β—淀粉样蛋白对大鼠学习记忆功能及脑胆碱乙酰转移酶和生长抑素表达的影响

目的：探讨Meynert核注射β-淀粉样肽（Aβ）大鼠学习记忆功能ChAT,SOM神经元的影响。方法：将1μLAβ1-40（10μg/μL）在立体定位仪下注入大鼠右侧Meynert核，分别于1周，4周时测定其学习记忆能力和脑组织中ChAT及SOM免疫反应阳性神经元的表达。结果：Aβ注射1周后，实验组出现学习记忆障碍，呈渐进性加重，4周时更为显著，在无名质区Meynert核及其边周，海马区和额，顶部皮质区，正常对照组和假手术组均有广泛的ChAT及SOM免疫反应阳性神经元分布，而实验组则减少，在4周时，实验组ChAT及SOM免疫反应阳性神经元表达显著减少，以Meynert核及其边周最显著。结论：Meynert核注射Aβ可使大鼠发生较持久的学习记忆功能障碍，Aβ致Meynert核、海马和皮质区的ChAT及SOM能神经元的减少，可能是学习记忆功能障碍和痴呆形成的重要因素之一。     

β-淀粉样蛋白对大鼠学习记忆功能及脑胆碱乙酰转移酶和生长抑素表达的影响

目的:探讨Meynert核注射β-淀粉样肽(Aβ)对大鼠学习记忆功能和ChAT,SOM神经元的影响.方法:将1μLAβ1～40(10μg/μL)在立体定位仪下注入大鼠右侧Meynert核,分别于1周、4周时测定其学习记忆能力和脑组织中ChAT及SOM免疫反应阳性神经元的表达.结果:Aβ注射1周后,实验组出现学习记忆障碍,呈渐进性加重,4周时更为显著.在无名质区Meynert核及其边周、海马区和额、顶部皮质区,正常对照组和假手术组均有广泛的ChAT及SOM免疫反应阳性神经元分布,而实验组则减少.在4周时,实验组ChAT及SOM免疫反应阳性神经元表达显著减少,以Meynert核及其边周最显著.结论:Meynert核注射Aβ可使大鼠发生较持久的学习记忆功能障碍,Aβ致Meynert核、海马和皮质区的ChAT及SOM能神经元的减少,可能是学习记忆功能障碍和痴呆形成的重要因素之一.     

Meynert核注射β-淀粉样蛋白对大鼠脑突触生长素表达的影响及尼莫地平的保护作用

目的 :探讨Meynert核注射 β 淀粉样蛋白 (amyloid betaprotein ,Aβ)对大鼠脑突触生长素表达的影响及尼莫地平的保护作用。方法 :将Aβ1 40 10 μg·μL-1注入右侧Meynert核建立大鼠AD模型 ,测定其学习记忆能力和脑组织突触生长素的表达变化及尼莫地平的影响作用。结果 :Aβ注射后出现较持久的学习记忆障碍 ,Aβ组呈渐进性加重 ,治疗组有一定改善。Aβ组Meynert核、海马区和皮质区突触生长素免疫反应阳性产物较对照组明显减少 ;治疗组较对照组减少 ,但较Aβ组有明显增加。 结论 :Meynert核、海马和皮质区突触数量的减少及其功能异常可能是AD学习记忆障碍和痴呆形成的重要因素之一。尼莫地平有一定的保护作用     

尼莫地平对实验性阿尔茨海默病大鼠记忆障碍的作用

目的 :探讨尼莫地平对实验性AD大鼠学习记忆障碍的作用及其可能机制。方法 :将Aβ 10 μg注入大鼠右侧Meynert核建立AD模型 ,观察尼莫地平对学习记忆功能和脑组织ChAT、SOM及NGF表达的影响作用。结果 :治疗组学习记忆障碍有明显改善 ,Meynert核、海马和皮质区ChAT、SOM表达数量较对照组减少 ,而较实验组显著增加 ;NGF较对照组和实验组均有明显增加。结论 :尼莫地平对Aβ所致学习记忆障碍有明显改善作用 ,其可能机制是抑制Ca2 +内流 ,促进NGF表达 ,对ChAT、SOM能神经元具有保护作用     

