MHV-A59温病湿热小鼠模型的构建与相关指标分析

目的 探讨MHV-A59病毒和湿热因素在炎症反应、水液代谢及免疫功能方面对MHV-A59小鼠肝炎湿热证模型构建的影响.方法 将24只小鼠随机分为4组,根据上述2种因素分别设立健康对照组、病毒组、湿热组和模型组,用FCM法测定小鼠外周血CD4+%、CD8+%水平,血清IFN-γ、IL-4水平用ELISA法检测,小鼠肝脏NF-KB的表达和胃粘膜AQP4的表达用免疫组化法检测,用单因素方差分析进行统计学分析.结果 病毒组与模型组小鼠肝脏NF-KB表达和CD4+/CD8+比值明显高于健康组和湿热组(P＜0.01,P＜0.05);而模型组和湿热组小鼠胃黏膜AQP4表达明显高于健康组(P＜0.01);模型组小鼠IFN-γ//IL-4比值则较健康组升高(P＜0.05).结论 MHV-A59病毒是导致小鼠肝脏NF-KB表达增加及外周血CD4+/CD8+比值升高的主要因素,而湿热因素主要导致小鼠胃黏膜AQP4表达增加;病毒因素和湿热因素的协同作用可引起小鼠血清IFN-γ/IL-4比值的升高.利用MHV-A59病毒和湿热因素可以成功构建符合中医温病湿热证的小鼠模型.     

急性化脓性扁桃体炎证候层次与Th1/Th2漂移相关性研究

目的研究急性化脓性扁桃体炎患者不同证候层次外周血Th1/Th2漂移变化。方法通过流式细胞检测技术,对急性化脓性扁桃体炎患者卫分证、气分证、营分证和正常人外周血Th1/Th2细胞进行检测,采用ELISA法测定血清细胞因子IL-4和IFN-γ水平,并比较IFN-γ/IL-4比值。结果与正常对照组比较,急性化脓性扁桃体炎卫分证组Th1、IFN-γ、Th1/Th2、IFN-γ/IL-4比值显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);气分证组Th1、Th2、IFN-γ、IL-4明显升高,差异有统计学意义(P<0.05~0.01);营分证组Th1、Th2、IFN-γ、IL-4继续明显升高,Th1/Th2比值却明显降低,差异有统计学意义(P<0.05~0.01)。与卫分证组比较,气分证组Th1、Th2、IFN-γ、IL-4显著升高,Th1/Th2、IFN-γ/IL-4比值明显降低,差异有统计学意义(P<0.05~0.01);营分证组Th2、IL-4继续明显升高,Th1/Th2、IFN-γ/IL-4比值明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。与气分证组比较,营分证组Th1、IFN-γ水平、Th1/Th2、IFN-γ/IL-4比值显著降低,Th2、IL-4显著升高,差异有统计学意义(P<0.05~0.01)。结论急性化脓性扁桃体炎卫分证、气分证、营分证证候层次变化与Th1/Th2漂移存在相关性。     

千佛菌对老龄小鼠Th1/Th2漂移的影响

目的 通过研究千佛菌对D-半乳糖致衰老模型小鼠外周血Th1、Th2型细胞因子(IFN-γ、IL-10)水平及IFN-γ/IL-10比值的影响,探讨千佛菌对衰老机体的免疫调节作用.方法 将小鼠随机分为正常对照组、衰老模型组、千佛菌大剂量组、千佛菌小剂量组.除正常组外,其余均腹腔注射D-半乳糖制备衰老模型.千佛菌大、小剂量组分别以100％和50％药液0.4 mL/只/日灌胃,其余等量生理盐水灌胃.测定血清中IFN-γ、IL-10含量并计算IFN-γ/IL-10比值,测定脾脏及胸腺指数.结果 模型组小鼠血清IFN-γ、IFN-γ/IL-10比值、脾脏及胸腺指数均明显降低,IL-10水平显著升高.与正常组比较,差异显著(P＜0.001、P＜0.05);与模型组比较,千佛菌大、小剂量组IFN-γ、脾脏及胸腺指数均明显升高,而IL-10水平明显降低.差异显著(P＜0.001,P ＜0.05),IFNγ/IL-10比值恢复;千佛菌大、小剂量组间IFN-γ、IL-10比较无差异(P＞0.05).结论 千佛菌对D-半乳糖致衰老模型小鼠Th1、型细胞因子IFN-γ水平及IFN-γ/IL-10比值具有升高作用,可使血清中Th2型细胞因子IL-10降低,并能够显著增加小鼠的脾脏及胸腺指数,对D-半乳糖导致衰老的Th1/Th2免疫失衡具有一定的调节作用,能使之趋向恢复正常.     

