针刺通过调节自噬反应对脑卒中大鼠的神经元损伤的影响

目的 探讨针刺通过腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、UNC-51样自噬激活激酶(ULK)1/2介导的自噬对脑卒中大鼠神经元的影响。方法 50只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、针刺组、3-甲基腺嘌呤(3-MA)组、针刺+5-氨基-4-甲酰胺咪唑核糖核苷酸(AICAR)组，每组10只，除假手术组其他4组采用中动脉栓塞法构建模型，并给予相应治疗。治疗后24 h,对各组大鼠神经功能缺损程度进行评分。结果 与假手术组比较，模型组治疗后神经功能缺损评分、海马组织AMPK、磷酸化ULK1(p-ULK1)/ULK1、微管相关蛋白1轻链3(LC3)B/A、Beclin-1表达升高，mTOR表达降低(P<0.05);与模型组比较，针刺组和3-MA组大鼠神经元损伤、自噬减轻，神经功能缺损评分、海马组织AMPK、p-ULK1/ULK1、LC3B/A、Beclin-1表达降低，mTOR表达升高(P<0.05);针刺+AICAR组治疗后神经功能缺损评分、海马组织AMPK、p-ULK1/ULK1、LC3B/A、Beclin-1表达明显高于针刺组(P<0.05),...     

mGluR1选择性拮抗剂LY367385对脑星形胶质细胞Na^＋-K^＋-ATP酶和Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶的影响

背景：脑星形胶质细胞肿胀是肝衰竭时脑水肿的特征,但其机制尚未完全阐明。目的：研究代谢型谷氨酸受体1亚型（mGluR1）选择性拮抗剂LY367385对脑星形胶质细胞Na^＋-K^＋-ATP酶和Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶的影响。方法：分离、培养小鼠脑星形胶质细胞,分为谷氨酸组、谷氨酸＋LY367385组、谷氨酸＋DMSO组和空白对照组,以定磷法检测Na^＋-K^＋-ATP酶和Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶活性,以高效液相色谱法测定ATP含量。结果：与空白对照组相比,谷氨酸组、谷氨酸＋LY367385组和谷氨酸＋DMSO组Na^＋-K^＋-ATP酶活性、Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶活性和ATP水平显著降低（P〈0.05）;谷氨酸＋LY367385组和谷氨酸＋DMSO组显著高于谷氨酸组（P〈0.001）,两组间则无明显差异。结论：mGluR1选择性拮抗剂LY367385可提高Na^＋-K^＋-ATP酶和Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶活性,减少ATP消耗,从而有效保护脑星形胶质细胞,有望成为预防和治疗肝性脑病的药物。     

帕金森病模型大鼠海马mGluR5的表达变化及意义

目的探讨帕金森病(PD)模型大鼠海马mGluR5的表达变化及意义。方法将SD大鼠随机分为正常对照组(A组)、PD模型组(B组)和非竞争性NMDA受体拮抗剂D-AP-5+PD组(C组),通过免疫组织化学方法观察多克隆抗体mGluR5在大鼠海马的表达变化。结果正常对照组中大鼠海马有丰富的mGluR5表达;PD模型组中大鼠海马mGluR5表达明显下降;在非竞争性NMDA受体拮抗剂D-AP-5+PD组中,大鼠海马mGluR5表达又明显上调。结论帕金森病模型大鼠海马各区mGluR5表达下降,可能是神经细胞的一种自我保护作用。mGluR5可能与帕金森病认知和情感及记忆功能障碍有关。帕金森病模型大鼠海马各区经用非竞争性NMDA受体拮抗剂D-AP-5处理后,海马mGluR5表达明显上调,推测mGluR5表达下降可能在帕金森病长时程增强(LTP)诱导过程中具有重要作用,其作用机制可能为NMDA受体依赖性。     

