HBV-YMDD变异患者与中医虚实辨证关系初探

目的 :初步探讨服用拉米夫定后HBV -YMDD变异患者中医辨证虚证、实证之间的关系。方法 :对服用拉米夫定半年以上的乙型慢性病毒性肝炎患者采用联合基因集团上海博华基因技术有限公司出品的迈科锐乙型肝炎病毒突变检测基因芯片 ,进行HBV -YMDD变异检测。出现HBV -YMDD者 ,根据中医基础理论 ,将其分为实证、虚证 ,来探讨HBV -YMDD变异患者中医虚、实辨证的关系。结果 :HBV -YMDD变异患者中实证变异率(38/ 4 8)明显高于虚证 (10 / 4 8) ,具有统计学意义。结论 :HBV -YMDD变异与虚、实辨证之间具有相关性。     

慢性乙型肝炎HBeAg阴性患者乙肝病毒变异与中医辨证分型的关系

目的：探讨慢性乙型肝炎HBeAg阴性患者乙型肝炎病毒（HBV）变异状况与中医辨证分型的关系.方法：将84例慢性乙型病毒性肝炎HBeAg阴性患者按中医辨证分为5种证型,采用迈科锐HBV突变检测基因芯片,进行乙型肝炎病毒C基因启动子（BCP）和前C基因终止变异检测.结果：与HBeAg阳性组患者相比,HBeAg阴性患者HBV变异的发生与中医各证型无明显相关性;分为偏实证组和偏虚证组后,BCP区和/或前C区变异率偏实证组为34.5%,偏虚证组为65.5%,偏虚证组明显高于偏实证组.结论：BCP区和/或前C区变异与中医辨证分型存在相关性,实证变异率低于虚证.     

未经核苷酸类似物治疗的乙型肝炎病毒YMDD变异的相关研究

目的：研究未予核苷（酸）类似物（NA）治疗的乙型肝炎患者,其体内乙肝病毒（HBV）P基因酪氨酸-蛋氨酸-天门冬氨酸-天门冬氨酸（YMDD）变异,对于病毒自身复制及感染者肝脏生化指标的影响。方法：收集未经NA抗病毒治疗的333例HBV感染者血清,检测HBV YMDD变异,及HBV-DNA、乙型肝炎病毒E抗原（HBeAg）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AsT）等指标。结果：体内病毒发生MDD变异的患者,血清HBV—DNA载量,AST、ALT4值均低于感染病毒未变异的患者（P〈0．05）。结论：变异后的HBV病毒DNA复制能力下降,血清转氨酶低于未变异者,HBeAg阳性者发生HBV YMDD变异率高于阴性者。     

HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者HBV变异与中医分型的相关性研究

目的:探讨慢性乙型肝炎HBeAg阴性患者乙肝病毒变异状况与中医辨证分型的相关性。方法:将112例HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者中医辨证分为5种证型,采用基因序列分析的方法进行乙型肝炎病毒BCP区和前C基因终止变异检测。结果:HBeAg阴性慢性乙肝患者HBV突变类型与中医分型无明显相关性,但肝郁脾虚型与湿热中阻型、瘀血阻络型相比,有显著性差异;分为偏实证组和偏虚证组后,BCP区和(或)前C基因终止变异的发生率在2组间存在显著性差异,虚证组明显高于实证组;相同位点在不同中医证候中的变异率无显著性差异。结论:BCP区和(或)前C区变异与中医辨证分型存在相关性,实证组变异率低于虚证组。肝郁脾虚型发生变异率最高。     

拉米夫定治疗慢性乙型肝炎后YMDD检测分析

拉米夫定是目前公认的有效抗病毒核苷类药物,对乙肝病毒(HBV)有明显的抑制作用,主要抑制HBV复制过程中逆转录酶的活性。该药在长期治疗过程中,少数病人HBV—DNA聚合酶活性区发生变异(简称YMDD变异)而对药物产生耐药性。HBV-YMDD变异是拉米夫定治疗中HBV产生耐药的主要原因。笔者采用PCR-酶联法检测技术,对260例慢性乙肝患者拉米夫定治疗中HBV-DNA、ALT反跳及YMDD变异关系进行检测与对比观察,现报告如下。     