培本方调节哮喘大鼠Th1/Th2失衡作用的实验研究

目的:研究培本方对哮喘大鼠Th1/Th2失衡的免疫调节作用。方法:采用OVA(卵蛋白)致敏、激发复制大鼠慢性哮喘模型,以阿斯美胶囊为对照药,通过检测血及BALF(支气管肺泡灌洗液)中IFN-γI、L-4I、L-5的含量,探讨培本方对大鼠哮喘模型的影响。结果:模型组较正常组血清和BALF内IL-4、IL-5、IL-4/IFN-γ均显著增高,血清IFN-γ含量无明显改变,BALF内IFN-γ显著降低;各给药组对上述指标有不同程度的影响作用。结论:培本方抗哮喘作用的机制之一为纠正哮喘Th1/Th2失衡。     

理冲汤对子宫肌瘤模型小鼠Th1/Th2 平衡漂移的调控作用研究

目的 研究理冲汤对子宫肌瘤模型小鼠Th1/Th2平衡漂移的调控作用。方法 将24只CB-17 Scid雌性小鼠随机分为4组,正常组、模型组、理冲汤组和阳性药物组,采用异种移植法制备小鼠子宫肌瘤模型,药物干预28天后,采用HE染色来观察各组小鼠子宫平滑肌结构,采用MSD 超敏多因子电化学发光法检测小鼠血清中Th1细胞分泌的IL-2、IFN-γ和Th2细胞分泌的IL-4、IL-5、IL-10的含量水平。结果 HE染色结果显示模型组小鼠子宫平滑肌组织及腺体较之于正常组有明显增生,细胞排列紊乱,而理冲汤组和阳性药物组小鼠子宫平滑肌组织基本正常。MSD检测结果显示与正常组比较,模型组小鼠血清中的IL-2、IFN-γ的浓度显著降低(P＜0.01),而IL-4、IL-5、IL-10的浓度显著升高(P＜0.05,P＜0.01);阳性药物组的IL-4、IL-5、IL-10的浓度也显著升高(P＜0.05,P＜0.01),理冲汤组仅IL-5的浓度较之于正常组显著升高(P＜0.01)。与模型组比较,理冲汤组小鼠血清中的IL-2、IFN-γ均显著升高(P＜0.05,P＜0.01),IL-4、IL-5、IL-10的浓度均显著降低(P＜0.05,P＜0.01);而阳性药物组中的IL-2、IFN-γ均显著升高(P＜0.05,P＜0.01),但IL-4、IL-5、IL-10的浓度变化比较,差异无统计学意义(P＞0.05)。结论 理冲汤通过调控Th1、Th2细胞分泌因子的含量水平,影响免疫逃逸,进而发挥抑制子宫肌瘤的作用。     

三仁汤对脾胃湿热证大鼠血清Th1/Th2细胞因子的影响

摘要：目的探讨三仁汤改善脾胃湿热证大鼠免疫功能的作用机理。方法将50只雄性SPF级SD大鼠随机分为正常对照组、脾
胃湿热模型组、三仁汤（高、中、低剂量）组,观察大鼠体质量、肛温等形态学改变,检测血清γ-干扰素(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)
表达水平,取大鼠胃、十二指肠和结肠组织行病理切片,HE染色观察胃肠道炎症情况。结果与正常对照组比较,模型组大鼠肛
温升高,饮水量和摄食量减少,病理提示胃肠道存在炎症损伤,血清IFN-γ和IL-4显著增高（P<0.01）,IFN-γ/IL-4比值有升高趋势
（P>0.05）。三仁汤高、中、低剂量组对脾胃湿热证大鼠的形态改变有恢复作用;中、低剂量组能降低湿热证大鼠IFN-γ、IL-4水平
（P<0.01）;高剂量组能降低IL-4水平（P<0.01）,有降低IFN-γ水平的趋势（P>0.05）,IFN-γ/IL-4比值反而升高（P<0.05）。结论脾
胃湿热证大鼠细胞免疫和体液免疫均呈亢进状态,Th1/Th2平衡有向Th1反应漂移的趋势,三仁汤能调节脾胃湿热证大鼠的免
疫功能,保护胃肠道粘膜。
     

