miR-126在人结肠癌细胞中的表达及其对结肠癌细胞生物学行为的影响

目的探讨microRNA(miR)-126在人结肠癌细胞中的表达以及对结肠癌细胞生物学行为的影响。方法通过实时定量RT-PCR检测结肠癌患者的结肠癌组织以及癌旁组织中miR-126的表达情况。通过慢病毒转染构建miR-126稳定过表达细胞系,并进一步通过体外实验研究miR-126对结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。结果与癌旁组织比较,miR-126在结肠癌细胞中表达率(55%)显著低于癌旁组织的87.5%(P0.05);miR-126的表达与患者是否发生转移及结肠癌临床Dukes分期显著相关(P0.05)。利用慢病毒转染构建的miR-126过表达SW480细胞系进行体外实验显示miR-126可以抑制SW480细胞的增殖,转染组与空白对照组12 h、24 h、48 h吸光度值差异均有统计学意义(P0.05);miR-126可以抑制结肠癌细胞迁移和侵袭的能力。Transwell实验中,转染组与空白对照组细胞迁移数差异均有统计学意义(P0.05)。结论 miR-126可明显抑制结肠癌细胞的发生发展,影响结肠癌细胞的生物学行为。     

干扰ECT2基因表达对结直肠癌SW620细胞侵袭和迁移的影响及机制研究

目的探讨转染小干扰RNA(siRNA)干扰上皮细胞转化序列2(ECT2)基因的表达对人结直肠癌SW620细胞侵袭和迁移的影响及机制。方法采用脂质体Lipofectamine 2000转染试剂将ECT2特异性siRNA或非特异性siRNA转染至SW620细胞,分别记为si-ECT2组和si-NC组,将未行转染的SW620细胞记为Control组。采用实时荧光定量PCR法(real-time qPCR)和蛋白质印迹法(Western blotting)分别检测各组SW620细胞中ECT2的mRNA和蛋白表达水平,采用Transwell侵袭实验检测各组SW620细胞的侵袭能力,采用划痕愈合实验检测各组SW620细胞的迁移能力,采用Western blotting法检测各组SW620细胞中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和MMP-9蛋白表达水平。结果与si-NC组相比,si-ECT2组SW620细胞中ECT2的mRNA和蛋白表达水平均明显降低,穿膜细胞数量明显减少,划痕愈合率明显降低,MMP-2和MMP-9蛋白表达水平均明显降低,差异均有统计学意义(P均0.05)。Control组的上述各项指标与si-NC组之间的差异均无统计学意义(P均0.05)。结论干扰ECT2基因的表达能够抑制结直肠癌SW620细胞的侵袭和迁移能力,其作用机制可能与下调MMP-2和MMP-9蛋白表达有关。     

miR-124对人结肠癌SW620细胞生长与侵袭的影响

目的观察miR-124对人结肠癌SW620细胞生物学功能的影响。方法采用MTT实验、细胞划痕实验、Transwell侵袭实验检测miR-124对人结肠癌SW620细胞的生长、侵袭转移能力的影响。结果 MTT检测发现,过表达miR-124可抑制人结肠癌SW620细胞的生长,且具有时间依赖性;细胞划痕实验显示,转染miR-124成熟体12、24 h后伤口愈合率分别为26.5%±0.7%、37.7%±1.5%,其阴性对照分别为40.6%±2.5%、78.2%±1.6%,P<0.05;Transwell侵袭实验显示,转染miR-124成熟体24 h后穿过基底膜的人结肠癌SW620细胞数为(37±2.6)个,其阴性对照为(80±3.6)个,P<0.05。结论 miR-124可抑制人结肠癌细胞生长与侵袭。     

