n-3多不饱和脂肪酸对糖尿病心肌病小鼠心脏的保护作用

目的:探讨n-3多不饱和脂肪酸(n-3 PUFAs)对糖尿病心肌病(DCM)小鼠心脏的保护作用及调控机制。方法:将6～8周龄雄性野生型(WT)C57BL/6J小鼠和Fat-1(编码n-3脂肪酸脱饱和酶,促n-3 PUFAs合成)转基因(Fat-1~(+/+))小鼠随机分成4组:WT组、Fat-1~(+/+)组、WT+DCM组和Fat-1~(+/+)+DCM组。通过腹腔注射50 mg/kg链脲佐菌素并以45%高脂饲料喂养20周建立DCM模型;对照组则腹腔注射等体积柠檬酸缓冲液并给予普通饲料喂养。造模期间每隔2周测定小鼠血糖及体重,并采用小动物超声仪检测小鼠左心室收缩及舒张功能变化。DCM造模结束后进行口服葡萄糖耐量试验(OGTT),并采用RT-qPCR和Western blot检测心肌凋亡、纤维化及NLRP3炎症小体通路相关分子的mRNA和蛋白水平。结果:DCM造模20周后,WT+DCM组和Fat-1~(+/+)+DCM组小鼠血糖比造模前均显著升高且体重显著降低(P0.05),但Fat-1~(+/+)+DCM组与WT+DCM组相比血糖显著降低,体重显著升高,OGTT曲线下面积显著减少(P0.01)。心脏超声检测结果显示DCM造模20周后WT+DCM组和Fat-1~(+/+)+DCM组小鼠左心室收缩功能(LVEF和LVFS)和舒张功能(E/A和E'/A')与造模前相比均显著降低,但Fat-1~(+/+)+DCM组小鼠左心室收缩和舒张功能较WT+DCM组显著改善(P0.01)。RT-qPCR和Western blot检测结果显示,心肌组织中凋亡执行蛋白caspase-3和促纤维化蛋白TGF-β的表达在DCM造模后均显著升高,但Fat-1~(+/+)+DCM组两者表达均比WT+DCM组显著减少(P0.05)。此外,经DCM造模后心脏组织中NLRP3炎症小体及相关炎症细胞因子(NLRP3、ASC、caspase-1、IL-1β和IL-18)的mRNA和蛋白表达水平较造模前均显著升高,但其在Fat-1~(+/+)+DCM组较WT+DCM组显著降低(P0.05)。结论:n-3 PUFAs对糖尿病小鼠的血糖、体重及左心室收缩和舒张功能均有显著改善作用;其机制可能是通过减少心肌细胞凋亡和纤维化并抑制NLRP3炎症小体及相关炎症因子的转录激活,从而减轻心肌损伤。     

DIZE对糖尿病心肌病大鼠心功能的保护作用

目的:观察研究血管紧张素转换酶2(ACE2)激动剂重氮氨苯脒乙酰甘氨酸盐(DIZE)对糖尿病心肌病(DCM)大鼠心功能的保护作用。方法:30只健康雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、DCM组和DIZE处理组(DIZE组),每组10只。DCM组与DIZE组一次性腹腔注射链脲佐菌素65 mg/kg,建立糖尿病模型,12周后经超声检查选出符合糖尿病心肌病的大鼠模型,分别给予DIZE 15 mg·kg~(-1)·d~(-1)或等体积生理盐水,皮下泵入给药4周处理。第16周末行超声检测心功能后麻醉处死大鼠。通过HE染色和Masson染色观察大鼠心肌组织形态学变化,Wsetern blot、ELISA和免疫组化等方法观察ACE2、血管紧张素(Ang)Ⅱ、Ang-(1-7)、白细胞介素(IL)-1、IL-6和结缔组织生长因子(CTGF)等指标的变化。结果:DIZE显著提高了糖尿病大鼠心肌中ACE2的表达,DIZE组较DCM组心肌组织中胶原含量明显降低,IL-1和IL-6蛋白表达水平明显下降,心功能得到明显改善(P0.05)。结论:ACE2内源性激动剂DIZE显著提高了ACE2的水平,降低了炎症水平,从而对DCM大鼠心功能起到保护作用。     

