紫薯花色苷提取物对ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化和高脂血症的作用

目的:研究紫薯花色苷提取物对Apo E-/-小鼠动脉粥样硬化和高脂血症的作用。方法:将8周龄雄性ApoE~(-/-)小鼠随机分为对照组、高脂饮食组、花色苷低剂量组、花色苷高剂量组和立普妥组,共5组(n=10),除对照组小鼠饲喂普通饲料外,其它4组在饲喂高脂饲料8周后,再给予蒸馏水、紫薯花色苷提取物(1. 67 mg·kg~(-1)·d~(-1)和8. 35 mg·kg~(-1)·d~(-1))或立普妥(阿托伐他汀钙,2 mg·kg~(-1)·d~(-1))灌胃8周。心脏取血检测小鼠血清的总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平;油红O和HE染色评估主动脉根部斑块面积和肝脏的脂肪变性程度; RT-q PCR方法检测主动脉和肝脏中炎症因子的表达。结果:与对照组比较,高脂饮食组小鼠血清的TC、LDL-C和HDL-C水平明显升高(P 0. 01),动脉的斑块面积明显增大(P 0. 01),肝脏的脂肪变性明显,白细胞介素1β(IL~(-1)β)、IL-6和单核细胞趋化蛋白1(MCP~(-1))的表达增加(P 0. 01),而过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)的表达降低(P 0. 05);高剂量紫薯花色苷提取物可以明显降低TC、TG和LDL-C水平(P 0. 01),减少动脉的斑块面积(P 0. 01),减轻肝脏的脂肪变性程度,同时还可以降低IL~(-1)β、IL-6和MCP~(-1)的表达(P 0. 05),提高PPAR-α的表达(P 0. 05)。结论:紫薯花色苷提取物可调节血脂,降低炎症细胞因子表达,从而抑制动脉粥样硬化的发展和高脂血症引起的肝组织脂肪变性。     

FAT/CD36在高脂喂养小鼠脂肪组织炎症中的作用

目的:探讨脂肪酸转运酶/白细胞分化抗原36(fatty acid translocase/CD36,FAT/CD36)在高脂饮食诱导的小鼠脂肪组织炎症中的作用。方法:将6周龄雄性C57BL/6J小鼠分别随机分为普通饮食组和高脂饮食组,喂养14周后,ELISA测定血清游离脂肪酸(FFA)含量,应用荧光实时定量PCR和Western blotting检测脂肪组织中FAT/CD36及炎症/趋化因子(IL-1β、IL-6、TNF-α、MCP-1、MIP-1)mRNA和蛋白的表达,免疫组织化学染色检测脂肪组织巨噬细胞浸润,比较高脂喂养14周的野生型小鼠和CD36基因敲除小鼠的脂肪组织炎症反应情况。结果:与普通饮食组相比,高脂饮食能增强C57BL/6J小鼠脂肪组织的FAT/CD36及炎症/趋化因子的表达,促进巨噬细胞在脂肪组织的浸润。与高脂饮食喂养的野生型小鼠相比,CD36基因敲除小鼠的脂肪组织炎症因子、趋化因子表达明显降低,脂肪组织巨噬细胞浸润减少。结论:高脂饮食通过上调脂肪组织FAT/CD36的表达激活了脂肪组织炎症。     

T淋巴细胞对高脂饮食引起的肠道炎症的影响

目的:探讨T淋巴细胞在高脂饮食导致的肠道炎症中所起的作用。方法:采用了T淋巴细胞缺失(CD3ε敲除)的小鼠模型,C57BL/6J野生型小鼠作对照,高脂喂养16周。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测结肠组织中的炎性因子水平,苏木精-伊红(HE)染色直接观察肠道形态,检测肠道肌层厚度,同时通过免疫组织化学技术(IHC)观察肠道组织中免疫细胞的浸润情况。结果:高脂饮食饲喂小鼠16周后,小鼠体重明显增加。qRT-PCR检测显示,与正常饮食的野生型小鼠组相比,高脂饮食的野生型小鼠结肠组织中IL-1β(P0. 01)、IL-5(P0. 05)、TNF-α(P0. 05)、IFN-γ(P0. 05)以及IL-6(P0. 05)表达水平明显上调; HE染色显示高脂饮食组结肠肌层明显变薄,同时免疫组化的结果显示结肠组织中巨噬细胞浸润增强。以高脂饮食野生型小鼠为对照,高脂饮食的T淋巴细胞缺失小鼠的结肠组织中IL-1β(P0. 01)、IL-6(P0. 05)、IFN-γ(P0. 05)、IL-5(P0. 05)以及TNF-α(P0. 01)基因水平下调; HE染色显示高脂饮食的T淋巴细胞缺失小鼠结肠肌层增厚,同时免疫组化结果显示结肠组织中巨噬细胞浸润减少。结论:T淋巴细胞对高脂饮食导致的肠道炎症有促进作用。     

