金黄色葡萄球菌影响小鼠主要组织相容性复合物I类分子的实验研究

目的：研究金黄色葡萄球菌对小鼠主要组织相容性复合物I类分子（MHCI）基因表达的影响。方法：30只BALB／c小鼠随机分成两组,对照组10只,实验组20只,实验组20只小鼠于实验前1天皮下注射金黄色葡萄球菌,实验持续8天。实验结束后取肝脏、脾脏、肾脏和肺组织少许提取RNA,RT-PCR测定MHCI类基因mRNA的表达,Westem印迹测定它们的蛋白表达。结果：第8天实验结束时,肝脏、脾脏、肾脏和肺组织的MHCI类基因mR．NA表达分别为4．35、3．86、4．61和4．23,明显高于对照组;MHCI类基因蛋白表达分别为7．12、7．23、8．65和9．83．明显高于对照组。结论：金黄色葡萄球菌能明显升高机体MHcI基因和蛋白的表达。     

烟雾暴露对卵白蛋白致敏的急性支气管哮喘大鼠模型肺组织激活素A mRNA和蛋白表达的影响

目的分析烟雾暴露对卵白蛋白致敏的急性支气管哮喘大鼠模型肺组织激活素A mRNA和蛋白表达的影响。方法取28只健康成年雄性SD大鼠,按照随机分配原则,分为空白对照组(正常大鼠,不采取任何处理)、阴性对照组(正常大鼠+烟雾暴露)、模型组(制备卵白蛋白致敏的急性支气管哮喘大鼠模型)、实验组(急性支气管哮喘大鼠+烟雾暴露),每组各7只。行苏木精-伊红染色,观察各组大鼠肺组织病理学改变;采用免疫印迹法检测大鼠肺组织中激活素A蛋白表达水平;根据实时荧光定量聚合酶链反应检测大鼠肺组织中激活素A mRNA相对表达量。结果经病理学染色结果可知,空白对照组肺组织病理学未见异常,而阴性对照组、模型组及实验组肺组织出现不同程度的病理学改变,且实验组更加明显。经免疫印迹法检测可知,阴性对照组、模型组及实验组肺组织中激活素A蛋白表达水平较空白对照组均明显升高(P <0. 05);模型组肺组织中激活素A蛋白表达水平较阴性对照组明显升高(P <0. 05);实验组肺组织中激活素A蛋白表达水平较阴性对照组和模型组明显升高(P <0. 05)。经实时荧光定量聚合酶链反应检测可知,相比空白对照组,阴性对照组、模型组及实验组肺组织中激活素A mRNA相对表达量均明显上调(P <0. 05);相比阴性对照组,模型组肺组织中激活素A mRNA相对表达量明显上调(P <0. 05);相比阴性对照组和模型组,实验组肺组织中激活素A mRNA相对表达量明显上调(P <0. 05)。结论在卵白蛋白致敏的急性支气管哮喘大鼠模型中,经烟雾暴露可促进大鼠肺组织激活素A蛋白表达,提高激活素A mRNA表达量,并进一步导致气道炎症加重。     

