荨麻疹患者血清中室尘和螨特异性IgG的Dot-ELISA法测定及临床意义

目的：建立Dot—ELISA法检测荨麻疹患者血清中特异性IgG抗体。方法：采用斑点一酶联免疫吸附试验测定人血清中特异性IgG抗体，并进行特异性，敏感性试验。结果：慢性荨麻疹的抗过敏原的特异性IgG抗体明显高于急性荨麻疹的同类抗体，而且特异性IgG抗体的出现与荨麻疹的严重程度呈反比。结论。该法具有成本低，操作简便，观察结果直接等优点，可进行临床大批量标本的测定。     

两种不同剂型人用狂犬疫苗不良反应与免疫效果评价

目的:评价辽宁成大人用狂犬疫苗(水剂)和辽宁依生人用狂犬疫苗(冻干剂)的不良反应及免疫效果,为人用狂犬疫苗免疫接种提供参考依据。方法:采取随机抽样方法,选取狂犬病暴露后到预防医学门诊注射人用狂犬疫苗人群为对象。将入选对象随机分为A、B两组,分别接种辽宁成大人用狂犬疫苗(水剂)和辽宁依生人用狂犬疫苗(冻干剂),采用随机双盲方法观察接种疫苗后72 h不良反应发生率。使用宁波天润生物有限公司生产的人狂犬病毒IgG抗体测定试剂,采用间接ELISA法,检测人用狂犬疫苗注射后人血清中狂犬病毒IgG抗体。结果:不良反应发生率A组24.03%,B组8.82%,两组不良反应发生率的差异有统计学意义(χ2=8.65 P<0.01);抗体阳转率A组97.5%、B组97.6%,抗体阳转率差异无统计学差异(χ2=0.46 P>0.05)。结论:辽宁成大人用狂犬疫苗(水剂)和辽宁依生人用狂犬疫苗(冻干剂)相比较,辽宁依生人用狂犬疫苗(冻干剂)的不良反应率相对较小,为首选。     

测量不确定度在ELISA检测中的评定和应用

目的：对测量不确定度在ELISA检测中的评定和应用作出探讨,提供一种表示ELISA检测结果质量的方法,并寻找改进ELISA检测质量的途径.方法：分别使用GUM法和自上而下评定法对ELISA检测中的测量不确定度进行评定.结果：应用GUM法举例评定测量不确定度得出：人血浆（清）HIV抗原抗体反应吸光度与cutoff比值（B）=4.335;U=1.3;k=2.应用自上而下评定法举例评定测量不确定度得出：人血浆（清）HCV抗体反应吸光度与cutoff比值=3.747;U=32.8;k=2.结论：ELISA检测引入测量不确定度后,会更科学地判定检测结果,解决了“灰区”设定“难”的问题.通过分析各分量的相对贡献,可有效改进检测工作质量,提升实验室检测水平.通过设立目标不确定度,可严格控制检测结果质量,以达到预期的质量要求.     

酶标SpA免疫酶法检测宫颈癌患者血清中单纯疱疹病毒抗体

许多报告认为单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)感染与宫颈癌的发生有关。应用免疫酶法和免疫荧光法检测 HSV/IgG 抗体已有报道。前者需用荧光显微镜,应用受到限制。免疫酶法检测患者体液中病毒特异性抗体比其它方法简便易行,且敏感性和特异性较好,应用日广。用它检测病毒 IgG 抗体,通常以酶标抗人 IgG(简称酶标抗体)作为第二抗体。本文将辣根过氧化物酶标记葡萄球菌 A 蛋白(简称酶标 SpA)用于免疫酶法     

酶标法检测CA242不确定度的评估分析

目的：探讨临床检验过程中定量酶标法（ELISA）检测CA242的不同影响因素,评估CA242的测量不确定度。方法：参考CNAS-GL06：2006《化学分析中不确定度的评估指南》等测量不确定度指南文件,重复检测低、中、高值3例标本,对本实验室开展的CA242检测评估其测量不确定度。结果：低、中、高值标本测定结果分别为4.482、41.892、102.355 U/ml,其相应的扩展不确定度为0.829、8.066、19.732 U/ml。随着标本浓度的上升,移液器加样引入的不确定度逐渐增加,而标准曲线拟合引入的不确定度则恰好相反。精密度和酶标仪测定OD值引入的不确定度所占比例最小。结论：在临床工作中应严格控制ELISA实验条件,特别是控制反应温度和环境温度,保证加样的准确性和稳定性,以获得准确可靠的结果。     