香叶木素降低NLRP3炎性小体活性缓解CCl_4诱导的肝损伤大鼠肝纤维化

目的:探索香叶木素(Diosmetin,DM)对CCl_4诱导的肝损伤大鼠肝纤维化的影响及其分子机制。方法:通过CCl_4处理建立肝损伤模型。大鼠随机分为4组:对照组; DM (20 mg/kg)组; CCl_4组; CCl_4+DM (20 mg/kg)组。苏木素-伊红(HE)染色观察肝脏组织病变。免疫组化染色检测细胞增殖核抗原-67(Ki-67)表达。脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)染色分析细胞凋亡。Masson三色染色观察肝纤维化。蛋白印迹检测含pyrin结构域NOD样受体家族3(NLRP3)和凋亡相关微粒蛋白(ASC),Caspase 1和白细胞介素(IL)-1β表达。结果:香叶木素可改善CCl_4诱导的肝损伤大鼠肝脏组织细胞排列不规则,充血,细胞质空泡化,肝细胞坏死等病理变化。与对照组相比,CCl_4组细胞增殖降低,细胞凋亡增加(P0. 05)。与CCl_4组相比,CCl_4+DM组细胞增殖上升,细胞凋亡下降(P0. 05)。而且,香叶木素可缓解CCl_4诱导的肝损伤大鼠肝纤维化。另外,CCl_4组NLRP3、ASC、Caspase 1和IL-1β的表达高于对照组(P0. 05)。CCl_4+DM组NLRP3、ASC、Caspase 1和IL-1β的表达低于CCl_4组(P0. 05)。结论:香叶木素可通过降低NLRP3炎性小体活性减轻CCl_4诱导的肝损伤大鼠肝纤维化。     

低温等离子体对胫骨骨折大鼠骨折愈合的作用及机制

目的 探究低温等离子体对胫骨骨折大鼠骨折愈合的作用及可能机制。方法 30只SD大鼠分为假手术组、模型组和低温等离子体照射组，每组10只。HE染色检测大鼠骨折处病理形态改变；ELISA检测大鼠血清ALP水平及骨组织IL-1β和IL-18水平；qRT-PCR和Western blot检测大鼠骨组织成骨相关基因RUNX2、OCN和COL1A1 mRNA和蛋白表达水平；Western blot检测大鼠骨组织NLRP3炎症小体相关蛋白NLRP3、cleaved-caspase1和GSDMD表达水平。结果 低温等离子体照射促进胫骨骨折大鼠骨折愈合，增加大鼠血清ALP水平及骨组织成骨相关基因RUNX2、OCN和COL1A1 mRNA和蛋白表达水平，降低大鼠骨组织IL-1β和IL-18水平及NLRP3炎症小体相关蛋白NLRP3、cleaved-caspase1和GSDMD表达水平。结论 低温等离子体照射通过抑制NLRP3炎症小体激活促进胫骨骨折大鼠骨折愈合。     