养血消风饮对慢性变应性接触性皮炎小鼠Th1/Th2免疫平衡失调的影响

目的：利用小鼠耳廓ACD模型进行养血消风饮的药效学研究,从Th1/Th2网络平衡的角度进行其免疫学机制探讨,为研究药物的作用机理提供依据。方法：用二硝基氯苯（DNCB）建立小鼠耳廓慢性ACD模型,随机分为4组：空白组、模型组、中药组、氯雷他定组,对比观察小鼠血清中IFN-γ和IL-4含量,以及小鼠病变耳组织中IFN-γmRNA及IL-4mRNA的表达情况,并进行相关性分析。结果：养血消风饮减少模型小鼠血清中IFN-γ的含量和增加IL-4含量,并能促使小鼠病变耳组织中IFN-γmRNA低表达和IL-4mRNA的高表达。结论：养血消风饮可能在转录水平和分子水平对ACD小鼠的Th1/Th2网络平衡失调起到调节作用。     

儿童斑秃Th1/Th2型细胞因子关系的临床研究

目的:探讨Th1/Th2细胞因子平衡失调在斑秃发病中的作用,以及Th1型细胞功能与斑秃发病的关系.方法:对45例斑秃患儿按其严重程度分为局限性斑秃(Localizef aiopecia areata patients,LAA)活动期组35例,全秃(Alopecia totalis patients,AT)及普秃(Alopecia universalis patients,AU)为一组10例,并以25例健康儿童为正常对照组作为研究对象.用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测在卡介苗多糖核酸(BCG-PSN)治疗前后3个月血清中IFN-γ、IL-12及IL-4、IL-10水平.结果:①斑秃患儿存在Th1/Th2细胞因子平衡紊乱,表现为血清中IFN-γ均明显高于正常组儿童,且AT/AU组明显高于LAA组;IL-12水平在LAA组与正常组儿童无显著差别,但AT/AU组明显高于正常对照组;而IL-4、IL-10水平在LAA组及AT/AU组与正常对照组相比均无显著性差异.②BCG-PSN治疗后可使斑秃患儿血清中IFN-γ水平较治疗前明显下降,同时IL-12水平在LAA组较治疗前也明显下降,但AT/AU组治疗前后无显著差别.而IL-4、IL-10水平治疗前后均无显著性差异.③血清中IFN-γ与IL-12水平成显著正相关.结论:①斑秃的发病与Th1/Th2细胞因子平衡失调有关,表现为Th1型细胞反应亢进,其中可能主要与IFN-γ、IL-12水平有关.②血清IFN-γ、IL-12水平高低可以作为提示斑秃病情严重性的指标.     