IL-31在哮喘小鼠中的动态表达及对肺泡上皮细胞表达CCL11和CCL22的影响

目的通过观察IL-31在OVA诱导小鼠哮喘模型中的动态表达及IL-31对肺泡上皮细胞表达趋化因子CCL11和CCL22的影响,探讨IL-31在哮喘气道炎症中的作用。方法常规OVA法建立小鼠哮喘模型,于末次激发后取肺组织HE染色及AB-PAS染色,收集支气管肺泡灌洗液(BALF)进行白细胞和嗜酸性粒细胞(EOS)计数,ELISA法检测血浆中IgE、IL-4、IFN-γ、IL-31水平,荧光定量PCR检测肺组织IL-31R mRNA表达水平,同时体外培养小鼠肺泡上皮细胞,用IL-31处理24 h后检测CCL11和CCL22 mRNA的表达水平。结果成功构建哮喘小鼠模型,哮喘小鼠BALF中白细胞总数、嗜酸性粒细胞百分比和血浆中IgE水平明显增多。哮喘小鼠肺组织病理切片见中性粒细胞、EOS浸润。哮喘小鼠血浆中Th2类细胞因子IL-4水平明显高于对照组,Th1类细胞因子IFN-γ明显低于对照组。哮喘小鼠血浆IL-31水平和肺组织IL-31R mRNA表达水平明显增高,第2周至第8周虽略有降低但仍明显高于对照组。IL-31作用小鼠肺泡上皮细胞24h后,趋化因子CCL11、CCL22mRNA表达增高。结论IL-31通过刺激趋化因子表达募集炎性细胞,促进气道炎症的发生发展。     

降脂理肝汤对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪肝病大鼠非经典的细胞焦亡途径的影响

目的:观察降脂理肝汤对非酒精性脂肪肝病(NAFLD)大鼠非经典的细胞焦亡途径的影响,探讨降脂理肝汤干预非酒精性脂肪肝的机制。方法:利用高脂饮食喂养制备大鼠NAFLD模型,给予降脂理肝汤连续灌胃6周干预后,Western blot检测大鼠肝脏组织GSDMD和Caspase-11蛋白表达水平,试剂盒检测大鼠门静脉血清LPS以及血清IL-1β、IL-18、TNF-α和IL-6水平。结果:与正常组比较,大鼠肝脏组织GSDMD、GSDMD的N端(GSDMD-N)以及Caspase-11蛋白水平明显升高,大鼠门静脉血清LPS以及血清IL-1β、IL-18、TNF-α和IL-6水平显著升高;降脂理肝汤干预后,大鼠肝脏组织GSDMD、GSDMD-N以及Caspase-11蛋白水平明显降低,大鼠门静脉血清LPS以及血清IL-1β、IL-18、TNF-α和IL-6水平显著降低。结论:降脂理肝汤干预高脂饮食诱导的NAFLD的机制与抑制非经典的细胞焦亡途径有关。     

硫辛酸抑制脂多糖诱导的星形胶质细胞细胞因子及趋化因子的表达

目的探讨硫辛酸(LA)对脂多糖(LPS)激活的星形胶质细胞分泌TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10及相关趋化因子的影响。方法分离并鉴定新生C57BL/6小鼠大脑皮质星形胶质细胞,1μg/mL LPS刺激第2代星形胶质细胞,100μg/mL LA进行干预,Griess法检测NO的分泌,ELISA检测TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10炎性因子的含量,反转录PCR检测炎症趋化因子CC亚族趋化因子配体20(CCL20),单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)和巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α)mRNA的表达。结果与正常组比较,LPS刺激星形胶质细胞后,NO、TNF-α、IL-1β、IL-6分泌显著升高,IL-10分泌下调(P0.05);LA能抑制LPS诱导的NO、TNF-α、IL-1β、IL-6的分泌,增加IL-10的分泌,与LPS组相比差异有统计学意义(P0.05)。LA能显著下调LPS所致的CCL20、MIP-1α、MCP-1 mRNA的分泌。结论 LA能抑制LPS激活星形胶质细胞所致的炎性反应,其作用与抑制炎性因子及趋化因子的分泌有关。     

