肺炎支原体感染对BALB/c小鼠TLR4/NF-κB信号通路表达的影响

目的探讨肺炎支原体(MP)感染对BALB/c小鼠TLR4/NF-κB信号通路表达的影响。方法BALB/c小鼠80只,随机分成肺炎支原体感染组和对照组,每组40只,分别于接种后3d、7d、14d、21d,,用ELISA试剂盒检测肺泡灌流液(BALF)IL-4和IL-6含量;HE染色观察肺脏病理组织学变化;用Western blot实验检测肺组织TLR4、Myd88与NF-κB表达变化。结果肺泡灌流液中IL-4和IL-6含量于感染后7 d时达到高峰,而后呈下降趋势;感染MP 3d后,BALB/c小鼠肺组织即出现间质性炎症改变,7d时炎症最明显,14d时炎症逐渐减轻;感染MP后,BALB/c小鼠肺组织TLR4、Myd88与NF-κB表达水平显著升高。结论肺炎支原体感染激活TLR4/NF-κB信号通路。     

乙型肝炎表面抗原对BALB/c小鼠细胞免疫应答的影响

目的研究不同来源乙肝表面抗原(HBsAg)对BALB/c小鼠的某些细胞免疫应答的影响.方法采用血源、CHO和酵母HBsAg分别免疫BALB/c小鼠,于免疫后不同时间制备脾脏单个核细胞(MNC),测定MNC对刀豆蛋白(ConA)和细菌脂多糖(LPS)的增殖反应性;采用绵羊红细胞(SRBC)作为致敏原,测定不同HBsAg免疫小鼠后迟发性超敏反应(DTH)的发生程度.结果不同来源HBsAg对ConA或LPS刺激的反应指数(SI)表现出不同的时间曲线,一般于免疫20?d和25?d时显著升高,其中血源HBsAg较高,酵母较低.H.M.-HBsAg在免疫5?d时即显出较高的SI值.CHO-HBsAg对SRBC诱导的DTH反应具有显著的抑制作用(P＜0.05).结论不同来源HBsAg诱导细胞免疫反应的类型和程度存在差异,CHO细胞来源的HBsAg对TH1细胞介导的DTH反应有抑制作用.     

全子宫切除术对BALB/c小鼠TDAR实验的影响

目的：通过建立BALB/c小鼠全子宫切除实验动物模型,考察和分析该术式对小鼠TDAR的影响。方法：平行对照组和手术组经腹行全子宫切除术,非手术组不予手术;非手术组和手术组腹腔注射KLH进行免疫;流式细胞技术分析B淋巴细胞亚群变化;ELISA法检测血清雌二醇和KLH IgG抗体含量;HE染色观察卵巢组织学改变。结果：KLH能够刺激B淋巴细胞分化增殖,手术组和非手术组较平行对照组明显升高（P＜0.05）;全子宫切除术能够影响KLH IgG抗体生成,手术组较非手术组低（P＜0.05）;全子宫切除小鼠雌二醇分泌明显低于非手术组（P＜0.05）;全子宫切除小鼠卵巢组织出现体积缩小,成熟卵泡形态不规则,颗粒细胞松散、凋亡等。结论：全子宫切除术通过降低卵巢雌二醇分泌水平,对小鼠TDAR实验产生抑制效应。     

BALB/c小鼠黑素瘤模型的建立

ＢＡＬＢ／ｃ小鼠黑素瘤模型的建立陶惠红杨耀琴朴文姬杨虎川（上海铁道大学医学院组胚教研室）接种Ｂ１６小鼠黑素瘤细胞悬液于ＢＡＬＢ／ｃ小鼠足部、腹腔和尾静脉，用于建立移植瘤模型和肺部转移瘤模型，以观察Ｂ１６实体瘤的形态学特点、接种细胞数与肿瘤生成的关系及...     