基因芯片技术检测利福平药物诱导H37Rv株基因突变的应用研究

目的用利福平、异烟肼药物作用H37Rv株,诱导基因突变,用基因芯片技术检测耐药菌株突变基因位点。方法H37Rv菌株用不同浓度的利福平和异烟肼加入培养液中观察菌株的耐药生长情况,耐药菌株用PCR扩增产物杂交,基因芯片检测药物作用部位是否有突变,检测突变基因位点。结果利福平药物诱导H37Rv耐药,用基因芯片技术检测利福平耐药菌株,rpoB基因531位发生突变,TCG转变为TTG,直接测序发现在相同位点发生突变。耐异烟肼耐药菌株katG基因315位发生突变,AGC转变为ACC。同时加入两种药物的耐药株用基因芯片检测分别在rpoB基因531位,katG基因315位发生突变。结论结核分枝杆菌产生耐药的机理与药物作用基因位点突变有关。基因芯片检测技术耐药菌株基因突变,不仅可以准确地确定突变位点和突变类型,快速、高效、设备简单,并能同时检测分析成千上万个基因有关突变位点。     

利用基因芯片技术研究乙肝病毒耐药机制

目的探讨基因芯片技术在乙型肝炎基因中的分型及乙肝病毒耐药性检测中的临床价值,研究乙肝病毒耐药机制。方法采用基因芯片技术和传统的PCR核酸扩增技术,对接受了拉米呋啶治疗的239例乙肝患者进行基因分型以及拉米夫定治疗中YM-DD基因变异即乙肝病毒耐药性进行检测。结果所有HBV DNA阳性者中,B基因型10例,C基因型132例,B/C混合型2例;拉米夫定治疗小于3个月、3个月～1 a以及1 a以上的YMDD突变率分别为3.77%,15.56%和40.6%。结论基因芯片技术能很好地用于乙肝的诊断分型,并能检测到YMDD变异情况,从而对拉米夫定治疗后耐药性进行判断。     

拉米夫啶致乙型肝炎患者YMDD变异分析

目的：了解拉米夫啶治疗慢性乙肝肝炎患者乙型肝炎病毒（HBv）YMDD变异情况及意义。方法：采用聚合酶链反应结合Taqman荧光技术检测出本院99例拉米夫啶治疗慢性乙型肝炎所致HBVDNAYMDD变异患者,并对这99例患者服药时间、HBVDNA、丙氨酸氨基转移酶（ALT）及HBvDNAYMDD变异情况进行分析。结果：99例HBVDNAYMDD变异患者中服药6～12个月有5例,13-24个月63例,25-36个月18例,37个月以上13例。YMDD变异株HBV复制处于中高度水平,YMDD变异患者中有60．3％ALT异常。YMDD变异以YVDD变异最多,其次为YIDD变异及YIDD／YVDD变异。结论：拉米夫啶治疗所致HBVDNA变异发生率在服药时间12。24个月最高,HBVYMDD变异的发生与HBVDNA水平及ALT异常相关,YMDD变异以YVDD变异为主。     

慢性乙型肝炎e抗原阴性患者肝郁脾虚证与HBV基因型和基因变异类型的相关性

目的探讨慢性乙型肝炎e抗原(HB eA g)阴性患者乙型肝炎病毒(HBV)基因型和基因变异类型与中医肝郁脾虚证的相关性。方法选取76例HB eA g阴性且被辨证为肝郁脾虚型的慢性乙肝患者,检测其HBV基因型和BCP区、前C区变异的情况,并同湿热中阻型患者做比较,同时结合肝郁脾虚型证型积分情况进行相关性分析。结果肝郁脾虚型与湿热中阻型患者相同位点的变异率差异有统计学意义(P<0.05);两组证型患者在HBV基因型的分布上差异有统计学意义(P<0.05);各基因变异类型占各HBV基因型的比例也不相同(P<0.05);肝郁脾虚型患者各基因型及各基因变异类型肝郁脾虚证候计分比较,差异亦有统计学意义(P<0.05)。结论 C基因型和前C变异在慢性乙型肝炎HB eA g阴性肝郁脾虚型患者中常见,HBV基因型和基因变异与中医证型均有相关性。     

