内质网应激对γ射线照射诱导肿瘤细胞死亡的影响

目的探讨内质网应激反应下肿瘤细胞对辐射敏感性的影响。方法将人宫颈癌HeLa细胞置于^60Co设备行γ射线照射;采用反转录PCR方法检测内质网应激反应标志分子X盒结合蛋白1（XBP1）mRNA剪切;细胞克隆形成试验检测内质网应激反应剂二硫苏糖醇（DTT）作用后对HeLa细胞的生存变化。结果DTT作用后XBP1 mRNA出现剪切;克隆形成试验发现HeLa细胞存活率明显提高。结论在内质网应激反应下,增加肿瘤细胞的辐射抵抗性。     

感染大片形吸虫水牛肝脏的病理变化

目的观察沼泽型水牛感染大片形吸虫(Fasciola gigantica)囊蚴后其肝脏在不同感染阶段的病理变化。方法 29头健康沼泽型水牛分为感染组(24)和对照组(5头),感染组每头一次性经口感染500个大片形吸虫囊蚴,对照组不作任何处理。感染后第3、10、28、42和70天解剖水牛(感染组第42天4头,其余时间点5头;对照组各1头),肉眼观察肝脏的病理变化;采集肝脏组织按常规方法制作组织切片,苏木素-伊红(HE)染色,光学显微镜下观察组织病理结构;Masson三色染色,光学显微镜下观察肝组织中胶原蛋白。结果感染组水牛在感染囊蚴后第3天,肝表面可见散在的灰白色片状病变区域,第10天灰白色片状病变更加明显并出现瘢痕,第28天肝脏表面开始出现化脓性结节,第42和70天化脓性病灶逐渐加重;对照组水牛肝表面光滑,无其他病变。肝组织切片HE染色后结果显示,感染后第3天,肝索结构轻微紊乱和肝细胞发生颗粒变性,第10天局部肝细胞核溶解、破碎,第28天肝小叶内开始出现嗜酸粒细胞浸润和肝小叶内局部出血,第42天肝小叶内大面积出血,第70天肝窦间隙内出现纤维化,肝细胞开始修复;对照组肝组织切片的肝索结构清晰,肝细胞结构正常。肝组织切片Masson三色染色结果显示,感染组水牛第42天在汇管区和肝细胞窦状隙间开始出现少量胶原纤维,第70天胶原纤维逐渐增多;对照组肝窦间隙内有少量的胶原纤维。结论水牛感染大片形吸虫囊蚴后,肝组织出现动态病理损伤,在感染囊蚴后第3天出现早期肝损伤,随后损伤逐步加重并呈现明显的炎性反应,至感染第42天开始出现肝纤维化的典型病理变化。     

60Coγ射线分割照射对宫颈癌细胞周期及相关蛋白的影响

目的 观察不同剂量60Coγ射线分割照射对宫颈癌Hela细胞周期和细胞周期素(cyclin) D1、B1及细胞周期蛋白依赖激酶(CDK)1、4的影响.方法 0、2、4、6 Gy 60Co γ射线分割照射宫颈癌Hela细胞,1次/d,共5 d.用流式细胞术检测细胞周期和凋亡指数,RT-PCR测定cyclin D1、B1及CDK1、4.结果 2、4、6 Gy 60Co γ射线分割照射后各照射组G0/G1和G2/M期细胞数量逐渐增多,细胞凋亡指数随照射剂量增加而增加,与对照组相比,P均<0.05;cyclin D1、CDK1在所有照射组中均不表达,而对照组细胞正常表达;各照射组细胞cyclin B1和CDK4的表达与对照组相比,P均<0.05. 结论 2、4、6 Gy 60Co γ射线分割照射后Hela细胞阻滞在G0/G1、G2/M期,并诱导细胞凋亡,照射后细胞周期相关蛋白表达均受到抑制.     