β-淀粉蛋白脑室内注射建立阿尔茨海默病大鼠模型

目的　观察β淀粉样蛋白(Aβ)脑室内注射建立阿尔茨海默病(AD)大鼠模型及其对大鼠行为、胆碱乙酰转移酶(ChAT)活性、细胞凋亡、神经生长因子(NGF)水平等影响。方法　将Aβ1 -42注射入大鼠侧脑室,于第1周、2周、4周观察Morris水迷宫逃避潜伏期、测定脑内ChAT活性、进行原位末端标记凋亡染色及NGF免疫组化染色。结果　Aβ1- 42注射后第2周大鼠Morris水迷宫逃避潜伏期延长,4周时更明显。2周后海马、皮层ChAT活性下降,4周后脑内ChAT活性广泛下降,以海马最为显著。2周后基底前脑Meynert核区凋亡细胞较其他脑区增多,NGF阳性细胞明显减少。结论　Aβ脑室内注射可以模拟AD行为改变,使脑内ChAT活性降低,基底前脑NGF含量减少,胆碱能神经元凋亡,可以作为AD研究模型。     

β-淀粉样蛋白对AD大鼠脑内胶质细胞的影响作用研究

目的　探讨Meynert核注射 β 淀粉样蛋白 (Aβ)后对大鼠脑神经胶质细胞超微结构的影响及其可能机制。方法　将 1μLAB1-40 (10 μg/ μL)在立体定向仪下注入大鼠右侧Meynert核 ,分别于 1周、4周时用透射电镜观察脑组织中神经胶质细胞超微结构变化。结果　实验组Meynert核、海马区和皮层区均可见神经胶质细胞增生 ,其中以小胶质细胞为主 ,星形胶质细胞次之 ;小胶质细胞聚集并吞噬变性神经细胞以及血管周围可见增生活跃的小胶质细胞聚集 ;神经元胞体皱缩 ,胞浆浓缩 ,核染色质固缩成团块状并见边聚现象 ,核膜尚完整 ,有发生凋亡的趋势 ;正常对照组和假手术组无上述变化。结论　Aβ能引发CNS神经胶质细胞增生并活化 ,免疫炎性反应在AD记忆障碍和痴呆形成过程中可能具有重要作用。     

骨形态发生蛋白4在Aβ诱导的神经毒性病变中的表达变化

目的探讨骨形态发生蛋白4(bone morphogenetic protein 4,BMP4)在β淀粉蛋白(amyloidβ,Aβ)诱导的神经毒性病变中的变化。方法 SD大鼠海马神经元原代培养,经过不同浓度(10、15、20μmol/L)Aβ25-35毒性片段处理后,通过定量PCR技术检测BMP4mRNA表达水平。SD大鼠双侧基底前脑注射Aβ1-40建立大鼠痴呆模型,通过免疫组化及免疫印迹检测基底前脑及海马区BMP4蛋白表达水平。结果 Aβ25-35处理组海马神经元内BMP4mRNA表达较空白对照组明显减少(P0.05)。免疫组化和免疫印迹实验结果显示,与对照组比较,Aβ1-40注射组大鼠基底前脑区BMP4蛋白表达减少,海马区其表达升高(P0.05)。结论 Aβ直接下调神经元内BMP4转录及表达,不同脑区内BMP4蛋白可能存在负反馈调节作用。     

去卵巢大鼠胆碱能神经系统改变及雌激素保护作用机制的研究

目的观察去卵巢大鼠胆碱能神经系统的改变及雌激素对其影响。方法利用免疫组织化学染色结合图像分析方法观察去卵巢大鼠海马CA1区胆碱乙酰转移酶(ChAT)的变化;利用RT—PCR方法检测去卵巢大鼠基底前脑神经生长因子(NGF)mRNA表达的变化。结果去卵巢大鼠海马CA1区ChAT的积分光密度(OD)值降低,基底前脑NGFmRNA平均表达水平明显降低,补充雌激素后以上各项指标均明显提高。结论(1)去卵巢大鼠海马CA1区胆碱能神经元ChAT活性下降,基底前脑胆碱能神经元NGFmRNA表达水平降低。(2)雌激素能够上调去卵巢大鼠NGFmRNA表达．而NGF能够增强ChAT的活性。促进乙酰胆碱(Ach)的合成和释放,改善学习记忆能力。     

阿尔茨海默病中神经生长因子及其受体的变化

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)又称老年性痴呆,是一种原因未明以记忆力下降和认知功能减退为主要临床表现的神经系统退行性疾病。神经生长因子(NGF)是最早发现且在脑内广泛分布的神经营养因子类物质。研究发现阿尔茨海默病中靶脑区NGF受体TrkA表达减少导致NGF逆向运输减少,以致Meynert基底核NGF减少,从而使基底前脑胆碱能神经元缺乏足够的NGF供应,促使基底前脑胆碱能神经元退变。有关动物实验研究表明神经生长因子能够在一定程度上缓解神经元变性。     

