大鼠垂体细胞动力学研究

目的 :研究大鼠垂体细胞的动力学。方法 :应用HE染色、衰老相关 β 半乳糖甘酶组织化学染色、增殖细胞核抗原免疫组织化学方法、末端转移酶dUTP缺口末端标记原位细胞凋亡检测方法研究正常大鼠垂体细胞。结果 :垂体细胞呈现多种方式的无丝分裂像。增殖细胞核抗原阳性细胞、衰老细胞及调亡细胞主要分布于垂体前叶 ,垂体后叶少见。结论 :大鼠垂体存在增殖、衰老和凋亡的细胞动力学过程。     

成年大鼠肾上腺皮质细胞动力学观察

目的：观察成年大鼠肾上腺皮质细胞增生，衰老与凋亡的动力学过程。方法：应用细胞生物学方法。衰老相关-β-半乳糖苷酶组织化学染色，增殖细胞核抗原免疫组织化学方法，末端转移酶dUTP缺口末端标记原位细胞凋亡检测方法观察成年健康大鼠肾上腺组织，结果：成年大鼠肾上腺被膜，皮质球状带，束状带，网状带细胞均呈现多种无丝分裂像；衰老细胞以球状带和网状带较多；肾上腺被膜，球状带和网状带均可见增殖细胞核抗原阳性细胞；肾上腺皮质球状带和网状带均有细胞凋亡，束状带偶见增殖细胞和凋亡细胞。结论：成年大鼠肾上腺皮质球状带，束状带和网状带呈现细胞增殖。生长，衰老和凋亡的细胞动力学过程；从被膜成纤维细胞到肾上腺皮质网状带细胞为一连续的组织动力学演化系。     

正常成人和成体大鼠气管软骨组织动力学观察

目的：观察正常成人和成体大鼠气管软骨的组织动力学。方法：应用细胞生物学方法、衰老相关-β-半乳糖苷酶组织化学染色和增殖细胞核抗原免疫组织化学方法,研究正常成人和正常成体大鼠气管软骨组织动力学。结果：软骨细胞呈现多种方式的无丝分裂像;气管软骨膜与软骨周围带多见细胞增生;气管软骨中央带多见衰老的软骨细胞,并见明显核固缩、核碎裂等细胞凋亡形态学特征。结论：从软骨膜最外层致密结缔组织到成熟软骨组织呈现一个连续的组织演化动力学过程;气管软骨组织适应性再生的细胞来源是软骨膜结缔组织细胞。     

正常成人和成体大鼠气管软骨组织动力学观察

目的：观察正常成人和成体大鼠气管软骨的组织动力学。方法：应用２细胞生物学方法，衰老相关β－半乳糖苷酶组织化学染色物增殖细胞核抗原免疫组织化学方法，研究正常成人和下沉成体大鼠气管罗这。结果：软骨细胞呈现多种方式的无丝分裂像；气管软骨戌罗雷雨我增生；气管软骨中央带见衰老的软骨细胞，并见明显核固缩、核碎裂等细胞凋亡形态学特征。结论．；从软骨膜最外层致密结缔组织到成熟软骨组织呈现一个连续的组织演化动力学过     

大鼠嗅球发育过程中的凋亡与增殖

目的:探讨大鼠嗅球发育过程中细胞凋亡和增殖的变化规律.方法:胚胎14 d,新生1 d (postnatal day, P1),P20及成年大鼠各10只,取嗅球以40 g/L多聚甲醛固定,石蜡包埋,连续切片. 采用TUNEL和免疫荧光染色方法检测大鼠嗅球中凋亡细胞和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)免疫反应阳性细胞的分布. 结果: 在胚胎14 d和P1大鼠嗅球中,凋亡细胞广泛分布而PCNA免疫反应阳性细胞主要分布在室管膜周围区域,凋亡细胞和PCNA免疫反应阳性细胞在P20和成年大鼠嗅球中主要分布在小球层和颗粒细胞层. 嗅球中的凋亡细胞和增殖细胞随龄逐渐减少,差异有显著性意义.结论:大鼠从胚胎到成体嗅球细胞凋亡和增殖逐渐减少.     