γ射线控制华支睾吸虫囊蚴感染性的效果

用0－0．20kGy钴－60γ射线对含华支睾吸虫囊蚴的鱼体和从鱼体中分离所得的囊蚴（离体囊蚴）分别进行照射，观察照射囊蚴在宿主（动物）体内发育的能力。囊蚴以灌胃法感染豚鼠或大鼠。用粪检虫卵和尸剖动物检查虫体的生物学方法，判定控制华支睾吸虫囊蚴感染性的最小有效剂量。结果表明，照射离体囊蚴的最小有效剂量为0．05kGy。照射鱼体组织内囊蚴的半数致死量为0．05kGy，最小有效剂量为0．15kGy。我国北方、中部和南方的该虫株囊蚴对钴－60γ射线的敏感性无显著差异，认为用钴－60γ射线0．15kGy剂量可完全控制鱼体中华支睾吸虫囊蚴的感染性，因而辐照技术可作为预防医学中的一种方法。     

用γ-射线照射灭活恶性疟原虫

本文作者试图找出灭活恶性疟原虫而不影响红细胞稳定性所需的γ-射线照射剂量,旨在阻断疟疾流行区输血性疟疾病例的发生。 作者以Palo Alto虫株为实验材料,4个培养皿中,2个含有3％—5％被原虫寄生的RBC,另2个则含无疟原虫的正常RBC作对照进行培养。将每个培养皿的内含物分装在     

大片形吸虫囊蚴的消灭

在日本,牛的片形吸虫病是反刍动物中最重要的寄生虫病。世界许多地方已知这种肝吸虫主要的感染途径是在污染囊蚴的沼泽牧场或泛滥地区动物食草而感染,但在日本,囊蚴常生长在水边的稻干或草上,特别是牛的片形吸虫病是食入带有囊蚴的稻草所致,     

~(60)Coγ射线照射对血管内皮细胞生物学作用的影响

目的观察~(60)Coγ射线照射对血管内皮细胞生物学作用的影响。方法用不同剂量~(60)Coγ射线照射人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC),通过细胞生长曲线和克隆形成实验观察细胞增殖存活情况;流式细胞术检测照射后细胞周期的变化;中性单细胞凝胶电泳及蛋白印迹法(Western blot)观察细胞照射后DNA分子损伤及修复情况。结果 ~(60)Coγ射线照射后,HUVEC细胞生长速度及增殖率降低,降低程度与照射剂量呈正相关;HUVEC细胞周期出现G_2/M期阻滞;HUVEC细胞出现明显的DNA双链断裂,γH2AX和DNA-PKcs表达增加。结论 ~(60)Coγ射线照射抑制血管内皮细胞增殖,导致G_2/M期阻滞,促进DNA断裂,相关修复蛋白表达增加。     

60Coγ射线左半身照射对小鼠非照射区域骨髓造血组织VEGF表达的影响

目的探讨局部电离辐射对小鼠非照射区域骨髓造血组织血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法将6—8周龄雄性昆明小鼠随机分为正常对照组、全身照射组、全身屏蔽照射组以及左半身照射组，用铅屏蔽建立半身照射模型，以8．0Gy^60Coγ射线照射，观察小鼠外周血白细胞和骨髓有核细胞计数，检测血清SOD、MDA变化，用Western blotting和免疫组织化学结合激光共聚焦显微镜观察骨髓造血组织VEGF表达的改变。结果在半身照射条件下，小鼠外周血白细胞降低，未照射侧骨髓有核细胞计数减少，血清MDA升高，SOD降低（与正常对照组比，P〈0．01）；非照射区域骨髓造血组织VEGF表达明显减少，VEGF阳性细胞显著下降（与正常对照组比，P〈0．01）。结论局部电离辐射作用后，可导致非照射区域骨髓造血组织增殖抑制，VEGF表达显著减少，氧自由基激活可能参与了该损伤过程。     

