BMP2、Noggin和IGF-1对成骨细胞的调节作用

目的 研究骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP2)、noggin、胰岛素样生长因子1(insulin like growth factor 1,IGF-1)对成骨细胞增殖的调节作用.方法 将人成骨肉瘤细胞MG63于RPMI 1640培养基中培养,添加不同浓度的BMP2、noggin、IGF-1蛋白进行药物干预,用四甲基偶氮唑盐(methylthiazolyl-tetrazolium,MTT)法研究成骨细胞的增殖率.结果 各药物干预组OD值与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05),对成骨细胞增殖的作用效应呈剂量和时间依赖性,其作用的最佳时间均在72 h.各药物组内之间比较,确定了最佳作用浓度,BMP2为2×10-9 mol/L,对MG63细胞的增殖率达179.59%;noggin为8×10-9 mol/L,对其增殖的抑制率达到15.51%;IGF-1为1×10-8 mol/L,其增殖率达189.80%.结论 BMP2、IGF-1对MG63细胞增殖有促进作用,而noggin则抑制MG63细胞的增殖.     

胰岛素样生长因子-1和肿瘤坏死因子-α对C2C12骨骼成肌细胞增殖和分化的影响

目的 观察胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)和肿瘤坏死因子-α(TNf-α)对体外培养的C2C12小鼠骨骼成肌细胞增殖、分化的影响.方法 体外培养C2C12小鼠骨骼成肌细胞,分别采用IGF-Ⅰ、TNF-α和IGF-I TNF-α干预细胞,以MTT法、肌酸激酶(CK)活性测定法检测处理后的细胞在增殖、分化方面的变化.结果 IGF-Ⅰ组24,48和72 h增殖程度均高于对照组(P＜0.05),且增殖作用具有时间效应(P＜0.05).IGF-Ⅰ组和TNF-α组CK活性均低于对照组(P＜0.05),但随着时间延长IGF-Ⅰ组CK活性呈升高趋势. 结论 IGF-Ⅰ促进C2C12骨骼成肌细胞的增殖,延迟其分化;TNF-α抑制C2C12骨骼成肌细胞的分化.     

INS、IGF-1和IGFBP-3在子宫内膜癌患者血清中的表达及其临床意义

目的 探讨胰岛素(INS)、胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)和胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)在子宫内膜癌患者血清的表达及临床意义.方法 采用电化学发光法和免疫放射法检测30例子宫内膜癌患者血清INS、IGF-Ⅰ及IGFBP-3的表达水平.结果 子宫内膜癌组胰岛素水平显著升高(158.06±47.82),与对照组( 57.30±33.21)差异有显著性(P＞0.01).而IGF-Ⅰ及IGFBP-3两组间差异无统计学意义(均P＞0.05).子宫内膜癌临床病理各期血清INS、IGF-Ⅰ及IGFBP-3水平比较差异无显著性意义(均P＞0.05).结论 高胰岛素血症与子宫内膜癌发生有关.检测血INS有助于发现子宫内膜癌高危人群,从而有利于早期预防.     

成都地区绝经后骨质疏松与雌二醇、血清胰岛素样生长因子-1的相关性研究

目的 探讨成都地区绝经后骨质疏松与雌二醇(E2)、血清胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的相关性.方法 利用双能X线吸收骨密度仪测量腰椎(L1～L4)、股骨颈和Wards三角的骨密度(bone mineral density,BMD)值,选取141例成都地区的女性绝经后患者,根据BMD值分为3个组,即骨量正常组,骨量减少组和骨质疏松组(OP组).采用全自动免疫分析仪检测E2浓度、用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测IGF-1浓度,并进行相关性分析.结果 OP组各部位BMD测量值和E2、IGF-1水平均低于骨量正常组和骨量减少组(P＜0.05),骨量减少组又低于骨量正常组(P＜0.05);E2、IGF-1水平与BMD测量值呈正相关(P＜0.01),与年龄呈负相关(P＜0.01).结论 在成都地区,血清中E2及IGF-1水平可在绝经后骨质疏松方面提供预警筛查信息.     