X线辐照激活NLRP3炎性体引起损伤肺组织细胞焦亡(pyroptosis)北大核心CSCD

目的建立放射性肺损伤模型,研究胱天蛋白酶1(caspase-1)依赖的程序性细胞死亡即细胞焦亡(pyroptosis)在放射性肺炎发病机制中的作用。方法 BALB/c小鼠胸腔15 Gy X线辐照5 d,处死小鼠。HE染色观察肺组织形态变化,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测辐照后肺组织细胞凋亡情况,Western blot法检测肺组织γ组蛋白2AX(γ-H2AX)、抗原KI-67(ki67)、含pyrin结构域NOD样受体家族3(NLRP3)、caspase-1和含CARD结构域凋亡相关斑点样蛋白(ASC/TMS-1)的表达情况,实时荧光定量PCR检测肺组织白细胞介素6(IL-6)、IL-8、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、含pyrin结构域NOD样受体家族3(NLRP3)、caspase-1、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-18的m RNA水平,采用免疫组织化学染色检测肺组织NLRP3、caspase-1和TMS1的表达情况,使用caspase-1活性检测试剂盒检测caspase-1活性;ELISA检测血清IL-1β和IL-18水平。结果辐照后小鼠肺泡壁毛细血管扩张充血,炎性细胞浸润,肺泡壁增厚;肺组织细胞TUNEL染色阳性指数升高,γ-H2AX和ki67的表达增强,提示细胞DNA遭到破坏且细胞增殖活性降低;肺组织细胞中IL-6、IL-8、TNF-α和MCP-1 m RNA水平增加;血清IL-1β和IL-18水平增加,肺组织NLRP3、caspase-1、ASC/TMS-1表达水平增加,caspase-1活性增强。结论辐照后,激活小鼠肺组织NLRP3炎性体诱导肺组织的细胞发生pyroptosis。     

miR-155/自噬/外泌体对酒精性肝病的影响

目的:研究酒精性肝病(ALD)中酒精持续激活小鼠肝脏巨噬细胞(即Kupffer细胞)并诱发肝脏炎性损伤的机制。方法:使用Gao-binge法制备慢性ALD小鼠模型,观察肝损伤,检测外泌体的浓度和大小分布,Western blot和RT-qPCR检测自噬相关蛋白和微小RNA-155(miR-155)的表达。体外实验中,对小鼠肝细胞系AML-12予以乙醇刺激24 h,制备肝细胞损伤模型,检测相关指标的变化。结果:酒精液体饮食导致小鼠肝细胞空泡变性、肝组织的脂质沉积和炎症细胞浸润,显示ALD疾病动物造模成功。与对照饮食组相比,酒精饮食喂养的小鼠肝脏肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、一氧化氮合酶2(NOS-2)、F4/80和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的mRNA表达升高,同时伴随肝细胞外泌体的生成成倍增加,提示慢性酒精摄入诱导的巨噬细胞过度活化与外泌体分泌增多有关。进一步研究表明,酒精饮食小鼠肝脏溶酶体相关膜蛋白1(LAMP1)和LAMP2的表达降低,细胞自噬通量显著受损,肝脏miR-155的表达明显升高。体外实验显示,酒精可直接诱导AML-12细胞miR-155表达,减少LAMP1和LAMP2表达,抑制细胞自噬通量,促进外泌体分泌。同时,乙醇处理组外泌体与pdTHP-1巨噬细胞共孵育后,细胞内TNF-α和IL-1β的mRNA表达显著增加,说明其外泌体可直接激活巨噬细胞。结论:酒精通过刺激肝脏miR-155介导的自噬和外泌体分泌,诱导肝细胞外泌体及其携带的致炎因子释放显著增加,是ALD中肝脏巨噬细胞持续过度激活的重要因素。     