病毒学因素对聚乙二醇干扰素α治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎e抗原血清学转换的影响

目的:探讨聚乙二醇干扰素α(PEG-IFNα)治疗乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)阳性患者的疗效及各种病毒学因素与HBeAg血清学转换的关系。方法:216例HBeAg阳性慢性乙型肝炎(CHB)患者皮下注射PEGIFNα,每周1次,治疗48周,随访24周。治疗前所有患者检测基线HBsAg、HBeAg、HBV-DNA定量,部分患者分析HBV基因型及P区位点变异情况。治疗结束后统计HBeAg的血清学转换情况,并分析各种病毒学因素与e抗原血清学转换的关系。结果:216例患者治疗48周时68例(31.48%)发生e抗原血清学转换。基线HBsAg定量<250 ng/mL患者的e抗原血清学转换率显著高于HBsAg定量≥250 ng/mL(χ2=4.293,P=0.038)。e抗原血清学转换组基线HBeAg和HBV-DNA定量显著低于非血清学转换组(t=4.455,P=0.000;t=1.974,P=0.046)。B、C型的e抗原血清学转换率差异不大(χ2=0.497,P=0.481)。野生型、非204位点变异患者的e抗原血清学转换率虽高于204位点变异者,但差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论:病毒学各因素中,基线HBsAg、HBeAg、和HBV-DNA定量是聚乙二醇干扰素α治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎疗效的较重要影响因素,HBV基因型(B、C型)及P区位点变异对其影响不大。     

乙型肝炎病毒BCP联合点突变与中医证型的关系

目的 观察乙型肝炎病毒（hepatitis Bvirus,HBV）基本C区启动子（basal core promoter,BCP）联合点突变与中医证型的关系。方法 收集未经拉米夫定及干扰素治疗的HBV DNA阳性慢性乙型肝炎患者102例,分为湿热中阻型、肝郁脾虚型、肝肾阴虚型、脾肾阳虚型和瘀血阻络型,分别检测血清HBV DNA、肝脏生化指标及BCPnt 1762A-T和nt1764G-A联合点突变。结果 实证组的变异株检出率明显高于虚证组,其中湿热中阻型患者变异株的检出率最高。结论 实证者可能较易发生BCP联合点突变,其中湿热中阻型患者可能更为显著。     

拉米呋啶治疗后乙肝病毒聚合酶YMDD的变异

目的观察拉米呋啶治疗慢性乙肝患者1年前后,患者体内HBV DNA多聚酶结构域C的酪氨酸―甲硫氨酸―天门冬氨酸―天门冬氨酸(YMDD)基因变异情况,及其与血清HBV DNA、丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平及乙肝标志物变化的关系。方法采用实时荧光定量PCR、ELISA及速率法分别检测60例乙肝患者经拉米呋啶治疗后其血清YMDD、HBV DNA、乙肝标志物及ALT的变化情况。结果拉米呋啶治疗9月、1年后YMDD的变异率分别为5%、13.3%。YMDD变异组HBV DNA阴转率为12.5%,无变异组HBV DNA阴转率为67.3%,两组阴转率相比差异有统计学意义(P<0.01)。拉米呋啶治疗1年后YMDD变异组ALT为(40.7±14.7)U/L,无变异组ALT为(26.5±10.1)U/L,两组相比差异有统计学意义(P<0.01)。5名HBeAg阴转患者无YMDD变异。结论乙肝患者经拉米呋啶治疗后,YMDD变异率随用药时间的延长可逐渐增加,当其HBV DNA、ALT含量出现明显反跳时,应及早改变治疗方案。     