肝硬变和肝癌中细胞凋亡与增殖的关系

利用原位ＤＮＡ末端转移酶标记技术和ＳＰ免疫组化方法检测肝硬变和肝细胞癌（ＨＣＣ）组织中凋亡细胞和增殖细胞核抗原。结果显示：ＨＣＣ中凋亡细胞密度显著低于肝硬变，而增殖细胞密度明显高于肝硬变。肝硬变中凋亡细胞主要分布于假小叶周边形成“凋亡细胞带”；在癌组织中呈散在分布。提示：肝硬变“凋亡细胞带”的形成可能与肝血流改变有关；肝硬变癌变过程中可能存在细胞选择性增殖     

Fas和FasL在丙型肝炎肝组织中的表达及意义

目的了解丙型肝炎患者肝细胞损伤与Fas抗原表达的关系。方法采用免疾组织化学方法显示Fas抗原与Fas配体（FasL）在丙型肝炎肝组织的分布，并同时运用原位杂交方法，检测肝组织中的丙型肝炎病毒（HCV）RNA。结果Fas抗原主要位于肝细胞胞浆。Fas抗原表达阳性细胞在肝小叶中多呈散在或灶状分布，汇管区周围和碎屑样坏死区内阳性表达较强。FasL大多位于肝内浸润的淋巴细胞，某些病例肝细胞胞浆也可呈弥漫强阳性。Fas抗原表达的阳性率与肝组织炎症程度相关。结论在丙型肝炎患者，Fas抗原表达水平与炎症活动度有关，未发现（HCV）RNA原位杂交阳性细胞与表达Fas抗原的肝细胞之间的对应关系。     

肝硬变和肝癌中细胞凋亡与增殖的关系

利用原位ＤＮＡ末端转移酶标记技术和ＳＰ免疫组化方法检测肝硬变和肝细胞癌（ＨＣＣ）组织中凋亡细胞和增殖细胞核抗原。结果显示：ＨＣＣ中凋亡细胞密度显著低于肝硬变，而增殖细胞密度明显高于肝硬变。肝硬变中凋亡细胞主要分布于假小叶周边形成“凋亡细胞带”；在癌组织中呈散在分布。提示：肝硬变“凋亡细胞带”的形成可能与肝血流改变有关；肝硬变癌变过程中可能存在细胞选择性增殖。     

D-gal致大鼠急性肝损伤过程中肝卵圆细胞增殖及迁延

目的用D-gal建立大鼠急性肝损伤模型,观察肝损伤后再生过程中肝卵圆细胞的增殖和迁延。方法建立大鼠急性肝损伤模型,于第1、3、7和14天分别取肝组织,分别行病理、免疫组织化学,观察卵圆细胞的分布迁移情况,并取第7天肝组织进行组织电镜观察汇管区新增生细胞超微结构。结果病理切片显示肝细胞变性坏死程度以第7天和第14天为主,出现新增生的细胞。免疫组化示随时间阳性细胞明显增多,分布于汇管区,并向小叶中心迁移,形成大量的胆小管,并有部分向坏死区迁移。透射电镜有新生内源性细胞,小于成熟的肝细胞,细胞器较少,有细胞紧密连接,以数个细胞排列成小胆管,与免疫组化一致。结论在大鼠急性肝损伤时HOC被活化、增殖,并向肝小叶中心迁移,全程参与了肝再生过程。     

肝细胞生长因子对肝纤维化的保护作用及其机制研究

目的 观察肝细胞生长因子(HGF)对实验性肝纤维化大鼠的保护作用及其可能的作用机制.方法 采用CCl4复合因素造模,HE染色观察肝组织形态学变化,赖氏法检测ALT、AST,TUNEL标记法检测肝细胞凋亡百分率,免疫组化方法观察增殖细胞核抗原(PCNA)、bcl-2、bax、Cyt C、caspase-3表达.结果 造模5～8周时,模型组可见肝小叶结构紊乱,纤维组织明显增生,并向肝小叶内延伸分割肝小叶,造模8周可形成假小叶.与模型组比较,HGF治疗组肝细胞变性坏死、炎性细胞浸润及纤维组织增生较轻(P<0.01),ALT、AST水平下降(P<0.05),肝细胞凋亡明显减少(P<0.05),PCNA阳性表达明显增高(P<0.05),bcl-2表达明显增多(P<0.01),同时bax、Cyt C、caspase-3表达显著减少(P<0.05).结论 HGF通过调节线粒体途径抑制肝细胞凋亡、促进肝细胞增殖而发挥对实验性肝纤维化大鼠的保护作用.     

