酸枣仁汤对PCPA致失眠大鼠大脑皮质代谢型谷氨酸受体mGluR1、mGluR2的影响

目的:观察对氯苯丙氨酸(PCPA)致失眠大鼠大脑皮质中代谢型谷氨酸受体mGluR1、mGluR2表达的改变情况,以及酸枣仁汤(SZRD)对PCPA所致失眠大鼠脑皮质中代谢型谷氨酸受体mGluR1、mGluR2表达的影响,探讨酸枣仁汤治疗失眠可能的作用机制。方法:将36只SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、SZRD对照组、SZRD高剂量组15g/(kg·d)、SZRD中剂量组7.5g/(kg·d)、SZRD低剂量组3.75g/(kg·d),每组6只。采取腹腔注射PCPA的方法建立失眠大鼠模型,各组灌胃相应药物7天后,取大脑皮质,采用免疫组织化学染色法检测mGluR1、mGluR2表达情况。结果:PCPA模型组大鼠大脑皮质中mGluR1、mGluR2的表达明显增高,与空白对照组比较差异具有统计学意义(P0.01)。SRZD高、中、低剂量组大鼠大脑皮质中mGluR1、mGluR2表达均降低,SZRD高剂量组大鼠大脑皮质中mGluR1、mGluR2的表达与PCPA模型组比较差异具有统计学意义(P0.01)。SZRD中剂量组大鼠大脑皮质中mGluR1、mGluR2的表达与PCPA模型组比较差异具有统计学意义(P0.01)。SZRD低剂量组大鼠mGluR1的表达与PCPA模型组比较差异无统计学意义(P0.05),而两组mGluR2表达比较差异具有统计学意义(P0.01)。SZRD对照组大鼠大脑皮质中mGluR1、mGluR2的表达与空白对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:PCPA致失眠大鼠大脑皮质中mGluR1、mGluR2的表达量升高,酸枣仁汤能调节PCPA所致失眠大鼠脑皮质中mGluR1、mGluR2的表达,提示酸枣仁汤治疗失眠的机制可能与激活大鼠脑皮质内谷氨酸受体的表达有关。     

寒凝血瘀证大鼠的肠道菌群变化与粪便代谢特征分析

目的:探讨寒凝血瘀状态下大鼠肠道菌群多样性及粪便中内源性代谢物的变化,并考察与寒凝血瘀证密切相关的肠道菌群、代谢物、代谢通路。方法:采用冰水浴诱导的大鼠寒凝血瘀证模型,利用16S rRNA基因测序技术联合UPLC-TOFMS的粪便代谢组学技术,将扰动的肠道菌群与内源性生物标记物进行关联分析。结果:基于Illumina Mi Seq平台,发现与空白组大鼠相比,寒凝血瘀证模型组大鼠中Firmicutes显著上调(P0.05),Bacteroidetes显著下调(P0.01),显著差异的属有23个。确定了7个与寒凝血瘀证相关的粪便代谢物,涉及到的3个相关性最强的代谢通路,分别为缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸生物合成,泛酸和辅酶A生物合成,组氨酸代谢。另外,肠道菌群的属与粪便代谢物有强相关性。结论:16S rRNA的高通量基因测序技术与代谢组学技术的联用可用于评价寒凝血瘀证的病理机制。     

基于肠道菌群测序和粪便代谢组学的荆防颗粒保护急性肺损伤机制研究

为了阐明荆防颗粒治疗急性肺损伤的效果及作用机制,并考察荆防颗粒对急性肺损伤粪便内源性代谢物代谢紊乱和肠道菌群稳态的调控作用,将小鼠随机分为假手术组、模型组、荆防颗粒组,造模后持续给药6 d。利用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱联用仪(UHPLC-HESI-QE-Orbitrap-MS/MS)代谢组学技术和16S rRNA高通量测序技术,测定小鼠肠道中内源性小分子物质和肠道菌群的变化,并寻找出潜在的生物标志物。结果显示,荆防颗粒可以对11个生物标志物L-谷氨酸、琥珀酸、花生四烯酸、亚油酸、亚麻酸、苯丙氨酸、鞘氨醇、丁酸、丙酮酸、色氨酸、棕榈酸进行调控。对这11个生物标志物通过在线软件MetaboAnalyst进行代谢通路分析,得到潜在的主要代谢通路,其中共有10条代谢通路与荆防颗粒治疗急性肺损伤密切相关,包括丙氨酸、天门冬氨酸和谷氨酸代谢,氨基酰基tRNA生物合成,三羧酸循环,乙醛酸及二羧酸代谢,精氨酸和脯氨酸代谢,亚油酸和亚麻酸代谢,氮代谢,谷氨酰胺和D-谷氨酸代谢,苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸的生物合成,苯丙氨酸代谢。肠道菌群结果显示显著性差异菌主要有Bacteroides...     