强肌健力口服液对脾虚小鼠RNA合成的影响

目的：观察强肌健力口服液对实验性脾虚证小鼠RNA合成的影响，探讨该方治疗脾胃虚损型重症肌无力的作用途径。 方法：实验于2005-10／11在广州中医药大学核医学实验室完成。①采用随机抽签法将4周龄健康雄性NIH小鼠68只分为5组：正常对照组（n=13）、脾虚模型组（n=16）、强肌健力日服液商剂量组（n=13）、强肌健力口服液中剂量组（n=13）、四君于汤组（n=13）。②采用利血平复制脾虚证动物模型，正常对照组动物腹腔注射生理盐水0．1mL／d。同时灌服蒸馏水0．5mL／d；脾虚模型组动物腹腔注射利血平0．2mg／（kg&;#183;d），并灌服蒸馏水0．5mL／d；强肌健力口服液高剂量组及中剂量组动物腹腔注射利血平0．2mg／（kg&;#183;d）。并灌胃强肌健力口服液（由北芪、党参、升麻、白术、甘草等组成。含生药120．4g／L），给药剂量分别为26g／kg及13g／kg，1次／d；四君子汤组动物腹腔注射利血平0．2mg／（kg&;#183;d），并灌服四君子汤（由党参、白术、茯苓、灸甘草组成）。26g/kg，1次／d，连续用药16d。测定各组动物脾脏、肾脏、胸腺、肝脏、心肌、小肠等组织RNA水平的变化，以及各组动物造模前后体质量和脾、肾、胸腺、肝脏、心肌组织质量体质量比值的变化。 结果：在实验过程中因灌胃失误及造模等原因引起动物死亡，其中脾虚模型组4只，强肌健力口服液高剂量组3只，强肌键力口服液中剂量组织1只，四君子汤组1只，最终进入结果分析为59只。①与正常对照组比较。脾虚模型组动物脾脏、肾脏、胸腺、肝脏、心肌、小肠组织中RNA含量均显著降低（Q=5．07～18．92，P均〈0．01）；用药16d后强肌健力口服液26g／kg组能使脾脏、肾脏、肝脏、小肠组织中RNA含量显著升高（Q=4．45～6．11，P〈0．05或0．01）；强肌健力口服液13g／kg组能使肾脏、胸腺、肝脏、小肠组织RNA含量显著升高（Q=3．47～5．24，P〈0．05或0．01）；②实验前各组小鼠体质量差异不显著（P=0．863）；实验结束后脾虚模型组小鼠体质量明显比正常对照组减轻（Q=17．08，P〈0．01）；强肌健力口服液和四君子汤组小鼠体质量比脾虚模型组显著升高（Q=4．73～7．76，P均〈0．01）。③脾虚模型组小鼠脾脏、肾脏、胸腺、肝脏、心肌组织质量比正常对照组减轻（Q=6．36～12．83，P均〈0．01），且脾脏、肾脏、胸腺组织比值比正常对照组显著降低（Q=3．01～5．13，P〈0．05或0．01）；强肌健力口服液和四君子汤组能使小鼠脾脏、肾脏、胸腺、心肌、肝脏组织质量增加（Q=3．57～10．51，P〈0．05或0．01），同时能升高脾脏、肾脏、胸腺、心肌组织比值（Q=3．01～7．28，P〈0．05或0．01）。 结论：脾虚证的发生与RNA合成减少有关，强肌健力口服液对RNA合成有促进作用，从而发挥其健脾益气、强肌健力作用。     

独立生长因子1在内毒素耐受小鼠肺组织中的作用研究

目的:研究独立生长因子1(Gfi1)在内毒素耐受小鼠接受大剂量内毒素(LPS)刺激后的表达。方法:74只C57BL/6小鼠随机分两组,对照组用0．9%NaCl注射后用大剂量LPS刺激,内毒素耐受组用小剂量LPS预处理后用大剂量LPS刺激。比较两组小鼠存活率,各时间点肺组织病理。用ELISA法检测肺组织TNF-α,RT-PCR检测肺组织Gfi1 mRNA,免疫组化法检测肺组织Gfi1蛋白表达。结果:内毒素耐受组小鼠存活率高,肺组织炎症反应轻,LPS刺激后TNF-α水平未见上升;LPS刺激后2h,6h小鼠肺组织Gfi1的mRNA表达较对照组高(P＜0．01);LPS刺激后6h、12h免疫组化显示小鼠肺组织Gfi1表达比对照组高(P＜0．01)。结论:内毒素耐受时,大剂量内毒素引起的肺部炎症反应较轻可能与肺部Gfi1高表达有关。     

