基质金属蛋白酶—1,反义金属蛋白酶组织抑制因子—1表达质粒？…

目的 观察基质金属蛋白酶－１（ＭＭＰ－１）,反义金属蛋白酶组织抑制因子－１（ＴＩＭＰ－１）表达质粒对大鼠肝纤维经的影响。方法 运用重组ＤＮＡ技术,构建大鼠ＭＭＰ－１,反义ＴＩＭＰ－１,真核细胞表达质粒,经脂质包埋后,利用腹腔注射将其导入免疫性大鼠纤维化模型体内,观察其对大鼠肝纤维化的影响。结果 ＭＭＰ－１,反义ＴＩＭＰ－１表达质粒均可促进肝脏中Ⅰ,Ⅲ型胶原的降解（Ｐ〈０．０５－Ｐ〈０．０１）,且作     

秋水仙碱对肝纤维化大鼠肝脏基质金属蛋白酶-1及其抑制因子-1表达的影响

目的 观察秋水仙碱对纤维化肝脏基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)表达的影响,从胶原降解的角度探讨秋水仙碱对肝纤维化有无逆转作用及可能存在的机制.方法 制备免疫性大鼠肝纤维化模型,并给予秋水仙碱治疗;通过RT-PCR检测MMP-1、TIMP-1的表达,并作Ⅰ、Ⅲ型胶原的免疫组化以及Masson胶原染色.结果 发现秋水仙碱对肝纤维化大鼠MMP-1的表达无明显影响(P>0.05),但可以抑制TIMP-1的表达(P<0.05),促进Ⅰ、Ⅲ型胶原的降解(P<0.05);然而在病理形态学的观察中,未发现秋水仙碱治疗组与肝纤维化模型组之间存在的显著性差异(P>0.05).结论 秋水仙碱可以抑制纤维化肝脏TIMP-1的表达,从而增强间质胶原酶的活性,促进Ⅰ、Ⅲ型胶原的降解,产生抗肝纤维化的作用,但其作用有限.     

基质金属蛋白酶2、9及基质金属蛋白酶组织抑制因子1在肺间质纤维化实验中的

细胞外基质 (ＥＣＭ)合成和降解失衡是引起ＥＣＭ积聚导致肺间质纤维化的重要病理生理因素。基质金属蛋白酶(ＭＭＰｓ)及其抑制物 (ＴＩＭＰｓ)是调节ＥＣＭ降解的重要体系。我们以博莱霉素诱导的肺间质纤维化大鼠为模型 ,观察肺间质纤维化发生过程中基质金属蛋白酶 2、9(ＭＭＰ 2、ＭＭＰ 9)及基质金属蛋白酶组织抑制因子 1(ＴＩＭＰ 1)基因表达的变化 ,探讨ＭＭＰ 2、9和ＴＩＭＰ 1在肺间质纤维化发病中的作用。材料与方法　 (1)动物模型制备 :雌性Ｗｉｓｔａｒ大鼠 6 0只(沈阳军区医学专科学校动物实验中心提供 ) ,体重 (2 15±2 0 )ｇ,…     

金属蛋白酶组织抑制因子1与肝纤维化

近年来,有关胶原降解方面的改变在肝纤维化形成中的作用日益引起重视。金属蛋白酶组织抑制因子(ｔｉｓｓｕｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｏｆｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ,ＴＩＭＰ)是一组胶原酶抑制物,通过与相应的胶原酶结合而抑制其对胶原的分解。ＴＩＭＰ1主要特异性地结合激活的间质胶原酶(ｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ1,ＭＭＰ1),从而抑制其对Ⅰ、Ⅲ型胶原的降解[1]。肝脏星形细胞(ｈｅｐａｔｉｃｓｔｅｌｌａｔｅｃｅｌｌｓ,ＨＳＣ)在体外培养时能够表达和分泌ＴＩＭＰ1[2]。为了研究ＴＩＭＰ1在肝纤维化过程中…     