基于尿液代谢组学的交泰丸治疗失眠的作用研究

目的从代谢网路层面阐明交泰丸干预对氯苯丙氨酸(p-chlorophenylalanine,PCPA)致大鼠失眠的药效及作用机制。方法采用一次性腹腔注射PCPA建立失眠大鼠模型;酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠下丘脑、海马、前额叶皮质和血清中的谷氨酸(Glu)、胆囊收缩素8(CCK-8)水平;采用核磁共振氢谱(~1H-NMR)技术结合多变量数据分析方法,研究失眠所致大鼠尿液代谢物谱的变化并鉴定相关代谢标志物,从整体代谢表型和代谢标志物角度评价交泰丸疗效。结果与正常组比较,模型组大鼠的下丘脑、海马、前额叶皮质和血清中的Glu水平显著升高(P0.05),CCK-8水平显著降低(P0.05),尿液代谢物组发生显著改变,筛选得到9种与失眠相关生物标志物;与模型组比较,交泰丸能明显降低大鼠下丘脑、海马、前额叶皮质和血清中Glu水平,升高CCK-8水平,差异有统计学意义(P0.05);交泰丸能对失眠大鼠尿液代谢紊乱产生有效干预,对尿液中与失眠相关的9个潜在生物标志物中的8个产生显著回调,与模型组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论交泰丸可能通过调节神经递质及干预机体能量代谢和肠道菌群代谢紊乱对失眠起到治疗作用。     

交泰丸干预对氯苯丙氨酸致大鼠失眠的代谢组学研究

为了阐明交泰丸干预对氯苯丙氨酸(p-chlorophenylalanine,PCPA)致大鼠失眠的药效及作用机制,SD大鼠一次性腹腔注射PCPA建立失眠模型,试验期间观察大鼠自发活动变化,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠下丘脑、海马、前额叶皮质和血清神经生长因子(nerve growth factor,NGF)水平,并利用核磁共振氢谱(1H-NM R)代谢组学技术建立大鼠血清及海马组织代谢物谱,分析交泰丸干预下大鼠自发活动,NGF水平及与失眠相关潜在生物标志物的变化。结果显示交泰丸能明显抑制失眠大鼠的自发活动,显著升高失眠大鼠下丘脑、海马、前额叶皮质和血清中NGF水平。交泰丸能对失眠所致大鼠血清和海马组织代谢紊乱产生有效的干预,并分别对血清和海马组织中6种和5种与失眠相关潜在生物标志物产生显著的回调。研究表明交泰丸干预PCPA所致失眠的机制可能与调节NGF水平及调控机体氨基酸代谢、脂质代谢和胆碱代谢有关。     

基于"脾主运化"理论探讨运脾消积法对厌食症幼龄大鼠肠道微生态的影响

目的:基于"脾主运化"理论探讨运脾消积法对厌食症幼龄大鼠肠道微生态的影响。方法:以病因模拟法制备大鼠厌食症模型,观察记录大鼠摄食量和体重的变化;分别以模型组、阳性对照组(健胃消食片0.45g/kg)、小儿开胃增食5.7 g/kg、11.4 g/kg组干预模型大鼠,连续42 d,另设正常组。收集粪便,以Illumina Mi Seq为测序平台,对其16S rRNA V3区的肠道菌群可操作分类单元(OTUs)数量、alpha与beta多样性、丰富度指数、多样性指数以及差异菌门与菌属进行综合性分析与评价,并对菌群代谢功能进行预测。结果:小儿厌食症模型大鼠中明显失调的OUT数量、丰富度指数Chao1和ACE、菌落多样性、属水平的棒状杆菌属(Corynebacterium)、Odoribacter属、YRC22属、普雷沃菌属(Prevotella)、Jeotgalicoccus属、瘤胃球菌属(Ruminococcus)、rc4-4属以及具有外源化合物降解和代谢功能的菌群以及能量代谢的相关菌群、多糖生物合成功能和代谢功能的菌群经小儿开胃增食合剂干预后均向正常或保护方向恢复。结论:小儿厌食症模型大鼠肠道微生物菌落的多样性发生了明显改变。小儿开胃增食合剂可明显加强保护性菌属的有益改变,减弱有害性菌属的损伤改变,调整菌群的多样性,使小儿厌食症菌群多样性及其功能恢复正常。     

