银杏叶提取物对AD模型小鼠海马谷氨酸转运体GLAST表达的影响

目的探讨银杏叶提取物对AD模型小鼠海马谷氨酸转运体GLAST表达的影响。方法采用双侧海马CA1区注射Aβ_(1-42)法测定正常对照组、AD模型组、AD+银杏叶提取物低剂量组(30 mg·kg~(-1)·day~(-1))、中剂量组(60 mg·kg~(-1)·d~(-1))、高剂量组(120 mg·kg~(-1)·d~(-1))动物海马中GLAST的变化。结果经银杏叶提取物处理后,模型组动物存活率增加;小鼠海马组织中Aβ_(1-42)阳性沉积明显减少,且高剂量组减少最为明显;AD模型组GLAST阳性表达明显减少(P0.05);银杏叶提取物处理组小鼠海马区GLAST阳性表达出现增加,银杏叶提取物中剂量组GLAST阳性表达增加最为显著(P0.05)。结论银杏叶提取物具有缓解Aβ诱导神经毒性的作用,对AD模型小鼠海马中谷氨酸转运体GLAST具有调节和保护作用。     

芥子碱硫氰酸盐抑制IR小鼠血脂血糖升高、动脉粥样硬化及肝细胞脂肪变性

目的:探究芥子碱硫氰酸盐(sinapine thiocyanate,ST)抑制胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)小鼠血脂血糖升高、动脉粥样硬化及肝细胞脂肪变性的机制。方法:Apo E~(-/-)雄性小鼠60只随机分成对照组、生理盐水组、罗格列酮组和ST低、中、高剂量治疗组,每组10只。除对照组常规饲料喂养外,其余各组以高脂饲料饲养12周,ST低、中、高剂量组同时给予ST(10、30和90 mg·kg~(-1)·d~(-1))灌胃,罗格列酮组给予罗格列酮(1.33 mg·kg~(-1)·d~(-1))灌胃。最后3周,除对照组腹腔注射生理盐水外,其余各组腹腔注射地塞米松(0.8 mg·kg~(-1)·d~(-1))诱导IR。每周断尾采血检测空腹血糖水平,第12周末禁食12 h后处死动物取样,检测空腹胰岛素、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、甘油三酯、总胆固醇及肝脂质等水平;将肝组织和主动脉固定包埋切片,HE染色。Western blot测定肝脂质代谢与骨骼肌MAPK信号通路相关蛋白表达。结果:ST呈剂量依赖性降低血脂、血糖及TNF-α等代谢相关指标的水平(P0.05),延缓肝细胞脂肪变性和动脉粥样硬化;并呈剂量依赖性调控肝脂质代谢信号通路(HMGR和SREBP-2等)及MAPK信号通路(ERK和p38等)蛋白表达(P0.05)。结论:ST抑制IR模型小鼠血脂血糖升高、动脉粥样硬化及肝细胞脂肪变性的机制可能与调控肝脂质代谢和骨骼肌MAPK信号通路相关蛋白表达有关。     

益母草碱对异丙肾上腺素诱导大鼠心肌纤维化和miR-1表达的影响

目的:探讨益母草碱对异丙肾上腺素(ISO)诱导大鼠心肌纤维化和微小RNA-1(miR-1)表达的影响。方法:取10只SD大鼠作正常对照组;取另80只SD大鼠作为实验鼠,连续2周腹腔注射ISO诱导心肌纤维化动物模型。造模成功后将实验鼠随机分为5组:模型组,益母草碱低(7.5 mg·kg~(-1)·d~(-1))、中(15 mg·kg~(-1)·d~(-1))和高(30 mg·kg~(-1)·d~(-1))剂量组,p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)抑制剂(0.3 mg·kg~(-1)·d~(-1))组。连续给予相应药物腹腔注射2周后,以透射电镜观察左心室肌组织超微结构;Masson染色观察心肌纤维化程度;免疫组织化学法观察I型胶原和III型胶原的表达;酶联免疫吸附法检测左心室肌组织内皮素1(ET-1)和血管紧张素II(Ang II)含量;real-time PCR法检测左心室肌miR-1和ET-1 mRNA的表达水平;Western blot法检测p38 MAPK、β-肌球蛋白重链(β-MHC)及α-肌球蛋白重链(α-MHC)蛋白表达水平。结果:与模型组比较,高剂量益母草碱能明显改善左心室肌超微结构,降低心肌胶原容积分数(CVF)及I型胶原和III型胶原蛋白表达(P0.05),减少左心室肌ET-1和Ang II含量(P0.05),上调miR-1和α-MHC的蛋白表达水平(P0.05),下调ET-1 mRNA及p38MAPK和β-MHC蛋白表达水平(P0.05)。结论:益母草碱可抑制ISO诱导的大鼠心肌纤维化,其机制可能与影响miR-1的表达,抑制ET-1/p38 MAPK信号通路有关。     

