人肝刺激因子的提取及其保肝作用的初步观察

采用水囊引产眙儿(胎龄4～6个月),提取肝刺激因子(hHSS),用~3H—胸腺嘧啶核苷测其活性,观察到 hHSS 可使34%肝切除的大鼠对~3H—胸腺嘧啶核苷掺入再生肝 DNA 率明显增加。将 hHSS 预先注入半乳糖胺损伤的小鼠体内,结果观察到:hHSS 极明显地降低半乳糖胺中毒的死亡率(P<0.01),明显地抑制半乳糖胺所致的血清 GPT 和 GOT 的高水平。电镜检查表明,hHSS 可保护肝细胞的超微结构(线拉体、内质网等)免受半乳糖胺的损伤。这些结果证明,从人胎肝中可提取 hHSS,而 hHSS 具有保护肝脏免受肝毒剂—半乳糖胺的毒害作用。     

大鼠肝刺激因子对CCl_4致肝损伤小鼠保护作用的机制研究——Ⅲ.HSS对DNA合成和琥珀酸脱氢酶的影响

我们曾经证明肝刺激因子(HSS)对小鼠实验性肝损伤的保护机制有二:一为抗氧化作用;另一为保持膜的流动性。本文再次探讨其机制并获得如下结果:①HSS促进CCl_4染毒小鼠肝细胞合成DNA;②HSS增加~3H-TdR掺入CCl_4染毒肝的DNA,③HSS保护受CCl_4处理小鼠的肝线粒体琥珀酸脱氢酶(SDH)活性。根据这些结果我们设想,HSS对CCl_4染毒小鼠奸细胞有强烈的增殖作用,其对SDH活性的保护有利于葡萄糖的氧化,这二者也可能是HSS的保肝机制。     

北五味子粗多糖保肝作用的机理

北五味子粗多糖多次灌胃给药，对四氯化碳中毒小鼠肝中丙二醛含量具有明显降低作用，亦能显著抑制小鼠肝匀浆脂质过氧化反应。能促进正常小鼠的胆汁分泌和部分肝切除后肝的再生。表明北五味子粗多糖的保肝作用与其对抗脂质过氧化、促进肝再生和利胆作用有关。     

肝脾调补方对D-氨基半乳糖胺所致小鼠化学性肝损伤的保护作用

目的:观察中药肝脾调补方对D-氨基半乳糖胺所致小鼠化学性肝损伤的保护作用并探讨其药理学机制。方法:采用D-氨基半乳糖胺(D-GlaN)建立小鼠急性肝损伤模型,通过肝脾调补方高、中、低剂量灌胃,观察肝脾调补方对各组小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)及肝组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)水平的影响。结果:肝脾调补方可明显降低D-氨基半乳糖胺(D-Ga/N)所致肝损伤小鼠血清中ALT、AST水平;降低肝组织匀浆的MDA、NOS、NO的含量,提高肝匀浆SOD、GSH-Px活性。结论:肝脾调补方对D-Ga/N致小鼠肝损伤有保护作用,其作用与抗脂质过氧化、稳定肝细胞膜和线粒体膜有关。     

丹芍化纤胶囊对肝细胞线粒体脂质过氧化的影响

目的 :观察丹芍化纤胶囊对四氯化碳 (CCl4)中毒性肝纤维化模型大鼠肝细胞线粒体脂质过氧化的作用。方法 :分别提取正常对照组、肝纤维化模型组、自然恢复组、低剂量丹芍化纤胶囊治疗组、高剂量丹芍化纤胶囊治疗组大鼠的肝组织线粒体 ,测定丙二醛 (MDA)的含量。结果 :肝纤维化组及自然恢复组较正常组大鼠肝细胞线粒体MDA含量明显增高 (P <0 0 5 ) ,治疗后 ,高剂量治疗组及低剂量治疗组大鼠肝细胞线粒体MDA含量均较肝纤维化组及自然恢复组明显降低 ,基本恢复正常水平。结论 :丹芍化纤胶囊对肝纤维化大鼠肝脏线粒体脂质过氧化具有一定的抑制作用 ,可能是其发挥抗肝纤维化疗效的机制。     

硒对离体人胚肝细胞膜的保护作用

在原代培养人胚肝细胞脂质过氧化损伤模型上，观察硒对肝细胞膜流动性及膜表面超微结构的影响。提示上述硒的保护作用与增强细胞抗氧化能力有关。     

保肝解毒胶囊对雷公藤多甙片所致小鼠急性肝损伤保护作用的实验研究

目的：运用新建雷公藤多甙致小鼠急性肝损伤模型，探讨保肝解毒胶囊对该模型肝损伤保护作用的效果和机理。方法：连续5d给小鼠灌服保肝解毒胶囊制剂，而后以雷公藤多甙片造小鼠急性肝损伤模型，检测小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、还原型谷胱甘肽(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)，肝匀浆中过氧化物(LPO)含量，并取肝组织作病理检查。结果：保肝解毒胶囊可以对抗肝损伤，其疗效和剂量有关；保肝解毒胶囊保护肝细胞的机理与对抗脂质过氧化反应有关。结论：保肝解毒胶囊具有保护肝脏的作用，     