蒿芩清胆汤对流感病毒性肺炎湿热证模型小鼠免疫损伤的影响

目的:通过模拟岭南湿热复合因素造模实现流感病毒性肺炎湿热证模型的构建,并观察蒿芩清胆汤对模型小鼠T淋巴细胞亚群及Th1/Th2细胞因子水平的影响。方法:将4周龄BALB/c小鼠按体质量随机分为正常对照组(A)、单纯病毒感染组(B)、湿热证模型组(C)、蒿芩清胆汤组(D)和阳性药物组(E)。A、B两组均给予普通饲料喂养14 d,B组于第11天滴鼻感染病毒1次。C、D、E组均给予高脂饲料喂养14d,同时连续10 d气候箱暴露,6 h/d,第11天滴鼻感染病毒1次,感染病毒后不再置入气候箱。D、E组分别于病毒感染后2 h开始灌胃给药,每日1次,连续4 d。D组每日灌胃蒿芩清胆汤水煎浓缩液0.4 ml;E组按70 mg.kg-1.d-1剂量灌胃给予利巴韦林溶液0.4 ml;其余各组均同时以灌胃等量生理盐水。连续干预14 d后,处死小鼠眼球取血,检测各组小鼠T淋巴细胞亚群及Th1/Th2细胞因子的水平。结果:①与A组相比,B、C组CD3+CD4+T淋巴细胞水平明显降低(P<0.05),CD3+CD8+T淋巴细胞水平明显升高(P<0.05),CD3+CD4+/CD3+CD8+值显著降低(P<0.05);与C组相比,E组CD3+CD8+T淋巴细胞水平明显降低(P<0.01),D、E组CD3+CD4+/CD3+CD8+值明显升高(P<0.05或P<0.01)。②与A组相比,B、C组血清IFN-γ水平明显升高(P<0.01),IFN-γ/IL-4值亦明显升高(P<0.05);与C组相比,E组IFN-γ/IL-4值明显降低(P<0.05)。结论:蒿芩清胆汤对流感病毒性肺炎湿热证模型小鼠具有多靶点的免疫炎症调节作用。     

维药神香草对哮喘大鼠血清白介素-17水平及Th1/Th2平衡的影响

目的 研究维吾尔药神香草对哮喘大鼠血清白介素-17(IL-17)水平及Th1/Th2平衡的影响,阐明神香草治疗哮喘的免疫机理.方法 将大鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组、地塞米松治疗组及神香草水提液高、低剂量治疗组.采用卵清白蛋白(OVA)、氢氧化铝[Al(OH)_3]及百白破疫苗联合致敏和OVA生理盐水雾化激发的方法制备哮喘模型.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测大鼠血清中IL-17、白介素-4(IL-4)及干扰素-γ(IFN-γ)的水平.结果 正常对照组与哮喘模型组、哮喘模型组与治疗组血清IL-17、IL-4及IFN-γ的水平差异均有显著性(P<0.05);神香草高剂量治疗组降低细胞分泌IL-17的作用大于低剂量治疗组(P<0.05);与模型组比较,神香草治疗后哮喘大鼠血清IL-4的水平显著降低(P<0.05),而IFN-γ的水平显著增高(P<0.05).各组大鼠血清IL-4与IFN-γ水平呈密切负相关(r=-0.997),IL-17水平与IL-4和IFN-γ水平呈负相关关系(r=-0.333,-0.509),均P<0.05.结论 神香草可通过抑制IL-17的分泌,纠正Th1/Th2型细胞因子失衡,发挥抗炎作用.     

三仁汤对脾胃湿热证大鼠血清Th1/Th2细胞因子的影响

目的探讨三仁汤改善脾胃湿热证大鼠免疫功能的作用机理。方法将50只雄性SPF级SD大鼠随机分为正常对照组、脾胃湿热模型组、三仁汤(高、中、低剂量)组,观察大鼠体质量、肛温等形态学改变,检测血清Y.干扰素(IFN-y)和白细胞介素-4(IL-4)表达水平,取大鼠胃、十二指肠和结肠组织行病理切片,HE染色观察胃肠道炎症情况。结果与正常对照组比较,模型组大鼠肛温升高,饮水量和摄食量减少,病理提示胃肠道存在炎症损伤,血清IFN-γ和IL-4显著增高(P<0.01),IFN-γ/IL-4比值有升高趋势(P>0.05)。三仁汤高、中、低剂量组对脾胃湿热证大鼠的形态改变有恢复作用;中、低剂量组能降低湿热证大鼠IFN-γ、IL-4水平(P<0.01);高剂量组能降低IL-4水平(P<0.01),有降低IFN-γ水平的趋势(P>0.05),IFN-γ/IL-4比值反而升高(P≮0.05)。结论脾胃湿热证大鼠细胞免疫和体液免疫均呈亢进状态,Th1/Th2平衡有向Th1反应漂移的趋势,三仁汤能调节脾胃湿热证大鼠的免疫功能,保护胃肠道粘膜。     