HBV所致终末期肝病患者肝组织胆管增生的免疫组织化学研究

目的在乙型肝炎病毒（HBV）所致的终末期肝病患者肝组织内，常可见大量的胆管增生，但其发生机制及临床意义尚不清楚。为阐明该类患者胆管增生的发生机制及其与卵圆细胞增生及肝细胞再生的关系，我们对8例HBV相关的终末期肝病患者及2例正常人肝组织进行了免疫组化染色及图像分析。方法肝组织连续切片后进行免疫组化染色。观察指标为细胞角蛋白（CK）7、CK8、CK19、OV6、增殖细胞核抗原（PC—NA）、甲胎蛋白（AFP）及白蛋白（ALB）。结果在所有8例惠者肝组织汇管区内均可见典型增生的胆管及非典型增生的胆管，且对CK7、CKB、CK19、OV6及PCNA染色呈阳性反应，但两种类型的胆管在染色强度上存在明显差异。一些非典型增生的胆管细胞表现出肝卵圆细胞的形态学及免疫组化特征。某些小型肝细胞样细胞在形态及免疫组化特征方面介于肝卵圆细胞及成熟肝细胞之间。结论在t-IBV相关的终末期肝病患者肝组织内，胆管增生可能存在不同起源。某些非典型增生的胆管细胞实际上就是活化的肝卵圆细胞。非典型增生的胆管细胞与肝细胞再生密切相关。小型肝细胞样细胞可能是肝卵圆细胞与成熟肝细胞之间的中间过渡细胞。     

慢性迁延性肠传非甲非乙型肝炎肝组织的光镜和电镜观察

本文报告一例病程长达6个月的肠道传播的非甲非乙型肝炎[Enterically Transmitted non-A non-B Hepatitis,简称HNANB(E)]病人肝穿活检标本的光镜和电镜观察结果。光镜下肝细胞大小一致,多呈疏松样变。肝小叶界板完整,小叶内有点状坏死灶。门管区有轻-中度炎性反应。电镜下肝细胞的细胞器变性且减少,多分布在核周和细胞膜下。肝细胞间隙增宽,微绒毛增多。Disse间隙内储脂细胞和胶原纤维增生。肝窦内Kupffer细胞肥大,少量致敏的淋巴细胞穿越窦壁与肝细胞密切接触。本例符合慢性迁延性肝炎(CPH)的病理和超微病理的改变。     

胆汁淤积致肝内胆管上皮细胞间质表型转变的病理学分析

目的 探讨胆汁性肝纤维化时胆管上皮细胞发生间质表型转变的特点.方法 制作胆管结扎所致大鼠肝纤维化模型,利用HE染色、免疫组化和免疫荧光等方法,检测术后1周和2周时肝内胆管细胞的上皮和间质标志物的表达情况.结果 大鼠胆管结扎后胆汁淤积,引起肝内汇管区胆管细胞显著增生以及围胆管成纤维细胞和纤维基质增加.免疫组化结果显示,假手术组和胆管结扎组大鼠胆管细胞均表达上皮细胞标志蛋白CK19,但胆管结扎组肝内胆管细胞也表达间质细胞标志物Vimentin和FSP1/S100A4.胆管结扎1周时,汇管区内新生小胆管呈Vimentin强阳性,2周时增生胆管周围许多细胞也呈Vimentin阳性.但两组大鼠胆管细胞均不表达肌成纤维细胞标志物α-SMA,α-SMA阳性细胞主要分布于汇管区胆管细胞周围.结论 在胆汁性肝纤维化进程中胆管细胞增生并发生一定程度的上皮一间质表型转变,可能促进了肝纤维化的发生.     

巨细胞病毒在慢性乙型肝炎患者肝组织中的表达

目的探讨巨细胞病毒(CMV)在慢性乙型肝炎(CHB)患者肝组织中表达意义。方法采用免疫组化以抗-CMV单克隆抗体对76例CHB患者肝组织进行检测,然后用抗-HBcAg多克隆抗体和抗-CMV单克隆抗体双标记技术在CHB患者同一张肝组织切片上显示两种病毒分布特点。结果轻度和重度慢性肝炎患者CMV检出率无显著差异(P=0.444),而重度CHB患者中CMV表达阳性细胞明显多于轻度患者(P=0.012)。双标记染色显示CMVAg和HBcAg多数表达于肝小叶内同一区域肝细胞甚至同一肝细胞内,也可见于肝小叶中不同部位。结论CHB患者更易重叠CMV感染,并且其感染程度与肝组织的活动性病变密切相关。     