问荆硅化物对四氯化碳急性肝损伤的保护作用及机制

目的 研究问荆硅化物(SCE)对CCl4急性肝损伤的保护作用及机制.方法 采用小鼠CCl4急性肝损伤模型进行实验,检测小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、NO及肝糖原、肝蛋白、肝甘油三酯、肝丙二醛、肝细胞色素P450含量及肝超氧化物歧化酶(SOD)活性.结果 SCE(灌胃1.0～2.0g/kg)能明显降低CCh肝损伤小鼠血清ALT、AST活性、NO含量及肝甘油三酯、肝丙二醛含量,提高肝糖原、肝蛋白、肝细胞色素P450含量及肝SOD活性.结论 SCE对CCl4引起的小鼠急性肝损伤具有明显保护作用,其机制可能与其清除自由基、抑制脂质过氧化及降低NO浓度有关.     

大鼠肝刺激因子对CCl_4损伤小鼠肝脏保护作用机制的研究 Ⅱ.HSS 保护膜结构稳定性的作用

本工作用小鼠肝细胞膜、线粒体膜和微粒体膜为研究对象,观察经过生物活性鉴定过的肝生长刺激因子(HSS)对 CCl_4损伤膜流动性的效应。利用荧光探测剂 DPH 与含膜片液混合,测其荧光偏振度并计算膜的微粘度,以作为膜流动性改变的指标。结果表明,HSS 可减弱 CCl_4对肝细胞膜、线粒体膜和微粒体膜的损伤,使它们保持正常的流动性和稳定性。我们推测这可能是 HSS 保护肝脏的机制之一。     

D-氨基半乳糖致小鼠、大鼠肝损伤模型的实验性研究

目的筛选D-氨基半乳糖（D—Gal）造模的最佳剂量，比较D—Gal造成的大、小鼠急性肝损伤模型的稳定性，为保肝新药的筛选提供合适的实验动物模型和理论依据。方法采用60只昆明种小鼠、70只SD大鼠，以D—Gal作为肝损伤试剂，建成急性肝损伤动物模型，以血液生化、肝功能、肝组织学的改变为观察指标，筛选大、小鼠最佳用药剂量，并观察D—Gal所致大鼠肝损伤的动态变化。结果本实验条件下，D—Gal500mg／kg为大鼠的最适剂量，此剂量建立的肝损伤模型肝组织形态变化显著且死亡率低。结论与小鼠动物模型相比较，D—Gal500mg／kg大鼠急性肝损伤模型更适用于保肝新药的筛选与评价。     

人胎肝刺激因子对肝毒剂致小鼠亚细胞器的功能变化的影响

人胎肝刺激因子具有明显的保肝作用。本文采用Ｄ－半乳糖胺及ＣＣｌ４损伤小鼠肝脏，进一步观察人胎肝刺激因子（ｈＨＳＳ）对肝损伤引起的微粒体Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶和混和功能氧化酶（Ｐ４５０）活性的保护作用，结果发现，肝损伤后，两种酶活性均明显降低，而预先经ｈＨＳＳ处理后，上述两种酶活性均有不同程度的恢复或增加。结果表明，ｈＨＳＳ的保肝作用，可能与保护肝细胞的钙稳定及加强肝细胞代谢酶活性有关。     

肝刺激因子对实验性急性肝损伤小鼠的保护作用

大鼠肝刺激因子(HSS)是否有保肝作用?这一问题的阐明不仅有理论意义还有潜在的临床意义。本工作采取初断乳大鼠的肝提取HSS,用CCl_4和半乳糖胺损伤小鼠肝脏,结果观察到:(1)HSS明显降低CCl_4和半乳糖胺所致小鼠血清GPT和GOT升高的幅度;(2)HSS的保肝作用具有量效关系;(3)HSS抗CCl_4损伤肝的时程在72h以上;(4)肝组织切片检查表明,HSS可减轻CCl_4和丰乳糖胺损伤肝的程度。上述生化学和组织形态学的指标表明,HSS对实验性急性肝损伤小鼠确有保护作用。     

Hepatic stimulator substance from human fetal liver for treatment of experimental hepatic failure.

The authors previously reported the successful reversal of lethal D-Gal induced hepatic necrosis in rats by human hepatic stimulator substance (hHSS), a liver specific growth factor partially purified from human fetal liver cells, which promoted hepatocyte proliferation. In this study, they further investigated the mechanism of hHSS in improving survival of experimental acute hepatic failure. Our results demonstrated that the level of alanine transaminase and endotoxin in the plasma and lipid peroxides in the liver of chemically poisoned rats were reduced by hHSS to different extent at different periods of observation compared with the saline control group. The apparent recovery of liver function and the increase of 3H-TdR incorporation into hepatic DNA correlated with the morphologic changes observed under light and electron microscopes, showing that the damages inflicted on the cellular and subcellular structure in the liver of hHSS-treated rats were greatly alleviated and rapidly repaired. Therefore, hHSS, which can prevent liver deterioration and promote hepatocyte regeneration, may be a new hepatic stimulator factor readily available for clinical use.