间歇低氧对大鼠海马神经细胞自噬相关蛋白表达的影响

目的通过模拟阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征的发病特征,建立大鼠间歇性低氧(IH)模型,观察IH后大鼠海马CA1区神经细胞线粒体自噬及相关蛋白的表达。方法 72只雄性Wistar大鼠随机分为对照组36只和间歇低氧(5%IH)组36只,对照组向低氧箱内持续注入压缩空气,5%IH组每天放入低氧箱内IH暴露7h,模型完成后分别于1、3、5、7、10和14d采用透射电镜观察大鼠海马CA1区神经细胞线粒体超微结构的改变;免疫组织化学法检测Beclin-1和微管相关蛋白1轻链3(LC3)的表达。结果与对照组比较,5%IH组3d开始出现线粒体超微结构的明显改变,可见线粒体自噬体形成;1、3、5、10和14dBeclin-1及LC3蛋白表达均明显升高(P<0.05),于10d达高峰(P<0.05),14d开始下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 IH早期可诱导大鼠海马神经细胞线粒体发生自噬及自噬相关蛋白Beclin-1和LC3的表达。     

缺血后处理对全脑缺血再灌注大鼠海马区神经元自噬的影响

目的探讨缺血后处理对脑缺血再灌注大鼠海马区神经元自噬表达的影响。方法采用改良的Pulsinelli四血管闭塞(4-VO)法制作脑缺血再灌注模型,雄性SD大鼠72只随机平均分为3组:假手术组(Sham组)、脑缺血再灌注模型组(CIR组)、脑缺血后处理组(CIP组),每组又分为6 h、24 h、48 h、72 h 4个时间点,通过苏木素-伊红(HE)染色检测海马区各时间点神经元形态及存活数量变化;应用免疫组织化学染色法测定自噬相关基因Beclin-1、LC3-Ⅱ的表达情况;Western印迹检测海马区自噬相关基因Beclin-1、LC3-Ⅱ的蛋白含量。结果与Sham组比较,其他两组大鼠海马神经元结构破坏,各时间点存活神经元数量显著下降(P<0.05),LC3-Ⅱ、Beclin-1表达显著增加(P<0.05);与CIR组比较,CIP组神经元结构损伤减轻,各时间点存活神经元数量明显增多(P<0.05),LC3-Ⅱ、Beclin-1的表达明显增加,其中24 h表达最高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论脑缺血后处理通过促进自噬相关基因表达上升,减轻脑缺血再灌注损伤。     

Akt信号通路在非典型性抗精神病药物阿立哌唑调节海马神经细胞凋亡中的作用

目的探讨非典型性抗精神病药物阿立哌唑是否通过Akt信号通路对海马神经细胞的凋亡发挥作用。方法通过构建精神分裂症(CPZ)模型小鼠,设置对照组、阿立哌唑组、CPZ组、CPZ+阿立哌唑四组,实验结束后对小鼠断头取脑,冰上分离出海马组织和脊髓,培养海马神经细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,MTT检测细胞增殖、Western印迹检测自噬相关蛋白Beclin1的表达情况;使用磷酸化Akt信号通路试剂盒对总Akt,磷酸化Akt(Ser473)含量的变化情况进行检测。结果对饲养6 w后的小鼠提取海马神经细胞,流式细胞仪、MTT检测结果表明,建立CPZ模型的小鼠,在饲养过程中使用阿立哌唑能明显降低海马神经细胞的凋亡率;MTT检测结果表明,与对照组相比,使用阿立哌唑的CPZ模型小鼠海马神经细胞的存活率明显提高(P<0.01);Western印迹检测自噬相关蛋白Beclin1的结果表明,构建的CPZ模型小鼠脊髓受到一定程度损伤,Beclin1的表达量明显升高(P<0.01),给阿立哌唑后其表达量显著下降;在CPZ组中总Akt及Ser473的表达水平均显著下降(P<0.01),通过服用阿立哌唑后表达水平出现回升,与对照组相比差异不显著(P>0.05)。结论非典型性抗精神病药物阿立哌唑可通过Akt信号通路使海马神经细胞免于凋亡。     