蝙蝠血清IgG的纯化及兔抗蝙蝠IgG酶标抗体的制备

目的纯化蝙蝠血清IgG,制备兔抗蝙蝠IgG酶标抗体。方法采用亲和层析纯化法纯化蝙蝠血清IgG,SDS-PAGE电泳鉴定蝙蝠IgG纯度。免疫大白兔制备兔抗蝙蝠IgG抗血清,免疫双扩散法测定抗血清效价,亲和层析纯化法纯化抗血清IgG。用改良过碘酸钠标记法制备兔抗蝙蝠IgG酶标抗体,直接ELISA和Western blot法对兔抗蝙蝠IgG酶标抗体进行工作浓度测定。结果纯化的蝙蝠血清IgG,其SDS-PAGE测定纯度大于95%;免疫大白兔所制备的抗血清免疫双扩散效价为1∶64;用改良过碘酸钠标记法制备兔抗蝙蝠IgG酶标抗体,其直接ELISA和Western blot工作浓度分别为1∶12800和大于1∶2000。结论制备了蝙蝠血清IgG的抗血清和酶标抗体,为蝙蝠的血清学检测体系提供了技术和资源储备。     

兔抗金黄地鼠酶标抗体的制备及应用

目的纯化金黄地鼠血清IgG,制备兔抗金黄地鼠酶标抗体(IgG-HRP),开展金黄地鼠仙台病毒的初步检测。方法采用亲和层析纯化法纯化金黄地鼠IgG, 用SDS- PAGE电泳测定IgG纯度并制备兔抗金黄地鼠IgG抗体(second antibody,Ab₂)；用免疫双扩散法检测抗血清效价后,再用亲和层析纯化抗血清IgG(Ab₂)；采用改良过碘酸钠标记法制备兔抗金黄地鼠酶标抗体(rabbit anti-hamster IgG-HRP)；用直接ELISA 和 Western-blot法对兔抗金黄地鼠IgG酶标抗体进行工作浓度测定；应用金黄地鼠酶标抗体对金黄地鼠仙台病毒进行酶免检测(IEA)。结果金黄地鼠血清IgG纯度达95%；兔抗金黄地鼠IgG抗体(Ab₂)免疫双扩散效价为1:64；兔抗金黄地鼠IgG-HRP经直接ELISA 和 Western-Blot测定工作浓度分别为1∶5000和1∶2000；酶免(IEA)效价为1∶2000。 结论高效快速纯化了金黄地鼠IgG,制备了金黄地鼠IgG-HRP,为金黄地鼠病原微生物的血清学检测提供了条件。     

金标渗滤法测定囊虫特异性抗体试剂盒的研制

目的 研制简易、快速、准确的囊虫病诊断试剂盒，并对其诊断价值进行考核评价。方法 以猪囊尾蚴的囊液粗提液为检测用抗原，以胶体金标记的金黄色葡萄球菌蛋白A（SPA）为探针，采用自行设计的渗滤装置制备金标渗滤法（DIGFA）检测试剂盒。检测不同病人血清中囊虫特异性IgG抗体，并以囊虫IgG抗体ELISA检测试剂盒考核其敏感性和特异性。结果 用金标试剂盒检测58人份囊虫病患者血清和100人份健康者血清，其敏感性为98.3％（57/58）；特异性为100％（100/100）。用该试剂盒检测25人份包虫病患者血清，6份呈弱阳性，交叉反应率为24％；检测30人份血吸虫病人血清，10人份肺吸虫病人血清，10人份肠道线虫病人血清，均无交叉反应。与ELISA试剂盒检测结果比较，符合率为98．7％，无显著性差异（χ^2=0．0545，P〉0．05）。结论 金标渗滤法快速检测囊虫特异性抗体试剂盒敏感性高、特异性强，可与ELISA法相媲美，且操作更为简便、快速，结果判读容易，特别适合临床检测和现场查病。     

血清抗-HBcIgG单阳性者HBV DNA含量的分析

乙肝核心抗体(抗-HBc)包括乙肝核心抗体IgM和乙肝核心抗体IgG,常用竞争法检测.HBV感染后多数人血清中能检出此抗体,它是一种敏感的血清学标志,也是乙型肝炎急性感染的早期标志,在血清中存在的时间很长,有些人滴度很高.     

不同方法检测红细胞血型IgG抗体的探讨

目的比较3种方法检测红细胞血型IgG抗体,为确定选用检测该抗体的方法及确定检测该抗体的最佳方案提供依据。方法采用聚凝胺法、抗球蛋白法及蛋白酶法等3种方法,分别检测116人份预处理过的O型血清（其中不含IgM抗-A及IgM抗-B）中的IgG抗A及IgG抗B,分别检测1批IgG抗D及1批IgG抗E效价的积分。结果在116人份预处理过的O型血清中,聚凝胺法、抗球蛋白法及蛋白酶法分别检出74人份、71人份及73人份血清中有IgG抗A,检出率分别为63.79%、61.21%及62.93%,三者比较差异无统计学意义（χ^2=0.172,P〉0.05）,分别检出83人份、81人份及82人份血清中有IgG抗B,检出率分别为71.55%、69.83%及70.69%,三者比较差异无统计学意义（χ^2=0.083,P〉0.05）;聚凝胺法、抗球蛋白法及蛋白酶法分别检出1批IgG抗D效价的积分为46、42、46,分别检出1批IgG抗E效价的积分为32、30、32。结论 3种方法均可用于检测红细胞血型IgG抗体,但采用单一方法检测该抗体,个别样本中的该抗体可被漏检,若采用3种方法联合应用来检测该抗体,则可防止个别样本中的该抗体被漏检,因此,采用3种方法联合应用来检测该抗体,是检测该抗体的最佳方案。     