咪喹莫特对哮喘小鼠TGF—β1及Smads蛋白的影响

目的 观察咪喹莫特对哮喘小鼠肺组织转化生长因子β1（TGF-β1）及其信号转导分子Smads表达的影响。方法 40只小鼠按随机数字表法分成4组，每组10只。正常对照组（A组）、哮喘模型组（B组）、布地奈德治疗组（C组）和咪喹莫特治疗组（D组）。小鼠于第0、14天以卵白蛋白（OVA）致敏，第24天开始雾化吸入1％OVA激发并持续28d，建立哮喘气道重塑模型，C组和D组在吸入OVA前2h分别雾化吸入布地奈德或咪喹莫特30min。于最后1次雾化结束后24h，对肺组织切片行苏木精-伊红（HE）染色观察病理学改变、过碘酸雪夫（AB—PAS）染色定量杯状细胞百分比及黏液分泌、Masson染色测定胶原沉积；用免疫组化方法检测肺组织TGF-β1的蛋白表达水平；用逆转录-聚合酶链反应半定量检测肺组织TGF-β1 mRNA以及Smad2、Smad7 mRNA表达水平。结果 B组杯状细胞增生明显，伴黏液高分泌，气管壁胶原过度沉积，与A组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；D组杯状细胞轻度增生，黏液分泌减少，气管壁胶原沉积减轻，与B组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；B组TGF-β1蛋白和mRNA、Smad2mRNA的表达较A组增加，差异有统计学意义（P〈0．05），C、D组TGF-β1蛋白和mRNA、Smad2mRNA的表达下降，与B组比较差异均有统计学意义（P〈0．05），D组可显著上调Smad7mRNA的表达，与B组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论 雾化吸入咪喹莫特通过抑制慢性哮喘小鼠肺组织TGF-β1，蛋白和mRNA、Smad2mRNA的过度表达，上调Smad7mRNA的表达，从而阻断TGF-β1的胞内信号转导，可在一定程度上减轻哮喘小鼠的气道重塑。     

强肌健力口服液影响脾虚小鼠蛋白质合成的效应

目的：观察强肌健力口服液对实验性脾虚证小鼠蛋白质合成的影响。方法：实验于2005-08／09在广州中医药大学核医学实验室完成。采用随机抽签法将4周龄健康雄性NIH小鼠78只分为正常对照组（n=14）、脾虚模型组（n=17）、强肌健力口服液高剂量组（n=15）．强肌健力口服液中剂量组（n=17）、四君子汤组（n=15）。采用利血平复制脾虚证动物模型，正常对照组动物腹腔注射生理盐水0．1mL／（只&;#183;d），同时灌服蒸馏水0．5mL／（只&;#183;d）；脾虚模型组动物腹腔注射利血平0．2mg／（kg&;#183;d），并灌服蒸馏水0．5mL／（只&;#183;d）；强肌健力口服液高剂量组及中剂量组动物腹腔注射利血平0．2mg／（kg&;#183;d），并灌胃强肌健力口服液（由北芪、党参、升麻、白术、甘草等组成，每毫升含生药1．204g），给药剂量为26g／kg及13g／kg，1次／d；四君子汤组动物腹腔注射利血平0．2mg／（kg&;#183;d），并灌服四君子汤（由党参、白术、茯苓、灸甘草组成）26g/kg，1次／d，连续用药16d。测定各组动物脾、胸腺、肾、肝、小肠等组织蛋白质水平的变化，以及各组动物造模前后体质量和脾、肾、胸腺、肝脏质量的变化。结果：在实验过程中因灌胃失误及造模等原因引起动物死亡，其中正常对照组1只，脾虚模型组5只，强肌健力口服液高剂量组3只，四君子汤组2只，最终进入结果分析67只。①与正常对照组比较，脾虚模型组动物脾脏、肾脏、肝脏、小肠组织蛋白质含量均显著降低（Q=10．64，8．06，14．71，11.22；P均〈0．01），胸腺组织蛋白质含量则升高（Q=10．68；P〈0．01），心肌组织则无改变；强肌健力口服液及四君子汤能使脾脏、肾脏、肝脏组织蛋白质含量升高（Q=3．67，2．93，3．78，3．95；P均〈0．05）；同时使胸腺蛋白质含量降低。②实验前各组小鼠体质量差异不显著（P=0．993）；实验结束后脾虚模型组小鼠体质量明显比正常对照组减轻（Q=17．32，P〈0．01）；强肌健力口服液和四君子汤组小鼠体质量比脾虚模型组显著升高（Q=6．69，5．03，8．30，P均〈0．01）。③脾虚模型组小鼠脾脏、肾脏、胸腺、肝脏、心肌组织质量比正常对照组减轻（P均〈0．01）；强肌健力口服液和四君子汤组小鼠脾脏、肾脏、胸腺、肝脏、心肌组织质量增加。结论：强肌健力口服液对蛋白质合成有促进作用，从而发挥其健脾益气作用。     

