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1.
背景:研究表明胰岛素抵抗在多囊卵巢综合征的发生与发展过程中起重要作用,建立理想的多囊卵巢综合征骨骼肌胰岛素抵抗动物模型是研究该疾病的基础。
目的:探讨建立较为理想的多囊卵巢综合征骨骼肌胰岛素抵抗大鼠模型的方法。
方法:将八九周龄SD雌性大鼠随机分为模型组和对照组。模型组给予胰岛素联合人绒毛膜促性腺激素皮下注射,并以高脂饲料和50 g/L葡萄糖水喂养,对照组皮下注射生理盐水,常规饮食喂养。
结果与结论:造模6周后,模型组大鼠卵巢体积明显增大,且呈多囊性改变;血清睾酮、黄体生成素、空腹血糖和胰岛素水平高于对照组;骨骼肌组织中葡萄糖转运蛋白4表达明显低于对照组,且其葡萄糖转运蛋白4阳性颗粒靠近骨骼肌细胞膜边缘者较少。可见胰岛素联合人绒毛膜促性腺激素皮下注射,并饲以高脂饲料和50 g/L葡萄糖水是建立多囊卵巢综合征骨骼肌胰岛素抵抗大鼠模型较为理想的方法。 相似文献
2.
背景:有研究表明血管内皮可能是胰岛素抵抗发生的首要环节。
目的:采用高浓度胰岛素体外诱导培养法建立人脐静脉内皮细胞胰岛素抵抗模型。
方法:以人脐静脉内皮细胞系为研究对象,应用含不同浓度胰岛素(50,40,30,20,10,1,0.1,0.01 U/L)的DMEM培养基与人脐静脉内皮细胞共同培养12,24,36,48,72 h,并设置正常组,光学显微镜下观察细胞形态学变化;MTT法测定各组细胞活性;用葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法法鉴定胰岛素抵抗细胞模型。
结果与结论:与正常组比较,当胰岛素浓度大于40 U/L,其作用时间大于48 h时,细胞形态受损严重,细胞活性显著下降(P < 0.01);当胰岛素浓度小于20 U/L,作用时间小于36 h时细胞形态无明显损伤(P > 0.05)。葡萄糖氧化 酶-过氧化物酶法实验表明,在30 U/L的胰岛素刺激48 h条件下,培养液中残存葡萄糖浓度显著高于正常组细胞 (P < 0.01)。证实,用含30 U/L胰岛素的培养基培养48 h的人脐静脉内皮细胞细胞可产生胰岛素抵抗。 相似文献
3.
为了研究高频电刺激的机理,我们设计了一个离体的细胞外电刺激培养细胞的装置,它能适用临床上外科治疗巴金森病的深部脑刺激的参数。此装置在24孔培养板相邻的两个孔中,架上钛金属丝桥;或者在10 cm直径的培养皿中,安置2条平行的钛金属丝。我们证明它在GH3和PC12细胞的培养中无毒性。初步的实验结果显示它适用于离体细胞新陈代谢变化的实验,基因芯片及蛋白芯片等技术的实验。 相似文献
4.
目的: 为冠心病心肌缺血和缺血再灌注的相关研究提供理想的实验模型。 方法: 采用不同的缺血时间和再灌注期不同的灌注模式,评价小鼠离体工作心脏缺血再灌注的功能状态。 结果: 短暂(5 min)的全心缺血,不能导致小鼠离体工作心脏足够的缺血性损伤;全心缺血30 min使小鼠离体工作心脏产生一定程度的心肌缺血性损伤,再灌注初期(5 min)借助于朗道夫(LF)模式才能建立稳定的小鼠离体工作心脏再灌注模型;过长(60 min)的全心缺血,即使再灌注初期LF模式灌注也不能使小鼠离体工作心脏恢复有效再灌注。 结论: 全心缺血30 min,再灌注初期(5 min)LF模式然后工作心脏(WH)模式灌注,是小鼠离体工作心脏心肌缺血再灌注的理想实验模型。 相似文献
5.