基质金属蛋白酶-2与肝纤维化

肝纤维化是各种慢性肝病向肝硬化发展的共同病理过程 ,其实质是以Ⅰ、Ⅲ型为主的胶原纤维等细胞外基质 (ＥＣＭ )合成与降解失衡 ,导致ＥＣＭ在肝内过度沉积而形成的。研究表明 ,参与ＥＣＭ降解的主要是基质金属蛋白酶类 (ＭＭＰｓ) ,其中基质金属蛋白酶 2 (ＭＭＰ 2 )在ＥＣＭ的降解与重塑中起着非常重要的作用 ,并有其独特的性质。本文就ＭＭＰ 2的来源、性质、结构及其在肝纤维化的发生、发展中的作用等作一介绍。一、ＭＭＰ 2的来源、结构ＭＭＰ 2又名明胶酶Ａ ,为Ⅳ型胶原酶的一种。相对分子质量为 72× 10 3 ,无糖基形式 ,主要由各种…     

免疫性肝纤维化中肝组织基质金属蛋白酶-1及其抑制因子-1的表达

正常肝脏细胞外基质的合成和溶解维持着动态平衡 ,基质金属蛋白酶 1(ＭＭＰ 1)及金属蛋白酶抑制因子 1(ＴＩＭＰ 1)起着重要的调节作用 ,当二者比例失调时 ,Ⅰ、Ⅲ型胶原降解减少而沉积[1,2 ] ,形成肝纤维化。我们应用ＥＬＩＳＡ方法在大鼠免疫性肝纤维化形成的不同时期同步测定ＭＭＰ 1、ＴＩＭＰ 1的蛋白表达 ,旨在进一步了解二者的动态变化及其作用。一、材料和方法1.主要试剂 :2 0 %人白蛋白 (ＨＳＡ ,ＡｒｍｏｕｒＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉ ｃａｌＣｏｍｐａｎｙ ,ＵＳＡ) ;ＭＭＰ 1及ＴＩＭＰ 1测定 (ＥＬＩＳＡ)试剂盒 (ＴＰＩＩｎＣ…     

大鼠基质金属蛋白酶-1表达质粒对实验性肝纤维化的影响

目的 观察重组基质金属蛋白酶－１真核细胞表达质粒对大鼠肝纤维化的影响。方法 运用ＤＮＡ重组技术,构建融合Ｆｌａｇ标记多肽的大鼠基质金属蛋白酶－１真核细胞表达质粒,经糖化多聚赖氨酸偶联后,利用静脉注射将其导入大鼠肝纤维化模型体内;通过ＲＴ－ＰＣＲ,Ⅰ、Ⅲ型胶原的免疫组化以及Ｍａｓｓｏｎ胶原染色观察重组基质金属蛋白酶－１表达质粒对大鼠肝纤维化的影响。结果 重组基质金属蛋白酶－１表达质粒可在大鼠肝脏中表     

反义金属蛋白酶组织抑制因子—1表达质粒对实验性大鼠肝纤维 …

观察反义金属蛋白酶组织抑制因子－１（ＴＩＭＰ－１）表达质粒对实验性大鼠肝纤维化的影响。方法运用逆转录巢式和重组ＤＮＡ技术,构建大鼠反义ＴＩＭＰ－１真核细胞表达质粒,经脂质体包埋后,利用腹腔注射将其导入免疫性大鼠肝纤维化模型体内;通过ＲＴ－ＰＣＲ,Ⅰ、Ⅲ型胶原的免疫组化及Ｍａｓｓｏｎ胶原染色观察反义ＴＩＭＰ－１表达质粒对大鼠肝纤维化的影响。结果反义原的免疫组化以及     