柴芩宁神颗粒改善失眠大鼠睡眠作用的海马代谢组学研究北大核心CSCD

该研究采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UHPLC-Q Exactive Orbitrap-MS)代谢组学技术分析柴芩宁神颗粒对肝郁失眠大鼠内源性代谢物的影响,探讨柴芩宁神颗粒改善睡眠的作用机制。采用腹腔注射对氯苯丙氨酸(PCPA)加复合刺激复制肝郁失眠大鼠模型,观察柴芩宁神颗粒对肝郁失眠大鼠宏观体征、血液流变学和海马中神经递质的影响。给药结束取大鼠海马进行LC-MS代谢组学检测,以主成分分析(PCA)、偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)及正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)等多元统计分析方法为手段,对各组大鼠海马代谢物进行分析,筛选出潜在生物标志物,并借助MetPA分析构建相关的代谢通路和代谢网络。研究结果表明,在给予药物治疗后,能显著改善大鼠的精神状态和肝郁血瘀现象,可以显著升高海马中除柴芩宁神颗粒低剂量组外其余各组中5-HT、GABA的含量和显著降低Glu的含量,其中艾司唑仑组和柴芩宁神颗粒高剂量组的效果优于其他给药组;代谢组学结果显示,通过代谢分析共筛选鉴定出27种与失眠相关的潜在生物标志物,并通过MetPA分析得到艾司唑仑干预失眠的代谢通路4条,柴芩宁神颗粒高剂量干预失眠的代谢通路3条,涉及嘌呤代谢、甘油磷脂代谢、组氨酸代谢、咖啡因代谢。柴芩宁神颗粒对改善失眠有一定的疗效,其可通过回调内源性差异代谢物来调控相关代谢通路,为进一步阐明柴芩宁神颗粒改善睡眠的作用机制提供依据。     

快速老化小鼠SAMP8模型粪便代谢物和肠道菌群改变的研究

目的研究快速老化小鼠SAMP8模型老化过程中粪便代谢物和肠道菌群的变化。方法采用1H-NMR代谢组学和宏基因组学技术,探索衰老相关的代谢标志物和肠道菌群,并对代谢物与肠道菌群进行Pearson关联分析。结果 SAMP8小鼠粪便中指认出31种内源性代谢物,与SAMR1小鼠相比,13种代谢物发生显著改变。差异代谢物主要富集在4条代谢途径:苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸的生物合成,缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸的生物合成,苯丙氨酸代谢,组氨酸代谢。肠道菌群分析发现10月龄快速老化小鼠SAMP8肠道菌群多样性明显改变,10种菌群的相对丰度显著改变。相关性分析结果表明,Christensenellaceae菌科与苯丙氨酸、组氨酸、缬氨酸、异亮氨酸和尿苷酸均呈正相关;Dehalobacterium菌属与酪氨酸,Planococcaceae动球菌科与缬氨酸均呈负相关。结论通过研究快速老化小鼠SAMP8模型粪便代谢物和菌群的变化规律,为衰老机制及抗衰老药物研究提供实验依据。     

酸枣仁汤对PCPA失眠大鼠大脑皮质代谢型谷氨酸受体和受体后cAMP、PKA的干预作用

目的:探讨PCPA失眠大鼠皮质代谢型谷氨酸受体(mGluRs)和受体后cAMP、PKAmRNA表达的变化及酸枣仁汤(SZRD)的干预作用。方法:采用连续3d腹腔注射氯苯丙氨酸350 mg·kg~(-1)的方法建立失眠大鼠模型,动物按随机数字表法分为空白对照组、模型组、SZRD大、中、小剂量组、SZRD对照组、5-HTP组,采用实时荧光定量PCR法检测皮质组织mGluR1、2、7及cAMP、PKAmRNA表达的变化。结果:模型组mGluR1、2、7 mRNA表达量显著增加,PKA、cAMP mRNA表达量明显下降。SZRD大剂量组和中剂量组的mGluR1、2、7mRNA表达量下降,SZRD大剂量组的PKA、cAMP mRNA表达量明显上升。SZRD本身并不改变正常大鼠皮质mGluR1、2、7、cAMP及PKAmRNA的表达,5-HTP组能导致皮质mGluR1、2 mRNA表达量增加,cAMP、PKAmRNA表达量明显下降。结论:PCPA引致皮质组织mGluR1、2、7mRNA表达量增加,PKA、cAMP mRNA表达量下降,SZRD能对上述变化发生干预作用。     