LncRNA H19通过PI3K/Akt通路对海人酸致癫痫大鼠海马神经细胞自噬的影响

目的:探讨长链非编码RNA(LncRNA)H19通过磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶B(PI3K/Akt)通路对海人酸致癫痫大鼠海马神经细胞自噬的影响。方法:将50只SD大鼠随机分为对照组、模型组、NC组(空载体)、LncRNA H19-shRNA组、LncRNA H19-shRNA+LY294002组(10μL、1μg/μL PI3K特异性抑制剂LY294002),每组10只。颈内皮下注射海人酸构建癫痫大鼠模型,造模成功后,对各组大鼠海马CA1区注射相应剂量LncRNA H19-shRNA、空载体、LY294002,观察大鼠行为学变化并检测大鼠脑电图;实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测大鼠海马组织中LncRNA H19表达水平;苏木精-伊红(HE)及Nissl染色观察大鼠海马神经元损伤情况;透射电镜观察海马神经元自噬情况;免疫组化法及蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测大鼠海马组织Beclin-1、LC3蛋白表达情况。结果:对照组大鼠脑电图波形正常、无癫痫发作;与对照组比较,模型组大鼠脑电图出现高幅高频波形,癫痫发作,LncRNA H19表达水平、神...     

内皮素A受体拮抗剂BQ-123对蛛网膜下腔出血大鼠学习记忆功能的影响

目的探讨内皮素A受体拮抗剂BQ-123对蛛网膜下腔出血(SAH)大鼠学习记忆功能的改善作用及机制。方法成年雄性SD大鼠随机分为Sham组、SAH组和BQ-123组;枕大池二次注血法建立SAH模型,BQ-123组经侧脑室注射BQ-123溶液给药剂量为18μg;穿梭箱检测大鼠学习记忆功能;HE染色观察海马区神经细胞形态结构变化;免疫组织化学染色检测自噬相关因子Beclin-1和LC3-Ⅱ的表达水平。结果与Sham组比较,SAH组学习记忆能力显著下降(P0.05),海马区神经细胞数量显著减少(P0.05),Beclin-1和LC3-Ⅱ的表达明显升高(P0.05);与SAH组相比,BQ-123组学习记忆能力得改明显改善(P0.05),海马区神经细胞丢失数量明显较少(P0.05),Beclin-1和LC3-Ⅱ的表达明显升高(P0.05)。结论 BQ-123干预可减轻SAH损伤造成的学习记忆功能障碍,其机制与可能与调控海马区神经细胞自噬有关。     

细胞外信号调节激酶抑制剂对间歇低氧大鼠认知功能的影响

目的探讨细胞外信号调节激酶(ERK)抑制剂对间歇低氧大鼠海马CA1区神经细胞自噬相关蛋白表达及认知功能的影响。方法成年雄性Wistar大鼠96只,采用随机数字法分为正常对照组(UC组)、5%间歇低氧组(5%IH组)、ERK抑制剂组(U0126组),每组又分为7、14、21、28 d 4个时间点,每个时间点8只大鼠。应用透射电镜观察大鼠海马CA1区神经细胞线粒体、自噬体等超微结构的改变;免疫组织化学法检测海马CA1区ERK1/2、Beclin-1、微管相关蛋白1轻链3(LC3)蛋白表达;TUNEL检测海马CA1区神经细胞凋亡情况;Morris水迷宫检测各组大鼠学习记忆功能。结果与UC组比较,5%IH组7、14、21、28 d海马CAl区神经细胞ERK1/2蛋白表达明显增加(P0.05);与5%IH组比较,U0126组7、14、21、28 d海马CAl区神经细胞ERK1/2蛋白表达明显降低(15.48±2.00 vs 27.91±2.15,15.51±1.93 vs 35.86±2.58,15.57±2.09 vs 47.04±3.96,15.43±1.97 vs 59.03±4.09,P0.05)。与UC组比较,5%IH组和U0126组7、14、21、28 d海马CAl区神经细胞Beclin-1和LC3蛋白表达及神经元凋亡指数明显增加(P0.05);与5%IH组比较,U0126组7、14、21、28 d海马CAl区神经细胞Beclin-1和LC3蛋白表达及神经元凋亡指数明显降低(P0.05)。与UC组比较,5%IH组和U0126组大鼠7、14、21、28 d逃避潜伏期明显延长,跨越目标象限时间明显缩短(P0.05);与5%IH组比较,U0126组大鼠7、14、21、28 d逃避潜伏期明显缩短,跨越目标象限时间明显延长(P0.05)。结论 ERK抑制剂U0126通过阻断ERK信号通路抑制大鼠海马神经细胞自噬的激活,进而减轻神经细胞损伤,改善认知功能。     