小鼠动情周期和妊娠期子宫内膜中PCNA标记细胞分布及数量的变化

应用免疫组织化学法进行动情周期和妊娠期ＢＤＦ_１雌性小鼠子宫内膜增殖细胞核抗原（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｎｇｃｅｌｌｎｕｃｌｅａｒａｎｔｉｇｅｎ，ＰＣＮＡ）的染色反应。根据对不同时期子宫内膜各部位细胞增殖情况的观察，发现在动情期ＰＣＮＡ标记细胞数量最多，约占子宫内膜细胞总数的２１．８％，并主要分布在子宫表面上皮中，约占表面上皮总数的６０％。动情间期可见ＰＣＮＡ标记细胞的再次轻度增高，约占子宫内膜总数的９．４％，也主要分布在子宫表面上皮中，约占２６％。妊娠期ＰＣＮＡ标记细胞主要以蜕膜上部为多，同时发现妊娠第９ｄＰＣＮＡ标记细胞数量最多，约占细胞总数的１４％。     

Hepatic sinusoidal endothelial cells promote hepatocyte proliferation early after partial hepatectomy in rats

BACKGROUND: We undertook this study in rats to investigate the role of hepatic sinusoidal endothelial cells (SECs) in hepatocyte proliferation early after partial hepatectomy and the regulatory mechanisms involved. METHODS: The animal model of 70% hepatectomy was made. Hepatic SECs and hepatocytes were isolated and cultured according to the method of Braet et al. with some modifications. Levels of nitric oxide (NO), interleukin-6 (IL-6), and hepatic growth factor (HGF) in the supernatants of hepatic SEC cultures were measured, and the expression of HGF mRNA by hepatic SECs was analyzed. The relationship between the supernatants of hepatic SEC cultures and hepatocyte proliferation was probed. (3)H-thymidine incorporation and the proliferating cell nuclear antigen (PCNA) labeling index of hepatocytes were used as signs of hepatocyte proliferation. RESULTS: Levels of NO, IL-6, and HGF in the supernatants of hepatic SECs cultures were increased markedly 6 and 24 h after hepatectomy and then were decreased gradually. The expression of HGF mRNA by cultured SECs was increased markedly 6 and 24 h after hepatectomy, with a peak 6 h after hepatectomy. The PCNA labeling index and (3)H-thymidine incorporation of hepatocytes started to increase 6 h after hepatectomy, with a peak at 24 h. Hepatic SECs were isolated from rats 24 h after partial hepatectomy and cultured for 24 h, and the culture supernatants were obtained. The supernatants not only significantly enhanced the PCNA labeling index and (3)H-thymidine incorporation of proliferating hepatocytes isolated from rats after partial hepatectomy but also obviously increased the DNA synthesis of quiescent hepatocytes from the control rats. The extent of hepatocyte proliferation was closely related to the amount of the SEC culture supernatants added in both rats after partial hepatectomy and control rats. CONCLUSIONS: These results suggest that cytokines (such as IL-6, HGF and NO) secreted by SECs play important roles in liver regeneration early after partial hepatectomy. We speculate that activated hepatic SECs secrete some substances that induce or trigger liver regeneration after partial hepatectomy.     

传代培养PC12细胞的早期细胞分裂过程观察

目的 :观察早期培养的PC12细胞以了解肿瘤细胞演化过程。方法 :RPMI 16 40传代培养的PC12细胞 ,以Giemsa和增殖细胞核抗原免疫组化进行染色观察。结果 :PC12细胞呈现包括全能原生质体、核内多倍体、多核体、核 内质多聚体、合胞体和多细胞裂殖球的一系列演化阶段。结论 :细胞裂殖是早期培养PC12细胞的主要无丝分裂方式。这种肿瘤演化早期的细胞裂殖方式对肿瘤发生具有基础的细胞生物学意义     

血红素氧化酶在门静脉高压大鼠肝脏和小肠中的表达

观察血红素氧化酶（HO）异构酶在门静脉高压组和假手术组大鼠肝脏和小肠中的表达。用免疫组化方法检测HO蛋白在肝脏、小肠和脾脏中的表达。原位杂交方法检测HO－1 mRNA在肝脏中的表达。发现假手术组：HO－2在肝细胞内呈弥漫性表达，在枯否细胞和星状细胞内也有表达，在脾脏红髓的窦内皮细胞和小肠浆膜层、肌层中也呈弥漫性表达，而HO－1仅在肝脏的枯否细胞中表达，肝细胞中无表达，脾脏和小肠中的表达与HO－2表达相同。门静脉高压组：HO－2在肝脏和内脏中表达无明显变化，HO－1在肝脏中弥漫性表达，呈现上调，小肠中的表达也呈现上调。结果表明：在正常时，HO－2蛋白主要由肝细胞产生，门静脉高压时，肝脏HO－1表达上调，其产生的一氧化碳（CO）可能在高动力循环状态下对血管张力起一定的调节作用。