miR-199对结直肠癌细胞增殖、侵袭的影响及机制

目的 探讨微小RNA-199(miR-199)对结直肠癌细胞增殖、侵袭的影响及其作用机制。方法 常规培养人正常结肠上皮细胞系（HCoEpiC细胞）、结直肠癌细胞系（LOVE、SW620、SW480、HT29、DLD-1细胞），用实时定量PCR法检测细胞中miR-199表达。将SW620细胞随机分为miR-199过表达组、阴性对照组及miR-199+转铁蛋白受体1(TFR1)共表达组（miR-199mimics+TFR1组），分别将miR-199mimics、mimic-NC、miR-199mimics+TFR1过表达质粒转染至细胞内；另取部分未转染细胞作为空白对照组。实时荧光定量PCR法检测TFR1 mRNA表达，MTT实验检测细胞增殖能力，Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力，Western blotting法检测TFR1蛋白表达，生物学软件TargetScan及双荧光素酶报告基因实验分析miR-199的靶基因。结果 人结直肠癌细胞系中miR-199相对表达量均低于人结肠上皮细胞系（P均<0.05），且SW620细胞中miR-199相对表达量最低，故选SW620细胞为实验...     

miR-223-3p在老年结肠癌组织和癌旁组织中的表达水平及其生物学功能作用机制

目的 探讨miR-223-3p在老年结肠癌组织和癌旁组织中的表达水平及其生物学功能作用机制。方法 选取108例初诊为老年结肠癌患者，经手术切除的结肠癌组织标本作为研究标本，癌旁组织标本(距结肠癌组织边缘至少5 cm)作为对照标本。购置人结肠癌细胞(SW480)和人结肠癌细胞(SW620)。通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)测定结肠癌组织、癌旁组织、SW480及SW620细胞中miR-223-3p表达水平，通过敲低或增加SW480及SW620细胞中miR-223-3p表达观察miR-223-3p对细胞增殖、运动、侵袭、凋亡及凋亡蛋白的影响。结果 结肠癌组织中miR-223-3p表达水平显著高于癌旁组织(P<0.001);SW620细胞中miR-223-3p表达水平显著高于SW480细胞(P<0.05);SW480细胞中，转染组miR-223-3p表达水平显著高于未转染组(P<0.001);SW620细胞中，转染组miR-223-3p表达水平显著低于未转染组(P<0.001);转染24、48、72 h后SW480细胞转染组细胞计数显著多于未转染组(P<...     

结肠癌细胞增殖和侵袭过程中miR-92a和miR-29c的表达及其意义

目的探讨miR-92a和miR-29c表达水平对结肠癌细胞增殖和侵袭能力的影响。方法应用miR-92ainhibitor、miR-29c mimic在体外转染结肠癌细胞系SW480,分别构建miR-92a的干扰表达和miR-29c的过表达,设置转染无义序列组作为对照组。(1)采用反转录合成cDNA和荧光定量PCR,以U6表达作为内对照,检测细胞中miR-92a和miR-29c的表达水平;(2)采用CCK-8法,通过检测转染结肠癌细胞后不同时期的450nm处吸光度值,测定细胞增殖能力;(3)采用Transwell小室侵袭实验检测细胞侵袭能力,分析miR-92a和miR-29c的相对表达量与结肠癌细胞增殖和侵袭的关系。结果 (1)与对照组相比,转染miR-92ainhibitor后,结肠癌细胞系SW480的miR-92a表达水平明显降低(P0.01),增殖能力和侵袭能力均受到明显抑制(P0.01);(2)转染miR-29cmimic后,结肠癌细胞系SW480中miR-29c表达水平明显升高(P0.01),但SW480细胞系的增殖能力和侵袭能力均受到明显抑制(P0.01)。结论 miR-92a在结肠癌细胞中过表达能提高肿瘤细胞的增殖能力和侵袭能力,miR-29c则发挥着相反的作用。     