胰岛素处理促进糖尿病大鼠肾皮质骨形成蛋白和激活蛋白膜结合抑制物(BAMBI)表达并抑制炎症反应

目的研究胰岛素控制糖尿病(DM)大鼠血糖后, DM大鼠肾皮质骨形成蛋白和激活蛋白膜结合抑制物(BAMBI)、含pyrin结构域NOD样受体家族3(NLRP3)、凋亡相关的斑点样蛋白2(ASC-2)、胱天蛋白酶1(caspase-1)及炎性介质和相关纤维化指标的表达情况。方法 SD大鼠随机分为正常对照组、 DM组及胰岛素处理组。链脲佐菌素(STZ)复制DM大鼠模型,每组8只, DM成模4周后,胰岛素处理组予以皮下注射胰岛素[8 U/(kg·次)],每天3次,连续注射6周后处死大鼠。免疫组织化学染色检测肾皮质BAMBI、 NLRP3、上皮钙黏素(E-cadherin)的表达, Western blot法检测肾皮质BAMBI、 NLRP3、 ASC-2、 caspase-1、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤连蛋白(FN)、Ⅳ型胶原蛋白(Col4)蛋白的表达,实时定量PCR检测肾皮质中BAMBI、 NLRP3的mRNA水平, ELISA检测肾皮质中白细胞介素1β(IL-1β)、 IL-18的水平。采用Spearman秩相关检验对BAMBI和NLRP3蛋白表达进行相关性分析。结果与正常对照组相比, DM组肾皮质NLRP3的mRNA和蛋白水平及ASC-2、 caspase-1的蛋白水平升高,α-SMA、 FN、 Col4蛋白表达也升高,而BAMBI的mRNA和蛋白水平及E-cadherin的蛋白表达降低,胰岛素处理组NLRP3的蛋白和mRNA水平及ASC-2、 caspase-1的蛋白水平低于DM组,α-SMA、 FN、 Col4蛋白表达也低于DM组,而BAMBI的mRNA和蛋白水平及E-cadherin的蛋白表达高于DM组;胰岛素处理组IL-1β、 IL-18的水平较DM组降低,相关性分析显示在DM组以及胰岛素处理组中BAMBI和NLRP3的表达呈负相关。结论胰岛素处理可恢复DM大鼠肾皮质中BAMBI的表达,进而抑制NLRP3炎性体激活,减轻DM大鼠肾脏的炎症反应,阻止或延缓糖尿病肾病的病程进展。     

长托宁抑制NLRP3炎症小体调节脑缺血再灌注大鼠小胶质细胞极化改善脑损伤

目的 探究长托宁对大鼠脑缺血再灌注致脑损伤的保护作用及可能的机制。方法 30只SD大鼠随机分成假手术组、模型组及长托宁组,每组10只。水迷宫实验检测大鼠认知能力变化;HE染色观察脑组织形态学变化;TUNEL方法检测脑组织神经元细胞凋亡;免疫荧光检测脑组织小胶质细胞极化;ELISA方法检测脑组织炎症因子水平;Western blot检测NLRP3炎症小体相关蛋白表达。结果 长托宁治疗增加脑缺血再灌注损伤大鼠认知能力,改善大鼠脑组织形态,降低脑组织神经元细胞凋亡水平、M2型小胶质细胞比例、IL-1β和IL-18水平及NLRP3、caspase-1和ASC蛋白表达水平,增加脑组织M1型小胶质细胞比例。结论 长托宁减轻大鼠脑缺血再灌注脑损伤,其作用机制可能与抑制NLRP3炎症小体有关。     

艾灸抑制NLRP3/Caspase-1通路介导的细胞焦亡减轻脑缺血再灌注损伤

背景：研究发现,艾灸能抑制脑缺血/再灌注损伤大鼠血清中的炎症因子,对抗氧化应激,抑制细胞凋亡,有效减轻脑缺血/再灌注损伤。目的：观察艾灸干预不同时间后脑缺血/再灌注损伤模型大鼠核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)炎性小体、半胱氨酸天冬氨酸酶1(cysteine aspartase,caspase-1)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、消皮素D(GSDMD)及白细胞介素1β、白细胞介素18表达的变化,并探讨其作用机制。方法：SD大鼠随机分为假手术组9只和造模组36只,造模组制备大脑中动脉栓塞大鼠模型。造模成功后将造模组大鼠进一步分为模型组、艾灸10 min组、艾灸15 min组、艾灸30 min组,每组9只。艾灸10 min、15 min和30 min组大鼠分别给予艾灸悬灸“百会、大椎、足三里”穴,均干预1次/d,共干预7 d。采用LONGA法评估大鼠神经功能缺损情况,TTC法观察脑组织梗死情况,苏木精-伊红染色观察脑组织病理改变,ELISA法检测...     