涿州市1～15岁儿童麻疹、脊髓灰质炎抗体检测结果分析

目的了解涿州市1～15岁儿童麻疹、脊髓灰质炎抗体水平,评价接种质量,为进一步做好免疫规划工作提供科学依据。方法采取随机抽样的方法采集1～15岁健康儿童血标本9 979份,使用ELISA法定量测定人血清中麻疹IgG、脊髓灰质炎IgG抗体水平。结果麻疹、脊髓灰质炎IgG抗体阳性率分别为87.9%和95.6%;不同年龄组儿童麻疹IgG抗体阳性率、脊髓灰质炎IgG抗体阳性率差异有统计学意义（χ2=22.58、χ2=27.23,P〈0.05）;不同性别儿童麻疹IgG抗体阳性率、脊髓灰质炎抗体阳性率差异无统计学意义（χ2=0.95、χ2=0.23,P〉0.05）;城区与乡镇儿童麻疹IgG抗体阳性率、脊髓灰质炎抗体阳性率差异有统计学意义（χ2=58.21、χ2=19.09,P〈0.05）。结论涿州市1～15岁儿童麻疹、脊髓灰质炎抗体水平保持在较高水平,麻疹IgG抗体、脊髓灰质炎抗体阳性率随年龄的增长显著降低,城区儿童麻疹、脊髓灰质炎抗体水平显著高于农村。     

HIV-I抗体阳性检测探讨

<正>我院分担上海市涉外婚姻检查任务,而艾滋病HIV-Ⅰ/Ⅱ抗体测定,又是我科检测的重点。近年来在涉外婚检入群中,发现了6例婚检者及1例外籍船员HIV-Ⅰ抗体呈阳性(均经上海市卫生防疫站鉴定,符合率达100％)。 1.材料与方法 标本来源:涉外婚姻检查外方人员及国际海员,共计15071人次。仪器:上海第三分析仪器厂516MC酶标仪;Clinibio-128型定量酶标仪。试剂:1989～1993年,采用上海生物制品所生产的HIV-Ⅰ抗体酶标试剂和Western Blot确定试剂盒。1993年后采用澳大利亚Agen公司的HIV-Ⅰ/Ⅱ抗体快速血凝试剂盒和华美、阿克苏公司抗HIV-Ⅰ/Ⅱ酶标试剂盒。按操作试剂盒说明书进行操作。     

临床方法学比对试验验证产品等效性研究

目的采用新成生物赛盟自免产品抗双链DNA抗体IgG检测试剂盒(酶联免疫吸附法)与A厂家已批准上市的同类产品针对临床样本进行对比试验研究,验证新成生物赛盟自免产品与已上市产品等效.方法选择B医院2011年9月至2012年2月确诊为系统性红斑狼疮(SLE)患者55例和同期健康体检者59例,用新成生物赛盟自免产品与A厂家产品平行测定,观察其相关性.结果新成生物赛盟自免测定抗双链DNA抗体结果与A厂家测定结果作线性回归分析,相关系数R2=0.9683,相关性良好,两者无显著性差异(P>0.05);同时作Kappa系数检验,Kappa系数=0.921,与A厂家试剂有高度一致性.结论新成生物赛盟自免产品抗双链DNA抗体IgG检测试剂盒(酶联免疫吸附法)与A厂家已批准上市的产品具有等效性,能为临床医生提供可靠准确有价值的诊断指导依据.     

大连地区O型孕妇产前ABO系统IgG抗体效价筛查

目的:检测O型孕妇ABO血型IgG抗体效价.方法:用微柱凝胶法抗人球蛋白试验测定O型孕妇IgG抗体效价.结果:266例O型孕妇总阳性率80.5%(214/266).在O-A组中,其中IgG抗A效价>64者占68.5%(63/92).在O-B组中,IgG抗B效价>64者占65.9%(58/88),在O-AB组中,IgG抗A、抗B效价>64者均占74.4%(32/43),各组均有发生新生儿溶血病的可能.讨论:通过微柱凝胶免疫检测法检测孕妇血清血型抗体IgG效价有助于诊断新生儿溶血病,指导临床干预措施.     