中医病证相符的大鼠心肾不交失眠模型的建立及其血清代谢组学研究

运用酶联免疫吸附法(ELISA)和代谢组学对2种心肾不交失眠动物模型进行分析比较,以期探究出一种较为理想的动物模型,并初步探讨心肾不交失眠本质。基于临床心肾不交失眠的证候特征和疾病特征,采用腹腔注射对氯苯丙氨酸(PCPA)和多因素共同作用的方法复制心肾不交失眠动物模型,采用行为学观测、酶联免疫吸附法、代谢组学从多个层次对病证结合的动物模型进行评价。Wistar大鼠随机分成正常组、PCPA组、复合模型(FH)组,记录大鼠行为学、体质量、肾上腺指数、脾脏指数;利用ELISA检测血清中促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、肾上腺皮质激素(ACTH)水平;采用UPLC-QE-MS检测血清中的差异代谢物信息。行为学测得FH组体质量、肾上腺指数较PCPA组均显著降低(P0.05);ELISA测得FH组较PCPA组ACTH,CRH显著升高;血清样本采集的数据统计经分析鉴定出9种潜在生物标志物,心肾不交失眠主要有4条代谢通路,分别是磷酸戊糖代谢,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,组氨酸代谢,牛磺酸和亚牛磺酸代谢。PCPA和多因素共同作用方法,均能成功复制出失眠模型,但多因素造模法与临床中医病证更为相似。采用动物行为学、酶联免疫、代谢组学能够从体外到体内、从宏观到微观、从个体到整体对心肾不交失眠大鼠模型进行综合评价。     

基于~1H-NMR代谢组学的酸枣仁改善失眠大鼠睡眠作用机制研究

目的利用氢核磁共振(~1H-NMR)代谢组学技术研究酸枣仁对对氯苯丙氨酸(PCPA)诱导的失眠大鼠血清内源性代谢物的影响,探讨酸枣仁改善睡眠的作用机制。方法大鼠ipPCPA溶液(400mg/kg)制备失眠模型,采用1H-NMR代谢组学技术,以主成分分析(PCA)、偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)及正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)等多元统计分析方法为手段,对各组大鼠血清代谢物进行分析,筛选出潜在生物标志物;借助MatPA分析构建潜在靶标代谢通路和代谢网络。结果 1H-NMR代谢组学分析方法共筛选11种与失眠相关的潜在生物标志物;通过MatPA分析得到8条潜在靶标代谢通路,包括谷氨酸和谷氨酰胺代谢,牛磺酸和亚牛磺酸代谢,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸的代谢,乙醛酸和二羧酸代谢,甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢,丙酮酸代谢,色氨酸代谢,三羧酸(TCA)循环。酸枣仁中剂量(15 g/kg)和高剂量(30 g/kg)均可显著回调11种潜在生物标志物。结论酸枣仁可通过调控失眠大鼠的能量代谢和氨基酸代谢,使大鼠内源性代谢物趋近正常水平,为进一步阐明酸枣仁改善睡眠的作用机制提供依据。     