黄连阿胶汤对失眠大鼠血清Th1/Th2平衡的影响

目的观察黄连阿胶汤对失眠模型大鼠Th1/Th2平衡的影响。方法将36只SD大鼠随机分为3组,PCPA法复制失眠大鼠模型,ELISA法检测大鼠血清IFN-γ、IL-1β、IL-4、IL-10及IFN-γ/IL-4的水平。结果模型组大鼠IFN-γ、IL-1β的水平明显下降（P〈0.01）,IL-4、IL-10的表达则明显升高（P〈0.01）,IFN-γ/IL-4比值降低（P〈0.01）;黄连阿胶汤组IFN-γ、IL-1β的表达有不同程度的升高（P〈0.05,P〈0.01）,IL-4、IL-10的表达降低（P〈0.05）,IFN-γ/IL-4比值升高（P〈0.01）。结论黄连阿胶汤能提高失眠大鼠Th1细胞因子的表达,降低Th2细胞因子的表达,促进Th1/Th2平衡向Th1方向偏移,是其治疗失眠的可能机制之一。     

系统性红斑狼疮合并冠状动脉性心脏病患者Th1／Th2失衡的研究

目的：探讨系统性红斑狼疮（SLE）合并冠状动脉性心脏病（简称冠心病）患者的 Th1／Th2是否存在失衡状况。方法收集 SLE 患者（SLE 组）、SLE 合并冠心病患者（合并组）及健康对照者（对照组）外周血,real-time PCR 法检测外周血 Th1／Th2细胞转录因子 T-bet／GATA-3的表达;流式细胞术检测 Th1／Th2细胞内 IFN-γ及 IL-4水平;酶联免疫吸附法（ELISA）检测患者外周血清中 IFN-γ及 IL-4水平并与对照组比较。结果 SLE 组患者外周血 Th1细胞转录因子 T-bet 表达水平、CD4＋ T 细胞内 IFN-γ分泌水平及血清 IFN-γ水平均明显低于对照组（P＜0．05）。合并组患者外周血 Th1细胞转录因子 T-bet 表达水平、CD4＋ T 细胞内 IFN-γ分泌水平及血清 IFN-γ水平均明显高于 SLE 组患者及对照组（P＜0．05）;合并组患者外周血 Th2细胞转录因子 GATA-3表达水平、CD4＋ T 细胞胞内 IL-4分泌水平及血清 IL-4水平均明显低于 SLE 组患者及对照组（ P ＜0．05）。结论 SLE合并冠心病患者存在 Th1优势活化的 Th1／Th2失衡状态,这种失衡状态可能与疾病的发生发展有关。     

清营解表合剂对流感病毒感染小鼠肺组织不同时相Th1/Th2细胞因子漂移的影响

目的：观察清营解表合剂对流感病毒感染小鼠Th1/Th2免疫平衡的影响。方法：以流感病毒亚洲甲型鼠肺适应株（A/PR/8/H1N1）感染小鼠为模型,采用SABC免疫组织化学法动态观察清营解表合剂干预治疗后肺部Thl型细胞因子γ-干扰素（IFN-γ）和Th2型细胞因子白介素-4（IL-4）的表达水平及IFN-γ/IL-4比值的变化。结果：感染模型组IFN-γ表达第6,9,12天较正常空白组下降。药物干预后,清营解表合剂组IFN-γ表达逐渐升高,第6,9,12天较感染模型组升高差异显著。感染模型组IL-4表达各时间点均高于正常空白组,在第6天达峰值;药物干预后,清营解表合剂组不同时间表达较感染模型组均下降,第6,9天下降显著,有统计学意义。病毒感染后,模型组较正常组IFN-γ/IL-4的比值在各时间点均降低,Th1/Th2平衡向Th2方向飘移;药物干预后,第6,9,12天清营解表合剂组较模型组IFN-γ/IL-4的比值升高有统计学意义,Thl/Th2平衡飘移得到纠正。结论：清营解表合剂可促进流感病毒感染小鼠Thl细胞因子表达,抑制Th2细胞因子的表达而提高免疫功能,调节机体的抗感染免疫平衡。     