TNF-α和cTnI在BALB/c小鼠自身免疫性心肌炎模型的动态变化

目的:以包含心肌球蛋白致病性抗原表位的人工合成多肽免疫BALB/c小鼠,建立实验性自身免疫性心肌炎动物模型,观察其自身免疫阶段和慢性病变期的病理变化,检测炎性因子和自身抗体变化.方法:人工合成含心肌肌球蛋白抗原重链表位长度为30个氨基酸残基的多肽0.8mg,纯化多肽皮下免疫遗传易感BALB/c小鼠,建立自身免疫性心肌炎模型,检测TNF-α和cTnI病变期间的改变.结果:实验组小鼠出现自身免疫性心肌炎病理改变.第14d出现心肌损伤,至第21d～30d心肌损伤达高峰,60d趋向稳定.心脏扩大,病理切片可见心肌层充血,间质巨噬细胞浸润明显,心肌细胞肿胀、逐步崩解坏死,被纤维组织取代.血清出现抗心肌肌球蛋白自身抗体阳性,并伴TNF-α和cTnI水平升高、高峰、下降的变化.结论:可成功诱导BALB/c系小鼠发病,建立实验性自身免疫性心肌炎动物模型,TNF-α和cTnI水平反映自身免疫性心肌炎病情发生、发展和转归.     

TNF-α和cTnI在BALB/c小鼠自身免疫性心肌炎模型的动态变化

目的：以包含心肌球蛋白致病性抗原表位的人工合成多肽免疫BALB／c小鼠，建立实验性自身免疫性心肌炎动物模型，观察其自身免疫阶段和慢性病变期的病理变化，检测炎性因子和自身抗体变化。方法：人工合成含心肌肌球蛋白抗原重链表位长度为30个氨基酸残基的多肽0．8mg，纯化多肽皮下免疫遗传易感BALB／c小鼠，建立自身免疫性心肌炎模型，检测TNF—α和cTnl病变期间的改变。结果：实验组小鼠出现自身免疫性心肌炎病理改变。第14d出现心肌损伤，至第21d～30d心肌损伤达高峰，60d趋向稳定。心脏扩大，病理切片可见心肌层充血，间质巨噬细胞浸润明显，心肌细胞肿胀、逐步崩解坏死，被纤维组织取代。血清出现抗心肌肌球蛋白自身抗体阳性，并伴TNF—α和cTnl水平升高、高峰、下降的变化。结论：可成功诱导BALB／c系小鼠发病，建立实验性自身免疫性心肌炎动物模型，TNF—α和cTnl水平反映自身免疫性心肌炎病情发生、发展和转归。     

苯甲酸雌二醇对BALB/c小鼠系统性红斑狼疮模型诱导的影响

目的：探讨不同剂量的苯甲酸雌二醇（Estradiol benzoate）对BALB/c小鼠系统性红斑狼疮（Systemic lupusery-thematosus，SLE）模型诱导的影响。方法：BALB/c小鼠卵巢摘除后用同系小鼠ConA活化的脾细胞（5×107）免疫3次，同时肌注不同剂量苯甲酸雌二醇，6周后以ELISA法检测血清抗核抗体（ANA）、抗组蛋白抗体（AHA）及血清和肾组织匀浆雌二醇（Estradiol，E2）水平，H.E、PAS染色观察肾脏病理改变，透射电镜检查肾脏超微结构的改变，直接荧光法检查IgG类免疫复合物的沉积。结果：经同系小鼠ConA活化的脾细胞免疫的BALB/c小鼠均发生红斑狼疮样改变，但不同剂量苯甲酸雌二醇组小鼠的自身抗体的产生及肾脏病理损害差异显著（P〈0.05）。结论：机体不同的雌二醇水平与SLE的病变程度相关。     

BALB/c小鼠特异性免疫状况与中枢神经系统风疹病毒JR23株的感染

目的　探讨机体特异性免疫状况与中枢神经系统 (centralnervoussystem ,CNS)风疹病毒(rubellavirus,RV)感染的关系。方法　本研究选择BALB c小鼠 ,给予地塞米松和环磷酰胺药物后 ,经腹腔感染RVJR2 3株 ,于感染后第 2 1天检测动物的免疫功能 ,观察RV对CNS的侵袭性 ,分析两者之间的关系。结果　环磷酰胺药物组的动物细胞功能明显低于其他实验组 (P <0 0 5 ) ,地塞米松药物组、药物未干预的病毒感染组及阴性对照组之间差异无显著性 (P >0 0 5 )。CNS受染动物的细胞免疫功能明显低于CNS未受染动物 (P <0 0 0 1)。地塞米松、环磷酰胺和药物未干预动物组的CNSRV感染率分别为 6 0 % ,90 %和 5 0 %。各组感染动物RV特异性抗体生成差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论　在机体尚未产生特异性抗体前 ,RV对CNS的感染与机体的细胞免疫状况有关     