大片形吸虫感染及其分泌排泄产物对小鼠Toll样受体mRNA表达量的影响

目的研究大片形吸虫感染及其分泌排泄产物对小鼠Toll样受体(TLRs) m RNA表达量的影响。方法 40只雌性BALB/c小鼠随机分为感染组和未感染组,每组20只。感染组每鼠经口灌喂大片形吸虫嚢蚴20个,未感染组经口灌喂等体积PBS,分别于感染后1、 4、 7、 14和28 d,每组各取4只小鼠进行剖杀。取小鼠肝脏组织,提取总RNA,逆转录为cDNA, qRT-PCR检测TLR1～9 mRNA的相对表达量。于感染的水牛肝脏中收集大片形吸虫虫体, PBS培养6 h,收集自然活性的大片形吸虫分泌排泄产物(n Fg ESP)。18只雌性BALB/c小鼠随机分为n Fg ESP组和PBS组,每组9只。n Fg ESP组每鼠经腹腔注射1 mg/ml n Fg ESP,对照组注射等量PBS,分别于注射后1、 4、 7 d,每组各取3只小鼠进行剖杀。取小鼠肝脏组织,提取总RNA,逆转录为cDNA, qRT-PCR检测TLR1～9 m RNA的相对表达量。将n Fg ESP溶液95℃热处理15 min,制备热灭活的大片形吸虫分泌排泄产物(hi Fg ESP);分别用含25、50、 100和200μg/ml n Fg ESP或hi Fg ESP的PBS体外刺激小鼠RAW264.7细胞24 h (细胞浓度为2×106个细胞/孔),设2个重复孔, 3次重复实验,以等体积PBS为空白对照;收集各组细胞,提取细胞总RNA,逆转录为cDNA, q RTPCR检测TLR1～9 mRNA的相对表达量。结果大片形吸虫感染小鼠实验结果显示,感染组小鼠7 d后肝脏组织中TLR6和TLR7的mRNA相对表达量分别为2.9±0.3和2.5±0.5,均高于未感染组(1.0±0.2和1.3±0.5)(P 0.01); 14 d后TLR1和TLR9的mRNA相对表达量分别为3.4±0.8和2.8±0.9,均高于未感染组(1.1±0.2和1.1±0.3)(P 0.05或P 0.01); 28 d后TLR1、 TLR8和TLR9的mRNA相对表达量分别为3.8±1.3、 4.2±1.5和3.1±0.9,均高于未感染组(1.0±0.2、 1.2±0.4和1.1±0.3)(P 0.01或P 0.05)。Fg ESP体内免疫小鼠实验结果显示, n Fg ESP注射1 d后,小鼠肝脏组织中TLR1和TLR2的mRNA相对表达量分别为2.5±0.4和1.9±0.4,均高于PBS组(1.0±0.1)(P 0.05或P 0.01)。Fg ESP体外刺激RAW264.7细胞实验结果显示, 100μg/ml n Fg ESP刺激下的TLR1、 TLR3、 TLR7和TLR8的mRNA相对表达量分别为1.6±0.0、 1.4±0.0、 1.6±0.0和1.9±0.0,均高于PBS组(1.0±0.0)(P 0.05或P 0.01); 200μg/ml n Fg ESP和hi Fg ESP刺激下的TLR8 mRNA相对表达量分别为3.4±0.0和4.0±0.5,均高于PBS组(1.0±0.0)(P 0.01); 100μg/ml hi Fg ESP刺激下的TLR2和TLR8的mRNA相对表达量分别为1.5±0.1和2.0±0.0,均高于PBS组(1.0±0.0)(P 0.01); 25μg/ml hi Fg ESP刺激下的TLR3m RNA相对表达量为0.6±0.0,低于PBS组(1.0±0.0)(P 0.01)。结论大片形吸虫可能通过其分泌排泄产物影响小鼠TLR1、 TLR7和TLR8的转录,对宿主免疫应答进行调控。     