合欢皮乙醇提取物通过调控NF-κB通路减轻四氯化碳诱导的小鼠急性肝损伤

目的:研究合欢皮乙醇提取物对急性肝损伤的作用,并对其可能的作用机制进行初步探讨。方法:釆用25%四氯化碳(橄榄油助溶)单次腹腔注射诱导小鼠急性肝损伤模型,筛选合欢皮乙醇提取物抗急性肝损伤的活性部位。通过HE染色观察肝组织形态结构的病理变化,检测肝组织中总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,ELISA检测血清中白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,Western blot检测各组小鼠肝细胞中NF-κB p65、Bcl-2和Bax的蛋白表达水平。结果:与model组比较,合欢皮乙醇提取物正丁醇相低剂量(AB-L,4 mg·kg~(-1)·d~(-1))组和高剂量(AB-H,8 mg·kg~(-1)·d~(-1))组血清中AST水平和ALT水平显著降低。HE染色病理学观察可见肝细胞坏死范围、程度和炎细胞浸润较model组明显减轻。与model组比较,AB-H组和AB-L组小鼠血清中的TNF-α和IL-6水平明显下降,小鼠肝细胞核中NF-κB p65的蛋白表达水平显著降低(P0.05)。与model组比较,AB-H组和AB-L组的肝组织中Bax蛋白表达水平降低,Bcl-2蛋白表达水平升高,Bcl-2/Bax比值升高(P0.05)。结论:合欢皮乙醇提取物正丁醇相可能通过减少NF-κB p65的活化而抑制IL-6和TNF-α炎性细胞因子的过度释放,以及调控Bcl-2和Bax蛋白的表达减轻肝细胞的凋亡,从而发挥对肝脏的保护作用。     

白屈菜红碱对肝纤维化小鼠TGF-β/Smads信号通路的影响

目的:探讨白屈菜红碱对四氯化碳(CCl_4)诱导的肝纤维化损伤小鼠的保护作用及对转化生长因子β(TGF-β)/Smads信号通路的影响。方法:50只C57BL/6N小鼠随机分成正常对照组、模型组及白屈菜红碱低剂量(10 mg·kg~(-1)·d~(-1))、中剂量(20 mg·kg~(-1)·d~(-1))和高剂量(40 mg·kg~(-1)·d~(-1))3个剂量组,每组10只。采用腹腔注射CCl_4和橄榄油混合液8周诱导小鼠肝纤维化模型,白屈菜红碱组于第5周开始灌胃给药。第14周后处死小鼠,观察白屈菜红碱各剂量组干预后小鼠的肝指数,苏木精-伊红染色和苦味酸-酸性品红染色法观察小鼠肝组织的病理改变及肝纤维化的程度;采用分光光度计和酶标仪测定血清中天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、透明质酸(HA)和肝组织中羟脯氨酸(Hyp)的含量;RT-q PCR检测TGF-β1、Smad3、Smad4和Smad7的mRNA表达;Western blot检测TGF-β1、Smad4和Smad7的蛋白表达。结果:与正常对照组比较,模型组肝纤维化的病理改变明显,肝指数、AST、ALT、HA和Hyp均显著升高(P0.05);TGF-β1、Smad3和Smad4的mRNA表达显著上调,Smad7的mRNA表达显著下调(P0.05);TGF-β1和Smad4的蛋白表达显著上调,Smad7的蛋白表达显著下调(P0.05);与模型组比较,白屈菜红碱不同剂量给药组均抑制上述指标的改变(P0.05)。结论:白屈菜红碱能够抑制CCl_4诱导的小鼠肝纤维化,其机制可能与TGF-β/Smads信号通路有关。     