清洁级长爪沙鼠病毒抗体ELISA检测法建立

经纯化长爪沙鼠IgG免疫家兔后获得的血清用辛酸法纯化抗体，电泳可见只有一条蛋白带，制备得酶标二抗工作浓度为1：25600。用间接ELISA对开放系统和屏障系统中长爪沙鼠进行淋巴细照脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)，鼠肝炎病毒(MHV)和仙台病毒抗体的检测，发现其血清病毒抗体阳性率开放系统为6．0%(4/67)，22.4%(15／67)和14．9%(10／67)，屏障系统为1．3%(1／79)，1．3%(1／79)和7．6%(6／79)，如用酶标蛋白A取代酶标抗长爪涉鼠IgG抗体进行检测，则无一份血清阳性，结果表明长爪沙鼠可以自然感染LCMV、MHV和仙台病毒或其抗原相关的病毒，酶标蛋白A不宣作为酶标二抗用手长爪沙鼠抗体的检测。     

心脑血管病患者Ox—LDL测定及其临床意义

采用抗氧化修饰低密度脂蛋白(Ox-LDL)单克隆抗体包被酶标板、酶标多克隆抗体夹心的方法检测Ox-LDL.用∑960酶标仪比色测定其结果.对70例心脑血管病人(冠心病31例、暗血管病39例)与43名健康成人血浆Ox-LDL含量进行比较,结果显示心脑血管病患者明显高于健康成人(均P<0.05).血浆Ox-LDL含量的增高,可间接反映病人动脉粥样硬化的程度.     

末稍血代替静脉血进行狂犬病毒抗体检测的可行性

目的:探讨采集末稍血直接稀释代替静脉血检测狂犬病毒抗体的可行性。方法:采集手指末梢血约40μl,加入0.40ml的灭菌生理盐水中,混匀后分离的上清液当作1∶21稀释血清,同时采集静脉血分离血清,分别采用酶联免疫法(ELISA)进行狂犬病毒抗体的检测。结果:176例接种狂犬疫苗者静脉血法测定狂犬病毒抗体阳性175例,阴性1例;而采用末稍血直接稀释法测定,检出抗体阳性者174例,阴性者2例,两法结果差异无显著性(P>0.05,χ2=0.00),而34例健康体检者两种方法测定狂犬病毒抗体均为阴性。结论:对于静脉采血较困难的婴幼儿及部分成年人,完全可以采集末稍血作狂犬病毒抗体检测。     

西安地区不同年龄人群血清中单纯疱疹病毒Ⅰ型IgG抗体水平的调查

本文报告了用酶标记葡萄球菌A蛋白作ELISA,检测西安地区176份不同年龄人群血清中单纯疱疹病毒I型IgG抗体水平,并抽样用微量中和试验进行了对比。结果表明,母体递给抗体水平在出生后迅速下降,3个月至1岁阶段降至最低。而后随年龄增长,抗体水平逐渐上升。3岁时己普遍受到单纯疱疹病毒I型感染,抗体接近成人水平.此后抗体持续保持在高水平状态,老年组也未见下降。抗体水平与性别无关。本实验结果表明,酶标葡萄球菌A蛋白ELISA法较微量中和试验简便、敏感,二者相关性良好,并可取代传统的中和试验,用于单纯疱疹病毒I型IgG抗体的大规模检测。     

2005年湛江市、韶关市、汕头市人兽弓形虫感染状况调查

目的 了解广东省湛江市、韶关市、汕头市的人兽弓形虫感染情况.方法 收集3个地区人、猪、鼠血清,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)间接法检测弓形虫IgG抗体.结果 湛江市检测猪血清279份,阳性13份,阳性率为4.66%,检测鼠血清93份,阳性7份,阳性率7.53%;韶关市检测人血清42份,阳性0份,检测鼠血清95份,阳性3份,阳性率3.16%;汕头市检测人血清50份,阳性6份,阳性率为12.00%,检测鼠血清100份,阳性3份,阳性率为4.00%.结论 汕头市人群存在弓形虫感染,湛江市、韶关市、汕头市兽类存在弓形虫感染,3个地区的鼠类弓形虫感染率无统计学意义,家鼠、野鼠的弓形虫感染率也无统计学意义.     

惠州市546例接种狂犬病疫苗后患者抗体检测结果分析

目的及时了解和观察本市犬咬伤人群接种狂犬病疫苗后产生（IgG）抗体的免疫效果,为制订科学完善的防患措施提供科学依据。方法抗体检测,使用宁波天润生物药业有限公司生产的人狂犬病毒（IgG）抗体测定试剂盒（酶联免疫法）。结果狂犬病疫苗暴露后人群不同年龄组有差异,随着年龄的增大,接种狂犬疫苗后抗体阳性率呈下降趋势,不同性别的抗体水平无差异。结论全程接种狂犬病疫苗后产生较为良好的免疫效果。