控氧灌注对体外循环犬肺缺血-再灌注损伤的保护作用

目的：探讨控氧灌注对体外循环犬肺损伤的保护作用。方法：14只健康犬随机分为实验组和对照纽,每组7只,开胸建立体外循环,经过60min升主动脉阻断和90min再灌注。实验组在主动脉开放瞬间调整FiO2至0．40,随后每5min依次上调0．10,最后达0．80并保持至实验结束,对照组开放后再灌注全程FiO2维持0．80。分别留取开胸后、主动脉开放后25、90min的血液标本及肺标本,检测血清IL-15和TNF-α含量,肺组织NF-κB蛋白水平、髓过氧化物酶（MPO）活性、丙二醛含量,肺组织干／湿重比及光镜下病理变化。结果：再灌注后5、10、15、20min实验组的PaO2均低于对照组（P均〈0．05）。再灌注后25、90min实验组肺组织NF—κB蛋白表达水平明显低于对照组（P〈0．05）,其肺组织MPO活性、丙二醛,血IL-6和TNF-α水平也低于对照组（P〈0．05或0．01）。再灌注后25、90min实验组肺组织干／湿重比值高于对照组,肺损伤评分也较低（P〈0．05）。结论：控氧灌注可有效降低体外循环犬肺NF-κB等炎症因子表达,减轻肺损伤程度。     

白细胞介素13对HEL细胞分化和转录因子c-fos表达的影响

目的研究白细胞介素13（IL-13）对红白血病细胞系HEL细胞分化作用及对HEL细胞转录因子c-fos表达的影响。方法用RT—PCR方法检测HEL细胞IL-13受体仪1、GPⅡb、vWF和c-fos基因mRNA表达，用Western blot和流式细胞术分别检测IL-13受体α1、c-fos、GPⅡb和vwF蛋白水平的表达。结果HEL细胞表达IL-13受体α1，用IL-13（100ng／ml）作用于HEL细胞，GPⅡb和vWF基因mRNA表达上调，实验组和对照组GPⅡb／β-actin吸光度比值分别为2．912，1．303，实验组为对照组的2．23倍（P〈0．05）；实验组和对照组vWV／f3一actin吸光度比值分别为0．506，0．217，实验组为对照组的2．33倍（P〈0．05）。流式细胞术分析结果显示，实验组GPⅡb和vWF蛋白表达明显高于对照组。IL-13作用于HEL细胞30min，c—fos基因mRNA表达水平达高峰，IL-13作用HEL细胞60min，c—fos蛋白表达达高峰，30min组、60min组c-fos/β-actin吸光度比值高于其它各组（P〈0．05）。结论IL-13可促进HEL细胞分化，并上调c-fos表达。     