铝盐致大鼠学习记忆功能障碍的β—APP、SS作用机制研究

目的：观察β－淀粉样前体蛋白（APP）、生长抑素（SS）在铝盐致大鼠学习记忆功能障碍模型脑内海马区表达的改变,并探讨其作用机制。方法：采用免疫组织化学方法检测β-APP、SS在大鼠脑内海马区的表达,HE染色观察实验组与对照组海马区锥体细胸层神经元形态结构,结果：实验组大鼠学习记忆功能较对照组明显降低（P＜0．01）;实验组海马区β－APP表达较对照组明显增加（P＜0．01）;SS免疫反应性神经元数目却显著减少（P＜0．01）;β-APP阳性度与SS阳性度之间存在等级负相关（P＜0．05）,实验组与对照组海马区神经元形态结构均基本 正常,数目无明显差异,结论：铝盐致大鼠海学记忆障碍的病理机制可能与脑内β-APP、SS表达的改变相关。     

SMAD6在Aβ诱导的神经毒性病变中的表达变化

目的探讨母抗Dpp小同源物6(small mothers against decapentaplegic homolog 6,SMAD6)在β淀粉样蛋白(amyloidβ,Aβ)诱导的神经毒性病变中的表达变化。方法取孕15~17d的SD大鼠的胎鼠,进行海马神经元原代培养,经不同浓度(10、15、20μmol/L)Aβ25-35毒性片段处理后,通过定量PCR技术检测SMAD6mRNA表达水平。取2月龄SD雄性大鼠12只,随机分为Aβ注射组和空白对照组,每组6只。采用双侧基底前脑注射Aβ1-40建立大鼠痴呆模型,通过免疫组化及免疫印迹检测基底前脑及海马区SMAD6蛋白表达水平。结果不同浓度Aβ25-35处理组海马神经元内SMAD6mRNA表达均较对照组减少(F=602.1,P0.01)。免疫组化结果显示,与对照组比较,Aβ1-40注射组大鼠基底前脑区SMAD6蛋白表达减少(68103±1520比96036±1804;t=20.51,P0.01),而海马区其表达增多(96441±1852比55039±1528;t=29.87,P0.01);免疫印迹结果显示,与对照组比较,Aβ1-40注射组大鼠基底前脑区SMAD6蛋白表达减少(0.1042±0.0067比1.000±0.0986;t=15.69,P0.01),而海马区其表达增多(12.5525±2.6803比1.000±0.0135;t=7.465,P0.01)。结论 Aβ可直接下调神经元内SMAD6mRNA转录及表达,不同脑区内SMAD6蛋白表达可能受负反馈调节机制影响。     

NGF预防大鼠额叶皮质损伤后基底前脑胆碱能神经元变性

目的：为了观察神经生长因子（NGF）对大鼠额叶皮质损伤后基底前脑胆碱能神经元变性的预防效果。方法：24只SD大鼠,随机平均分为3组：（1）实验组（NGF）,（2）对照组（等容量的生理盐水）,（3）正常组（假手术）,用外科手术造成双侧额叶皮质局限性损伤,动物的学习,记忆机能及基底前脑含乙酰胆碱酯酶（AChE)活性神经元则分别用Y型迷宫和组织化学方法进行检测。结果：额叶皮质损伤4周后,动物的学习,记忆机能明显下降（P＜0．01）,基底前脑含AChE活性神经元明显减少（P＜0．01）,NGI治疗可有效地防止额叶皮质损伤大鼠学习,记忆障碍的发生及基底前脑含AChE活性神经元的减少（P＜0．05）。结论：NGF对双侧额叶皮质损伤大鼠的学习,记忆机能障碍及基底前脑胆碱能神经元变性有预防效果。     

神经营养因子NGF、BDNF对AD模型鼠海马移植的影响

目的:研究神经营养因子NGF、BDNF对AD模型鼠海马移植后行为和形态学变化。方法:24.只AD模型鼠随机分成4组:单纯胚基底前脑细胞悬液移植组(ST组)、含NGF或BDNF胚基底前脑细胞悬液移植组(NGF组)、(BD-NF组)和模型对照组(M组),移植后3月进行行为测试并比较移植区AchE细胞数和纤维密度,运用方差分析和SNK检验进行组间比较。结果:行为测试移植3组明显优于模型M组,含因子组又较ST组效果好(P<0.01),两因子组间差异无显著性(P>0.05);因子组存活细胞数均高于ST组,NGF组细胞数多于BDNF组(P<0.05),纤维密度两组相似(P>0.05)。结论:海马内存活胆碱能神经元能代偿受损胆碱能神经元的功能,改善动物的学习记忆功能;NGF、BDNF均能促进胆碱能神经元存活,增加AchE细胞数目和突起,但BDNF促进神经元突起延伸作用较好,而NGF则对神经元保护作用较强。     