γ射线对血管平滑肌细胞增殖的影响

目的 :了解γ射线对血管平滑肌细胞 (SMC)增殖的影响及剂量—效应关系。方法 :在无菌条件下取猪的胸主动脉 ,用组织块贴壁法培养SMC ,取进入指数生长期的猪主动脉SMC分别用 0Gy、3 5Gy、7 0Gy、14 0Gy、2 8 0Gyγ射线照射 ,用3 H标记的胸腺嘧啶核苷 ( 3 H TdR)掺入试验分别在照射后 12h、2 4h、36h、48h测SMC的3 H TdR掺入量 (以每分闪烁计数值表示 ) ,同时观察细胞形态的变化。结果 :不同照射剂量在各时点3 H TdR掺入量均较照射剂量为 0Gy时明显减少 (P <0 0 5 ) ,γ射线对SMC增殖的抑制作用为 7 0Gy及 14 0Gy >3 5Gy ,而 2 8 0Gy抑制作用最强。形态学观察发现各组细胞轮廓明显增强 ,胞浆中可见颗粒状物质 ,14 0Gy照射细胞时出现空泡样变 ,照射剂量 2 8 0Gy可见大量细胞死亡。结论 :γ射线 ( 3 5Gy～ 2 8 0Gy)能明显抑制SMC增殖 ,且抑制作用随剂量增大而增强 ;照射剂量 <14 0Gy时以细胞抑制作用为主 ,照射剂量 2 8 0Gy时以致死效应为主     

γ射线照射对小鼠体内曼氏血吸虫童虫的移行和存活的影响

本文作者用不同照射量的γ射线照射曼氏血吸虫童虫,经肌肉注射感染小鼠,以观察血吸虫童虫在鼠体内的移行和存活的情况。用 T.O.远系繁殖的第6周雄鼠。虫体的回收是用门脉系统灌注法和肺组织内虫体的回收相结合,灌注液用含25单位/毫升肝素的 Hanks 平衡盐溶液。鼠肺内血吸虫童虫的回收,采用把切细的肺组织经孵育3小时和24小时后收集的方法。用组织压片法镜检肝组织内的虫卵,并用 Doenhoff 等(1978) 所描述的方法推算虫卵数。根据卵的孵化力确定卵的活力。成虫用乙酰-明矾胭脂红染色以观察生殖器官。     

肝蛭净对感染肝片吸虫黄牛血清γ—谷氨酰胺转肽酶活性的影响

本文报告了感染肝片吸虫的黄牛经肝蛭净(化学名triclabendazole,商品名Fasinex)治疗后,血清γ-谷氨酰胺转肽酶(γ-Glutanyl transpeptide,简称γ-GT)活性的变化。比较两对照组,肝片吸虫的入侵导致血清γ-GT活性曲线呈明显升高。比较两治疗组,2周龄组的血清γ-GT活性曲线明显升高,而8周龄组的曲线则比较平稳。试验结果提示:肝蛭净治疗8周龄肝片吸虫比治疗2周龄肝片吸虫效果好。各组曲线作函数回归处理,呈现指数函数规律。     

大片形吸虫排泄分泌产物对体外培养LO2人肝细胞的影响

目的初步探讨大片形吸虫排泄分泌产物(FgESP)对体外培养LO2人肝细胞的增殖及对肝细胞损伤相关的生化指标的影响。方法将LO2人肝细胞分为5个密度组(1 000、 3 000、 5 000、 7 000、 10 000个/孔),铺于96孔板中,空白对照组只加入培养基,根据LO2细胞生长曲线选择最适细胞铺板密度。在96孔板中,以最适细胞密度铺板,分为0.02、 0.10、 0.20、 0.40、 1.00 mg/ml FgESP等5组,每组设4个重复,以PBS作为阴性对照组,在培养箱中孵育4、 8、 12、 24、 48和72 h后进行MTT细胞活性检测,测吸光度(A_(490)值)。在24孔板中,分为0.02、 0.10、 0.20、 0.40、 1.00 mg/ml FgESP等5组,每组设3个重复,以PBS作为阴性对照组,分别在培养4、 8、 12、 24、 48和72 h后,收集LO2细胞上清,测定碱性磷酸酶(ALP)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转氨酶(ALT)、白蛋白(ALB)的含量。采用GraphPad Prism 6.0软件进行统计学分析。结果根据LO2人肝细胞生长曲线,筛选出5 000个/孔为96孔板最佳铺板密度。FgESP作用72 h后, MTT细胞活性检测结果显示, 0.02、 0.10、 0.20、 0.40、 1.00 mg/ml FgESP等5组的A_(490)值分别为1.29±0.01、 1.28±0.06、1.13±0.08、 0.97±0.06、 0.25±0.01,均低于对照组(1.45±0.05)(P 0.01)。生化指标检测结果显示, 0.40、1.00 mg/ml FgESP作用细胞LO2人肝72 h后, ALT含量分别为2.00±0.00、 3.67±0.58, AST含量分别为5.33±0.58、7.67±0.58,均高于对照组的(P 0.01);作用48 h后, 1.00 mg/ml FgESP组ALT、 AST含量分别为2.00±0.00、7.00±0.00,高于对照组的0.33±0.58、 3.67±0.58 (P 0.01);在12～72 h内, 0.10、 0.20、 0.40、 1.00 mg/ml FgESP作用后ALP含量升高(P 0.01),而0.02 mg/ml FgESP仅在作用72 h后ALP含量升高(P 0.01);各实验组ALB含量与阴性对照组差异无统计学意义(P 0.05)。结论 FgESP体外作用可抑制LO2人肝细胞增殖能力,且细胞增殖的抑制及损伤程度与FgESP的浓度相关。     