游离脂肪酸诱导3T3-L1细胞胰岛素抵抗模型的建立 总被引:5,自引:0,他引:5
目的观察不同种类和浓度游离脂肪酸(FFA)对3T3-L1细胞葡萄糖摄取及胰岛素敏感性的影响,建立FFA诱导的胰岛素抵抗细胞模型。方法3T3-L1细胞体外诱导分化为脂肪细胞,油红O染色鉴定,不同浓度软脂酸(PA)和油酸(OA)诱导,测定基础状态和胰岛素刺激下葡萄糖特异性转运情况。结果3T3-L1脂肪细胞诱导率为98%±1.3%,PA和OA各组胰岛素刺激后的葡萄糖特异性转运呈时间和浓度依赖性下降趋势,均显著低于对照组(p<0.01);0.5mM PA作用24h后基础葡萄糖特异性转运明显低于对照组和PA 0.25mM作用24h组(p<0.05)。结论3T3-L1细胞在体外可稳定分化为成熟脂肪细胞,经FFA诱导成为胰岛素抵抗细胞模型;随FFA作用时间延长和浓度增加,胰岛素抵抗程度加重,并以时间和浓度依赖性方式抑制3T3-L1脂肪细胞胰岛素刺激后的葡萄糖特异性转运,高浓度时抑制基础状态下的葡萄糖特异性转运。 相似文献
6.
《中国优生与遗传杂志》2016,(7)
目的采用胰岛素体外诱导法建立胎盘滋养层细胞胰岛素抵抗模型为研究妊娠期糖尿病中的胰岛素抵抗提供一种可靠的细胞模型。方法采用含不同浓度的胰岛素的RPMI1640培养基作用于胎盘滋养层细胞,用葡萄糖-己糖激酶法检测上清中葡萄糖含量,并用CCK8检测不同时间、不同胰岛素浓度细胞生存率,结合葡萄糖消耗量及细胞生存率确定产生胰岛素抵抗最佳胰岛素作用浓度及作用时间;并以油红及HE染色观察细胞形态变化;模型建立后再次用用葡萄糖-己糖激酶法检测不同作用时间上清中葡萄糖含量,以确定胰岛素抵抗模型持续时间。结果细胞在胰岛素浓度为10~(-7)mol/L,作用时间为48h,葡萄糖消耗量最小;模型细胞与正常细胞相比增殖减少,脂滴明显增多;模型建立后在60h内,胰岛素抵抗仍然存在。结论细胞产生胰岛素抵抗的最佳作用浓度为10~(-7)mol/L,最佳作用时间为48h,此模型于60h内稳定。 相似文献
7.
背景:目前,复方中药、单味中药在体内降糖作用及其降糖机制研究较多,但体外尤其是中药单体成分对胰岛素抵抗细胞有何影响尚不清楚。
目的:体外建立人肝癌细胞(HepG2)胰岛素抵抗模型,并初步筛选可有效改善胰岛素抵抗的中药有效成分。
方法:用不同浓度的胰岛素对HepG2细胞进行不同时间的诱导,通过MTT法对细胞活性评价及葡萄糖氧化酶法对HepG2细胞葡萄糖消耗量测定,明确建立稳定的HepG2胰岛素抵抗模型的胰岛素诱导浓度及诱导时间。模型建立后,应用不同浓度的齐墩果酸、药根碱、阿魏酸、大黄酸、马钱苷、葛根素、大豆苷分别作用于胰岛素抵抗细胞24 h,用葡萄糖氧化酶法分别观察不同浓度的上述中药成分对胰岛素抵抗模型HepG2细胞葡萄糖消耗的影响,MTT法对各组细胞活性进行评价。
结果与结论:HepG2细胞在10-6 mol/L浓度的胰岛素中作用24 h,葡萄糖消耗量明显减少(P < 0.01),说明实验成功诱导出稳定人肝癌细胞胰岛素抵抗模型。10-5 mol/L浓度胰岛素组的胰岛素抵抗更明显(P < 0.01)。各时间点10-5 mol/L浓度胰岛素作用的细胞成活率逐渐降低,死亡细胞增多(P < 0.05)。齐墩果酸、药根碱、阿魏酸、大黄酸、马钱苷、葛根素、大豆苷均有改善细胞胰岛素抵抗的作用。其中,质量浓度2×10-1 g/L药根碱、大黄酸、葛根素和齐墩果酸,2×10-5 g/L马钱苷和阿魏酸对改善人肝癌细胞胰岛素抵抗效果较好(P < 0.01)。 相似文献
8.