酸枣仁总皂苷改善对氯苯丙氨酸诱导失眠大鼠模型学习记忆损伤机制的研究

目的 基于代谢组学技术考察酸枣仁总皂苷（total saponins of Ziziphi Spinosae Semen,SZSS）对失眠大鼠内源性代谢物的影响,并探讨酸枣仁总皂苷改善学习记忆的药效及其作用机制。方法 采用对氯苯丙氨酸（DL-4-chlorophenylalanine,PCPA）诱导大鼠失眠模型,给予地西泮和酸枣仁总皂苷干预后,进行旷场实验及Morris水迷宫实验;采用苏木素-伊红（HE）染色观察海马组织病理变化;采用ELISA测定海马组织5-羟色氨（5-hydroxytryptamine,5-HT）、γ-氨基丁酸（γ-aminobutyric acid,GABA）及NO （nitric oxide,NO）水平。利用UPLC-Orbitrap-MS/MS技术对大鼠海马组织代谢轮廓进行分析,结合多元统计分析筛选差异性代谢物,并基于MetaboAnalyst 5.0数据库进行代谢通路及代谢网络分析,多角度探讨酸枣仁总皂苷改善学习记忆的代谢特征及作用途径。结果 与模型组比较,酸枣仁总皂苷组大鼠学习能力显著提高（P<0.05、0.01）,海马组织病理结构明显改善,海马组织中5-HT、GABA及NO水平显著升高（P<0.05、0.01）;代谢组学共鉴定出18种与学习记忆损伤相关的潜在生物标志物,酸枣仁总皂苷主要通过苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸等7条主要氨基酸代谢通路发挥改善记忆损伤的作用。结论 酸枣仁总皂苷能够通过回调海马组织内源性差异代谢物,并调控相关氨基酸代谢通路,从而改善失眠引起学习记忆减退。     

酸枣仁汤对失眠大鼠中脑中缝背核Bcl-2及脑源性神经营养因子mRNA的影响

目的 观察对氯苯丙氨酸(PCPA)失眠大鼠中脑中缝背核Bcl-2及脑源性神经营养因子mRNA(BDNF mRNA)表达的改变,以及酸枣仁汤(SZRD)对PCPA所致失眠大鼠中脑中缝背核Bcl-2及BDNF mRNA表达改变的影响,探讨酸枣仁汤可能的作用环节.方法 SD大鼠42只,随机分为空白对照组、模型组、SZRD大剂量组(15 g·kg-1)、SZRD中剂量组(7.5 g·kg-1)、SZRD小剂量组(3.75 g·kg-1)、西药治疗组(艾司唑仑2 mg·kg-1).采用腹腔注射PCPA的方法建立失眠大鼠模型,各组治疗7d后,取脑组织,采用免疫组织化学染色法检测Bcl-2蛋白表达变化,采用原位杂交法检测BDNF mRNA表达的变化.结果 PCPA失眠模型组大鼠中脑中缝背核Bcl-2及BDNF mRNA表达增强,与空白对照组相比,差异具有统计学意义(P＜0.01);酸枣仁汤高剂量组中缝背核内Bcl-2及BDNF mRNA表达增加,与模型组相比具有显著性差异(P＜0.01),艾司唑仑组中缝背核BDNF mRNA表达增加,与模型组相比具有显著性差异(P＜0.001),艾司唑仑组中缝背核Bcl-2表达与模型组相比无显著性差异.结论 PCPA所致失眠能导致中脑中缝背核Bcl-2及BDNF mR-NA表达增强,酸枣仁汤能调节中脑中缝背核Bcl-2及BDNF mRNA表达量,从而发挥对失眠的干预作用.     

PCPA失眠后大鼠不同时间大脑皮质钠-钾ATP酶和钙-镁ATP酶活性变化及酸枣仁汤的干预作用

目的研究PCPA失眠后大鼠大脑皮质不同时间大脑皮质钠-钾ATP酶和钙-镁ATP酶活性变化及酸枣仁汤的干预作用。方法采用连续3天ip对氯苯丙氨酸(PCPA)350mg·kg-1的方法建立失眠大鼠模型。动物随机分为空白对照组、模型组、5-羟色氨酸(5-HTP)组、酸枣仁汤(SZRD)治疗组、5-HTP+SZRD组、SZRD对照组和正常对照组。SZRD治疗组按15g·kg~(-1)ig 7d。各组分别在实验第4、5、6、8、10天取皮质组织,采用无机磷法同时测定钠-钾三磷酸腺苷酶(Na+/K+-ATPase)和钙-镁三磷酸腺苷酶(Ca~(2+)/Mg~(2+)-ATPase)活性。结果实验第4、5、6、8、10天PCPA失眠模型组Na~+/K~+-ATPase和Ca~(2+)/Mg~(2+)-ATPase活性均明显下降,与空白对照组相比具有显著性差异(P0.01),实验第8天和第10天SZRD治疗组Na~+/K~+-ATPase活性明显升高,与模型组相比具有显著性差异(P0.01);实验第8天和第10天SZRD治疗组Ca~(2+)/Mg~(2+)-ATPase的活性明显升高,与模型组相比具有显著性差异(P0.05)。结论 PCPA所致失眠能导致大鼠皮质组织Na~+/K~+-ATPase和Ca~(2+)/Mg~(2+)-ATPase的活性明显下降,酸枣仁汤能调节PCPA失眠大鼠皮质Na~+/K~+-ATPase和Ca~(2+)/Mg~(2+)-ATPase的活性,这可能是酸枣仁汤治疗失眠症的中枢机制之一。     