亚甲蓝对百草枯中毒大鼠胸腺T淋巴细胞亚群与氧化应激的影响

目的:研究亚甲蓝(methylene blue,MB)对百草枯(paraquat,PQ)中毒大鼠胸腺T淋巴细胞亚群免疫功能与氧化应激的影响。方法:选取Wistar雄性大鼠40只,随机分为正常组、模型组、MB低剂量(2 mg·kg~(-1)·d~(-1))组和MB高剂量(4 mg·kg~(-1)·d~(-1))组。72 h后HE染色法观察胸腺组织形态,比色法测定各组胸腺组织SOD活性及MDA含量,免疫组化试剂盒检测Bcl-2和Bax和CD4及CD8的表达。结果:MB组胸腺皮、髓质分界清楚,胸腺细胞MDA含量减少,SOD活性增加,抗氧化能力提高,Bcl-2和Bax表达量下调、Bcl-2/Bax的比值增加,CD4阳性表达提高。结论:MB能够改善PQ对胸腺细胞的氧化损伤,调节胸腺T淋巴细胞亚群在皮质和髓质区的分布,从而缓解机体持续性损伤。     

鱼腥草素钠对脊髓损伤后的神经保护作用及其机制初探

目的探究鱼腥草素钠(sodium houttuyfonate,SH)对大鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)早期的神经保护作用及与小胶质/巨噬细胞表型M1型和M2型转化的关系。方法首先,判定SH的最佳药物剂量,40只SD雌性大鼠被随机分为假手术组,实验组(根据给药质量浓度不同分为低(0.06 g·kg~(-1)·d~(-1))、中(0.12 g·kg~(-1)·d~(-1))、高(0.24 g·kg~(-1)·d~(-1))3个剂量组)和模型组。连续灌胃给药7 d,余下各组给予生理盐水对照。BBB评分检测大鼠后肢运动功能;尼氏染色及免疫染色用于观察前角神经元结构和生理功能并计数其数量;综合上述结果判定SH的最佳治疗剂量。其次,为探究其神经保护的可能机制,24只SD雌性大鼠被随机分为假手术组、SH最佳剂量组、模型组,各8只;免疫荧光及Western blot检测各组炎症因子(TNF-α、IL-1β)、P-JNK(phosphorylation c-Jun N-terminal kinase,P-JNK)、JNK、P-ERK(phosphorylation extracellular signal regulated kinase,ERK)、ERK、P-P38MAPK(phosphorylation P38 mitogen-activated protein kinase,P-P38MAPK)以及小胶质/巨噬细胞极化标志物iNOS(M1型)和Argi1(M2型)的表达。结果中、高剂量SH能无差别的改善SCI后大鼠的后肢运动功能,保留SCI处神经元的正常结构和部分生理功能和减少SCI后运动神经元的丢失;综合上述结果判定中剂量(0.12 g·kg~(-1)·d~(-1))为本实验的最佳剂量。与模型组相比,中剂量组中iNOS+细胞数量和蛋白iNOS、TNF-α、IL-1β、P-JNK/JNK、P-ERK/ERK、P-P38MAPK/P38MAPK的表达减少,而Argi+细胞数量和蛋白Argi的表达则增加。结论 SH对SCI大鼠具有一定的神经保护作用,其保护作用可能是通过抑制SCI后MAPK信号通路的激活,促进M1型小胶质/巨噬细胞向M2型转化,减轻其所介导的神经炎症反应。     

青钱柳降糖组方对2型糖尿病大鼠的治疗作用

目的:探讨青钱柳降糖组方(QQL组方)对2型糖尿病模型大鼠的治疗效果。方法:随机抽取10只大鼠作为正常对照组,其余大鼠采用高脂饮食联合链脲霉素诱发2型糖尿病大鼠模型。成模大鼠随机分为中药高(300 mg·kg~(-1)·d~(-1))、中(150 mg·kg~(-1)·d~(-1))、低(75 mg·kg~(-1)·d~(-1))剂量组和模型对照组,每组10只。各给药组每日给予相应药物灌胃,连续6周。观察QQL组方对糖尿病大鼠体重、血糖、血清胰岛素、糖化血红蛋白、抗氧化指标和炎症因子的影响。结果:与模型对照组比较,QQL组方中、高剂量组大鼠的体重增加,血糖下降,血清胰岛素含量升高,糖化血红蛋白含量降低,血糖曲线下面积减少,胰岛组织损伤减轻,血清SOD和GSH增加,MDA、IL-1β和TNF-α水平降低。结论:QQL组方对2型糖尿病大鼠高血糖症状和糖耐受情况有改善作用,对胰岛组织有保护作用,其机制可能与其抗氧化和抗炎作用有关。     