白介素-17A在急性百草枯中毒小鼠肺损伤中的作用北大核心CSCD

目的探讨白介素-17A（IL-17A）在急性百草枯中毒致小鼠肺损伤中的作用。方法120只健康SPF级ICR雄性小鼠,随机（随机数字表法）分为3组：生理盐水对照组（NS）、百草枯染毒组（PQ）和抗体中和组（PQ＋Ah）,每组40只。PQ组和PQ＋Ab组小鼠以25mg／kg的剂量一次性经口灌胃5mg／mL的PQ溶液建立中毒模型,抗体中和组每只小鼠于染毒后立即经腹腔注射5μg IL-17A中和性抗体;NS组小鼠给予相应量的生理盐水。染毒后每组按8h、1d、3d、5d、7d各取6只存活小鼠进行实验,测定小鼠肺湿干比（W／D）,HE染色光镜下观察小鼠肺组织病理变化并评分,酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清细胞因子IL-17A、白介素-22（IL-22）、白介素-6（IL-6）、转化生长因子-β（TGF-B）含量,免疫组化法检测肺组织白介素-23受体（IL-23R）表达,实时荧光定量PCR（qRT—PCR）法测定肺组织维甲酸相关孤核受体（RORyt）mRNA表达,SPSS22．0软件分析数据。结果PQ灌胃后,PQ组和PQ＋Ab组小鼠肺W／D显著升高（P〈0．01）,肺组织出现急性损伤的病理改变,血清细胞因子（IL-17A、IL-22、IL-6、TGF—B）含量增多（P〈0．05）、肺组织中IL-23R和RORYt mRNA的表达升高（P〈0．01）;抗体中和IL-17A后,PQ＋Ab组小鼠肺W／D降低（P〈0．05）,肺病理损伤减轻,血清细胞因子水平下降（P〈0．05）,肺组织中IL-23R和RORYt mRNA的表达降低（P〈0．05）。结论IL-17A参与急性百草枯中毒致小鼠肺损伤过程,阻断IL-17A能够明显减轻小鼠肺急性损伤。     

二烯丙基三硫对急性肺损伤小鼠肿瘤坏死因子-α表达及核转录因子-kB活性的影响

目的 探讨二烯丙基三硫（DATS）对脂多糖（LPS）致急性肺损伤（ALI）小鼠肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达及核转录因子-kB（NF—kB）活性的影响。方法 复制LPS致ALI小鼠模型。实验动物按随机数字表法分为生理盐水对照组、ALI模型组、DATS预防组、DATS治疗组和DATS对照组。采用酶联免疫吸附法（ELLSA）测定各组血清和肺组织匀浆上清液中TNF—α浓度；用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测各组肺组织TNF-α mRNA表达；凝胶电泳迁移率改变分析（EMSA）检测肺组织NF—kB活性。结果 ALI模型组2h血清及肺组织TNF—α含量明显升高（P均〈0．01），6h有所降低，但仍高于生理盐水和DATS对照组（P均〈0．01）；DATS预防组2h和6h血清及肺组织TNF—α含量较ALI模型组均明显降低（P〈0．05或P＜0．01），但DATS治疗组无明显效果（P均〉0．05）。ALI模型组2h肺组织TNF—α mRNA表达较生理盐水对照组和DATS对照组均明显升高（P均〈0．01），DATS预防组可明显抑制肺组织中TNF—α mRNA表达（P〈0．05），但DATS治疗组无明显效果。ALI模型组肺组织NF～kB活性较生理盐水对照组和DATS对照组均明显升高（P均〈0．05），DATS预防组可明显抑制肺组织NF—kB活性（P〈0．05），但DATS治疗组的抑制效果不明显。结论 预先给予DATS可抑制LPS诱导的ALI小鼠肺组织NF—kB活性和TNF—α mRNA表达，减少血清及肺组织中TNF—α的生成，具有一定的抗ALI作用。     

cis and trans elements differ among mouse strains with high and low extrahepatic complement factor B gene expression

