分析

目的 :从猪脑中分离神经肽 ,并对其氨基酸组成进行分析。方法 :新鲜猪脑经匀浆后用生理盐水和蒸馏水提取。提取液用SephadexG5 0柱层析纯化。收集液做薄层层析并用茚三酮显色。收集Rf(Removefactor) 0 5 0的组分 ,进行硅胶柱层析。收集液再次做薄层层析和茚三酮显色 ,收集Rf值为 0 5 0的组分 ,冷冻干燥制成猪神经肽。结果 :该肽经日立 83 5 5 0型氨基酸分析仪分析 ,证明其含有Ala和Asp二种氨基酸。结论 :结果表明该肽是一种酸性神经肽     

硅胶薄层层析展开剂构成的变化对不同极性成分Rf值的影响

目的:探讨硅胶薄层层析中展开剂构成与不同极性成分Rf值的关系的规律.方法:对飞蓬(Erigeron acer L.)进行化学成分研究.结果:在硅胶G薄层层析中若使用由两种溶剂组成的展开系统,则这两种溶剂的极性越接近,斑点越分散.结论:硅胶薄层层析展开剂构成的变化对不同极性成分Rf值有影响.     

双清口服液中桔梗、柴胡的薄层鉴别方法

双清口服液具有清热解毒，清肺止咳的作用，用于治疗流感、上呼吸道感染及各种发热疾病。为有效控制该成药的内在质量，保证药效，锗对方中桔梗、柴胡薄层鉴别法进行试验，现总结如下。１药品与试剂 ①对照品及对照药材：桔梗皂甙对照品；柴胡对照药材；柴胡皂甙ａ、ｄ对照品；桔梗对照药材。均由中国药品生物制品检定所提供。②薄层层析板；硅胶Ｇ（青岛海洋化工厂）；羧甲基纤维素钠（上海化学采购供应站）．０．３％羧甲基纤维素钠溶液 ３份加 １份硅胶 Ｇ铺板： １１０℃活化 ３０分钟，置干燥器中备用。③试剂：正己烷、乙酸乙酯、氯仿…     

G6PD缺乏时红细胞膜磷脂脂肪酸组成的改变

探讨Ｇ６ＰＤ缺乏时红细胞膜磷脂的氧化性损伤用氯仿：甲醇（２∶１Ｖ／Ｖ）抽提膜脂质，通过硅胶柱层析分离得到磷脂，经薄层层析分离得磷脂酰乙醇胺（ＰＥ）、磷脂酰丝氨酸（ＰＳ）和磷脂酰胆碱（ＰＣ）采用ＴＬＣ扫描仪测定各种磷脂的含量用甲醇提取ＰＥ，ＰＳ及ＰＣ，经快速酯交换得到脂肪酸甲酯、采用毛细管气相色谱分析各种磷脂中脂肪酸的组成情况结果：Ｇ６ＰＤ缺乏时，ＰＳ含量下降，红细胞膜总磷脂及ＰＳ中不饱和脂肪酸（Ｃ１８∶１，Ｃ１８∶２）的含量均减少，ＰＥ中Ｃ１６∶０的含量也减少实验结果推测，Ｇ６ＰＤ缺乏时红细胞膜磷脂改变，ＰＳ含量的减少及ＰＳ中不饱和脂肪酸含量的下降可能与氧化性损伤有关     

山葡萄多酚对大鼠心肌线粒体氧化损伤的保护作用

目的:在大鼠心肌线粒体（Mt）自由基损伤的体外实验中观察山葡萄多酚(PVAR)对心肌线粒体氧化损伤的保护作用,为治疗心肌缺血再灌注损伤提供实验依据。方法: 实验分5组,正常线粒体组、诱导损伤线粒体组和预先加25、50、100 mg•L^-1PVAR再诱导损伤线粒体组;利用Fe²⁺/维生素C（VitC）系统产生氧自由基,体外对Wistar大鼠心肌Mt诱导损伤,观察各组Mt心磷脂和MDA含量、膜流动性、ATPase活性和肿胀度的变化。结果：与损伤组比较,三种剂量PVAR组心磷脂含量明显增高（P<0.05),MDA明显减少（P<0.01),膜流动性显著增大(P<0.01),ATPase活性增高（P<0.05),100 mg•L^-1PVAR组线粒体肿胀度与正常组比较差异无显著性。结论:氧自由基引起Mt损伤;PVAR对氧自由基引起的大鼠心肌Mt损伤具有保护作用,保护机制可能是直接减少氧自由基的生成。     

法医学组织病理切片STR分型影响因素的比较分析

目的 研究法医学病理切片DNA的基因型,探讨病理切片的组织类型、保存时间与尸源年龄对STR分型的影响.方法 运用16位点Loci-STRs复合荧光标记STR-PCR技术,采用7阶重复拉丁方实验设计,取14例尸检7个年龄段的新鲜组织样本,制作脑、心、肝、肾、脾、肺、肠等7类组织病理切片,将切片随机分组保存7d、14d、3...     