本事琥珀散对子宫内膜异位症大鼠Th1/Th2漂移的影响

目的：通过比较本事琥珀散治疗前后子宫内膜异位症（EMs）大鼠模型血清辅助性T淋巴细胞（Th细胞）分泌干扰素-γ（IFN-γ）和白细胞介素-4（IL-4）及其比值的变化,探讨本事琥珀散对EMs Th1/Th2漂移的影响。方法：采用自体内膜移植法建立EMs大鼠模型,随机分为正常组、伪手术组、疾病模型组、本事琥珀散组和达那唑组,给药4周后ELISA法检测血清IFN-γ和IL-4水平,并计算IFN-γ/IL-4比值。结果：与疾病模型组比较,本事琥珀散组IFN-γ/IL-4比值明显降低,差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论：EMs大鼠模型血清Th细胞存在Th2向Th1漂移的现象,对异位内膜的生长具有促进作用。本事琥珀散能够纠正Th1/Th2的漂移,对EMs一定的具有治疗作用。     

血清Th1／Th2及HSP与急性心肌梗死的关系

目的：探讨血清中辅助性T细胞1（Th1）和Th2及热休克蛋白（HSP）与急性心肌梗死（AMI）的关系。方法：选取来我院就诊的急性心肌梗死患者20例,为AMI组;选取同时间不稳定心绞痛（UA）患者20例为UA组和造影正常的心痛患者20例（对照组）作为观察对象,比较3组外周血及冠脉血中Th1／Th2含量及相应的细胞因子γ干扰素（IFN-γ）、白介素-4（IL-4）浓度;比较不同组间血清中HSP及其抗体含量差异。结果：AMI患者外周血中Th1、Th2及IFN-γ含量、Th1／Th2和IFN—γ／IL-4比值均明显高于UA组和对照组,IL-4含量则明显低于UA组和对照组;AMI患者冠脉阻塞段血清中Th1、Th2及IFN-γ、IL-4含量、Th1／Th2和IFN—γ／IL-4比值均明显高于UA组和对照组;与正常对照组比较,UA组外周血和冠脉血中Th1及IFN-γ含量、Th1／Th2和IFN—γ／IL-4比值明显上升,Th2及IL-4明显下降,差异均具有统计学意义（P〈0．05）;AMI患者外周血及冠脉阻塞段血清中HSP60及其抗体含量明显高于UA组和对照组;UA组患者外周血和冠脉血中HSP60及其抗体含量明显高于对照组,差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论：AMI患者发生T细胞亚群偏移现象,主要表现为Th1亢进,HSP60及其抗体表达上升。     

自拟通肺平哮汤对哮喘豚鼠Th1/Th2细胞功能调节作用的影响

目的探讨中药复方通肺平哮汤对哮喘豚鼠气道炎性反应的抑制及对Th1/Th2细胞功能调节作用的影响。方法 40只健康雄性Hartley系豚鼠随机分为空白对照组、病理模型组、地塞米松组、通肺平哮汤组各10只,后3组用卵白蛋白(OVA)致敏,建立哮喘豚鼠模型,然后分别给予蒸馏水(2 ml/只)、地塞米松(0.01 g/kg)、通肺平哮汤(20 g/kg),用药7 d后处死动物,采用流式细胞术分析CD_4~+细胞干扰素-γ(IFN-γ)和白介素-4(IL-4)水平变化。结果与空白对照组比较,病理模型组IFN-γ水平明显降低,IL-4水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与病理模型组比较,地塞米松组、通肺平哮汤组IFN-γ水平明显升高(P<0.05),而IL-4水平无明显差异(P>0.05);地塞米松组与通肺平哮汤组比较差异亦无统计学意义(P>0.05)。病理组织学检查示病理模型组气道壁及肺间质大量嗜酸性粒细胞浸润,平滑肌层增厚,管腔狭窄,地塞米松组及通肺平哮汤组病理改变显著减轻。结论通肺平哮汤可以抑制Th2的活化,使Th1/Th2平衡向Th1偏移从而发挥平喘作用。