低剂量醋酸棉酚联合十一酸睾丸酮、去氧孕烯和微量炔雌醇可逆抗雄性生育作用

目的:探索低剂量醋酸棉酚(GA)联合十一酸睾丸酮(TU)、去氧孕烯(DSG)和微量炔雌醇(EE)可逆抗雄性生育作用效果和优化组方。方法:成年雄性Wistar大鼠分为联合用药7周+GA组、联合用药7周组、低剂量GA组、高剂量GA组、激素组和对照组。采用交配试验、组织学形态测定分析法、病理学等方法检测服药雄性大鼠生育能力、附睾精子和睾丸的组织学改变。结果:雄性大鼠联合用药7周+GA组服药6周,不育率达100%,大鼠附睾内长形精子数量减少,90%精子头尾断裂、活力丧失;第8周开始停用激素单独以低剂量GA(12.5mg·kg~(-1)·d~(-1))可继续维持抗生育效果17周;停药第8周雄鼠全部恢复生育。结论:口服低剂量GA(15mg·kg~(-1)·d~(-1)为起效剂量,12.5mg·kg~(-1)·d~(-1)为维持剂量)联合TU(100mg·kg~(-1)·d~(-1))、DSG(0.125mg·kg~(-1)·d~(-1))和微量EE(0.025mg·kg~(-1)·d~(-1)),通过严重损伤成熟精子、影响精子形成过程和诱导精子延迟释放发挥避孕效应,抗雄性生育作用起效时间短、效果好、可逆、安全,是优化的低剂量GA联合甾体激素男用避孕药实验用药方案。     

氯沙坦通过激活AMPK抑制LPS诱导的小鼠海马GFAP表达

目的:探讨氯沙坦对脂多糖(LPS)诱导的星形胶质细胞活化标志物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响,以及其机制是否与激活腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)有关。方法:将成年雄性昆明小鼠分为正常对照组、LPS模型组、氯沙坦给药组及氯沙坦与compound C合用组。侧脑室注射相同剂量LPS(24μg/d,每天1次,共2次),以建立中枢神经炎症损伤模型;氯沙坦(0.5、1或5 mg·kg~(-1)·d~(-1))于LPS注射前14 d开始连续每日腹腔注射给药;AMPK抑制剂Compound C(10 mg·kg~(-1)·d~(-1))于LPS注射前2 d开始连续每日腹腔注射给药。在LPS末次注射后的第3天取各组小鼠的海马脑区组织,利用Western blot法检测GFAP、AMPK、p-AMPK、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和p-mTOR的蛋白水平。结果:2次LPS注射后可显著诱导GFAP在海马脑区的表达(P0.01),而氯沙坦可浓度依赖地抑制LPS诱导的GFAP表达,当氯沙坦剂量为5 mg·kg~(-1)·d~(-1)时可显著抑制GFAP表达(P0.05),同时,在该剂量下,氯沙坦显著提高了AMPK的磷酸化水平(P0.01),但对mTOR的磷酸化水平无明显调节作用;而AMPK抑制剂Compound C可显著逆转氯沙坦对GFAP表达及AMPK磷酸化的调节作用(P0.05)。结论:氯沙坦可抑制LPS诱导的海马GFAP表达,该作用可能与其激活AMPK有关,但并不依赖于mTOR信号通路。     