全氟辛烷磺酸通过NLRP3炎症小体诱导幼年期大鼠肺损伤及格列本脲干预的研究

目的:探讨含NLRP3家族Pyrin域蛋白3(NLRP3)炎症小体参与全氟辛烷磺酸(PFOS)诱导幼年期大鼠肺损伤的可能机制。方法:28只21日龄SD大鼠随机分为对照(C)组、PFOS(P)组、格列本脲(G)组和格列本脲+PFOS(GP)组。将实验动物根据不同分组建立PFOS暴露模型和格列本脲保护模型,留取肺标本进行HE染色,ELISA法检测肺组织中髓过氧化物酶(MPO)含量以及支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素1β(IL-1β)和IL-18含量,高效液相色谱法(HPLC)检测血清中PFOS浓度,Western blot法检测肺组织中NLRP3、caspase-1和含CARD凋亡相关斑点样蛋白(ASC)的蛋白水平。结果:肺组织病理切片HE染色结果显示,与C组相比,P组的气管及肺泡间质可见明显炎症浸润;格列本脲可使炎症反应显著减轻。ELISA结果显示,P组肺组织中MPO含量较C组显著升高(P<0.05),P组BALF中的IL-1β和IL-18含量较C组也明显升高(P<0.05);GP组肺组织MPD含量及BALF中IL-1β和IL-18含量均较P组降低(P<0.05...     

阿托伐他汀联合丙泊酚治疗能够抑制NLRP3炎症小体缓解大鼠心肌缺血再灌注损伤

目的 探讨阿托伐他汀与丙泊酚联合治疗在大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用机制及其与NLRP3炎症小体之间的关系。方法 构建心肌细胞缺血再灌注模型;将大鼠随机分为假手术组（Sham）、模型组（MIRI）、阿托伐他汀组（Atorvastatin）、丙泊酚组（Propofol）和阿托伐他汀与丙泊酚联合组（Atorvastatin+Propofol）。应用TTC染色法检测各组大鼠心肌损伤面积;应用TUNEL染色法检测心肌细胞的凋亡情况;免疫荧光法检测ROS的表达水平;ELISA法检测心肌细胞中TNF-α、IL-6、IL-1β和IL-18的表达情况;应用Western blot法检测NLRP3、Caspase-1、IL-1β及GSDMD-N的变化。结果 与模型组相比,阿托伐他汀和丙泊酚联合治疗组中大鼠的心肌梗死面积降低显著降低（P<0.05）;心肌细胞的凋亡率显著降低（P<0.05）;ROS的水平显著下降（P<0.05）;TNF-α、IL-6、IL-1β和IL-18的表达明显下降（P<0.05）以及NLRP3、Caspase-1、IL-1β及GSDMD-N等蛋白的水平显著降低（P<0.05）。结论 阿托伐他汀与丙泊酚联合治疗能够降低心肌细胞的凋亡、氧化应激反应和炎症反应,其机制与下调NLRP3炎症小体及其相关的蛋白表达有关。     

排毒保肾丸对糖尿病肾病大鼠炎症小体NLRP3表达及NF-κB信号通路的影响北大核心CSCD

目的:探究排毒保肾丸对糖尿病肾病(DKD)大鼠炎症小体核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)表达及核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的影响。方法:48只大鼠随机分为4组:对照组、模型组、排毒保肾丸组、阳性对照组(氯沙坦组)。模型组、排毒保肾丸组和氯沙坦组建立DKD大鼠模型,饲以高脂高糖饲料并腹腔注射小剂量链脲佐菌素(STZ)。排毒保肾丸组、氯沙坦组分别灌胃排毒保肾丸、氯沙坦,对照组、模型组灌胃给予等量生理盐水,连续8周。8周后测定尿蛋白、血肌酸酐、血尿素氮含量,处死大鼠并留取肾脏组织。ELISA检测血清IL-6、IL-1β及TNF-α含量;HE染色观察肾脏组织形态学改变;Masson染色观察肾脏组织纤维化改变;免疫组化染色及Western blot检测NLRP3、NF-κB p65、天冬氨酸特异性蛋白酶1(Caspase-1)蛋白表达。结果:与对照组相比,模型组大鼠肾脏组织损伤严重,尿蛋白、血肌酐、尿素氮含量、炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α含量、NLRP3、NF-κB p65、Caspase-1蛋白表达显著增加(均P<0.05);与模型组相比,排毒保肾丸组和氯沙坦组肾脏组织损伤减轻,尿蛋白、血肌酐、尿素氮含量、炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α含量、NLRP3、NF-κB p65、Caspase-1蛋白表达显著减少(均P<0.05)。结论:排毒保肾丸能够有效改善DKD损伤,抑制机体炎症反应,可能通过抑制炎症小体NLRP3表达和NF-κB信号通路发挥保护作用。     