人脐血源基质细胞对小鼠淋巴细胞增殖作用的研究

目的 探讨人脐血源基质细胞对小鼠淋巴细胞的增殖作用.方法 将培养的人脐血源基质细胞(hUCBDSCs)与分离的小鼠脾脏淋巴细胞进行混合培养,采用CCK-8检测淋巴细胞增殖,流式细胞仪检查细胞周期.结果 hUCBDSCs组OD值明显高于时照组(P＜0.05),rhIL-2 hUCBDSCs组OD值更高(P＜0.05),而细胞因子作用(hUCBDSCs培养上清液)组与对照组差异无统计学意义(P＞0.05).实验(混合培养)组淋巴细胞S G2/M期明显高于对照(单纯培养)组(P＜0.05).结论 hUCBDSCs具有促进小鼠脾脏淋巴细胞增殖作用.     

体外冲击波联合重组人胰岛素样生长因子Ⅰ对MG63细胞的作用

目的:探讨体外冲击波(extracorporal shockwave,ESW)和重组人胰岛素样生长因子Ⅰ(recombinant human insulin-like growth factor-1,rhIGF-Ⅰ)联合作用对成骨细胞增值及骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)表达的影响。方法:体外培养人成骨肉瘤细胞株(MG63),制备细胞悬液(1×106cells/m l),实验组分别经ESW、rhIGF-Ⅰ、ESW联合rhIGF-Ⅰ处理,对照组不处理,用MTT比色法检测细胞增殖,ELISA法测定细胞培养上清液中的BMP-2含量。结果:24小时后,ESW组和rhIGF-Ⅰ组与对照组相比细胞明显增殖、BMP-2表达增多(P<0.05),两组间48小时后BMP-2分泌量差异具有统计学意义(P<0.05)。两者联合作用后能显著促进MG63细胞表达BMP-2,并持续到48小时后,与各自单独作用相比差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:ESW和rhIGF-1均能促进MG63细胞增殖及自分泌BMP-2;ESW与rhIGF-1联合应用对促进MG63细胞自分泌BMP-2具有协同作用,但是两者联合作用在细胞增殖和活力上协同作用不明显。     

重组人胰岛素样生长因子Ⅰ(rhIGF-Ⅰ)对大鼠成骨细胞增殖和功能的影响

目的观察胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)对体外培养的大鼠成骨细胞的增殖、碱性磷酸酶(ALP)的合成和钙化结节形成的影响.方法不同浓度IGF-Ⅰ分别刺激培养的大鼠成骨细胞,采用噻唑蓝(MTT)法测定细胞增殖能力;采用对硝基酚磷酸盐法测定细胞裂解液中ALP活性;Von Kossa染色测定钙化结节数目.结果一定浓度IGF-Ⅰ能明显增加大鼠成骨细胞数量(P＜0.05),在0.1～100.0 ng/ml这种作用与IGF-Ⅰ的浓度呈正相关;经IGF-Ⅰ刺激,大鼠成骨细胞ALP合成明显高于对照组(P＜0.05);经IGF-Ⅰ刺激,大鼠成骨细胞钙化结节数目明显高于对照组(P＜0.001).结论IGF-Ⅰ能增加体外培养的大鼠成骨细胞数量,促进成骨细胞ALP合成和钙化,提示IGF-Ⅰ可能直接促进骨形成.     

抗生素及bFGF,EGF,rhGH对人体外培养Hacat细胞生物学特性影响

目的观察不同种类不同浓度的创面外用药物对Hacat(human adult skin keratinocyte propagated under low Ca and elevated temperature)细胞生物学特性的影响.方法将Hacat细胞传代,经创面外用药物作用后,倒置显微镜观察其生长变化、流式细胞仪检测其细胞周期、二甲基噻唑二苯基四唑溴盐(MTT)法检测其细胞增殖等的变化.结果细胞形态学观察、二甲基噻唑二苯基四唑溴盐(MTT)吸光度OD值(optical density)、细胞增殖指数[PI=(S G2/M)/(G0/G1 S G2/M)]值的结果与对照组比较结果较一致:庆大霉素组、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)组、丁胺卡那霉素0.021μgml组Hacat细胞变化均不明显(P＞0.05);其余各种剂量抗生素组及表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)组抑制Hacat细胞增值,数目较少,形态不规则,透明度低,细胞内多有颗粒样物质及空泡.OD值、PI值均明显降低(P＜0.05,P＜0.01).其中氯霉素组、丁胺卡那霉素组OD值存在组内差异,低浓度组对细胞增殖抑制作用较中、高浓度低(P＜0.05).重组人生长激素(recombinant human growth hormone,rhGH)组促进Hacat细胞增值,OD值、PI值与对照组比较均增高(P＜0.05),且存在组内差异,高浓度组对细胞增殖促进作用较中、低浓度低(P＜0.05).结论①不同创面外用药物对Hacat细胞生物学特性影响各异.②氯霉素组、丁胺卡那霉素组、rhGH组对Hacat细胞生物学特性的影响存在组内差异.     