瑞巴派特对阿司匹林诱导的小鼠小肠上皮屏障损伤的修复

目的:探讨瑞巴派特能否通过促进肠道上皮屏障结构和功能的修复改善阿司匹林导致的小肠黏膜损伤。方法:本研究利用BALB/c小鼠,使用阿司匹林(200 mg·kg~(-1)·d~(-1))连续5 d灌胃的方法制作小肠损伤模型,并根据是否诱导小肠损伤及接受瑞巴派特(320 mg·kg~(-1)·d~(-1))的处理将小鼠分为正常对照组、模型组、瑞巴派特对照组及瑞巴派特治疗组。通过透射电镜、免疫组化、qPCR和Western blot等方法,在不同时点系统地观察瑞巴派特对阿司匹林所致的小鼠小肠黏膜损伤模型中小肠黏膜结构及屏障功能蛋白表达的影响。结果:阿司匹林所致的小肠黏膜损伤小鼠,经瑞巴派特(320 mg·kg~(-1)·d~(-1))连续5 d处理后,小肠上皮细胞间紧密连接结构的损害明显减轻,小肠组织中紧密连接蛋白ZO-1及occludin在mRNA及蛋白质水平的表达均明显增加(P0.05),环氧化酶2(COX-2)和增殖相关信号分子β-catenin、c-Myc的表达也高于对照组(P0.05),组织匀浆中前列腺素E_2浓度显著增加(P0.05),而COX-1的表达在治疗组中无明显改变。同时,治疗组血清中的D-乳酸水平明显降低(P0.05)。结论:瑞巴派特能够通过上调COX-2的表达,促进阿司匹林所致的小鼠小肠黏膜损伤的修复,改善肠屏障的结构与功能。     

紫薯花色苷提取物对ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化和高脂血症的作用

目的:研究紫薯花色苷提取物对Apo E-/-小鼠动脉粥样硬化和高脂血症的作用。方法:将8周龄雄性ApoE~(-/-)小鼠随机分为对照组、高脂饮食组、花色苷低剂量组、花色苷高剂量组和立普妥组,共5组(n=10),除对照组小鼠饲喂普通饲料外,其它4组在饲喂高脂饲料8周后,再给予蒸馏水、紫薯花色苷提取物(1. 67 mg·kg~(-1)·d~(-1)和8. 35 mg·kg~(-1)·d~(-1))或立普妥(阿托伐他汀钙,2 mg·kg~(-1)·d~(-1))灌胃8周。心脏取血检测小鼠血清的总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平;油红O和HE染色评估主动脉根部斑块面积和肝脏的脂肪变性程度; RT-q PCR方法检测主动脉和肝脏中炎症因子的表达。结果:与对照组比较,高脂饮食组小鼠血清的TC、LDL-C和HDL-C水平明显升高(P 0. 01),动脉的斑块面积明显增大(P 0. 01),肝脏的脂肪变性明显,白细胞介素1β(IL~(-1)β)、IL-6和单核细胞趋化蛋白1(MCP~(-1))的表达增加(P 0. 01),而过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)的表达降低(P 0. 05);高剂量紫薯花色苷提取物可以明显降低TC、TG和LDL-C水平(P 0. 01),减少动脉的斑块面积(P 0. 01),减轻肝脏的脂肪变性程度,同时还可以降低IL~(-1)β、IL-6和MCP~(-1)的表达(P 0. 05),提高PPAR-α的表达(P 0. 05)。结论:紫薯花色苷提取物可调节血脂,降低炎症细胞因子表达,从而抑制动脉粥样硬化的发展和高脂血症引起的肝组织脂肪变性。     

辛伐他汀对大鼠肾缺血再灌注损伤后心肌Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的:观察辛伐他汀对肾缺血再灌注损伤后心肌组织的影响及其机制。方法:随机将36只大鼠分为假手术组、肾缺血再灌注组和辛伐他汀组,每组12只。后2组用夹闭双侧肾动脉的方法复制肾缺血再灌注损伤模型;辛伐他汀组在造模前给予辛伐他汀(20 mg·kg~(-1)·d~(-1))灌胃,持续2周。用生化检查检测血清肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)、心肌组织丙二醛(MDA)含量及乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性,并用Western blot法检测Bcl-2和Bax的表达水平。结果:与假手术组比,缺血再灌注组SCr、BUN和心肌MDA含量均升高(P0.05),心肌LDH和CK活性增强(P0.05),心肌SOD活性明显下降(P0.05);与缺血再灌注组比较,辛伐他汀组SCr、BUN和心肌MDA的含量降低(P0.05),心肌LDH和CK活性明显减弱(P0.05),而心肌SOD活性增强(P0.05)。与假手术组比较,心肌Bcl-2与Bax的蛋白表达水平在肾缺血再灌注组增多(P0.05);与缺血组相比,Bax表达在辛伐他汀组明显降低,而Bcl-2表达增加(P0.05)。结论:辛伐他汀对肾缺血再灌注后的心肌有保护作用,保护机制可能与辛伐他汀可以消除自由基、升高Bcl-2蛋白表达和降低Bax蛋白表达有一定关系。     