Factor B (Bf), an enzyme of the alternative pathway of complement activation, is one of four major histocompatibility complex (MHC) class III genes. To ascertain the genetic mechanism for tissue-specific constitutive and regulated expression of Bf, we sequenced the regulatory regions 5'' of the gene from mice of different H-2 MHC haplotypes and assessed trans-acting factors, specific DNA binding nucleoproteins, in liver and kidney. Striking tissue-specific differences in constitutive expression of Bf were demonstrated in mice of H-2f or H-2z haplotypes when compared with H-2d or H-2u (kidney and intestinal Bf in H-2d or H-2u much greater than H-2f or H-2z). These differences correlated with a point nucleotide substitution 3 bp downstream of the upstream Bf initiation site that affects interaction with a DNA binding protein. This and additional cis differences localize the sequence substitutions responsible for previously identified restriction fragment length polymorphisms among inbred mouse strains and also reveal two previously unrecognized polymorphisms generated by SmaI and HinfI digestion. Evidence for differences in trans was found in a comparison of DNA binding nucleoproteins from kidney, but not liver, of B10.PL when compared with B10.M. These data, together with the high degree of sequence homology between human and mouse Bf 5'' flanking regions, should prompt a search for polymorphic restriction sites and cis binding elements in the Bf promoter that could serve as markers of human MHC-associated renal pathology and variants in local MHC class III gene expression.     

Neutrophils and their Fc gamma receptors are essential in a mouse model of transfusion-related acute lung injury

Transfusion-related acute lung injury (TRALI) is the most common cause of transfusion-related mortality. To explore the pathogenesis of TRALI, we developed an in vivo mouse model based on the passive transfusion of an MHC class I (MHC I) mAb (H2Kd) to mice with the cognate antigen. Transfusion of the MHC I mAb to BALB/c mice produced acute lung injury with increased excess lung water, increased lung vascular and lung epithelial permeability to protein, and decreased alveolar fluid clearance. There was 50% mortality at a 2-hour time point after Ab administration. Pulmonary histology and immunohistochemistry revealed prominent neutrophil sequestration in the lung microvasculature that occurred concomitantly with acute peripheral blood neutropenia, all within 2 hours of administration of the mAb. Depletion of neutrophils by injection of anti-granulocyte mAb Gr-1 protected mice from lung injury following MHC I mAb challenge. FcRgamma-/- mice were resistant to MHC I mAb-induced lung injury, while adoptive transfer of wild-type neutrophils into the FcRgamma-/- animals restored lung injury following MHC I mAb challenge. In conclusion, in a clinically relevant in vivo mouse model of TRALI using an MHC I mAb, the mechanism of lung injury was dependent on neutrophils and their Fc gamma receptors.     

小剂量奥沙利铂抗肿瘤血管生成作用的体内实验研究

目的观察小剂量奥沙利铂（L-OHP）对小鼠移植瘤生长的抑制作用及对血管内皮生长因子（VEGF）的表达和微血管密度（MVD）的影响。方法建立肝癌H22小鼠模型后,将小鼠随机分组4组,5％葡萄糖20mL／kg阴性对照组、环磷酰胺20mg／kg阳性对照组、奥沙利铂0．75mg／k和1．5mg／kg组,腹腔等容积注射给药,连续10d。第11天处死小鼠,计算瘤重抑制率,用免疫组化方法测定肿瘤组织中的VEGF和CD34的表达。结果1．5mg／kg奥沙利铂组的瘤重明显低于阴性对照组（P〈0．01）,而且肿瘤组织中的VEGF和CD34的表达也明显低于阴性对照组（P〈0．01）。结论小剂量奥沙利铂对H22肝癌荷瘤小鼠抑瘤作用明显,能抑制肿瘤组织中VEGF和MVD的表达;小剂量奥沙利铂在体内可能具有抑制肿瘤组织血管生成的作用。     