miR-151a-3p对胰腺癌细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响

目的探讨miR-151a-3p在胰腺癌细胞中的表达及miR-151a-3p表达对胰腺癌细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-151a-3p在三种胰腺癌细胞系的表达情况;利用脂质体转染技术将miR-151a-3p mimic和mimic NC转染至胰腺癌BxPC-3细胞中,qRT-PCR检测转染后miR-151a-3p在BxPC-3细胞中的表达水平;CCK-8法检测转染后BxPC-3细胞的增殖能力;Transwell实验检测转染后BxPC-3细胞的迁移及侵袭能力;流式细胞术检测转染BxPC-3细胞的凋亡能力。结果 qRT-PCR结果显示,3种胰腺癌细胞系中miR-151a-3p表达水平均显著升高(P0.01),其中,BxPC-3细胞中miR-151a-3p表达水平最高;转染miR-151a-3p mimic的BxPC-3细胞中miR-151a-3p表达水平显著高于mimic NC和空白组(P0.001);CCK-8实验结果显示,转染miR-151a-3p mimic的BxPC-3细胞增殖能力显著高于mimic NC和空白对照组(P0.01);Transwell实验结果显示,转染miR-151a-3p mimic的BxPC-3细胞迁移及侵袭能力显著高于mimic NC和空白对照组(P0.01);流式细胞术结果显示,转染miR-151a-3p mimic的BxPC-3细胞凋亡率显著低于mimic NC和空白对照组(P0.001)。结论 miR-151a-3p在胰腺癌细胞中高表达,过表达miR-151a-3p促进胰腺癌细胞增殖、迁移及侵袭,抑制细胞凋亡。     

lncRNA MVIH在结直肠癌细胞中表达及干扰其表达对SW620细胞功能的影响

目的 探讨肝癌微血管浸润相关的lncRNA (lncRNA MVIH)在结直肠癌细胞中的表达及干扰其表达对SW620细胞增殖、侵袭、迁移和上皮间质转化的影响。方法 采用实时荧光定量-聚合酶链反应(PCR)检测lncRNA MVIH在人正常结直肠上皮细胞株FHC和人结直肠癌细胞株SW480、HT29、LOVO、SW620中的表达。将体外培养的SW620细胞分为对照组、阴性组和干扰组,采用CCK-8法、平板克隆实验和Transwell小室法分别检测细胞增殖、克隆形成及细胞侵袭、迁移能力,Western印迹检测细胞中上皮间质转化相关的蛋白E-钙黏附蛋白(cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和N-cadherin的表达。结果 与FHC细胞相比,SW480、HT29、LOVO和SW620细胞中lncRNA MVIH表达水平显著升高(P<0.05),且SW620细胞最高。与对照组相比,干扰组细胞中lncRNA MVIH和Vimentin、N-cadherin蛋白的表达水平均显著降低,E-cadherin蛋白的表达水平显著升高,且细胞增殖能力显著减弱,克隆细胞数、侵袭细胞数、迁移细...     

Syndecan-1对结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

背景:Syndecan-1是表达于上皮细胞表面的一种硫酸乙酰肝素蛋白聚糖,在多种肿瘤细胞中的表达下降,与肿瘤的多种生物学行为密切相关,但其在细胞水平上对结直肠癌发展的作用目前尚无深入的研究。目的:评估Syndecan-1对人结肠癌细胞株增殖、迁移和侵袭能力的影响,并初步探讨可能的分子机制。方法:分别将Syndecan-1高表达质粒和Syndecan-1 siRNA转染人结肠癌细胞株SW620和SW480,分别以转染空载质粒或无关序列作为阴性对照。采用CCK-8法检测细胞增殖,Transwell细胞迁移实验和Matrigel细胞侵袭实验分别检测细胞迁移、侵袭能力,蛋白质印迹法检测上皮细胞间质转化主要分子标记物E-cadherin的蛋白表达。结果:与阴性对照组相比,转染Syndecan-1高表达质粒的SW620细胞生长速度、迁移细胞数和侵袭细胞数均明显降低,同时E-cadherin表达升高;转染Syndecan-1 siRNA的SW480细胞生长速度、迁移细胞数和侵袭细胞数均明显升高,同时E-cadherin表达降低。结论:Syndecan-1能抑制结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,其机制可能与上皮细胞间质转化有关。     