IL-12对BALB/c小鼠Th17细胞的分化的影响

目的: 观察细胞因子IL-12对Th17细胞分化的影响.方法: 小鼠脾淋巴细胞经抗CD3单克隆抗体(mAb)和不同浓度的重组小鼠IL-12刺激, 3 d后使用ELISA方法观察培养物上清液中IL-17的产生情况.并使用细胞内细胞因子染色的方法, 通过流式细胞术观察CD3 mAb和重组小鼠IL-12刺激对Th1和Th17细胞分化的影响.结果: Th17细胞不分泌IFN-γ、 IL-5、 IL-10等细胞因子, 不表达Foxp3, 是一个独立的细胞亚群.不同浓度的重组小鼠IL-12可以诱导抗CD3 mAb 的T细胞分泌IFN-γ, 并向Th1细胞方向分化.同时, IL-12可以抑制活化的T细胞分泌IL-17, 抑制T细胞向Th17细胞分化.结论: IL-12可以抑制Th17细胞的分化.     

肺炎支原体感染在BALB/c小鼠肺组织不同时间炎症的变化

目的了解肺炎支原体感染的不同时期肺组织的病理变化、用PCR的方法检测肺炎支原体出现时间、阳性率的变化情况。方法建立肺炎支原体经呼吸道感染的BALB/c小鼠模型,对感染后3、7、14、21 d的小鼠的肺组织进行病理变化、肺湿重、PCR检测肺炎支原体出现时间的研究。结果肺炎支原体经呼吸道感染的BALB/c小鼠肺组织变大重量增加,肺指数同正常对照组相比,P﹤0.01,差异有统计学意义;呼吸道感染的BALB/c小鼠肺组织在3、7 d时,肺组织的病理变化最明显,14 d炎症减轻,21 d炎症基本消退;用PCR的方法检测支气管肺泡灌洗液肺炎支原体7 d时全部为阳性。结论肺炎肺炎支原体感染BALB/c小鼠模型制作成功,感染后7 d时肺部炎症最明显。     

BALB/c小鼠滴鼻免疫灭活SARS病毒对全身性免疫的影响

目的　了解灭活SARS病毒滴鼻免疫小鼠对全身性免疫的影响。方法　将 5周龄雌性BALB c小鼠随机分为两组 ,每组 10只 ,免疫组小鼠每只免疫 5 0 μg的灭活病毒悬液 ,对照组注射等体积PBS。分别在免疫的 8d和 14d处死小鼠 ,分离脾细胞和外周血淋巴细胞 ,流式细胞仪观察其淋巴细胞表型 ;间接ELISA法测定其血清中抗SARS病毒特异性抗体IgM和IgG。结果　第 8天脾脏的CD4 T细胞的构成比增加 (P =0 .0 2 7)。外周血淋巴细胞表型在第 8天即开始发生改变 ,在第 14天变化明显 ,与对照组差异有显著性 ,CD4 ,CD8 ,CD3 T细胞构成比和T B比值显著降低 (P <0 .0 5、0 .0 1、0 .0 1、0 .0 1) ,同时CD4 5R B2 2 0 细胞 (B细胞 )构成比显著增加 (P =0 .0 0 0 )。但是此时血清中特异性抗体未能被检测到。结论　在未应用佐剂的情况下 ,小鼠滴鼻接种灭活SARS病毒虽然可以导致诱导机体免疫细胞表型的变化 ,却未能诱导抗体的产生。     