采用高浓度胰岛素诱导建立胰岛素抵抗(IR)HepG2细胞模型,评价甲鱼油对IR细胞模型胰岛素敏感性和葡萄糖代谢的影响.利用甲鱼油处理IR细胞模型,通过葡萄糖氧化酶及3H-D-葡萄糖参入实验分别检测其葡萄糖消耗和3H-D-葡萄糖参入率.结果表明,HepG2细胞模型的葡萄糖参入率在各种浓度的胰岛素刺激下均低于对照细胞(P<0.05),并且HepG2细胞模型与对照细胞的3H-D-葡萄糖参入率随着胰岛素浓度的升高而升高,但前者升高的幅度低于后者.MTT(甲基噻唑基四唑)结果显示甲鱼油均具有促进对照细胞和IR细胞模型增殖作用.与对照组细胞相比,采用不同浓度胰岛素诱导的模型细胞经甲鱼油处理后其葡萄糖摄取和消耗显著增加(P<0.05).甲鱼油明显增加该IR细胞模型的葡萄糖消耗和3H-D-葡萄糖参入率,提高IR细胞模型的胰岛素敏感性,改善其糖代谢. 相似文献
9.
蛋白激酶B(pmtein kinaseB,PKB)具有促进生长、增殖、抑制凋亡的作用,对糖代谢有明显影响。本研究通过高脂喂养诱导sprague-Dawley(SD)大鼠产生胰岛素抵抗,检测大鼠骨骼肌中胰岛素诱导的蛋白激酶B的表达的改变,揭示胰岛素抵抗与蛋白激酶B表达的关系。 相似文献
10.
《中国病理生理杂志》2015,(10)
<正>目的:采用Urotensin Ⅱ(UⅡ)体外诱导法建立HepG 2细胞胰岛素抵抗模型,并探讨其机制。方法:采用含不同UⅡ浓度的DMEM培养基培养HepG 2细胞,最后半小时与1×10-7mol/L insulin共孵育,葡萄糖-己糖激酶法检测不同时点培养基中葡萄糖含量,以HepG 2细胞蛋白进行定量,确定胰岛素抵抗最佳作用浓度及时间;多功能酶标仪检测UⅡ诱导hepG 2细胞内活性 相似文献
11.
背景:保持供心离体跳动,可以减少供心的缺血时间,延长供心的离体保存时间。
目的:建立稳定简便的猪不停跳心脏离体模型。
方法:12只健康家猪随机等分为不停跳组和冷晶体灌注组。不停跳组经升主动脉建立冠状动脉灌注,经右心房进右心室建立静脉引流,经左心耳放置软管入左心室引流,建立猪的不停跳心脏离体模型。冷晶体灌注组按常规心脏移植实行心脏离体保护。
结果与结论:不停跳组共施行6例猪心脏离体手术,术后2,4 h离体心脏不停跳成功率为100%(6/6),6 h离体心脏不停跳成功率为83%(5/6)。与对照组相比,不停跳组丙二醛水平降低,超氧化物歧化酶活性升高(P < 0.05),心肌超微结构保持良好。说明猪的不停跳心脏离体模型成功率高,是研究离体不停跳心脏仪器的稳定可靠动物模型。 相似文献
12.
目的:为心力衰竭的基因研究提供理想的实验模型。方法:建立小鼠离体工作心脏模型,并评价心功能状态。结果:后负荷固定(50 mmHg)前负荷5 mmHg至25 mmHg范围内,左室收缩压(LVPsys)、最大左室压力上升/下降速率(dLVPdtmax/dLVPdtmin)、冠状动脉流量(CFlow)在前负荷10 mmHg时达最大值;平均主动脉压力(APmean)、平均主动脉流量(AFmean)在前负荷20 mmHg达最大值;左室舒张末压(LVEDP)与前负荷正相关,r=0.9861。前负荷固定(10 mmHg),后负荷40 mmHg至100 mmHg范围内,LVEDP、CFlow与后负荷无关;LVPsys、dLVPdtmax、dLVPdtmin分别于后负荷90、60、70 mmHg时达最大值;APmean随后负荷的递增而增加;AFmean随后负荷的递增而减少。结论:小鼠离体工作心脏在不同前后负荷下功能的改变完全符合Frank-Starling定律,是评价单一因素对心功能影响的理想实验模型。 相似文献
13.