长托宁介导NLRP3炎性小体调控IKKβ/IKKα/NF-κB通路抑制脊髓损伤大鼠细胞焦亡

目的 探索长托宁对脊髓损伤大鼠细胞焦亡的影响及可能机制。方法 SD大鼠随机分为假手术组（Sham组）、脊髓损伤模型组（Allen’s法建立SCI大鼠模型）和长托宁治疗组（PHC组,腹腔注射长托宁2mg/kg,连续给药14 d）。各组大鼠进行运动功能（BBB）评分;HE、尼氏染色观察脊髓病理学变化;ELISA检测IL-1β、TNF-α、IL-6和IL-18的含量变化;TUNEL检测脊髓细胞凋亡;Western blot方法检测NLRP3、procaspase1、pro-IL1β、IKKβ、IKKα、P-IKKβ、P-IKKα、NF-κB的表达水平。结果 长托宁减轻SCI大鼠脊髓损伤,抑制炎症反应,抑制IL-1β、TNF-α、IL-6和IL-18释放,抑制细胞凋亡,下调炎症小体相关蛋白表达水平,降低NLRP3、pro-caspase1、pro-IL1β表达水平,抑制IKKβ/IKKα/NF-κB信号通路活性。结论 长托宁减轻SCI大鼠炎症反应,抑制NLRP3炎性小体,与调控IKKβ/IKKα/NF-κB通路有关。     

3-硝基酪氨酸与糖尿病心肌病大鼠心肌细胞凋亡的关系研究

目的：探讨2型糖尿病大鼠心肌组织及血中3-硝基酪氨酸（3-NT）与糖尿病心肌病（DCM）心肌细胞凋亡的关系。方法：选取8周龄雄性SD大鼠60只,将其随机分为4组,空白对照组、DCM组、糖尿病+缬沙坦处理组和DCM+缬沙坦处理组,每组15只。用TUNEL法检测DCM心肌细胞的凋亡指数（AI）;用免疫组化的方法检测心肌组织中3-NT的表达指数（EI）;用ELISA法检测血清中3-NT的浓度。结果：(1) 4组大鼠的心脏重量指数有显著差异（P<0.01）,DCM组和DCM+缬沙坦处理组心脏重量指数大于空白对照组和糖尿病+缬沙坦处理组。(2) 心肌组织免疫组化方法检测表明,心肌组织中3-NT的EI与心肌细胞的AI呈正相关（P<0.01）,而血中3-NT的含量与心肌细胞的AI无相关关系（P>0.05）。(3) 4组大鼠间的AI比较有显著差异（P<0.01）。两两比较各组AI,DCM组 > 糖尿病+缬沙坦预处理组、DCM+缬沙坦处理组 > 空白对照组。(4) 4组大鼠心肌组织3-NT表达指数比较有显著差异（P<0.01）;两两比较,DCM组显著大于其它3组。(5) 4组大鼠血中3-NT的浓度比较无显著差异（P>0.05）。结论：(1) DCM大鼠心肌组织中3-NT的表达显著增多并与心肌细胞凋亡密切相关,缬沙坦能够抑制DCM大鼠心肌细胞中3-NT的表达,并由此抑制DCM大鼠心肌细胞凋亡。(2) 循环血中的3-NT水平不能真实反映DCM大鼠心肌组织中3-NT表达水平及其对心肌细胞凋亡的影响。     

大鼠急性心肌梗死后NLRP3炎性体-IL-1β信号轴激活与End-MT的关系

目的:研究在急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)引发的心肌纤维化过程中,NLRP3炎性体-IL-1β信号轴的激活与内皮-间充质转化(endothelial-mesenchymal transition,End-MT)是否存在同一性。方法:30只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组(n=15)与AMI组(n=15),术后28 d采用Masson染色检测心肌纤维化水平;Western blot检测NLRP3炎性体(NLRP3、ASC、pro-caspase-1和caspase-1)、内皮细胞标志物(CD31和VE-cadherin)及间充质细胞标志物(α-SMA和FSP1)的表达;酶联免疫吸附法检测NLRP3炎性体下游因子IL-1β的表达。结果:与假手术组相比,冠脉结扎组AMI大鼠心肌纤维化水平、End-MT进展程度、NLRP3炎性体活性及caspase-1和IL-1β的表达均显著增加(P0.05)。结论:NLRP3炎性体-IL-1β信号轴的激活与End-MT进程具有显著同一性,提示NLRP3炎性体-IL-1β作为激活End-MT的潜在靶点将为研究AMI后心肌纤维化及心力衰竭提供新的理论依据。     