久咳颗粒镇咳、抗炎和祛痰作用实验研究

目的:研究久咳颗粒的镇咳、抗炎和祛痰药理作用。方法:180只ICR小鼠(雌雄各半)根据体重随机分为正常组、模型组、阳性组以及久咳颗粒高(28 g生药·kg~(-1))、中(14 g生药·kg~(-1))、低(7 g生药·kg~(-1))三个剂量组(n=10),预防性给药7d后,分别考察氨水致小鼠咳嗽模型、二甲苯致小鼠耳廓肿胀模型和气管酚红法中各模型动物的咳嗽潜伏期、咳嗽次数、耳肿胀度和酚红排泌量。结果:与正常组比较,模型组小鼠的咳嗽的潜伏期明显缩短(P0.01)、咳嗽次数明显增加(P0.01),耳肿胀度明显增加(P0.01)而酚红排泌量减少(P0.01);与模型组比较,久咳颗粒高中剂量组小鼠的咳嗽的潜伏期明显延长(P0.05)、咳嗽次数明显减少(P0.05)和耳肿胀度降低(P0.05),且久咳颗粒各剂量组酚红排泌量明显增加(P0.05)。结论:久咳颗粒具有显著的镇咳、抗炎和祛痰作用。     

白藜芦醇对糖尿病大鼠血管平滑肌细胞凋亡的影响及其机制研究

目的:探索白藜芦醇对糖尿病大鼠血管平滑肌细胞凋亡的影响及其调控机制。方法:实时定量PCR (qRT-PCR)检测血清中单核细胞趋化蛋白鄄1 (MCP1)、巨噬细胞移动抑制因子(MIF)和白细胞介素18(IL-18)的mRNA 水平;HE 染 色和Masson 染色评价心肌纤维化水平;流式细胞术分析细胞凋亡;蛋白印迹检测Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9、B 淋巴 瘤2 蛋白(Bcl-2)、Bcl-2 相关蛋白X(Bax)、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT 蛋白表达。结果:白藜芦醇可降低STZ 诱导的糖尿病大 鼠血清MCP-1、MIF 和IL-18 的mRNA 水平并改善心肌纤维化加剧。STZ 诱导糖尿病组血管平滑肌细胞凋亡率明显高于对照 组(P<0.05)。与STZ 诱导糖尿病组相比,STZ+白藜芦醇组血管平滑肌细胞凋亡率明显降低(P<0.05)。而且,白藜芦醇可抑 制STZ 诱导的糖尿病大鼠血管平滑肌细胞Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9 和Bax 蛋白表达,提高Bcl-2 表达(P<0.05)。 与对照组相比,STZ 诱导糖尿病组血管平滑肌细胞中p-PI3K/ PI3K 和p-AKT/ AKT 比率明显降低(P<0.05)。STZ+白藜芦醇组 血管平滑肌细胞p-PI3K/ PI3K 和p-AKT/ AKT 比率明显高于STZ 诱导糖尿病组(P<0.05)。结论:白藜芦醇可通过激活PI3K/ AKT 信号通路抑制STZ 诱导的糖尿病大鼠血管平滑肌细胞凋亡。     