16S rRNA高通量测序研究柴芪汤对代谢综合征大鼠肠道菌群的影响

目的:采用16S rRNA高通量测序技术分析柴芪汤对代谢综合征(MS)大鼠肠道菌群的影响。方法:通过Illumina Miseq PE300型高通量测序仪对大鼠粪便肠道菌群进行16S rRNA基因V3-V4可变区检测,运用Usearch、Mothur、LEfSe分析肠道菌群的组成结构及不同菌属相对丰度变化。结果:柴芪汤能够逆转MS大鼠肠道菌群物种多样性的下降,并纠正MS导致的菌群组成结构改变。研究发现MS大鼠的肠道菌群在菌属水平有57个菌属相对丰度发生显著变化,而柴芪汤能将其中的54个菌属恢复至正常水平。结论:从肠道微生态角度阐释了MS的可能病机,柴芪汤可以通过调节肠道菌群防治MS。     

基于粪便代谢组学技术的逍遥散抗抑郁作用机制研究

目的应用核磁共振氢谱(1H-NMR)代谢组学技术研究慢性温和不可预知应激(CUMS)抑郁大鼠粪便中内源性代谢物及代谢通路的变化,并评价逍遥散的改善作用,探讨其抗抑郁作用机制。方法使用CUMS造模程序建立抑郁模型,采用1H-NMR技术结合多变量统计分析方法,研究CUMS抑郁大鼠粪便代谢物谱的变化、鉴定相关代谢标志物并构建代谢通路。结果在抑郁大鼠粪便样本中共筛选10种与抑郁相关的潜在生物标志物。与对照组比较,模型组天冬酰胺、天冬氨酸、乳酸和丙酸水平显著升高(P0.05、0.01),而苯丙氨酸、酪氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、丙氨酸和脯氨酸水平显著降低(P0.05、0.01)。与模型组相比,逍遥散能显著升高苯丙氨酸、酪氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺和脯氨酸的水平,能显著降低天冬酰胺、乳酸和丙酸的水平。与对照组比较,CUMS抑郁大鼠粪便中6条代谢通路发生了显著变化:包括(1)氨基酰t RNA生物合成,(2)丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,(3)精氨酸和脯氨酸代谢,(4)谷氨酸和谷氨酰胺代谢,(5)苯丙氨酸代谢以及(6)丙酮酸代谢。而逍遥散可显著回调(2)、(3)、(4)、(5)和(6)条代谢通路。结论逍遥散可能通过调控氨基酸代谢、糖代谢和肠道微生物的代谢等途径发挥抗抑郁作用。     

基于“热证可灸”理论研究艾灸对胃热证大鼠肠道微生态的影响

目的:采用16S rDNA测序分析艾灸胃经穴对胃热证大鼠肠道微生态的影响。方法:24只SD大鼠按随机数字表法分为空白组、模型组、胃经穴组和对照点组各6只。运用Illumina Hiseq高通量测序技术分析胃热证大鼠和艾灸胃经穴干预胃热证大鼠的肠道菌群结构,利用LEfSe分析比较组间微生物的物种差异。结果:与空白组比较,模型组中红蝽菌科(Coriobacteriaceae)、柯林斯氏菌属(Collinsella)及梭菌属(Clostridium)等致病菌丰度显著上调。与模型组大鼠比较,胃经穴组中放线菌门(Actinobacteria)、双歧杆菌科(Bifidobacteriaceae)、双歧杆菌属(Bifidobacterium)和瘤胃球菌属(Ruminococcus)等益生菌丰度显著上调。结论:艾灸胃经穴"梁门""足三里"能显著上调胃热证大鼠益生菌丰度水平,对大鼠的肠道微生物组成及物种影响具有调节作用,可能是其治疗胃热证的机制之一。     