貂组织线粒体DNA及细胞色素b鉴定及特征

目的:探讨貂组织线粒体DNA（mtDNA）及细胞色素b(Cytb)的特征。方法:采用碱变性方法提取新鲜的貂心及肝组织中mtDNA,PCR技术扩增细胞色素b(Cytb)基因部分序列片段并直接测序。结果:新鲜的貂心和肝组织提取出16 800 bp的mtDNA,并能扩增出310 bp大小的Cytb基因,测序结果显示貂心Cytb基因与美洲貂(GenBank AB026109.1)同源性为99%。 结论:貂组织含有完整的mtDNA,Cytb部分基因可以作为貂心物种鉴定及检测的分子标记。     

缺血预处理对离体大鼠心肌线粒体心磷脂及心功能的影响

目的 探讨缺血预处理(ischemie preconditioning,IP)对缺血再灌注损伤大鼠心肌线粒体心磷脂(cardiolipin)及心功能的影响.方法 清洁级SD大鼠72只,体质量200～300 g,雌雄各半,用随机数字表法分为正常组、对照组、缺血预处理组(IP组)、5-羟葵酸(5-HD)拈抗缺血预处理组(HD组),每组18只.采用Langendorff灌流装置建立大鼠离体心脏缺血再灌注模型,正常组灌注平衡20 min,持续灌注100 min;对照组灌注平衡20 min,持续灌注30 min,缺血40 min,再灌注30 min;IP组灌注平衡20 min后,给予2次间断缺血预处理,每次缺血5 min再灌注5 min,余缺血再灌注同对照组;HD组在预处理前灌注5-HD 10 min,余同IP组.各组分别于灌注平衡末(T1)、缺血前即刻(T2)、再灌注末(T3)记录心率(HR)、左心室发展压(LVDP)和左心室舒张末压(LVEDP),采用高效液相色谱仪测定心肌线粒体心磷脂含量.结果 与T1、T2时比较,各组T3时HR、LVDP明显降低,LVEDP明显升高,心肌线粒体心磷脂含量明显降低(P<0.05,P<0.01);与正常组比较,余3组T3时HR、LVDP明显降低,LVEDP明显升高,心肌线粒体心磷脂含量明显降低(P<0.05,P<0.01);与对照组比较,IP组及HD组T1时HR、LVDP明显升高,LVEDP明显降低,心肌线粒体心磷脂含量明显升高(P<0.05,P<0.01);与IP组比较,HD组T3时HR、LVDP明显降低,LVEDP明显升高,心肌线粒体心磷脂含量明显降低(P<0.05,P<0.01).结论 IP可维护心肌线粒体心磷脂含量的相对稳定,改善大鼠离体缺血再灌注心脏功能,其机制主要与mito-KATP通道的激活有关.     

慢性肺心病并发重症DIC的治疗

本文报告了１１例慢性肺心病合并重症ＤＩＣ，用肝素和鲜血浆为主综合治疗后，８例救治成功（有效率达７２．７％）。并对肺心病并发重症ＤＩＣ的早期诊断，用药剂量的特殊性进行了讨论。     

白膜法制备手工血小板方法的探讨

目的通过研究采集与制备时间对手工血小板质量的影响,探讨白膜法制备手工血小板的方法。方法采集28例健康献血者400ml全血,采用（两步法）白膜法分离制备手工血小板,按照采集与制备时间的不同均分为4组,每组7例。对照组：新鲜全血采集6 h之内立即进行手工血小板的分离制备（对照组）;B组：新鲜全血采集6 h之内进行第一步分离,白膜放置6 h进行第二步分离;C组：新鲜全血采集6 h之内进行第一步分离,白膜放置24 h进行第二步分离;D组：新鲜全血采集6～8 h之后进行手工血小板的分离制备。检测血小板计数（platelet count,PLT）、血小板平均体积（mean platelet volum,MPV）、白细胞残余率、pH值、低渗休克反应（hypotonic shock response,HSR）、血小板聚集率以及血小板膜P-选择素（CD62p）的变化。结果白膜放置6 h之后（B组）,制备手工血小板其血小板计数（779.9±83.8）×109/L和HSR（62.61±5.24）%高于其他3组;MPV（6.44±0.17）fl和CD62p（47.67±7.40）%低于其他3组。B、C、D3组血小板计数、pH值、HSR和血小板聚集的比较均优于对照组,且差异有统计学意义（P〈0.05）,4组CD62p流式细胞术检测结果无统计学差异。结论手工制备血小板可以打破传统6～8 h之内必须制备的概念,尤以新鲜全血立即制备第一步,白膜放置6 h之后制备手工血小板为最优。     

羊膜移植治疗复发性翼状胬肉

目的 观察复发性翼状胬肉切除联合新鲜羊膜移植术的临床疗效.方法 在显微镜下用新鲜羊膜移植治疗31例(34只眼)复发性翼状胬肉,手术全部在显著微镜下完成.结果 术后随访观察6～18个月,平均11个月,羊膜移植手术均一次成功,未观察到免疫排斥反应,角膜上皮6天内修复,羊膜移植片水肿在10天左右消失,3周新生血管化完成.结论 应用新鲜羊膜移植是治疗复发性翼状胬肉的有效的方法.     

Relation of the level of platelet membrane glycoproteins, platelet adhesion, platelet aggregation and traditional Chinese medicine syndrome patterns of coronary heart disease

This experiment made quantitative analysis of platelet GPlb of 56 patients with coronary heart disease and with McAb SZ-2 resisting to human being platelet GP by using the method of indirect immunity fluorescence saturation, observed the changes of coronary heart patients' platelet GPlb based on TCM differentiation of the pattern, and determined the level of PAdT, PAgT. The results showed that the level of platelet GPlb of coronary heart disease was higher than normal. Among them, the acute myocardiac infarction group was the most obvious, followed by the unstable angina pectoris group and the stable angina pectoris group. The level of PAdT, PAgT of coronary heart patients was higher than those of the normal group (P less than 0.005, 0.05); the level of platelet GPlb in blood stasis syndrome group was higher remarkably than the group of having no blood stasis syndrome and the normal (P less than 0.001). These results suggested that it played an important part in the occurrence and development of coronary heart disease as manifested by abnormal increase of platelet GPlb, and enhancement of platelet's adherence and aggregation. The abnormal increase of platelet GPlb is due to pathological mechanism of blood stasis syndrome of coronary heart disease. This experiment also provided a fresh evidence to TCM differentiation of the pattern and treatment of coronary heart disease.