长期低氧对骨肉瘤细胞增殖与分化的影响

目的 观察长期低氧对骨肉瘤细胞增殖、分化及骨肉瘤干细胞自我更新能力的影响.方法 采用噻吩蓝(MTT)比色法观察低氧对骨肉瘤细胞系MG63增殖的影响.后续试验分为两组:第1组为低氧处理组,将MG63细胞在低氧环境下培养1周后进行实验;第2组为常氧对照组.应用实时定量聚合酶链反应(real-time PCR)检测两组骨肉瘤细胞的成骨分化基因(Runx2和OC)、胚胎干细胞标志基因Oct3/4、原癌基因c-Myc及低氧诱导因子(HIF)-1a、2a的表达.采用无血清悬浮球培养法观察并比较两组细胞肉瘤球数目和体积的差异.采用免疫组织化学染色法检测两组细胞中HIF-1a和HIF-2a蛋白的表达.结果 培养第6、9天,低氧处理组的光密度(D)值为0.128±0.020、0.700±0.060,分别显著高于常氧对照组的0.073±0.050、0.480±0.120(P值均＜0.05).低氧处理组MG63细胞骨肉瘤球的数目为(24±10.97)个,显著高于常氧对照组的(1 3±3.95)个(P＜0.05);低氧处理组MG63骨肉瘤球的体积显著大于常氧对照组.与常氧对照组比较,低氧处理组细胞的成骨标志基因Runx2和OC均显著下调(P值均＜0.05),胚胎干细胞标志基因Oct3/4和原癌基因c-Myc表达均显著上调(P值均＜0.05),HIF-2α表达显著上调(P＜0.05);免疫组织化学染色检测到MG63细胞中有HIF-1a和HIF-2a蛋白表达.结论 长期低氧可促进骨肉瘤细胞MG63的增殖,抑制其成骨分化,并促进骨肉瘤球的自我更新能力,增强其干细胞特性.HIF-2a蛋白可能在这些过程中发挥关键作用.     

胰岛素样生长因子在胃癌中的表达与意义

目的 探讨胰岛素样生长因子-Ⅰ(insulin-like growth factor-Ⅰ,IGF-Ⅰ)、胰岛素样生长因子-Ⅱ(insulin-like growth factor-Ⅱ,IGF-Ⅱ)在胃癌中的表达及与胃癌浸润转移等生物学行为的关系.方法 对胃癌患者40例的癌组织、距原发灶5cm以上切缘组织和正常胃组织标本10例进行IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ免疫组织化学染色.结果 ①胃癌组织中IGF-Ⅰ的表达率显著高于切缘组织和对照组(P＜0.05);切缘组织和对照组中表达率差异无统计学意义(P＞0.05);病理分期中Ⅰ、Ⅱ期与Ⅲ、Ⅳ期比较差异有统计学意义(P＜0.05);无淋巴结转移组与淋巴结转移组相比差异有统计学意义(P＜0.05);未侵及全层组与侵及全层组相比差异有统计学意义(P＜0.05).②胃癌组织中IGF-Ⅱ的表达率显著高于切缘组织和对照组(P＜0.05).切缘组织和对照组中表达率差异无统计学意义(P＞0.05).病理分期中Ⅰ、Ⅱ期与Ⅲ、Ⅳ期比较差异有统计学意义(P＜0.05);无淋巴结转移组与淋巴结转移组相比差异有统计学意义(P＜0.05);未侵及全层组与侵及全层组相比差异有统计学意义(P＜0.05).结论 IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ的高表达与胃癌的发生有关,且均参与了胃癌的侵袭和转移.