重型肝炎患者肝组织基质金属蛋白酶-1及其抑制因子-1 mRNA的表达

目的：观察重型肝炎患者基质金属蛋白酶－1（MMP－1）和金属蛋白酶组织抑制因子－1（TIMP－1）mRNA的表达以及胶原蛋白的沉积情况，从胶原降解的角度探讨重型肝炎致肝纤维化的机制。方法：重型肝炎肝组织标本20例，非肝病患者肝组织6例，用原位杂交法检测肝组织MMP－1和TIMP－1 mRNA-1 的表达，并作I、Ⅳ型胶原的免疫组化以及天狼红胶原染色。结果：与对照组比较，重型肝炎组的MMP－1 mRNA和TIMP－1 mRNA表达显著增加，肝组织胶原蛋白总含量和I、Ⅳ型胶原蛋白含量亦显著增加。肝组织胶原蛋白总含量和I、Ⅳ型胶原蛋白含量与MMP－1 mRNA表达无明显相关性，与TIMP－1 mRNA表达呈正相关。结论：重型肝炎患者肝纤维化的发生与金属蛋白酶抑制因子增加、抑制金属蛋白酶的活性、降低间质胶原蛋白的分解有关。     

基质金属蛋白酶及其抑制因子与肝纤维化

基质金属蛋白酶是肝内细胞外基质降解酶的重要酶类肝内ＭＭＰ家族包括ＭＭＰ－１，ＭＭＰ－２，ＭＭＰ－３及其抑制因子ＴＩＭＰ－１，ＴＩＭＰ－２，ＴＩＭＰ－３，ＭＭＰ主要由肝脏间质细胞合成和分泌，ＴＩＭＰ可由肝实质及间质细胞合成和分履，肝纤维化早期时，肝组织间质胶原酶活性较高。纤维化晚期活性下降，而肝纤维化时肝组织中ＴＩＭＰ－１表达增强，慢性肝炎患者血清ＴＩＭＰ－１水平显著增高，并与肝纤维程度呈显著相关。     

Expression of matrix metalloproteinase-2 and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 in hepatic stellate cells during rat hepatic fibrosis and its intervention by IL-10

AIM: To investigate the expression of matrix metallopr-oteinase-2 and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 in hepatic fibrosis and the antifibrogenic role of exogenous interleukin-10 (IL-10). METHODS: Hepatic fibrosis was induced by CCI4 administration and 60 male Sprague-Dawley rats were randomly divided into normal control group (group N, 8 rats), CCI4-induced group (group C, 28 rats) and IL-10-treated group (group I, 24 rats). At the beginning of the 7th and 11th wk, rats in each group were routinely perfused with pronase E and type IV collagenase through portal vein catheter and the suspension was centrifuged by 11% Nycodenz density gradient to isolate hepatic stellate cells (HSCs). RT-PCR was used to analyze mRNA of MMP-2 and TIMP-1 from freshly isolated cells. Densitometric data were standardized with β-actin signals. Immunocytochemistry was performed to detect MMP-2 and TIMP-1 expression in HSC cultured for 72 h. RESULTS: Compared to group N in the 7th wk, MMP-2 and TIMP-1 mRNA increased in group C (P= 0.001/0.001) and group I (P= 0.001/0.009). The level of MMP-2 and TIMP-1 mRNA in group I was significantly lower than that in group C (P= 0.001/0.001). In the 11th wk, MMP-2 mRNA in group I was still lower than that in group C (P = 0.005), but both dropped compared with that in the 7th week (P = 0.001/0.004). TIMP-1 mRNA in group I was still lower than that in group C (P= 0.001), and increased in group C (P= 0.001) while decreased in group I (P = 0.042) compared with that in the 7th wk. Same results were found by immunocytochemistry. CONCLUSION: Expression of MMP-2 and TIMP-1 is increased in hepatic fibrosis. IL-10 exhibits an antifibrogenic effect by suppressing MMP-2 and TIMP-1 expression.     