乙型肝炎相关性肝衰竭阴、阳黄证患者外周血DCs功能比较研究

目的：比较乙型肝炎（HBV）相关性肝衰竭阴黄证、阳黄证患者外周血树突状细胞（DCs）功能,研究阴黄证、阳黄证两证型DCs 的免疫表达特点。方法：将HBV 相关性肝衰竭黄疸症患者分为阳黄组与阴黄组两组,另设健康对照组,以外周血来源的PBMCs 体外分离诱导培养DCs,应用流式细胞计数检测DCs 的表面分子HLA-DR、CD80、CD86、CD83、CD1α,并检测DCs 的上清液中IFN-α、IL-4 的分泌水平,比较HBV 相关性肝衰竭患者阴、阳黄证与免疫细胞及炎症因子表达的差异。结果：与健康组比较,HBV 相关性肝衰竭患者DCs 表型HLA-DR、CD1α、CD83、CD80、CD86 表达率显著下降（P<0.01）,DCs 分泌因子IFN-α显著升高（P<0.01）;与阳黄组比较,HBV 相关性肝衰竭患者阴黄组CD83、CD86表达率显著降低（P<0.01）,IL-4 表达显著增强（P<0.01）;与阴黄组比较,阳黄证组DCs 分泌因子IFN-α表达显著增强（P<0.01）。结论：阴黄、阳黄两组HBV 相关性肝衰竭患者的DCs 功能状态均表现为细胞免疫功能低下,阴黄证患者的细胞免疫功能更低,存在抗炎症细胞因子表达增强;阳黄证患者存在炎症因子过度释放。     

乙型肝炎病毒基因型和基因变异在乙型肝炎病毒相关性肾小球肾炎中的意义

目的:探讨HBV基因型及基因变异等病毒因素在HBV-GN中的意义.方法:选择41例HBV-GN患者,采用荧光PCR法检测HBV-GN患者基因型,HBV多态性芯片检测基因变异,同时测定尿常规、肾功能和血压等临床资料.结果:41例HBV-GN患者,B基因型14例,C型24例(86.8%),B+C混合型3例.B型和C型患者间24小时尿蛋白有显著性统计学差异(P＜0.05),尿红细胞计数、血压、尿素氮和血清肌酐无显著性统计学差异(均P >0.05).12例为前C区1896位变异,1896位变异与未变异者间小便常规,血压和肾功能无显著性差异.结论:HBV-GN患者HBV基因以B、C两型为主,C型为多.C型患肾脏损害可能更为严重.前C区1896位变异和YMDD变异对HBV-GN患者小便常规、血压和肾功能无明显影响.     

益气清肝方药联合拉米夫定抗乙肝病毒临床研究

拉米夫定是目前临床应用最多的核苷类抗乙肝病毒（HBV）药物之一,疗效确切,但随着用药时间的延长,慢性乙肝（CHB）患者发生病毒耐药变异的比例增高.乙肝病毒YMDD变异株对拉米夫定的耐药性增强,病毒变异导致患者HBV DNA定量反跳、肝功能异常,使病情出现反复,给临床治疗带来一定的困难.因此,中西医结合治疗提高拉米夫定抗乙肝病毒应答率、防治病毒耐药变异成为临床研究热点.     

健脾清化方联合垃米夫定治疗慢性乙型肝炎对HBV、YMDD变异的影响

目的:观察健脾清化方联合拉米夫定在减少乙肝病毒P区基因YMDD变异方面的作用。方法:选取乙肝病毒主要复制指标HBV DNA(PCR法)阳性且中医辨证为肝郁脾虚兼湿热证的慢性乙型肝炎患者63例,随机分为健脾清化方联合拉米夫定治疗组32例、拉米夫定对照组31例,疗程2年,疗程结束时,采用caliper1000微流芯片仪对HBVDNA阳性患者进行YMDD变异检测。结果:2年疗程结束时,健脾清化方联合拉米夫定治疗组YMDD变异率为15.6%(5/32),拉米夫定对照组变异率为38.7%(12/31),治疗组低于对照组(P<0.05),较长的疗程、治疗前较高的DNA含量与变异的发生具有相关性(R=0.888,P=0.018)。结论:健脾清化方联合拉米夫定治疗中医辨证为肝郁脾虚兼湿热型慢性乙型肝炎患者比单独应用能有效减少病毒YMDD变异,提高临床疗效。     