依达拉奉联合雷帕霉素对蛛网膜下腔出血大鼠神经细胞自噬及学习记忆的影响

目的探讨依达拉奉联合雷帕霉素(RAP)对蛛网膜下腔出血(SAH)大鼠神经细胞自噬及学习记忆的影响。方法80只雄性SD大鼠随机分成假手术组、SAH组、RAP组、依达拉奉联合RAP组(联合组)。采用枕大池二次注血法制作SAH大鼠模型;光镜观察海马区神经细胞形态结构,免疫组织化学法检测自噬标志蛋白(Beclin-1、LC3-Ⅱ)表达水平;水迷宫测动物学习记忆。结果与假手术组比较,SAH组存活神经细胞数量明显减少、Beclin-1和LC3-Ⅱ表达水平明显增加、动物学习记忆功能指标显著降低(P0. 05);与SAH组比较,RAP组存活神经细胞数量增多、Beclin-1和LC3-Ⅱ表达水平明显增加、动物学习记忆功能指标明显改善(P0. 05);与RAP组比较,联合组存活神经细胞数量明显增多、Beclin-1和LC3-Ⅱ表达水平明显增加、动物学习记忆功能指标明显改善(P0. 05)。结论依达拉奉联合RAP可提高SAH大鼠神经细胞自噬程度和神经细胞存活,提高学习记忆功能。     

State of knowledge of helminth fauna of freshwater fishes of Poland

A total 89 fish and lamprey species has been recorded from Polish freshwater habitats. Twenty-seven of them (30.3%) have not been surveyed for parasitic helminthes. Some of the latter fishes are either rare or not easily accessible. Other live only in specific habitats in scattered localities. An important obstacle for studying parasite faunas of some fishes may be their status on an endangered species. Among the non-surveyed fishes, are those which have been relatively recently introduced to Poland or migrated there on their own. The present paper attempts to review all hitherto not studied helminthologically fish species, their habitats, localities and current protection status.     

高血压降压治疗目标的再认识

根据传统的高血压水平的定义,1993年WHO高血压治疗指南提出血压控制目标为<140/90mm Hg(1mm Hg=0.133kPa),但是并非所有患者都必须将血压降至同一水平,而应根据患者情况进行个体化治疗。Framingham进行的一项长达10～12年的心血管事件研究发现,第5年后,正常上限血压[收缩压(SBP     

Lack of correlation of degree of villous atrophy with severity of clinical presentation of coeliac disease

BACKGROUND AND AIM: Both the clinical presentation and the degree of mucosal damage in coeliac disease vary greatly. In view of conflicting information as to whether the mode of presentation correlates with the degree of villous atrophy, we reviewed a large cohort of patients with coeliac disease. PATIENTS AND METHODS: We correlated mode of presentation (classical, diarrhoea predominant or atypical/silent) with histology of duodenal biopsies and examined their trends over time. RESULTS: The cohort consisted of 499 adults, mean age 44.1 years, 68% females. The majority had silent coeliac disease (56%) and total villous atrophy (65%). There was no correlation of mode of presentation with the degree of villous atrophy (p=0.25). Sixty-eight percent of females and 58% of males had a severe villous atrophy (p=0.052). There was a significant trend over time for a greater proportion of patients presenting as atypical/silent coeliac disease and having partial villous atrophy, though the majority still had total villous atrophy. CONCLUSIONS: Among our patients the degree of villous atrophy in duodenal biopsies did not correlate with the mode of presentation, indicating that factors other than the degree of villous atrophy must account for diarrhoea in coeliac disease.