16S rRNA测序探讨岭南湿证人群肠道菌群结构变化

目的:探讨岭南湿证人群的肠道菌群结构。方法:利用高通量基因测序手段,通过对11名湿证志愿者和11名正常志愿者的粪便样本进行肠道菌群16S rRNA扩增子测序,采用OTU聚类分析和比对注释,对样本物种丰度和样本间门、科、属、种等水平上的差异进行统计分析,找出湿证组与正常组的肠道微生态结构差异,并用PICRUSt软件预测差异功能通路。结果:湿证人群肠道菌群分布较健康对照组存在明显差异,主要体现为群落丰富度指数差异显著,梭杆菌门差异最大,丰度上湿证组减少86.5%,有3个科、6个属、9个种水平上均表现出显著差异,另外湿证组与正常组在9个功能通路上存在显著不同,分别是:半胱氨酸和甲硫氨酸代谢、能量代谢、叶酸生物合成、半乳糖代谢、甘油磷脂代谢、脂多糖生物合成蛋白、氮代谢、氧化磷酸化作用、五磷酸途径。结论:湿证症状的产生可能与肠道菌群结构改变有关。     

补中益气汤改善脾虚型胃肠动力障碍大鼠代谢组学研究

目的研究采用代谢组学方法,探索补中益气汤改善脾虚型大鼠胃肠动力学障碍的潜在作用机制。方法采用LC-LTQ-OBITRAP高分辨质谱方法检测正常、模型及补中益气汤组血清代谢物变化,分析补中益气汤改善胃肠动力学障碍的血清生物标记物,解析补中益气汤作用的内源性代谢通路。结果研究发现补中益气汤对脾虚胃肠动力障碍大鼠体内的代谢轮廓有显著影响,与正常组相比,脾虚胃肠动力障碍大鼠有24种差异代谢物发生显著变化,而补中益气汤给药后可逆转其中14种差异代谢物,包括色氨酸、谷氨酰胺、磷脂胆碱等,通路分析研究表明,这些差异性代谢物主要与谷氨酰胺代谢、初级胆汁酸生物合成,不饱和脂肪酸生物合成、牛磺酸和亚牛磺酸代谢、丙氨酸和天冬、谷氨酸代谢有关。结论补中益气汤改善脾虚型大鼠胃肠动力学障碍可能与其影响代谢物轮廓,调控谷氨酰胺代谢、初级胆汁酸生物合成、不饱和脂肪酸生物合成、氨基酸代谢等有关。     

去卵巢大鼠肠道菌群结构和功能的变化及二仙汤的干预作用

目的 采用16S rRNA基因测序探讨二仙汤对大鼠去卵巢后肠道菌群变化的干预作用。方法 将32只雌性健康SD大鼠随机分为4组,每组8只,分别为假手术（Sham）组、模型（OVX）组、雌激素（E）组及二仙汤（EXD）组。E组、EXD组分别以1.8×10^-4 g·kg^-1剂量戊酸雌二醇药液、9 g·kg^-1剂量二仙汤进行灌胃,余下两组给予等体积蒸馏水,1次/d,持续16周。16周后,检测大鼠血清雌激素及血脂四项水平,提取大鼠粪便DNA,给予16S rRNA基因测序并分析结果。结果 与Sham组比较,OVX组血清雌激素水平显著降低（P<0.01）,血清总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平明显升高（P<0.05）,与OVX组比较,E组与EXD组血清雌激素水平显著升高（P<0.01）,TC、LDL-C水平明显降低（P<0.05）。Alpha多样性显示,去卵巢后肠道菌群多样性无显著性变化。Beta多样性显示,4组菌群结构具有显著性差异,二仙汤干预可以改善去卵巢后肠道菌群变化。利用LEfSe分析4组差异菌群,Sham组与OVX组有3个差异菌门、18个差异菌属,OVX组与E组有1个差异菌门、12个差异菌属,OVX组与EXD组有3个差异菌门、5个差异菌属。雌激素干预可以使OVX组瘤胃球菌1（Ruminococcus 1）、厌氧弧菌（Anaerovibrio）、苏黎世杆菌（Turicibacter）3种菌属变化趋势逆转恢复;二仙汤干预可以使OVX组拟杆菌门和厚壁菌门2种菌门变化趋势逆转恢复,普雷沃氏菌9（Prevotella 9）、瘤胃球菌科UCG-014属（Ruminococcaceae UCG-014）、瘤胃球菌1（Ruminococcus 1）、纺锤链杆属（Fusicatenibacter）4种菌属变化趋势逆转恢复。结论 去卵巢大鼠肠道菌群结构和功能发生明显改变,二仙汤可以改善这种变化。