妊娠期高血压疾病的危险因素分析

目的：探讨HBV基因型及基因变异等病毒因素在HBV-GN中的意义.方法：选择41例HBV-GN患者,采用荧光PCR法检测HBV-GN患者基因型,HBV多态性芯片检测基因变异,同时测定尿常规、肾功能和血压等临床资料.结果：41例HBV-GN患者,B基因型14例,C型24例（86.8%）,B＋C混合型3例.B型和C型患者间24小时尿蛋白有显著性统计学差异（P＜0.05）,尿红细胞计数、血压、尿素氮和血清肌酐无显著性统计学差异（均P 〉0.05）.12例为前C区1896位变异,1896位变异与未变异者间小便常规,血压和肾功能无显著性差异.结论：HBV-GN患者HBV基因以B、C两型为主,C型为多.C型患肾脏损害可能更为严重.前C区1896位变异和YMDD变异对HBV-GN患者小便常规、血压和肾功能无明显影响.     

拉米夫定和补肾方联合应用治疗慢性乙型肝炎的疗效及对YMDD区域的影响

目的：观察拉米夫定和补肾方联合应用治疗慢性乙型肝炎的疗效及对慢性乙型肝炎病毒P基因酪氨酸—蛋氨酸—天冬氨酸—天冬氨酸(YM)D)区域的影响。方法：收集乙型肝炎病毒(HBV)DNA阳性的慢性乙型肝炎患者88例,分为拉米夫定组、拉米夫定加补肾方l组和拉米夫定加补肾方2组共3组,分别检测血清HBV DNA、肝脏生化指标和P基因YMDD区域变异。结果：在治疗52周时,拉米夫定加补肾方2组无论是HBV DNA阳性率(6．45％),还是YMDD变异率(3．23％)都比拉米夫定组低。结论：初步表明,拉米夫定与补肾方联合用药能在一定程度上提高治疗慢性乙型对炎的疗效,并可能减少YMDD的变异。     

柴芍六君子汤联合拉米夫定治疗肝郁脾虚型慢乙肝40例

目的：观察柴芍六君子汤联合拉米夫定治疗肝郁脾虚型慢乙肝的临床疗效。方法：将80例患者随机分为2组。治疗组40例予拉米夫定配合柴芍六君子汤治疗；对照组40例单用拉米夫定治疗，疗程结束时（1年）观察HBV—YMDD变异率、HBVDNA定量、HBeAg血清转换率的变化。结果：2组患者HBeAg血清转换率分别为25％和7．5％，HBV—YMDD变异率分别为10．0％和22．5％，2组比较，治疗组优于对照组（P〈0．01，P〈0．05）。结论：柴芍六君子汤联合拉米夫定能够提高HBeAg血清转换率，降低HBV—YMDD变异发生率。     

肾移植乙肝患者使用拉米夫定出现YMDD变异的治疗

目的探讨拉米夫定治疗肾移植术后乙肝患者出现YMDD变异的治疗方案。方法将16例经拉米夫定治疗出现YMDD变异的肾移植术后乙肝患者随机分为2组,A组8例联用阿德福韦酯治疗,B组8例换用恩替卡韦治疗。定期复查2组肝肾功能、尿常规、HBV DNA定量及乙肝病毒YMDD变异情况,观察治疗效果。结果治疗96周,2组ALT水平、HBV DNA水平均较治疗前显著下降,2组间ALT、HBV DNA水平比较均无显著性差异。治疗12周、24周、48周、96周,A组检测到YMDD变异株分别为2例、1例、0例、0例,B组分别为4例、2例、0例、0例。2组随访期间移植肾功能均正常。结论肾移植乙肝患者经拉米夫定治疗出现YMDD变异后采用与阿德福韦酯联合治疗或换用恩替卡韦均可有效抑制乙肝病毒复制,且安全有效,有利于乙型肝炎病毒阳性肾移植患者长期存活。