二甲双胍联合膈下逐瘀汤对多囊卵巢综合征胰岛素抵抗大鼠TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的:观察二甲双胍(metformin,Met)联合膈下逐瘀汤对经脱氢表雄酮诱导的多囊卵巢综合征(PCOS)胰岛素抵抗大鼠Toll样受体4(Toll-like receptor-4,TLR-4)/核因子κB(nucler factor-κB,NF-κB)信号通路的影响及其作用机制。方法:将110只经脱氢表雄酮诱导造模成功的PCOS大鼠用随机数字表法随机分为3组,分别为模型(model)组(30只)、二甲双胍治疗(Met)组(40只)和二甲双胍联合膈下逐瘀汤治疗(combination)组(40只)。Model组大鼠每天灌胃相同体积的0.9%氯化钠;Met组大鼠每天给予二甲双胍(270 mg·kg~(-1)·d~(-1))灌胃;combination组大鼠每天给予二甲双胍(270 mg·kg~(-1)·d~(-1))+膈下逐瘀汤(34.5 mg·kg~(-1)·d~(-1))灌胃。3组大鼠均连续干预28 d。干预结束后测定血糖[空腹血糖(FPG)和餐后2 h血糖(2h PBG)];用RT-PCR法分别检测3组大鼠卵泡上皮NF-κB、TLR-4及氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)的mRNA表达水平;ELISA检测外周血清炎性因子白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和C反应蛋白(CRP)的浓度。结果:干预结束后Met和combination组大鼠FPG、2h PBG及血清IL-6、TNF-α和CRP浓度均低于model组(P0.05),且combination组大鼠外周血清上述指标均低于Met组(P0.05);干预结束后Met和combination组大鼠卵泡上皮NF-κB、TLR-4和ox-LDL的mRNA水平均低于model组(P0.05),且combination组大鼠卵泡上皮NF-κB、TLR-4和ox-LDL的mRNA水平均低于Met组(P0.05)。结论:在给予二甲双胍的基础上给予膈下逐瘀汤来治疗PCOS胰岛素抵抗大鼠,能通过降低外周血清及卵巢上皮细胞炎性因子表达,以及卵巢上皮组织NF-κB、TLR-4和ox-LDL表达来改善胰岛素抵抗状态。     

孕期染汞对胎鼠脑损伤及S100B蛋白表达的影响

目的研究孕期染汞胎鼠脑组织的损伤情况,探讨S100B在胎鼠脑损伤中的表达及意义。方法建立孕鼠动物模型,将孕鼠随机分为对照组及染汞组(0.8、1.4、2.0mg·kg~(-1)·d~(-1));染汞组于妊娠6-9 d连续灌胃给药,对照组为蒸馏水同期灌胃。妊娠第19天用戊巴比妥钠(40mg/kg)麻醉孕鼠,剖腹取胎。应用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定各组胎鼠脑组织汞含量;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测各组胎鼠脑组织中S100B水平;脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)法检测各组胎鼠脑细胞凋亡情况;蛋白印迹法(Western blot)检测各组胎鼠脑组织bcl-2蛋白表达情况。结果 0.8 mg·kg~(-1)·d~(-1)、1.4 mg·kg~(-1)·d~(-1)及2.0mg·kg~(-1)·d~(-1)浓度的氯化甲基汞组,胎鼠脑组织中S100B蛋白的水平分别为(0.43±0.03)μg·L~(-1)、(0.62±0.03)μg·L~(-1)、(0.64±0.03)μg·L~(-1),呈增加趋势。胎鼠脑组织的汞含量较对照组明显升高(P0.05),S100B蛋白的表达量与对照组比较的差异有统计学意义P0.05);胎鼠的脑细胞凋亡率较对照组也明显升高(P0.05),实验组(染汞组)的bcl-2蛋白表达量较对照组则有明显下降(P0.05)。结论孕期染汞可导致胎鼠脑细胞凋亡增加,脑组织中S100B蛋白水平升高,提示S100B可成为孕期汞暴露胎鼠脑损伤的预测指标。     

靶向TRIM29基因的siRNA通过抑制PI3K/AKT信号通路诱导鼻咽癌细胞凋亡

目的:探讨沉默TRIM29基因表达对鼻咽癌细胞凋亡及PI3K/AKT信号通路的影响。方法:将人鼻咽癌5-8F细胞分为空白组、阴性对照(NC)组(转染阴性对照siRNA)和si-TRIM29组(转染TRIM29的特异性siRNA),通过CCK-8法检测si-TRIM29转染5-8F细胞0～96 h的细胞活力。通过流式细胞术及Western blot分别检测si-TRIM29转染5-8F细胞48 h的细胞凋亡率及TRIM29、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9、Bcl-2、Bax、t-AKT和p-AKT的蛋白水平。10μmol/L的PI3K/AKT信号通路特异性抑制剂LY294002及si-TRIM29单独或联用处理细胞,细胞分为空白组、LY294002组和LY294002+si-TRIM29组,流式细胞术检测3组细胞凋亡率。结果:转染TRIM29 siRNA的5-8F细胞TRIM29蛋白表达明显低于空白组(P0.05)。和空白组比较,si-TRIM29组细胞活力明显降低,凋亡率明显升高,cleaved caspase-3、cleaved caspase-9和Bax蛋白的水平明显升高,Bcl-2和p-AKT蛋白的水平明显降低(P0.05)。LY294002组的细胞凋亡率高于空白组,而LY294002+si-TRIM29组的细胞凋亡率高于LY294002组(P0.05)。结论:沉默TRIM29基因表达可通过抑制PI3K/AKT信号通路诱导鼻咽癌细胞凋亡。     