p53、TGF-β1及炎性细胞因子在新型酒精性肾损伤小鼠模型中的表达

鉴于以往酒精性肾损伤模型的局限性,模拟人类常见饮酒模式,将20只小鼠随机分为对照组和酒精组,采用慢性酒精喂养加单次急性酒精灌胃的方法,建造新型酒精性肾损伤小鼠模型。通过苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining, HE)、过碘酸-雪夫染色法(periodic acid-Schiff staining,PAS)染色观察肾脏组织病理学改变,实时荧光定量PCR检测转化生长因子β1(transforming growth factor beta 1,TGF-β1)、炎性细胞因子和p53的mRNA表达水平,Western blotting检测p53蛋白的表达。结果显示,与对照组比较,酒精组小鼠肾质量、肾脏指数明显升高(P0.01);HE染色显示肾小球系膜细胞轻度增生,肾小管上皮细胞肿胀、间距增宽,间质内小血管增生、扩张、水肿,周围伴有炎性细胞浸润;PAS染色显示肾小球系膜细胞和系膜基质轻度增生;TGF-β1、炎性细胞因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)及p53的mRNA表达增加(P0.05);p53蛋白表达下调(P0.01)。提示新型酒精性肾损伤小鼠模型构建成功,p53、TGF-β1及炎性细胞因子参与了新型酒精性肾损伤,这为今后的研究提供了可靠的模型和线索。     

大黄酚对高脂饮食诱导的幼龄大鼠非酒精性脂肪肝的调节作用

目的探究大黄酚(chrysophanol,CP)对幼龄大鼠非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)的调节作用。方法将40只大鼠随机分为对照(control,Ctrl)组、CP组,高脂(high-fat,HF)组和HF+CP组。HF组和HF+CP组用高脂饲料喂养,其余2组以正常饲料喂养,CP组和HF+CP组同时腹腔注射CP(30 mg/kg)。4周后收集各组大鼠血清及肝脏组织,HE染色检测肝脏病理情况、TUNEL法检测细胞凋亡、Western blot检测脂质合成和分解代谢基因的表达、ELISA检测血清炎症因子水平。结果与Ctrl组比较,HF组大鼠肝脏组织出现明显的肝脂肪变性及炎性细胞浸润,凋亡小体明显增多;与HF组比较,HF+CP组大鼠肝组织脂肪变性及炎性细胞浸润显著减轻,凋亡小体数明显减少;同时,与Ctrl组比较,HF组大鼠脂质合成代谢基因ACC和SPEBP-1c的表达水平明显升高,分解代谢基因PPARα和CPT-1的表达水平明显降低,CP能显著减弱HP对ACC、SPEBP-1c、PPARα和CPT-1表达的影响。此外,HF能显著升高大鼠血清IL-1β和IL-6水平,CP能显著降低模型大鼠血清IL-1β和IL-6水平。结论 CP能通过调控脂质的合成代谢及炎症反应减轻幼龄大鼠NAFLD。     

复方蛹虫草改善DSS联合高脂饮食诱导的溃疡性结肠炎的作用和机制

目的探究复方蛹虫草(CCM)对葡聚糖硫酸钠(DSS)联合高脂诱导的溃疡性结肠炎(UC)的改善作用及初步机制。方法C57BL/6J雄性小鼠随机分为正常对照组、模型组、巴柳氮钠组及CCM 90、180和540 mg·kg~(-1)·d~(-1)组。采用DSS联合高脂饮食建立UC小鼠模型。造模同时ig给药,每天1次,连续8周,每周称量各组小鼠体质量,联苯胺法检测粪便隐血水平,酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定血清细胞炎性因子TNF-α、IL-1β。HE染色法比较各组结肠组织病理改变,蛋白质免疫印迹(Western blot)方法检测结肠组织中IκB-α、NF-κBp65、TNF-α的表达。结果与正常组相比,模型组粪便隐血分数在第1、3、5、6周显著增加(P0.05);小鼠结肠组织发生明显炎性细胞浸润(P0.05);血清炎性因子TNF-α、IL-1β含量显著增高(P0.01);结肠组织TNF-α、NF-κBp65表达显著增高(P0.01),IκB-α表达显著降低(P0.01)。与模型组相比,CCM组小鼠体质量均显著降低(P0.05,P0.01);CCM组小鼠粪便隐血显著减少(P0.05);CCM高剂量组小鼠血清TNF-α显著降低(P0.05),CCM中剂量组小鼠血清IL-1β显著降低(P0.05);CCM中剂量组小鼠结肠组织炎性细胞浸润显著减少(P0.05);CCM给药各组小鼠结肠组织TNF-α、NF-κBp65表达显著降低(P0.01),IκB-α表达显著增高(P0.01)。结论 CCM可以改善DSS联合高脂诱导的溃疡性结肠炎,其机制可能与其抑制NF-κB通路的激活有关。     