microRNA-31对胃癌细胞系AGS迁移的影响

目的探讨胃癌组织中microRNA(miR)-31的表达情况及miR-31对胃癌细胞系AGS迁移的影响。方法收集27例胃癌患者的胃癌组织和对应的正常组织,采用实时定量(qRT)-PCR检测miR-31的表达水平。筛选胃癌细胞系AGS细胞作为研究载体,通过转染miR-31mimics(实验组)使胃癌细胞系AGS细胞内miR-31的表达升高。采用划痕愈合实验和Transwell小室实验观察miR-31对胃癌AGS细胞迁移能力的影响。结果胃癌组织miR-31的表达明显低于对应的正常组织(P<0.05);与对照组相比,实验组miR-31的表达水平升高(P<0.05)。划痕实验结果显示实验组迁移距离明显小于对照组(P<0.05),Transwell小室实验结果显示转染miR-31mimics后,胃癌AGS细胞的迁移能力下降。结论 miR-31在胃癌组织中呈低表达,过表达的miR-31能够抑制AGS细胞的迁移。     

miR-381通过下调SETDB1抑制结肠癌细胞转移

目的探讨人结肠癌组织中miR-381的临床意义及对结肠癌转移能力的影响。方法荧光实时定量聚合酶链反应(PCR)检测结肠癌及癌旁组织中miR-381的表达量;通过人工合成的miR-381模拟物在SW480细胞中构建miR-381过表达细胞株;通过划痕愈合试验、Transwell侵袭小室检测细胞迁移及侵袭情况;PCR及蛋白免疫印迹检测miR-381潜在靶点组蛋白赖氨酸N端甲基转移酶SET结构域分支型(SETDB)1的表达变化;免疫组化染色检测SETDB1在结肠癌组织中的表达及与miR-381的表达相关性。结果 miR-381在结肠癌组织中表达水平明显低于癌旁组织(t=10.080,P0.001);过表达miR-381能够抑制结肠癌SW480细胞的迁移(t=4.223,P=0.027)及侵袭能力(t=3.651,P=0.033);提高SW480细胞内miR-381的表达后显著下调了SETDB1 mRNA(t=10.521,P=0.008)及蛋白(t=4.811,P=0.027)在SW480细胞内的表达水平,并抑制了MMP-2的表达水平(t=3.472,P=0.036)。结肠癌组织内SETDB1表达升高(t=4.811,P=0.027),且与miR-381的表达水平呈负相关关系(r=-0.325,P=0.021)。结论 miR-381在结肠癌中表达降低,miR-381能够通过抑制结肠癌中SETDB1而发挥抗肿瘤转移作用。     

过表达CD44v6基因对人大肠癌SW480细胞侵袭迁移能力的影响

目的:研究CD44v6基因过表达对SW480细胞侵袭和迁移能力的影响.方法:慢病毒介导的CD44v6过表达细胞(CD44v6组)和空载体对照细胞(NC组)由前期实验构建.采用荧光显微镜观察增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)表达、实时荧光定量PCR检测CD44v6 mRNA表达水平、免疫荧光检测Flag标签蛋白三种方法重新鉴定过表达细胞模型;CCK-8法检测细胞增殖活性;划痕试验和Transwell试验检测细胞侵袭和迁移能力.结果:绿色荧光蛋白观察显示细胞转染效率近100%;实时荧光定量PCR显示CD44v6组细胞CD44v6 mRNA表达水平较对照组.显著升高(P0.001);Flag标签蛋白免疫荧光染色显示过表达CD44v6蛋白主要定位于细胞膜.CCK-8结果显示2组细胞增殖无明显差异;划痕试验结果显示CD44v6组细胞划痕愈合指数较对照组显著增高(P0.05);Transwell试验结果显示CD44v6组细胞迁移和侵袭相关指数均较对照组显著增高(均P0.05),且CD44v6抗体处理后,CD44v6组细胞迁移和侵袭相关指数均较前显著减低(均P0.05).结论:CD44v6基因过表达能显著增强SW480细胞侵袭和迁移能力.     