人参皂苷Rh1对哮喘模型小鼠炎症因子表达的抑制作用

目的:观察和探讨人参皂苷Rh1对哮喘模型小鼠的血清和支气管肺泡冲洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中炎症因子的表达和肺组织形态学变化的影响。方法:雄性BALB/c小鼠40只,分为正常对照组、哮喘模型组、人参皂苷Rh1小剂量(40 mg·kg~(-1)·d~(-1))治疗组和人参皂苷Rh1大剂量(80 mg·kg~(-1)·d~(-1))治疗组,并利用卵清蛋白致敏和雾化吸入激发方法制作哮喘模型;人参皂苷Rh1小剂量治疗组和大剂量治疗组分别在每次激发攻击前30 min灌胃,每天一次,共2周。在末次激发24 h后收集BALF,计数嗜酸性粒细胞(eosinophil,EOS)数目;利用ELISA测定BALF中白细胞介素(IL)-4、IL-5和干扰素γ(IFN-γ)的水平;收集血液并测定血清中Ig G和Ig E的水平;用Western blot检测肺组织中转化生长因子(TGF)-β1蛋白表达的变化;用HE染色观察肺组织的病理学变化。结果:人参皂苷Rh1可抑制小鼠哮喘模型BLAF中EOS数目(P0.01);降低BLAF中IL-4、IL-5和IFN-γ的表达(P0.01);减少血清中Ig E的含量(P0.01);减少肺组织中TGF-β1蛋白表达(P0.01),并改善哮喘小鼠肺组织病理学变化。结论:人参皂苷Rh1对哮喘小鼠具有抑制炎症因子表达、调节免疫反应和改善肺组织病理变化的作用。     

通心络对新西兰兔动脉粥样硬化血小板活化的影响

目的:探讨通心络对动脉粥样硬化新西兰兔血小板的保护作用。方法:SPF级新西兰家兔42只,雌雄各半,随机分为7组:正常组,模型组,通心络超微粉低、中、高剂量组(0.15、0.3和0.6 g·kg~(-1)·d~(-1)),阿托伐他汀组(2.5 mg·kg~(-1)·d~(-1)),阿司匹林组(12.5 mg·kg~(-1)·d~(-1))。正常组给予普通饲料12周,模型组给予高脂饮食12周建立动脉粥样硬化模型,其余各组在给予高脂饲料的同时按剂量连续灌胃给药12周,饮水不限。末次给药后禁食12 h取材。取全血进行血常规检测,取血清、血浆分别进行血脂水平、血小板因子4(PF4)和可溶性CD62P(s CD62P)检测,流式细胞术检测血小板钙离子,电镜观察血小板超微结构,光镜下进行动脉粥样组织病理学观察。结果:与正常组比较,模型组新西兰兔血小板计数及血小板平均体积明显增加,血脂胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平显著增高,血清PF4、sCD62P及血小板钙离子浓度表达明显增加(P0.05)。与模型组相比,各用药组均不同程度地降低血小板计数和血小板平均体积,血小板表达PF4、sCD62P水平及血小板内钙离子浓度明显降低,通心络低、中、高剂量组和阿托伐他汀组降低血清TC、TG和LDL-C水平(P0.05);电镜观察见正常组血小板形态规则,细胞器分布均匀,模型组血小板形态畸形,伪足明显,α颗粒及致密颗粒减少,胞浆内空泡增多,提示血小板活化状态,用药组均不同程度改善血小板形态,增加α颗粒及致密颗粒数量,胞质损伤减轻。组织病理学观察正常组内膜光滑完整,模型组内膜显著增厚,泡沫细胞大量聚集,斑块形成,用药组通心络高剂量组内膜增厚显著降低,泡沫细胞明显减少,斑块形成不明显,其它用药组均不同程度改善内膜增厚,降低泡沫细胞含量。结论:通心络可显著抑制动脉粥样硬化过程中血小板的活化状态,对于延缓动脉粥样硬化血栓形成具有重要临床治疗价值。