MMP-1、TIMP-1及其在肝纤维化中的作用

基质金属蛋白酶(MMP)和金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)是细胞外基质(ECM)合成和降解调节中的两个重要的因素。其中MMP-1主要降解细胞外基质的主要成分Ⅰ、Ⅲ型胶原,TIMP-1可抑制MMP-1的活性。肝纤维化时MMP-1活性下降,而TIMP-1活性不断升高。研究显示,二者活性失衡是导致肝纤维化进展的重要因素。它们的来源结构、活性的调节及功能成为目前的研究热点。     

辛伐他汀对兔粥样硬化髂动脉基质金属蛋白酶组织抑制物-1表达的影响

目的　研究辛伐他汀对动脉粥样硬化兔髂动脉基质金属蛋白酶组织抑制物 1(TIMP 1)表达的影响。方法　 18只家兔分为正常对照组 (正常饮食 ,5只 )、基础对照组 (球囊和高脂饮食 ,7只 )和辛伐他汀治疗组 (球囊、高脂饮食和辛伐他汀 ,6只 )。球囊损伤后 4周处死 ,取一侧病变髂动脉做病理切片 ,取另一侧病变髂动脉抽提总RNA和总蛋白 ,分别应用半定量逆转录多聚酶链式反应 (RT PCR)和Western蛋白印迹法 (Westernblot)测定TIMP 1mRNA和蛋白质的表达。结果　辛伐他汀可以显著降低家兔血浆总胆固醇 ,抑制动脉粥样硬化的形成 ;增加动脉粥样硬化兔髂动脉组织TIMP 1的表达 ,正常对照组、基础对照组、辛伐他汀治疗组动脉壁TIMP 1mRNA的相对值分别为 1 5 7± 0 11,2 72± 0 10 ,3 33± 0 2 8,相互间有统计学差异 (P <0 0 5 ) ;正常对照组、基础对照组、辛伐他汀治疗组Westernblot检测结果分别为 2 72± 1 16 ,7 5 1± 1 4 4 ,16 90± 1 4 5 ,相互间有显著性差异 (P <0 0 0 0 1) ;免疫组化观察结果也提示TIMP 1的表达增加。结论　辛伐他汀可以显著增加动脉粥样硬化兔血管组织TIMP 1的表达 ,抑制动脉粥样硬化的形成。     

透明质酸钠对兔骨关节炎软骨和滑膜中MMP-1-3及其组织抑制物mRNA表达的影响

目的观察透明质酸钠(HA)关节腔注射对骨关节炎(OA)模型关节软骨及滑膜中的基质金属蛋白酶(MMP)-1、MMP-3及其组织抑制物(TIMP)-1mRNA表达水平的影响。方法16只大耳白兔行单侧前交叉韧带切断术,术后5周将动物随机分为实验组和对照组,实验组关节腔注射1%HA0.3ml,每周1次,连续5周,对照组则注射等量生理盐水。术后10周观察两组动物股骨内髁关节软骨光镜下的病理改变,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测关节软骨及滑膜中MMP-1、MMP-3及TIMP-1mRNA的表达。结果实验组软骨退变程度较对照组明显减轻,实验组滑膜中MMP-3的mRNA表达水平显著低于对照组(0.40±0.10vs0.62±0.13),而软骨中的MMP-3的表达较对照组差异无显著性,MMP-1和TIMP-1在实验组和对照组软骨及滑膜中的mRNA表达差异无显著性。结论HA能有效地减轻早期OA关节软骨的退变,其对早期OA的治疗作用的机制之一可能是抑制滑膜MMP-3的表达。     

心肌组织基质金属蛋白酶-3及其抑制物-1的表达与心功能损害

目的 探讨心肌组织基质金属蛋白酶－3（MMP－3）及其抑制物－1（TIMP－1）相对含量与心力衰竭（心衰）的关系。方法 采用RT－PCR方法对31例风湿性心脏病（RHD）心衰患者及8例健康人心室肌组织中MMP－3及TIMP－1含量进行半定量分析;RHD患者术前心功能指标采用超声心动图检查。结果 瓣膜病所致心力衰竭（心衰）病人心肌组织呈心肌重型的病理改变;心衰病人心肌组织MMP－3 mRNA表达较正常人增高,且心功能越差,MMP－3相对含量越高;TIMP－1则相反。结论 MMP－3表达含量的增加及TIMP－1表达含量的降低参与心肌重构,是影响心衰患者心功能恢复的重要因素之一。