miR-613靶向KLF4对结肠癌增殖及迁移的影响及其分子机制

[目的]确定miR-613在结肠癌组织和结肠癌细胞系中的表达以及miR-613靶向KrüPPel样因子4(KLF4)对人结肠癌细胞增殖、迁移的影响。[方法]采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测35例结肠癌组织及其癌旁组织中miR-613和KLF4的表达水平,并进行相关性分析。并采用qRT-PCR检测miR-613在结肠癌细胞系(SW480,SW620,HCT116,DLD1,LOVO,NCM460,RKO)中的表达。在HCT116和SW480中分别转染miR-613模拟物和抑制剂。CCK8及EDU实验用于检测转染前后细胞增殖能力的改变。Transwell实验检测细胞迁移能力的改变。使用双荧光素酶报告基因测量miR-613与KLF4的相互作用关系。功能回复实验用于确定miR-613靶向KLF4对结肠癌细胞增殖、迁移的影响。[结果]miR-613 mRNA在结肠癌组织中表达明显高于其癌旁组织(P0.05);KLF4在结肠癌组织中表达明显低于其癌旁组织(P0.05);miR-613与KLF4表达呈负相关(R~2=0.74,P0.001)。在结肠癌细胞系中,HCT116中miR-613的表达水平最低,SW480中miR-613的表达水平最高。在HCT116中,miR-613的表达上调后,细胞增殖活性显著于阴性对照组(P0.05);细胞迁移能力明显升高(P0.05);KLF4蛋白表达水平明显降低(P0.05)。SW480细胞中,抑制miR-613表达后,增殖活性明显低于阴性对照组(P0.05);细胞迁移能力明显降低(P0.05);KLF4蛋白表达水平明显降低(P0.05)。在HCT116细胞中,miR-613模拟物与KLF4 3'UTR野生型质粒共转染,与阴性对照组比较,荧光素酶活性显著增加,差异有统计学意义(P0.05)。miR-613抑制剂和si-KLF4共转染至结肠癌细胞后,si-KLF4可挽救由于miR-613低表达导致的细胞增殖、迁移能力的降低。[结论]miR-613在结肠癌组织中高表达;miR-613通过靶向KLF4基因调控结肠癌细胞的增殖和迁移。     

长链非编码RNA CASC2通过靶基因miR-514b-5p调控结直肠癌细胞增殖、侵袭、迁移的作用机制

目的探讨肿瘤易感候选基因(CASC)2对结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及潜在的作用机制。方法运用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测人正常结肠黏膜上皮细胞NCM460和结直肠癌细胞SW480中CASC2和miR-514b-5p的表达水平;将pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA-CASC2组(转染pcDNA-CASC2 mimics)、si-NC组(转染si-NC)、si-CASC2组(转染si-CASC2)、anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、anti-miR-514b-5p组(转染anti-miR-514b-5p)、pcDNA-CASC2+miR-NC组(共转染pcDNA-CASC2 mimics和miR-NC)、pcDNA-CASC2+miR-514b-5p组(共转染pcDNA-CASC2 mimics和miR-514b-5p)、WT-CASC2+miR-NC组(共转染WT-CASC2和miR-NC)、WT-CASC2+miR-514b-5p组(共转染WT-CASC2和miR-514b-5p mimics)、MUT-CASC2+miR-NC组(共转染MUT-UCA1和miR-NC)、MUT-CASC2+miR-514b-5p组(共转染MUT-CASC2和miR-514b-5p mimics)均用脂质体法转染至SW480细胞;采用细胞计数试剂盒(CCK)-8法检测各组细胞增殖;Transwell检测各组细胞迁移和侵袭;双荧光素酶报告基因实验检测荧光活性。结果结直肠癌SW480细胞于正常结肠黏膜上皮细胞NCM460、CASC2的表达水平显著降低,miR-514b-5p的表达水平显著升高(P0.05);过表达CASC2、抑制表达miR-514b-5p均可抑制SW480细胞增殖、迁移和侵袭;CASC2可靶向调控miR-514b-5p的表达。miR-514b-5p过表达可部分逆转CASC2过表达对结直肠癌SW480细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用。结论长链非编码RNA CASC2可抑制结直肠癌SW480细胞的增殖、迁移和侵袭,其机制可能与靶向miR-514b-5p基因有关,将可为结直肠癌的预防和治疗提供新靶点。     