何首乌对海人藻酸致大鼠脑 AChE神经元及纤维损伤的保护作用

目的　观察海人藻酸 (KA)对大鼠基底前脑含乙酰胆碱能神经元 (包括其投射纤维投射部位 )毁损后的数目和形态改变 ,以探讨何首乌 (PMT)对胆碱能神经元及其纤维的保护作用及机制。方法　采用兴奋性神经毒素海人藻酸 (KA)损伤基底前脑 (BF)Meynert核团 ,内侧隔核 (MS)及斜角带核 (DB) ,建立毁损模型 ,用何首乌喂饲毁损实验组 ,使用组织化学方法显示乙酰胆碱能神经元及纤维的改变及可能的用药后保护和活化作用。结果　何首乌喂饲组 (A组 )比非何首乌喂饲组 (B组 )在基底前脑中的Meynert核数量多 ,且细胞完整无破坏 ,其投射到海马及大脑皮质的AChE纤维数目多 ,纤维形态无破坏 ,差异有显著性 (P <0 .0 1)。结论　何首乌对大鼠AChE神经元及其投射纤维有保护作用。     

BDNF和神经干细胞联用对穹隆海马伞切割鼠基底前脑p75NGFR阳性神经元数及其形态学的影响

目的研究神经干细胞（NSC）和脑源性神经营养因子（BDNF）联合治疗对穹隆海马伞切割鼠基底前脑p75^NGFR阳性神经元厦其形态学的影响。方法切断SD大鼠左侧穹隆海马伞模拟AD大鼠模型，利用无血清培养技术获得新生SD鼠的海马NSC。基底前脑注射NSC，同时侧脑室注射BDNF,4周后行免疫组化结合图象分析技术观察各组大鼠基底前脑p75^NGFR阳性神经元厦其形态学变化。结果损伤组大鼠p75^NGFR阳性神经元数在内侧隔核（MS）和斜角带（VDB）较正常组明显下降（P〈0．01）；移植组细胞数较损伤组有改善（P〈0．05）；与正常组相比较，联合组免疫阳性神经元数无显著下降（P〉0．05）。形态学参数测试结果显示，p75^NGFR阳性神经元的面积、周长在4组中的改变类似p75^NGFR阳性神经元数。结论NSC和BDNF联用较单独使用BDNF或NSC更好地增加p75^NGFR阳性神经元数及其形态学参数。     

远志总皂苷对阿尔茨海默病模型大鼠海马脑源性神经营养因子及酪氨酸蛋白激酶B表达的影响

目的观察远志总皂苷对阿尔茨海默病模型大鼠海马CA1区脑源性神经营养因子(BDNF)及其特异性受体酪氨酸蛋白激酶B(TrkB)表达的影响,探讨远志总皂苷对阿尔茨海默病的干预作用机制。方法雄性Wistar大鼠被随机分为生理盐水组(正常对照组)、阿尔茨海默病模型组(模型组),以及远志总皂苷低剂量(12.50 mg/ml)和高剂量(37.50 mg/ml)组;采用D-半乳糖致衰老联合鹅膏覃氨酸损毁基底前脑Meynert核法建立阿尔茨海默病大鼠模型,免疫组织化学染色检测大鼠海马CA1区BDNF及其受体TrkB表达水平。结果 BDNF和TrkB阳性物质呈棕黄色,主要表达于海马CA1区神经元胞膜。模型组大鼠海马CA1区BDNF及其受体TrkB表达水平为0.30±0.02和0.21±0.07,低于正常对照组的0.47±0.02和0.46±0.05(均P=0.000);与模型组相比,远志总皂苷低剂量组(0.35±0.05,0.32±0.07)和高剂量组(0.43±0.05,0.37±0.03)大鼠海马CA1区BDNF及其受体TrkB表达水平均显著升高(均P=0.000),但以高剂量组升高更为显著(均P=0.000)。结论远志总皂苷可以显著升高阿尔茨海默病模型大鼠海马CA1区BDNF及其受体TrkB表达水平,且具有剂量依赖性,这可能是其改善认知功能的机制之一。     