白细胞介素-22预处理对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌系统性感染小鼠肝脏炎症应答的影响

目的在耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)系统性感染小鼠模型中,观察白细胞介素(interleukin)-22预处理对小鼠肝脏组织炎症应答的影响。方法于感染前24 h对Balb/c小鼠经尾静脉注射25μg重组小鼠IL-22,7×1010CFU/kg的MRSA(ATCC43300)经尾静脉注射感染小鼠,感染6 h后取外周血和肝脏组织。检测血清中谷氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)和7种促炎因子[包括:IL-1β、IL-12p70、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)、IL-6、趋化因子CXCL1、IL-10、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)]的表达水平;实时定量PCR法检测小鼠肝脏中IFN-γ、IL-6、CXCL1和TNF-αm RNA的水平;对小鼠肝脏组织进行HE染色,观察肝细胞坏死和炎症细胞浸润情况,对组织切片进行病理学评分;分离小鼠肝脏内淋巴细胞(intrahepatic lymphocytes,IHLs),应用流式细胞术检测不同炎症细胞亚群的数量。结果 MRSA感染小鼠血清和肝脏中IFN-γ、IL-6、CXCL1和TNF-α的表达水平均较空白对照组显著升高(P0.05),IL-22预处理可降低MRSA感染所致的上述细胞因子升高表达(P0.05)。MRSA感染亦可导致肝脏炎症损伤,主要表现为血清ALT水平升高、肝脏坏死和炎症病理学评分升高以及肝脏内淋巴细胞和各种非特异性炎症细胞向肝脏募集浸润的数量增加。IL-22预处理可降低MRSA感染所致的肝脏炎症损伤,ALT水平下降,病理学评分降低,炎症细胞向肝脏募集浸润的数量亦减少。结论 IL-22预处理降低MRSA系统性感染小鼠肝脏的炎症反应。     

CD226基因敲除加重小鼠放射性肝损伤的发生

目的观察CD226基因敲除(KO)对小鼠放射性肝损伤的影响。方法雄性野生型(WT)和CD226KO小鼠随机分为非辐照组和辐照组,非辐照组不经过任何处理,辐照组接受8 Gy ~(60)Co照射建立急性放射性损伤模型。观察小鼠存活和体质量改变情况, HE染色观察肝脏和结肠病变情况,实时定量PCR检测肝和结肠组织炎症因子诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、白细胞介素1β(IL-1β)、 IL-6、 IL-12p40、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的mRNA水平。结果与辐照WT小鼠相比,辐照后的CD226KO小鼠体质量明显下降,存活率下降; CD226KO小鼠肝脏损伤加重,肝指数(肝质量/体质量)下降显著, iNOS、 IL-1β、 IL-6、 IL-12p40、 TNF-α、 MCP-1 mRNA水平显著升高;但CD226KO小鼠结肠炎症减轻,炎症因子mRNA水平降低。结论 CD226缺失降低辐照小鼠存活率,与肝损伤加重密切相关。     

TLR4/MyD88/AMPK通路参与调节高脂饮食诱导的肥胖小鼠脂肪组织炎症和细胞凋亡北大核心CSCD

目的:探讨Toll样受体4(TLR4)基因敲除对高脂饮食诱导的肥胖小鼠脂肪组织炎症和细胞凋亡的影响。方法:雄性C57BL/6J和TLR4基因敲除小鼠随机分为正常对照组(NC)、肥胖组(OB)、TLR4基因敲除组(TK)、TLR4基因敲除肥胖组(TO),NC组给予正常饲料喂养,其他组给予高脂饲料喂养。16周后取血检测各组小鼠空腹血糖(FPG)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)和游离脂肪酸(FFA)水平;HE染色观察各组小鼠脂肪细胞形态变化;Western blot检测TLR4、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶α(p-AMPKα)、髓样分化因子88(MyD88)、Bax和Bcl-2蛋白表达;ELISA检测小鼠血清单细胞趋化因子-1(MCP-1)、IL-6、TNF-α、IL-10水平。结果:与NC组相比,OB组小鼠脂肪细胞明显增大,FPG、TC、TG、LDL、FFA、MCP-1、IL-6和TNF-α水平明显升高(P<0.01),HDL和IL-10水平明显降低(P<0.01,P<0.05),TLR4、MyD88和Bax表达明显增加(P<0.01),p-AMPKα和Bcl-2表达明显减少(P<0.05);与OB组相比,TO组小鼠上述检测指标表达明显逆转。结论:TLR4基因敲除可通过MyD88依赖的AMPK缓解高脂饮食诱导的肥胖小鼠脂肪组织慢性炎症和细胞凋亡。     