非小细胞肺癌放疗抵抗细胞模型的建立与鉴定 总被引:2,自引:2,他引:0
目的体外建立非小细胞肺癌A549放疗抵抗模型,为进一步研究放疗抵抗的机制和治疗提供实验基础。方法摸索接种细胞数量及诱导照射剂量;采用间歇照射诱导建立放疗抵抗细胞模型RA549;倒置显微镜观察细胞形态;克隆形成实验鉴定RA549的放疗抵抗性。结果照射后RA549细胞形态较亲本A549细胞变长、变大,但传代5代后又可恢复;RA549细胞的存活分数明显大于亲本细胞。结论间歇照射诱导可以成功建立稳定的、具有放疗抵抗性的肺癌细胞模型。 相似文献
14.
目的:构建体外小鼠成肌细胞间歇性低氧/复氧模型并验证。方法:设定三气培养箱的混合气中1%或4%O2含量为低氧培养条件,二氧化碳培养箱中的条件为复氧条件,将小鼠成肌细胞(C2C12)分别按不同氧浓度(1%和4%)及复氧循环周期(6 h和8 h)处理,结束后观察细胞增殖情况,测定细胞培养液中葡萄糖、乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase, LDH)及分泌性蛋白质分子——含Ⅲ型纤连蛋白结构域蛋白5(fibronectin type Ⅲ domain containing 5, FNDC5)浓度,测定细胞低氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1α, HIF-1α)蛋白的表达水平。结果:(1) 1%低氧浓度组较4%低氧浓度组细胞增殖慢、FNDC5含量低,培养液中葡萄糖浓度高、LDH活性及细胞中HIF-1α蛋白表达较高(P<0.05)。(2)1%低氧浓度条件下,与循环周期6 h组相比,循环周期8 h组细胞活力显著下降(P<0.05)。结论:本研究模拟了体外小鼠成肌细胞在不同低氧/复氧条件下的损伤状况及FNDC5的差异表达... 相似文献
15.
血脂异常、糖代谢异常、中心性肥胖、动脉粥样硬化等是代谢综合征常见的临床症候群,其以胰岛素抵抗为中心,这些危险因素可以诱导2型糖尿病的发生[1].肝脏是糖代谢的重要部位,肝细胞胰岛素抵抗发生时主要表现为肝糖原合成水平降低等[2].HepG2细胞来源于肝癌细胞,其表型同肝细胞相似性极高,高浓度的胰岛素可以诱导HepG2细胞... 相似文献
16.
杨波 《中国病理生理杂志》2015,31(8):1472-1476
目的:研究白杨素对胰岛素抵抗小鼠模型的干预作用及其相应机制。方法:40只雄性C57小鼠,根据饮食随机分为对照组、胰岛素抵抗组、白杨素低剂量组及高剂量组,每组各10只。喂养24周后检测各组小鼠体重、肝指数和脂肪指数,评价胰岛素抵抗状况(血糖、胰岛素水平及HOMA-IR)及氧化应激水平(SOD、GSH-Px和MDA);real-time PCR检测肝脏胰岛素信号通路分子(IR、IRS1、IRS2、Glut2和Glut4)及炎症分子(TNF-α、IL-1β、IL-6和NF-κB)mRNA表达水平。Western blot检测肝脏关键信号蛋白(IRS1和p65)及其磷酸化的水平。结果:经过24周干预后,胰岛素抵抗组小鼠明显肥胖,体脂沉积显著(P0.01),血糖、胰岛素水平及HOMA-IR指数均高于对照组(P0.01),且肝脏氧化应激增加(P0.05),成功建立胰岛素抵抗模型。白杨素干预后,无论低剂量组还是高剂量组小鼠体重、血糖较胰岛素抵抗组上升缓慢(P0.05),血清胰岛素水平及HOMA-IR亦明显降低(P0.05),肝脏氧化应激水平明显下降(P0.05)。白杨素能够上调胰岛素信号通路中IR、IRS1、IRS2、Glut2及Glut4的mRNA表达,同时降低各炎症因子的表达,对NF-κB有抑制作用(P0.05)。其中高剂量组在炎症抑制方面更强(P0.05)。Western blot实验结果提示白杨素的改善作用与上调p-IRS1及下调p-p65相关。结论:白杨素降低了肥胖、高血糖及高胰岛素血症,缓解了胰岛素抵抗及氧化应激,这一作用可能与其调控胰岛素信号通路及抑制炎症因子表达密切相关。 相似文献
17.