地塞米松对小鼠脾脏巨噬细胞内TLR4和TLR2表达的影响

为观察小鼠脾巨噬细胞内的TLR4和TLR2在脂多糖 (LPS )刺激后 ,地塞米松 (Dx )对其表达量的影响 ,在向BALB/c小鼠腹腔内注射LPS和Dx后采用贴壁法分离小鼠脾巨噬细胞 ,通过半定量RT PCR方法测定了TLR4和TLR2mRNA的表达量。结果显示 :①LPS刺激后 ,小鼠脾巨噬细胞内TLR4mRNA显著上调 (吸光度比为 0 11) ,TLR2上调不明显 (吸光度比为0 0 0 8) ;②预先注射不同剂量Dx ,分别为 0 1mg/kg、 1mg/kg、 10mg/kg ,再用LPS刺激小鼠。注射了Dx后巨噬细胞TLR4mRNA表达量较单纯注射LPS的小鼠显著降低 (吸光度比分别为 0 0 93、 0 0 5 0和 0 0 14 ) ;但TLR2mRNA表达量随着Dx使用剂量增加而增加 (吸光度比分别为 0 0 5 4、 0 0 80和 0 16 1)。该项研究表明TLR4是参与LPS引起炎症反应的主要Toll样受体 ,而TLR2不起主要作用 ;Dx对LPS刺激后TLR 4mRNA的表达有抑制作用 ,而对TLR2mRNA的表达有增强作用 ;Dx抑制LPS引起的炎症反应可能与抑制TLR4的表达有关     

BALB/c小鼠肥大细胞瘤/白血病模型的建立

目的研究建立BALB/c小鼠肥大细胞瘤/白血病模型。方法 BALB/c小鼠尾静脉注入小鼠肥大细胞瘤P815细胞,实验按每只小鼠接种细胞数量分为1×10^7/只组、5×10^6/只组、2.5×10^6/只组、1×10^6/只组、5×10^5/只组、1×105/只组和溶剂（RPMI1640培养液）对照组。观察小鼠的生存状态、体重及肝肺脾（重量、形态、病理）、染色体、血涂片、骨髓涂片、白细胞及血小板计数。结果注入P815细胞≥1×106/只的所有组小鼠均死亡,〈1×10^6/只的所有组生存良好,且死亡小鼠的生存时间与注入细胞数量呈负向依赖关系（P〈0.05）。死亡组小鼠体重较注射前相当或减轻、肝肺脾重较对照组及未死亡组显著增加（P〈0.05）;肝质地变硬,表面可见大量大小不一的白色结节突起,部分脾肺可见出血梗死灶,病理示肝脾有大量异形肥大细胞瘤细胞浸润;脾细胞染色体分析可见肥大细胞瘤细胞的非正常染色体核型;白细胞和血小板计数较对照组降低（P〈0.01）,血涂片可见少量肥大细胞瘤细胞,骨髓涂片示骨髓原始细胞比例增高。结论 P815细胞通过静脉注射能使BALB/c小鼠形成肥大细胞瘤/白血病,可作为肿瘤实验研究的一种模型构建方法。     

登革病毒2型感染BALB/c小鼠的IL-4、IFN-γ产生动态观察

目的　探讨登革病毒 2型 (DEN2 )临床分离株感染BALB c小鼠后其血浆中IL 4、IFN γ产生动态及相关关系。方法　用不同剂量DEN2临床分离株经皮下多点注射 ,建立BALB c小鼠感染模型 ,并用双抗体夹心ELISA法检测感染后不同时间各组动物血浆中IL 4、IFN γ浓度。结果　DEN2感染可使BALB c小鼠产生IL 4、IFN γ增加 (P <0 .0 5 ) ,且细胞因子浓度与病毒感染剂量有关。初次感染阶段两者水平均有升高 ,而再次感染阶段以IL 4升高为主。结论　在初次感染阶段TH1 TH2应答均发挥重要作用 ;而再次感染阶段以TH2应答为主。     

幽门螺杆菌感染BALB/c小鼠模型的研究

随着对幽门螺杆菌 (Ｈ .ｐｙｌｏｒｉ)疫苗、致病机理、药物筛选等方面研究的深入 ,人们越来越多地需用动物模型。我们用含有ｃａｇＡ和ｖａｇＡ基因阳性的Ｈｐ株ｓｙｄ ｎｅｙｓｔｒａｉｎ1 (ＳＳ1 )感染ＢＡＬＢ ｃ小鼠 ,作Ｈｐ慢性感染小鼠的动物模型 ,试验用空肠弯曲菌琼脂基础培养基培养 ,微需氧条件下 37℃培养 3～ 5ｄ。ＳＰＦ级ＢＡＬＢ ｃ小鼠 40只 ,雌性 ,7～ 8周龄 ,重 17～ 2 0克 ,分实验组、对照组。实验组动物模型灌喂Ｈ .ｐｙｌｏｒｉ菌液 ,0 4ｍｌ 只 (每ｍｌ约含Ｈｐ 10 9条 ) ,连续 5次 ,10ｄ完成 ,对照组动物则不作相应…     