右美托咪定通过Akt/m TOR自噬通路介导NLRP3炎症小体失活而减轻脓毒症大鼠肠损伤

目的:探讨右美托咪定(DEX)是否通过蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)自噬通路介导核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体失活从而减轻脓毒症大鼠肠损伤。方法:随机数字法对50只大鼠分组:假手术组、模型组、DEX组(0、3和6 h腹腔注射10μg/kg DEX)、DEX+NVP-BEZ235组(在DEX组基础上腹腔注射30 mg/kg NVP-BEZ235)及DEX+3-甲基腺嘌呤(3-MA)组(在DEX组基础上腹腔注射15 mg/kg 3-MA),每组10只。除假手术组外,其余各组盲肠结扎穿孔术(CLP)建立脓毒症大鼠模型,建模后给药。HE染色观察肠道组织形态,对结肠标本进行结肠大体形态损伤指数(CMDI)评分;ELISA检测血清中白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;免疫组化检测肠道组织中自噬相关蛋白beclin-1和LC3-II蛋白水平;Western blot检测肠道组织中Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR、NLRP3、含caspase募集结构域的凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、caspase-1及其前体pro-caspase-1的蛋白水平。结果:模型组大鼠肠道组织完整性被破坏,细胞脱落和炎症浸润现象明显;DEX组大鼠肠道组织完整,仅出现部分细胞脱落和炎症浸润现象;DEX+NVP-BEZ235组和DEX+3-MA组大鼠肠道完整性被破坏,细胞脱落和炎症浸润明显。与假手术组相比,模型组大鼠CMDI评分,血清中IL-1β和TNF-α水平,肠道组织中beclin-1和LC3-II蛋白阳性率,p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR、NLRP3、ASC和caspase-1/pro-caspase-1蛋白水平升高(P0.05);与模型组相比,DEX组大鼠CMDI评分,血清中IL-1β和TNF-α水平,肠道组织中NLRP3、ASC和caspase-1/pro-caspase-1蛋白水平降低(P0.05),肠道组织中beclin-1和LC3-II蛋白阳性率及p-Akt/Akt和pmTOR/mTOR蛋白水平升高(P0.05);与DEX组相比,DEX+NVP-BEZ235组和DEX+3-MA组血清中IL-1β和TNF-α水平及肠道组织中NLRP3、ASC和caspase-1/pro-caspase-1蛋白水平升高(P0.05),肠道组织中beclin-1和LC3-II蛋白阳性率及p-Akt/Akt和p-mTOR/mTOR蛋白水平降低(P0.05)。结论:DEX能够通过激活Akt/mTOR通路促进自噬而介导NLRP3炎症小体失活,从而减轻脓毒症大鼠肠损伤。     

NLRP3炎性小体在动脉粥样硬化发生发展中的作用

NLRP3炎性小体是一种包含胞内受体(主要是NOD样受体)、半胱天冬氨酸前体和凋亡相关斑点样蛋白的蛋白质复合体.该复合体最初只是被描述为一种影响感染和炎症过程的复合体,它的活化引起半胱天冬氨酶-1的激活并剪切加工底物白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18),从而引起炎症反应;此外,炎性小体的激活过程对有氧糖酵解(瓦伯格效应,Warburg effect)有着重要的影响,这同样可以促进炎症的发生.随后的证据表明炎性小体的活化还影响很多代谢紊乱包括动脉粥样硬化(atherosclerosis, AS)、2型糖尿病、痛风和肥胖等.本综述将探讨AS与炎症、NLRP3炎性小体活化的关联性,以及瓦伯格效应如何关联炎症反应及炎性小体的激活.     