     

人胎肝刺激因子对大鼠实验性肝纤维化影响的研究

本工作从健康孕妇水囊引产４～６个月龄的胎儿取肝，采用ＬａＢｒｅｃｑｕｅ方法提取肝刺激因子，称人肝刺激因子（ｈｕｍａｎＨｅｐａｔｉｃＳｔｉｍｕｌａｔｏｒＳｕｂｓｔａｎｃｅ，ｈＨＳＳ）。将ｈＨＳＳ注入肝部分切除之大白鼠体内，用３Ｈ－胸腺嘧啶核苷掺入肝ＤＮＡ法测定其生物活性。结果表明，我们提取的ｈＨＳＳ刺激肝细胞ＤＮＡ合成较对照组增加６倍。采用皮下注射６０％ＣＣｌ４豆油溶液和饮用低浓度的乙醇制备慢性肝损伤动物模型，以观察ｋＨＳＳ对大鼠实验性慢性肝纤维化的影响。实验结果表明，（１）ｈＨＳＳ可以明显降低ＣＣｌ４－乙醇所致慢性肝损伤时肝组织羟脯氨酸含量的升高，在实验第２８、４２天差异具显著性（Ｐ＜０．０５，０．０１）。（２）病理组织学观察表明，ｈＨＳＳ可以明显降低ＣＣｌ４－乙致慢性肝损伤时肝组织纤维化的程度。在实验的第４２天差异具显著性（Ｐ＜０．０１）。本工作结果提示，肝再生刺激因子可能是一种有希望应用于临床治疗慢性肝病的生物制剂。     

利福平增加异烟肼肝毒性的机制探讨

目的　探讨利福平增加异烟肼肝毒性的机制。方法　分别测定异烟肼组、利福平组和联合用药组小鼠的血清谷丙转氨酶（ＧＰＴ）、肝指数、肝匀浆丙二醛（ＭＤＡ）含量、肝微粒体Ｐ４５０和线粒体Ｃａ~２＋ＡＴＰ活性,及肝病理检查,结果与对照组或实验组之间进行比较。结果　异烟肼和利福平联合用药组的ＭＤＡ、ＧＰＴ明显增高,线粒体Ｃａ~２＋ ＡＴＰ酶活性明显降低（Ｐ＜０．０５）,且肝细胞坏死较为明显。结论　异烟肼和利福平联合用药后肝毒性增加与膜脂质过氧化、线粒体Ｃａ~２＋　ＡＴＰ酶受损及利福平诱导肝药酶有关。     

小鼠急性肝坏死模型锌指蛋白A20的变化及意义

目的探讨锌指蛋白A20在小鼠急性肝坏死模型中的表达变化规律及意义。方法用D-氨基半乳糖（D-GalN）＋内毒素（LPS）联合制备小鼠急性肝坏死模型。将BalB/C小鼠随机分为正常对照组和模型组,于不同时间点取肝组织,采用苏木素-伊红（HE）染色光镜下观察肝组织病理学变化,免疫组化SP法检测肝细胞A20的表达情况。结果A20在正常对照组小鼠肝细胞中无表达。模型组小鼠在注射D-GalN和LPS后1h肝细胞开始表达A20;2h时表达水平迅速上升达峰值,Constantine半定量评分为4.33分,A20染色阳性肝细胞达20%～45%,主要分布在小叶间静脉周围;3h时A20表达下降;7h时降至难以检测水平。在肝坏死期,A20染色阳性肝细胞仍部分存活,而A20染色阴性肝细胞则大片坏死。结论在小鼠急性肝坏死模型出现大量肝细胞坏死前,A20在肝细胞中表达水平快速上升至高峰;当肝细胞大量坏死时,A20表达水平降至极低。A20在控制炎症反应、保护肝细胞免受损伤方面发挥了作用。     

D-氨基半乳糖联合脂多糖诱导小鼠慢性肝损伤模型的建立

目的研究D-氨基半乳糖联合脂多糖诱导小鼠慢性肝损伤模型建立的方法。方法 30 mg/mLD-氨基半乳糖和2μg/mL脂多糖混合溶液,腹腔注射,每2天1次,连续8周。监测小鼠饮食和体重变化;取血测定小鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平;取肝组织,HE和Masson染色,观察小鼠肝组织结构、细胞形态及纤维化程度。结果模型组ALT水平升高,肝细胞变性、坏死等病变,组织纤维化明显增生。结论 D-氨基半乳糖联合脂多糖可诱导小鼠的慢性肝损伤模型。