HBV感染对IFN-γ表达的影响

目的探讨HBV感染对干扰素-γ(IFN-γ)表达的影响。方法选择HBeAg阳性的慢性乙型肝炎(CHB)患者30例、HBeAg阴性的CHB患者30例、慢性HBV携带者30例、健康对照者30例,采用巢式PCR检测各组血中HBV DNA水平,Real Time RT-PCR检测外周血单个核细胞(PBMC)中IFN-γmRNA的表达水平。结果 90例慢性HBV感染者PBMC中IFN-γmRNA水平较正常对照组明显下降(P<0.01),其中慢性HBV携带组IFN-γmRNA水平最低,其次为HBeAg阳性组;慢性HBV感染者血清HBV-DNA与PBMC中IFN-γmRNA水平呈负相关(P<0.05)。结论慢性HBV感染者IFN-γ表达水平下降可能与HBV感染有关,HBV感染可引起细胞免疫功能紊乱,可能是HBV感染慢性化的主要原因之一。     

肌肉注射γ射线照射的曼氏血吸虫童虫对鼠体的免疫作用

将刚逸出于扁卷螺的曼氏血吸虫(波多黎各株)尾蚴,浓集成500条/毫升,以不同剂量的钴~(60) 照射,在含有水化乳蛋白、青霉素、链霉素的 Earle 氏液内洗两次,并用针头将其头与尾分离后,在30℃下孵育1小时,搅动后静止3分钟,弃去浮悬的尾部,余下的体部用 Earle 氏液稀释成不同浓度。在经实验证明彼此无差异的 GBA/Lac株、CBA/H-T.株和 NIA 株小鼠体上进行免疫试验,各次均分为下列3组,并设同性别同年龄的小鼠作为对照,组问并作“t”测验.     

藐小棘隙吸虫感染对儿童生长发育影响的研究

为了探讨藐小棘隙吸虫对儿童生长发育的影响，本文将７５例感染藐小棘隙吸虫的小学生随机分为２组，分别用吡喹酮和安慰剂５ｍｇ／ｋｇ顿服，治后５个月进行检查对比。结果吡喹酮和安慰剂组５项测量指标中４项差异均无显著意义（Ｐ＞０．０５），故初步认为藐小棘隙吸虫感染对少年儿童生长发育的影响尚不明显。     

藐小棘隙吸虫感染对儿童生长发育影响的研究

为了探讨藐小棘隙吸虫对儿童生长发育的影响,本文将76例感染藐小棘隙吸虫的小学生随机分为2组,分别用吡喹酮5mg/kg 和等剂量安慰剂顿服,治后5月进行检查对比。结果吡喹酮和安慰剂5项测量指标中4项差异均无显著意义(P<0.05),故可初步认为藐小棘隙吸虫感染对少年儿童生长发育的影响尚不明显。     

藐小棘隙吸虫感染对儿童生长发育影响的研究

为了探讨藐小棘隙吸虫对儿童生长发育的影响，本文将７５例感染藐小棘隙吸虫的小学生随机分为２组，分别用吡喹酮和安慰剂５ｍｇ／ｋｇ顿服，治后５个月进行检查对比。结果吡喹酮和安慰剂组５项测量指标中４项差异均无显著意义，故初步认为藐小棘隙吸虫感染对少年儿童生长发育的影响尚不明显。