瘦素、胰岛素抵抗与体脂分布 总被引:4,自引:0,他引:4
瘦素是ob基因的产物,它除增加能量消耗、减少食物摄入和降低脂肪贮存外,还与生殖、血压调节、血细胞增殖等密切相关;此外,瘦素与胰岛素之间有双向作用,形成脂肪-胰岛内分泌轴,一旦此轴的反馈机制破坏,则可能导致肥胖、高胰岛素血症及2型糖尿病.瘦素与体脂含量密切相关,特别是与皮下脂肪呈显著正相关. 相似文献
18.
目的:建立胰岛素定量标记免疫分析试剂盒的行业标准,并进行试验验证。方法:选择不同方法的8种胰岛素定量标记免疫分析试剂盒,按照拟定行业标准规定,对外观、线性、最低检出限、准确性、精密度和稳定性等项目进行验证。结果:除某些试剂盒的个别指标不能满足要求外,大部分试剂盒均能满足拟定行标中的所有要求。结论:胰岛素定量标记免疫分析试剂盒行业标准制定合理、可操作性强。该标准的制定有助于统一胰岛素定量标记免疫分析试剂盒的质量标准,为其生产、检验、流通及临床应用及其他领域的监管提供依据。 相似文献
19.
目的建立符合解剖结构的头颈三维动力学有限元模型,研究冲击力作用下头颈部动力学响应。方法采用中国成年男性志愿者颈部CT扫描图像,获取颈椎三维点云数据,通过有限元前处理软件ICEM-CFD和Hyper Mesh建立颈部有限元模型。模型包括椎骨、椎间盘、小关节、韧带和软骨等组织,结合已建立并验证的头部有限元模型,装配成具有详细解剖结构的人体头颈部有限元模型。结果模型参考公开发表的头颈部轴向冲击实验数据进行验证,其颈部变形、头部加速度、接触力曲线以及损伤部位与实验数据吻合较好。结论动力学三维有限元模型可用于汽车安全、运动学损伤等领域人体头颈部的动态响应和损伤机制研究。 相似文献
20.
背景:胚胎心脏心外膜细胞是最近被发现的具有分化为心肌细胞和血管平滑肌细胞潜能的心脏干细胞,可分化为心脏三系细胞,为心脏损伤的再生提供了新的细胞来源,但其定向分化机制及调控因素仍不清楚。目的:体外建立小鼠胚胎心脏心外膜细胞培养模型。方法:解剖显微镜下分离11.5-12.5 d小鼠胚胎心脏,剪除肺静脉血管、心房组织及左心室,移至6孔板(或35 mm培养皿)培养,24 h后移走胚胎心脏组织继续培养。相差显微镜观察胚胎心外膜细胞生长特点;使用免疫荧光技术对细胞进行胚胎心外膜细胞特异性抗体Wt-1、Tbx18染色。结果与结论:胚胎心外膜单层细胞从组织块边缘长出,呈鹅卵石样,并围绕组织块向外延伸。移去胚胎心脏后细胞继续生长,且增殖迅速,三四天后长至融合。所有细胞均强阳性表达胚胎心脏心外膜细胞特异性抗体Wt-1及Tbx18。结果表明,胚胎心脏心外膜细胞生长迅速、形态单一,均表达心外膜细胞特异因子,细胞纯度高,成功构建了体外胚胎心脏心外膜细胞培养模型,为研究其定向分化的分子机制提供了新的 思路。 相似文献