余甘子总酚对动脉粥样硬化ApoE-/-小鼠肝脏保护作用机制的研究

目的：研究余甘子总酚对载脂蛋白E基因敲除（ApoE-/-）动脉粥样硬化模型小鼠的肝脏保护作用,初步探讨其作用机制。方法：建立高脂饮食诱导的ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化模型,给予余甘子总酚灌胃8周后,酶联免疫法检测小鼠血清中天冬氨酸转氨酶（AST）和丙氨酸转氨酶（ALT）水平;观察小鼠肝脏病理模型切片;酶联免疫法检测小鼠肝脏组织匀浆中的总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、白细胞介素6(IL-6)、IL-1β和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平;Western blot法检测小鼠肝脏组织相关蛋白的表达。结果：余甘子总酚干预可降低ApoE-/-小鼠血清中AST和ALT水平（P<0.05）,减缓小鼠肝脏脂肪性病变及炎症细胞浸润现象;同时,余甘子总酚可显著降低肝脏组织匀浆中TC、TG和LDL-C水平,提高HDL-C水平（P<0.05）,显著降低炎症因子IL-6、IL-1β和TNF-α含量（P<0.05）;此外,余甘子总酚还可显著升高模型小鼠肝脏组织ATP结合盒转运体A1(ABCA1)蛋白水平（P<0.0...     

Eotaxin处理的黑色素瘤小鼠的肿瘤组织及细胞因子研究

目的:探讨嗜酸性粒细胞(EOS)趋化因子局部注射后观察小鼠的肿瘤生长情况,肿瘤组织细胞因子的变化.推测EOS和肿瘤之间的相互关系.方法:用BALB/c小鼠建立黑色素瘤小鼠模型,并在种瘤部位附近局部注射eotaxin(EOS趋化因子,100 μg/L),隔天注射1次.于第16天处死小鼠,取其肿瘤组织做HE染色,观察肿瘤组织局部形态结构的变化.以放射免疫法检测黑色素瘤小鼠血清以及肿瘤组织匀浆中TNF-α和IL-10的含量.结果:(1)非EOS趋化因子组和EOS趋化因子组肿瘤称重显示组间无统计学意义.(2)HE染色显示,EOS趋化因子组镜下观察到在肿瘤组织间质周围可见大量的坏死组织和炎症细胞浸润,在肿瘤组织内有较多嗜酸性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞浸润.而在非EOS趋化因子组肿瘤组织内及周围EOS浸润较少,巨噬细胞也较少.(3)放射免疫法结果显示EOS趋化因子处理组肿瘤组织匀浆中TNF-α、IL-10含量明显高于非EOS趋化因子处理组肿瘤组织匀浆中TNF-α、IL-10含量.而血清中两个组的TNF-α、IL-10含量无明显差别.结论:用EOS趋化因子局部注射后,在肿瘤组织中EOS和巨噬细胞浸润明显增加,EOS对肿瘤生长无明显抑制作用.     

miR-148a通过抑制Ca~(2+)/钙调蛋白依赖激酶Ⅱα(CaMKⅡα)减少小鼠肝缺血再灌注损伤

目的探讨miR-148a通过抑制Ca2+/钙调蛋白依赖激酶Ⅱα(Ca MKⅡα)对肝缺血/再灌注(I/R)损伤的影响及其机制。方法建立小鼠肝I/R模型,采用实时定量PCR检测miR-148a、Ca MKⅡα、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)mRNA的表达,Western blot法检测肝脏组织Ca MKⅡα的表达;HE染色观察各组肝组织的形态学变化,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测肝细胞凋亡情况。结果肝I/R后miR-148a表达上调,与Ca MKⅡα表达水平呈负相关;外源性miR-148 a模拟物处理肝I/R损伤小鼠后,Ca MKⅡα、TNF-α、IL-1βmRNA的表达水平下降,肝脏组织炎性细胞浸润及肝实质细胞坏死减少,肝细胞凋亡降低。结论 miR-148a可通过抑制Ca MKⅡα的表达而缓解肝I/R损伤。     