BALB/c小鼠巨细胞病毒性心肌炎模型的特征

目的：探讨BALB/c小鼠巨细胞病毒(MCMV)性心肌炎模型的特征。方法:60只4周龄BALB/c小鼠随机分成2组：实验组(36只，MCMV腹腔注射)和对照组(24只，3T3细胞裂解液腹腔注射)。在注射后3、7、14、21、28、35、42、49、56、63和70 d，记录心电图，测血清抗心肌β1受体抗体，分批处死小鼠行心肌病理、免疫组化和MCMV DNA检测。结果:实验组心肌炎累积发病25只(25/36，69.4%)，死亡4只(4/36，11.1%)；心肌炎急性期心肌呈现弥漫性炎性细胞浸润和灶性心肌细胞变性坏死，慢性期心肌间质散在炎性细胞浸润，急慢性期心肌炎病理积分均在2分或以下；免疫组化示急性期心肌IL-1β和TNF-α蛋白强阳性表达。实验组心律失常累计发生率达50.0%，可出现各种心律失常，急性期以窦性、房性心律失常和传导阻滞为主，慢性期以室性和房性心律失常为主。实验组3-7 d时心肌组织可检测到MCMV DNA片段，14-70 d时则不能检测到。实验组前5周血清抗β1受体抗体滴度为0，第6-10周明显升高；对照组前7周该抗体滴度为0，第8-10周轻微升高。结论:MCMV心肌炎并不严重，心肌细胞变性坏死具有局灶性和散在性特点，可出现各种心律失常；心肌炎早期病变和心律失常的发生可能与病毒感染直接损伤有关，慢性期病变和心律失常的发生则可能与抗β1受体抗体的作用有关。     

免疫BALB/c小鼠获得大量抗体的方法

仅管小白鼠有饲养方便,价格低廉等优点,但由于小白鼠血清数量很少,所以,一般不采用免疫小鼠的方法制备抗体。本篇简要介绍一种对免疫后的小鼠诱生腹水的方法,通过这种方法我们在BALB/c小鼠体内获得了较多数量的抗人血清白蛋白和抗人血清高密度载脂蛋白A_1的抗体。 其方法是:在6—8周龄小鼠腹腔内预先注入灭菌石蜡油0.5ml,首次免疫采用5μg人血清白蛋白或5μg人血清高密度载脂蛋白A_1,加等量福氏完全佐剂。一周后用同样剂量的抗原加福氏不完全佐剂加强免疫,四周后于每只小鼠腹腔内注入SP_2/O小     

杨树花粉过敏BALB / c 小鼠动物模型的建立

目的:建立杨树花粉粗提物致敏激发的小鼠过敏模型。方法:将60 只BALB/ c 小鼠随机均分为正常组、卵清蛋白(OVA)阳性对照组和模型组,每隔5 d 经腹腔注射致敏1 次,共4 次,末次致敏后第5 天滴鼻激发。观察支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症细胞变化情况;PAS 染色观察气道黏液分泌情况;HE 染色观察鼻黏膜、肺炎症情况;免疫组化法检测肺组织中IL-4 及IFN-α阳性细胞平均光密度值;酶联免疫吸附试验检测血清中的总IgE 水平。结果:与正常组比较,模型组诱导鼻黏膜、肺组织出现明显的变应性炎症且气道黏液分泌明显增加;BALF 涂片显示明显的炎症细胞(嗜酸性粒细胞、中性粒细胞)增多;肺组织中IL-4 阳性细胞平均光密度值均高于正常组,IFN-α阳性细胞平均光密度值均低于正常组;血清中总IgE 高于正常组。结论:杨树花粉粗提物能够成功建立小鼠过敏模型。该模型的建立有利于过敏性疾病机制的研究。