小剂量奥沙利铂抗肿瘤血管生成作用的体内实验研究

目的观察小剂量奥沙利铂(L-OHP)对小鼠移植瘤生长的抑制作用及对血管内皮生长因子(VEGF)的表达和微血管密度(MVD)的影响。方法建立肝癌H22小鼠模型后,将小鼠随机分组4组,5%葡萄糖20 mL/kg阴性对照组、环磷酰胺20 mg/kg阳性对照组、奥沙利铂0.75 mg/kg和1.5 mg/kg组,腹腔等容积注射给药,连续10 d,第11天处死小鼠,计算瘤重抑制率,用免疫组化方法测定肿瘤组织中的VEGF和CD34的表达。结果1.5 mg/kg奥沙利铂组的瘤重明显低于阴性对照组(P<0.01),而且肿瘤组织中的VEGF和CD34的表达也明显低于阴性对照组(P<0.01)。结论小剂量奥沙利铂对H22肝癌荷瘤小鼠抑瘤作用明显,能抑制肿瘤组织中VEGF和MVD的表达;小剂量奥沙利铂在体内可能具有抑制肿瘤组织血管生成的作用。     

Adenoviral transfer of a single donor-specific MHC class I gene to recipient bone marrow cells can induce specific immunological unresponsiveness in vivo

We investigated the delivery of a donor-specific MHC class I gene, H-2K(b), using a newly constructed replication-defective recombinant adenovirus (AdSV40K(b)) to recipient tissue before transplantation as a means of inducing donor-specific immunological unresponsiveness. AdSV40K(b) was able to transduce both a fibroblast cell line and freshly isolated bone marrow cells (BMCs) resulting in cell surface expression of H2-K(b) protein. Intravenous infusion of AdSV40K(b)-transduced syngeneic CBA/Ca (H-2(k)) BMCs into CBA recipient mice treated with an anti-CD4 monoclonal antibody 27 days before transplantation of a fully MHC-mismatched, C57BL/10 (H-2K(b+)), cardiac allograft resulted in significant long-term graft survival when compared with mice receiving the same dose of syngeneic BMCs transduced with a control adenovirus, AdRSVbetagal. Despite the induction of H-2K(b)-specific hyporesponsiveness following pretreatment with AdSV40K(b)-transduced CBA BMCs, persistence of H-2K(b) mRNA in central or peripheral tissues could not be demonstrated by RT-PCR. This result was in contrast to the observed persistence of K(b) mRNA both in the periphery and thymus following the infusion of transgenic CBK (H-2(k) + K(b)) BMCs. We conclude that ex vivo adenoviral gene transfer of a single donor MHC class I gene to recipient BMCs in combination with transient depletion of CD4(+) cells is sufficient to induce long-term graft survival of a fully allogeneic cardiac graft. In addition, detectable microchimerism is not a prerequisite for graft survival.     

肿瘤抑制因子BTG1和IKZF1在小鼠白血病发生过程中相互作用研究

目的探讨肿瘤抑制因子B细胞易位基因1(BTG1)与编码转录因子蛋白的基因1(KZF1)在小鼠白血病发生过程中的相互作用。方法将24只SPF级BALB/c裸鼠分为对照组和模型组,每组12只。模型组采用尾静脉注射白血病细胞系K562建立白血病模型,对照组注射等剂量生理盐水。试验后1周、3周与6周采用MTT法检测细胞生存率,酶联免疫法检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)与白细胞介素6(IL-6)含量;试验后6周流式细胞仪法检测细胞凋亡,Western blot法检测BTG1、IKZF1蛋白表达水平;定量分析小鼠肝和肺中白细胞浸入情况。结果试验后1周、3周与6周,模型组的造血细胞生存率、血清TNF-α与IL-6含量显著高于对照组(P<0.05),模型组在组内对比差异也有统计学意义(P<0.05)。试验后6周,模型组的骨髓细胞凋亡指数显著高于对照组(P<0.05),骨髓BTG1、IKZF1蛋白相对表达水平显著低于对照组(P<0.05)。与对照组相比,模型组渗入小鼠肝和肺的白细胞百分比显著上升(P<0.05)。结论小鼠白血病发生过程伴随有BTG1和IKZF1的低表达,可促进炎症因子的释放,导致造血细胞增殖旺盛与骨髓细胞凋亡并使得小鼠肝和肺组织的白细胞百分比上升。     