CCL21/CCR7对小鼠急性心肌梗死后炎症反应及梗死面积的影响

目的:探讨抗CCL21处理对急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)后小鼠炎症反应和心肌损伤的影响.方法:结扎冠脉前降支构建C57BL/6小鼠心肌梗死模型,随机分为假手术组(Sham)、对照组(isotype-IgG control)和CCL21单抗干预组(goat anti-mouse CCL21 mAb).qPCR检测AMI后心肌组织CCL21受体CCR7表达,ELISA法检测抗CCL21处理对心肌梗死后小鼠血清炎症趋化因子和肌钙蛋白的影响.HE染色评估心肌梗死后心肌组织炎性细胞浸润.1和7 d后Evans blue/TTC双染评估梗死区和危险区面积.结果:AMI导致小鼠血清CCL21水平和心肌组织CCR7在心肌组织内表达水平显著增高.冠脉结扎后小鼠血清白细胞趋化因子水平显著增高,anti-CCL21干预组小鼠血清CXCL1等趋化因子水平均显著低于对照isotype-IgG组.给予anti-CCL21处理有效逆转了cTnI和心肌酶LDH-1升高,并显著降低心肌梗死区面积.结论:抗CCL21处理可显著抑制心肌梗死后炎症反应并降低小鼠心肌梗死面积.     

右美托咪啶减轻急性肺损伤的机制研究

目的探讨右美托咪啶(Dex)对小鼠急性肺损伤(ALI)的影响及潜在作用机制。方法将32只C57BL/6雄性小鼠随机分为空白对照组(Sham组)、右美托咪啶组(Dex组)、脂多糖组(LPS组)和药物干预组(LPS+Dex组)。LPS组和LPS+Dex组小鼠通过腹腔注射LPS(10 mg/kg)构建小鼠ALI模型,Dex组及LPS+Dex组小鼠腹腔注射Dex(40μg/kg),Sham组和LPS组注射等剂量生理盐水。LPS注射12 h后,采用HE染色比较各组小鼠肺损伤状况;qRT-PCR检测各组小鼠肺组织中促炎性细胞因子IL-1β、TNF-α、IL-6和MCP-1 mRNA的表达;Western blot检测各组小鼠肺组织中GPX4、COX2和转录因子红系2相关因子2(Nrf2)蛋白的表达。结果与Sham组相比,LPS组小鼠肺损伤评分明显升高(P0.05),促炎性细胞因子IL-1β、TNF-α、IL-6和MCP-1mRNA表达水平均明显升高(P0.05),肺组织铁死亡标志物GPX4蛋白表达水平明显降低(P0.05),COX2蛋白表达水平则明显升高(P0.05),肺组织中Nrf2蛋白表达水平明显降低(P0.05)。与LPS组相比,LPS+Dex组小鼠肺损伤评分明显降低(P0.05),IL-1β、TNF-α、IL-6和MCP-1 mRNA表达水平明显降低(P0.05),GPX4的蛋白表达水平明显升高(P0.05),COX2蛋白表达水平则明显降低(P0.05),Nrf2的蛋白表达水平也明显升高(P0.05)。结论 Dex可能通过激活Nrf2抑制小鼠肺组织铁死亡,进而发挥肺保护作用。     

L-谷氨酰胺治疗大鼠非酒精性脂肪肝病

目的观察L-谷氨酰胺对非酒精性脂肪肝病大鼠的作用。方法将大鼠随机分为对照组、高脂饮食组及L-谷氨酰胺治疗组,高脂饮食组与L-谷氨酰胺治疗组用高脂饮食建立非酒精性脂肪肝病模型,造模成功后给予相应治疗,8周后处死大鼠并检测相关指标。结果治疗组相较于高脂饮食组的炎性反应明显减轻,脂肪空泡减少;治疗组的LDL、AST、TBA、CHOL、TG、LDL-C、IL-6、TNF-α、IL-α、IL-β、MDA及CRP较高脂饮食组明显降低(P0.05),GSH、T-AOC、HDL-C明显升高(P0.05),SREBF1和ACCαmRNA与蛋白表达明显下降(P0.05),PPARαmRNA及蛋白表达明显升高(P0.05)。结论 L-谷氨酰胺可缓解大鼠非酒精性脂肪肝病症状,其机制可能是通过降低SREBF1及ACCα表达、同时增加PPARα表达实现的。