microRNA-1Ob促进人低转移肺癌细胞株95-C的增殖及侵袭

目的 探讨microRNA-10b(miRNA-10b)对人低转移肺癌细胞95-C的增殖、细胞周期、凋亡以及侵袭及迁移能力的影响.方法 用脂质体法将miRNA-10b真核表达质粒瞬时转染入95-C,实验设置空白对照组、空载体转染组和miRNA-10b质粒转染组,转染后荧光显微镜下观察转染效率,实时定量RT-PCR检测各组细胞miRNA-10b的表达,细胞增殖实验检测各组细胞的增殖情况,流式细胞仪检测各组细胞周期及细胞凋亡率,Transwell实验检测各组细胞侵袭能力,细胞划痕实验检测各组细胞迁移能力.结果 转染后miRNA-10b质粒转染组细胞增殖速度明显增快,细胞凋亡率降低,细胞侵袭及迁移能力增强,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 miRNA-10b可以促进95-C细胞的增殖,降低细胞凋亡,增加95-C细胞的侵袭及迁移能力.     

miR-425对胶质瘤细胞迁移与侵袭的影响

目的探讨miR-425对人胶质细胞瘤U87细胞迁移与侵袭能力的影响。方法利用Lipo2000转染试剂体外瞬时转染人胶质细胞瘤U87,将细胞分为实验组(转染miR-425 mimics)、抑制组(转染miR-425 inhibitors)、空白组(无转染)。Real-time PCR检测细胞中miR-425表达;划痕实验检测细胞的迁移距离,Transwell实验检测细胞的迁移以及侵袭能力,Western印迹检测基质金属蛋白(MMP)2、MMP9的表达水平。结果与空白组相比,miR-425 mimics组miR-425表达明显上调,约为空白组的8倍,细胞侵袭与迁移能力下降,MMP2、MMP9表达下降,miR-425 inhibitors组miR-425表达明显下调,约为空白组的0.14倍,细胞侵袭与迁移能力显著增强,MMP2、MMP9表达增强。结论 miR-425的表达水平与胶质瘤U87细胞的迁移与侵袭能力密切相关。     

miR-130a调控肿瘤抑制因子对结直肠癌细胞生物学行为的影响

目的通过检测miR-130a的表达情况及miR-130a与肿瘤抑制因子(CYLD)的靶向关系,探讨miR-130a是否可通过调控CYLD对结直肠癌SW480细胞生物学行为产生影响。方法将结直肠癌SW480细胞设置为对照组、阴性转染组、miR-130a inhibitor组,采用qRT-PCR检测各组miR-130a的表达; MTT法、Transwell法、流式细胞术分别检测各组SW480细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移情况;双荧光素酶报告基因检测miR-130a与CYLD靶向关系; Western blot检测各组细胞CYLD、增殖、凋亡、侵袭迁移相关蛋白表达情况。结果与对照组相比,miR-130a inhibitor组的miR-130a表达水平显著降低(P 0.05)。与对照组相比,miR-130a inhibitor组SW480细胞凋亡率显著增加,而存活率、侵袭迁移数显著降低(P 0.05)。与对照组相比,miR-130a inhibitor组c-Myc、CyclinD1、MMP7、Bcl-2表达水平显著降低,Bax、Caspase-3、CYLD表达水平显著增加(P 0.05)。靶基因预测结果显示,CYLD是miR-130a的潜在目标基因,与pmirGLO-CYLD-wt+miR-NC组相比,pmirGLO-CYLD-wt+miR-130a mimics组荧光素酶活性显著降低。结论 miR-130a表达沉默可能通过促进CYLD表达抑制SW480细胞的增殖、侵袭、迁移,促进细胞凋亡。     