超声作用下微泡携肝细胞生长因子治疗大鼠肝纤维化的实验研究

目的 探讨超声作用下微泡携肝细胞生长因子(HGF)对大鼠肝纤维化的治疗效果。方法 构建真核表达质粒pMD18-T/HGF;将实验大鼠随机分为5组：正常组、模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组。建立肝纤维化模型,治疗14 d后处死大鼠,取血行检测丙氨酸转氨酶(ALT)评价肝功能,病理切片HE染色评价纤维化程度,免疫组化SABC法观察HGF蛋白,RT-PCR检测HGF mRNA。结果 治疗组治疗后血清肝功能优于模型组(P＜0.05),低剂量组与正常组间差异有统计学意义(P＜0.05),中、高剂量组与正常组间差异无统计学意义(P＞0.05)。病理切片示治疗组纤维化减轻;免疫组化见各治疗组HGF阳性表达,表达量随治疗剂量增高而增大(P＜0.05)。RT-PCR示各治疗组HGF mRNA表达高于模型组,且随治疗剂量的增大而增高(P＜0.05)。结论 超声作用下微泡携HGF可以有效抑制肝纤维化进程,其治疗效果在一定范围内随着治疗剂量的增大而增强。     

虎杖对急性肺损伤大鼠肺组织AQP-1 mRNA表达的影响

目的：探讨中药虎杖对急性肺损伤大鼠肺组织AQP-1 mRNA表达的影响。方法将60只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组,模型组,虎杖低、中、高剂量组、强的松对照组,每组10只。造模并以虎杖煎剂治疗后,使用荧光定量RT-PCR法测定大鼠肺组织AQP-1mRNA的表达。结果 AQP-1 mRNA表达：虎杖高剂量组为（4.332±0.221）,虎杖中剂量组为（7.727±0.527）,与模型组比较均明显增高,差异均有统计学意义（P〈0.05）。虎杖低剂量组与模型组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论虎杖可能是通过促进肺组织AQP-1 mRNA的表达,改善肺组织正常水液代谢功能,从而起到对急性肺损伤大鼠的治疗作用。     

外源性抗原对内皮细胞MHC-I类链相关基因A表达的影响

背景:研究表明部分肾移植受者在移植前就产生了MHC-I类链相关基因A(MICA)抗体,包括部分自身抗体,其急性排斥反应发生率明显高于抗体阴性者.目的:探讨外源性抗原对内皮细胞MICA表达的影响.方法:分别以5,10和25 μg/L 3个剂量,将MICA重组蛋白分为M5,M10,M25组,将热休克蛋白分为H5,H10,H25组,对人脐静脉内皮细胞予以诱导培养48 h,对照组加入等量的磷酸盐缓冲液.结果与结论:用MICA重组蛋白诱导48 h后,各实验组(M5,M10,M25)内皮细胞MICA mRNA和MICA蛋白的表达量与对照组比较均有显著增加(P < 0.05).M5组和M10组MICA mRNA和MICA蛋白均高于M25组 (P < 0.05).MICA膜蛋白表达以M10组最高,并与M5组、M25组之间差异有显著性意义(P < 0.05).各实验组(M5,M10,M25)可溶性MICA水平较对照组显著下降(P < 0.05).热休克蛋白组内皮细胞MICA基因的表达和可溶性MICA水平均无明显改变.结果表明外源性MICA抗原能够诱导内皮细胞自身MICA mRNA和蛋白表达上调,尤其是细胞膜蛋白增加明显,但可溶性MICA水平显著下降.