NLRP3炎性小体与小鼠间质性膀胱炎的相关性研究

目的通过建立小鼠间质性膀胱炎(IC)模型,探讨Nod样受体蛋白3(NLRP3)炎性体在IC中的作用和机制,进而为IC的治疗寻求新靶点。方法 C57BL/6J小鼠40只,随机分成4组:空白对照组(生理盐水注射)10只,IC模型组(腹腔注射环磷酰胺,150mg/kg,24h后观察各项指标)10只,BHB对照组(每12h注射NLRP3炎性小体抑制剂BHB,125mg/kg,3次,第3次注射BHB2h后腹腔注射环磷酰胺150mg/kg)10只,IC治疗组(IC+NLRP3抑制剂处理)10只。HE染色观察病理学特征,RT-PCR和Western blot检测间质性膀胱炎小鼠膀胱中NLRP3,caspase-1和IL-1β表达及其激活情况。结果环磷酰胺注射诱导NLRP3,caspase-1和IL-1β表达增加和活化。间质性膀胱炎小鼠膀胱体积增大、充血水肿,膀胱湿重显著增加,粘膜层细胞破坏,粘膜下层明显增厚,炎症细胞浸润增多,而BHB预处理的小鼠上述情况明显好转。结论 NLRP3炎症小体与间质性膀胱炎密切相关,可能为IC临床治疗的重要干预靶点。     

麻黄定喘汤通过调控NLRP3炎症小体改善咳嗽变异性哮喘豚鼠气道炎症北大核心CSCD

目的:探讨麻黄定喘汤对咳嗽变异性哮喘(CVA)豚鼠气道炎症的影响及其治疗作用是否与NLRP3信号通路有关。方法:选取50只雄性豚鼠随机分为正常组、模型组、麻黄定喘汤低剂量组(5 g/kg)、麻黄定喘汤高剂量组(20 g/kg)和地塞米松组(0.5 mg/kg),每组10只。除正常组外其余建立CVA模型,连续给药4周。末次给药后辣椒素气溶胶激发记录咳嗽次数及咳嗽延迟时间;肺泡灌洗液(BALF)进行Diff-Quik染色检测炎症细胞计数;肺组织进行HE染色、PAS染色、Masson染色观察病理改变;Caspase-1活性试剂盒观察肺组织Caspase-1活性变化;ELISA检测BALF中IL-1β、IL-18、IL-17A、IL-22、IL-23细胞因子含量;Western blot检测肺组织中NLRP3、Caspase-1、ASC、IL-18、IL-1β蛋白表达水平;免疫组织化学法和免疫荧光法观察NLRP3在气道周围的分布。结果:麻黄定喘汤有效减少咳嗽次数,降低BALF中炎症细胞数及IL-1β、IL-18、IL-17A、IL-22、IL-23炎症细胞因子含量;下调肺组织中NLRP3、Caspase-1、ASC、IL-18、IL-1β蛋白表达水平;减弱肺组织NLRP3的荧光强度,降低肺组织中Caspase-1活性。结论:麻黄定喘汤可能通过抑制NLRP3炎症小体改善CVA豚鼠气道炎症。     

益气养阴方通过激活ERK/Nrf2/HO-1通路减轻糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤

目的:探究益气养阴方对糖尿病(DM)大鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的作用及可能的机制。方法:将健康雄性SD大鼠随机分为:正常(control)组,DM假手术(DM-S组)组,DM+MIRI组,益气养阴方低、中和高剂量组(灌胃7.5、15和30 g/kg益气养阴方水煎液),Nrf2激活剂(bardoxolone methyl)组(每天灌胃大鼠30 mg/kg bardoxolone methyl,灌胃量1 mL/kg)。每组均15只大鼠,连续给药7 d。末次给药结束后采集尾静脉血,对大鼠血糖血脂水平进行检测;ELISA法检测血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和IL-10的水平;血液采集后,采用超声检测大鼠心脏功能的变化;心功能检测后,处死大鼠获取心脏组织,采用氯化三苯基四氮唑(TTC)染色评估心肌梗死体积变化;苏木素-伊红(HE)染色观察心肌组织病理形态学变化;TUNEL法检测心肌细胞凋亡情况; Western blot检测心肌组织磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)、核因子E2相关因子2(Nrf2)和血红素加氧酶1(HO-1)的蛋白水平;氮蓝四唑显色法检测心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)活力,硫代巴比妥酸比色法检测丙二醛(MDA)水平,铁离子还原法检测活性氧簇(ROS)的水平。结果:与control组相比,DM-S组和DM+MIRI组的空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)水平显著升高,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平显著降低(P0.05);与DM-S组和DM+MIRI组相比,益气养阴方各组与bardoxolone methyl组的FBG、TC和TG水平显著降低,HDL-C水平显著升高(P0.05)。与control组和DM-S组相比,DM+MIRI组的心率(HR)和左心室舒张末压(LVEDP)升高,平均动脉压(MAP)、左心室收缩压(LVSP)和左室射血分数(LVEF)降低,血清cTnI、TNF-α、IL-1β和IL-10水平升高,心肌梗死体积百分比升高,大鼠心肌细胞破碎、坏死数量增多,心肌细胞凋亡率升高,p-ERK1/2、Nrf2和HO-1蛋白水平均降低,MDA和ROS水平均升高,SOD活力降低(P0.05)。与DM+MIRI组相比,益气养阴方各组与bardoxolone methyl组的HR和LVEDP降低,MAP、LVSP和LVEF升高,血清cTnI、TNF-α、IL-1β和IL-10水平降低,心肌梗死体积百分比降低,大鼠心肌细胞破碎、坏死减少,心肌细胞凋亡率降低,p-ERK1/2、Nrf2和HO-1的蛋白水平均升高,MDA和ROS水平降低,SOD活力升高(P0.05)。结论:益气养阴方可保护DM+MIRI大鼠的心肌组织,减轻组织氧化应激水平,其效应可能是通过激活ERK/Nrf2/HO-1通路实现的。     

鸢尾素有效降低阿霉素诱导心肌损伤大鼠炎症反应和心肌细胞凋亡

目的研究鸢尾素(Irisin)对阿霉素诱导心肌损伤大鼠的炎症反应和心肌细胞凋亡的影响及其作用机制。方法采用阿霉素诱导方法建立Sprague-Dawley(SD)大鼠心肌损伤模型并随机分成正常对照组(control group)、心肌损伤模型组(model group)和低、中、高浓度鸢尾素处理组。Irisin处理4周后,检测各组大鼠心功能指标(HR、LVSP、LVEDP、+dp/dtmax、-dp/dtmax),HE染色检测心肌组织病理变化,流式细胞术检测心肌组织中活性氧(ROS)水平;ELISA方法检测心肌组织中炎症因子(IL-6、IL-10、TNF-α、IFN-γ)水平;Tunel染色检测心肌组织细胞凋亡情况;免疫印迹法检测心肌组织中p-AKT/AKT水平变化。结果模型组大鼠心功能指标显著下降,且心肌组织病理损伤严重;心肌组织中ROS阳性比例、炎症因子水平和细胞凋亡率均显著上升,而p-AKT/AKT水平显著下降(P0.05)。经低、中、高浓度Irisin作用后,各组大鼠心功能指标逐渐回升,心肌组织病理损伤也逐渐减轻,且心肌组织中ROS阳性比例、炎症因子水平和细胞凋亡率均逐渐降低,而p-AKT/AKT水平显著上升(P0.05)。结论 Irisin有效降低阿霉素诱导的心肌损伤,通过抑制炎症反应、ROS水平和心肌细胞凋亡发挥作用并与AKT磷酸化相关。     

同型半胱氨酸激活NLRP3炎症小体促进动脉粥样硬化的作用研究

<正>目的:探讨同型半胱氨酸(Hcy)对NLRP3炎症小体的激活及其在动脉粥样硬化(AS)中的作用。方法:(1)Hcy处理人巨噬细胞,检测NLRP3炎症小体表达及培养上清IL-1β浓度;通过NLRP3 siRNA干扰,观察Hcy的作用是否被阻断。(2)apoE-/-雄性小鼠,随机分为对照组(CT)、高脂组(HF)、高脂高蛋氨酸组(HFHM)、高脂高蛋氨酸+control siRNA组和高脂高