ku80蛋白表达水平与肝癌细胞侵袭迁移能力的相关性

目的观察ku80蛋白表达水平与肝癌细胞侵袭迁移能力的相关性。方法使用肝癌细胞系MHCC97-H、 MHCC97-L、HepG2及正常人肝细胞HL-7702为研究对象,分别采用RT-PCR、Western印迹方法检测ku80 mRNA及蛋白水平;体外划痕实验、Transwell侵袭实验观察4株细胞迁移、侵袭能力;免疫荧光检测ku80亚细胞定位;线性相关分析ku80及其mRNA与肝癌细胞系迁移、侵袭能力的相关性。结果 ku80 mRNA及蛋白在4株细胞系中均有表达,且在3株肝癌细胞中的表达明显高于正常肝细胞系HL-7702(均P0.05),其中MHCC97-H细胞表达水平最高(P0.01);体外划痕实验、Transwell侵袭实验显示3株肝癌细胞系的迁移、侵袭能力明显高于HL-7702细胞系(均PO.05),其中MHCC97-H的迁移侵袭能力最强(P0.01)。ku80蛋白定位于细胞核。线性相关性分析显示ku80蛋白及mRNA的表达水平与肝癌细胞系的迁移、侵袭能力呈正相关。结论 ku80蛋白主要在细胞核表达,其表达水平与肝癌细胞系的迁移、侵袭能力呈正相关。     

MicroRNA-21在胃癌细胞中促进上皮-间质转化的研究

目的探讨MicroRNA-21在胃癌细胞上皮-间质转化中的作用及其机制。方法利用Lipofectamine 2000脂质体将miR-21 mimics、miR-21 inhibitor转染入AGS细胞中;Real-time聚合酶链反应(RT-PCR)法测定AGS细胞内miR-21的表达;采用划痕法、Transwell小室检测细胞的迁移和侵袭能力;Western blotting方法检测上皮-间质转化(EMT)相关蛋白表达的表达变化。结果 AGS细胞转染miR-21 mimics后,细胞的迁移和侵袭能力均高于对照组(P<0.05),Western blot结果显示E-Cadherin、PTEN表达下降,Vimentin表达升高;AGS细胞转染miR-21 inhibitor后,细胞的迁移和侵袭能力均低于对照组(P<0.05);E-Cadherin、PTEN表达升高,Vimentin表达降低。结论 miR-21可以诱导AGS胃癌细胞迁移和侵袭。E-cadherin和PTEN表达下调和上调Vimentin可能是miR-21作用的分子机制。miR-21在胃癌肿瘤转移中可能起着重要作用,可能成为胃癌治疗的一个潜在靶点。     

沉默miR-107对乳腺癌细胞侵袭及上皮-间质转化的影响

目的 探究miR-107对乳腺癌细胞侵袭及上皮-间质转化(EMT)的影响和机制。方法 利用荧光定量PCR方法分析miR-107在正常乳腺细胞及乳腺癌细胞系中的表达差异;HS578T细胞分别转染对照miRNA和miR-107抑制剂,利用划痕实验分析细胞迁移能力,用Transwell实验分析细胞侵袭能力,用实时荧光定量PCR方法检测细胞EMT标志物的表达水平,用蛋白质免疫印迹实验检测细胞PTEN/AKT信号通路。结果 与正常乳腺细胞相比,miR-107在乳腺癌细胞株中高表达;沉默miR-107的表达抑制HS578T细胞的迁移、侵袭及EMT,促进PTEN/AKT信号通路。结论 miR-107在乳腺癌细胞中高表达,沉默miR-107表达通过PTEN/AKT信号通路抑制乳腺癌细胞迁移、侵袭和EMT。