雌激素对双侧穹隆-海马伞切断及去势大鼠脑源性神经营养因子表达的影响

目的　采用双侧穹隆-海马伞切断及双侧卵巢切除方法制作大鼠认知障碍模型,观察4个脑区脑源性神经营养因子(BDNF)表达的变化,以及补充外源性雌激素对BDNF的影响。方法选择健康雌性Wistar大鼠30只,先按2×2方差分析设计分别建立4个模型组:穹隆-海马伞切断组(FF组)、卵巢切除组(OVX组)、卵巢切除加穹隆-海马伞切断组(OF组)和对照组,然后再建立OF组同时给予雌二醇(E2 )治疗组(OF+E2 组)和双侧穹隆-海马伞切断加卵巢切除对照组,每组5只。E2 剂量为1mg/kg,每7天1次皮下注射,共4次28天。观察各组大鼠海马CA1区、皮质区、杏仁复合体区、基底前脑Meynert核区BDNF蛋白表达的变化。结果　(1)经F分析,双侧卵巢切除和双侧穹隆-海马伞切断与否存在主效应和显著交互效应(P<0 001)。FF组、OVX组和OF组的BDNF阳性细胞计数在海马CA1区、皮层、杏仁复合体、Meynert核均明显少于对照组(P<0 001),其中OF组在Meynert核区的BDNF阳性细胞计数少于FF组和OVX组(P<0 01); (2)OF组+E2 组在4个脑区的BDNF阳性细胞数均多于OF对照组(均P<0 01和<0 05)。结论　双侧穹隆-海马伞切断和(或)双侧卵巢切除均可导致大鼠脑内BDNF表达减少,补充外源性雌激素可显著增加BDNF的表达。     

NGF对β-淀粉样蛋白诱导海马神经细胞凋亡的保护作用

目的　研究神经生长因子 (nerve growth factor ,NGF)对β-淀粉样蛋白 (amyloid-beta protein,Aβ)诱导体外培养大鼠海马神经细胞凋亡的作用 ,从而探讨 NGF对阿尔茨海默病 (Alzheimer disease,AD)的治疗作用。方法　于无菌条件下取新生 1 d大鼠海马 ,进行原代海马神经细胞培养 ,用透射电镜、琼脂糖凝胶电泳、原位末端标记 (TUNEL)等方法观察 Aβ组和 NGF组神经元细胞的凋亡变化。结果　 Aβ1 -40可诱导海马神经细胞凋亡 ,染色质浓缩 ,凋亡小体形成 ,细胞核 DNA降解 ,TUNEL 染色阳性 ;而 NGF组细胞凋亡率明显减少 (P <0 .0 5 )。结论　 Aβ1 -40能诱导海马神经细胞凋亡 ,NGF对 Aβ诱导的海马神经细胞凋亡具有保护作用。     

侧脑室内注入脑源性神经营养因子对AD小鼠酪氨酸激酶B及内源性BDNF表达的影响

目的 探讨侧脑室内注入脑源性神经营养因子(BDNF)对APP/PS1双转基因阿尔茨海默病(AD)小鼠酪氨酸激酶B (TrkB)及内源性BDNF表达的影响. 方法 10只10月龄APP/PS1雄性小鼠按随机数字表法分为2组,实验组5只,双侧侧脑室内注入BDNF;磷酸盐缓冲液(PBS)组5只,双侧侧脑室内注入PBS,为阳性对照组;干预时间均为6周.同时选择5只同窝生10月龄野生型小鼠,不予任何处理,为阴性对照组.采用荧光免疫组化法观察小鼠皮层区β-淀粉样蛋白(Aβ)斑块形态学改变,硫磺素S法检测致密斑的数量,同时检测小鼠皮层区TrkB、BDNF蛋白表达的情况. 结果 (1)治疗前、后BDNF组Aβ斑块总数分别为(101.58±7.86)个、(102.83±8.22)个,与PBS组(97.23±1 1.62)个、(103.6±6.46)个比较差异均无统计学意义(t=0.695、-0.171,P=-0.509、0.869);治疗6周后BDNF组Aβ斑块直径缩小至(34.65±9.33)μm,TS+斑块数量减少至(51.70±4.18)个,与PBS组(46.17±10.16)μm、(58.85±7.55)个比较,差异均具有统计学意义(t=-2.401、-2.536,P=0.047、0.039);(2)治疗后BDNF组TrkB、BDNF蛋白表达明显增强. 结论 侧脑室内注入BDNF减少了Aβ致密斑的形成,使Aβ蛋白沉积导致的神经毒性作用减弱,从而促进皮层区TrkB表达增强,导致内源性BDNF表达增强,可在一定程度上延缓AD小鼠的病程.     

全反式维甲酸对阿尔茨海默病大鼠学习记忆能力及海马Aβ蛋白沉积的影响

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的主要临床表现为学习记忆障碍,组织病理上可见老年斑、神经元纤维缠结(NFT)和基底前脑胆碱能神经元丢失[1],其中老年斑的主要成分为β淀粉样蛋白(β-amyloid protein,Aβ)。AD的病因